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1、糖化血红蛋白糖化血红蛋白检测与临床应用检测与临床应用检测与临床应用检测与临床应用概概 述述糖尿病与糖尿病与糖化血红蛋白糖化血红蛋白（Glycated hemoglobin，GHB）糖尿病糖尿病糖尿病诊断与监测糖尿病诊断与监测 主要内容主要内容 重点：重点：重点：重点：糖化血红蛋白定义糖化血红蛋白定义糖化血红蛋白定义糖化血红蛋白定义 了解：了解：了解：了解：糖化血红蛋白类型糖化血红蛋白类型糖化血红蛋白类型糖化血红蛋白类型 了解：了解：了解：了解：糖化血红蛋白检测糖化血红蛋白检测糖化血红蛋白检测糖化血红蛋白检测方法方法方法方法 重点：重点：重点：重点：糖化血红蛋白临床糖化血红蛋白临床糖化血红蛋白临
2、床糖化血红蛋白临床应用应用应用应用糖化蛋白糖化蛋白 己糖（葡萄糖）糖基己糖（葡萄糖）糖基+蛋白质氨基酸基团蛋白质氨基酸基团糖化血红蛋白糖化血红蛋白糖化血红蛋白相关概念糖化血红蛋白相关概念糖化血红蛋白相关概念糖化血红蛋白相关概念重点：概念：是血红蛋白与糖类重点：概念：是血红蛋白与糖类经非酶促结合而成的，它的合成经非酶促结合而成的，它的合成过程是缓慢的而且相对不可逆的，过程是缓慢的而且相对不可逆的，积累并持续于红细胞中，合成速积累并持续于红细胞中，合成速率与糖的浓度成正比。率与糖的浓度成正比。GHB在糖尿病监测中的特点：在糖尿病监测中的特点：（1）与血糖值相平行。）与血糖值相平行。（2）生成缓慢。
3、）生成缓慢。（3）一旦生成就不易分解）一旦生成就不易分解。（4）反应场所）反应场所。糖化血红蛋白类型糖化血红蛋白类型HbA 95-97%以上，以上，HbA2（占（占2.5），HbF（占（占0.2）HbA0（未糖化部分）（未糖化部分）HbA HbA1（糖基化部分）：（糖基化部分）：HbA1a（a1-a2）HbA1b（b1-b3）HbA1c（葡萄糖结合）（葡萄糖结合）糖化血红蛋白检测方法糖化血红蛋白检测方法基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带电荷不同：离子层析法、电泳等基于糖化血红蛋白上糖化基团的结构特点：亲和层析、免疫法、离子捕获法等一、免疫凝集法原理：原理：利用血红蛋白利用血红蛋白-链上糖基化
4、的链上糖基化的N末末端的端的4-8个氨基酸个氨基酸糖化位点制备的糖化位点制备的单克隆或多克隆抗体直接测定。单克隆或多克隆抗体直接测定。许多同源的糖化血红蛋白变体也许多同源的糖化血红蛋白变体也有相同的有相同的N末端结构，从而会对结末端结构，从而会对结果造成干扰。果造成干扰。二、离子交换HLPC法原理：原理：根据血红蛋白根据血红蛋白链链N N末端缬氨酸糖化末端缬氨酸糖化后所带电荷不同。后所带电荷不同。在中性在中性pHpH条件下，条件下，HbA1cHbA1c携带电荷较携带电荷较少，可以与其它组分（少，可以与其它组分（HbA1aHbA1a、HbA1b HbA1b、HbF HbF、HbAHbA0 0 等
5、）分开达到等）分开达到分离的目的。分离的目的。三、亲和层析法原理：原理：采用间氨基苯硼酸的琼脂糖珠。采用间氨基苯硼酸的琼脂糖珠。硼酸具有与血红蛋白分子上葡萄糖可逆结硼酸具有与血红蛋白分子上葡萄糖可逆结合反应的性质，致使合反应的性质，致使GHb选择性地结合于选择性地结合于柱上，而非糖化血红蛋白及不稳定柱上，而非糖化血红蛋白及不稳定GHb、HbF被洗脱而分离。被洗脱而分离。除葡萄糖外，血液中所有的糖类都可与除葡萄糖外，血液中所有的糖类都可与Hb相结合，因此该方法的检测结果为糖化相结合，因此该方法的检测结果为糖化血红蛋白总量，而不是血红蛋白总量，而不是HbA1c的含量。的含量。临床应用临床应用1.1
6、.标本采集标本采集2.2.参考值范围参考值范围3.3.平均血糖平均血糖4.4.HbA1c研究及其标准化研究及其标准化5.5.临床意义临床意义标本采集与保存：标本采集与保存：标本采集与保存：标本采集与保存：静脉血：静脉血：EDTA、草酸盐、肝素、草酸盐、肝素放置：放置：4 可放置可放置1周。周。采集时间：不限采集时间：不限美国糖尿病协会美国糖尿病协会(ADA)建议血糖控制满意且稳定建议血糖控制满意且稳定的糖尿病患者至少的糖尿病患者至少1年测年测2次糖化血红蛋白；若血次糖化血红蛋白；若血糖控制不满意且需调整方案者，应一年测糖控制不满意且需调整方案者，应一年测4次。次。正常参考值：正常参考值：46%
7、诊断界值：诊断界值：6.5%6.5%糖尿病高危人群：糖尿病高危人群：5.7%5.7%6.4%6.4%一般认为，糖尿病患一般认为，糖尿病患HbA1c6.5HbA1c6.5时，说明血糖水平控制较好时，说明血糖水平控制较好。参考值范围参考值范围参考值范围参考值范围 平均血糖与平均血糖与HbA1c的关系的关系根据根据DCCTDCCT的数据，美国糖化血红蛋的数据，美国糖化血红蛋白标准化项目（白标准化项目（NGSPNGSP）以及大型的）以及大型的临床试验研究临床试验研究ADAG，得出的直线，得出的直线回归方程式可以将糖化血红蛋白值回归方程式可以将糖化血红蛋白值用来估计平均血糖值：用来估计平均血糖值：MBG
8、MBG估计值估计值24.8924.89（HbA1cHbA1c）45.3645.36 GHb(%)平均血糖（MGB）43.3355.0066.6778.3389.99911.71013.31114.91216.7平均血糖取代平均血糖取代HbA1c？HbA1c研究稳定发展，是评价研究稳定发展，是评价血糖控制的重要指标血糖控制的重要指标几个大型的国际糖尿病研究都几个大型的国际糖尿病研究都表明表明HbA1c与糖尿病并发症存与糖尿病并发症存在着线性相关。在着线性相关。HbA1c研究及其标准化研究及其标准化UKPDSUKPDS流行病学分析：流行病学分析：HbA1cHbA1c降低降低1%1%的获益的获益 2
9、1%全部并发症 14%14%12%37%糖尿病相关死亡总死亡率心肌梗死卒中微血管病变 21%课件Relative Risk视网膜病变肾脏病变神经病变微量白蛋白尿HbA1c(%)151311975316789101112DCCTDCCT：糖化血红蛋白与并发症线性相关：糖化血红蛋白与并发症线性相关课件 在在糖糖尿尿病病的的筛筛查查中中有有提提示示价价值值，可可作作为为轻轻症症、2型型、隐隐性性糖糖尿尿病病早早期期诊诊断断指指标。标。发发现现治治疗疗中中存存在在的的问问题题以以及及指指导导治治疗疗方方案案的的调调整整。在在糖糖尿尿病病的的治治疗疗中中可可作作为参考、治疗指标。为参考、治疗指标。预预示
10、示微微、小小血血管管并并发发症症（糖糖基基化化终终产产物物产产生生、刺刺激激产产生生ROS，损损伤伤血血管管细细胞）胞）临床意义临床意义测定糖化血红蛋白的注意事项（一）测定糖化血红蛋白的注意事项（一）血糖波动较大，不能反映真正的血糖血糖波动较大，不能反映真正的血糖变化变化HbA1cHbA1c6.0%时间6.0%HbA1c能代表血糖控制水平，能代表血糖控制质量吗？能代表血糖控制水平，能代表血糖控制质量吗？生理性生理性HbA1c6.0%是否等于病理性是否等于病理性6.0？糖化血红蛋白还受红细胞的影响，糖化血红蛋白还受红细胞的影响，在合并影响红细胞质和量的疾病在合并影响红细胞质和量的疾病（如肾脏疾病
11、、溶血性贫血等）时，（如肾脏疾病、溶血性贫血等）时，所测得的糖化血红蛋白也不能反映所测得的糖化血红蛋白也不能反映真正的血糖水平。真正的血糖水平。测定糖化血红蛋白的注意事项（二）测定糖化血红蛋白的注意事项（二）小小 结结1.1.糖化血红蛋白是人体血液中糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。糖化血红蛋白结合的产物。糖化血红蛋白越高表示血糖与血红蛋白结越高表示血糖与血红蛋白结合越多，糖尿病病情也越重。合越多，糖尿病病情也越重。糖化血红蛋白能够反映过去糖化血红蛋白能够反映过去2 23 3个月血糖控制的平均水平个月血糖控制的平均水平 。2.2.糖化血红蛋白与
12、血糖的控制情糖化血红蛋白与血糖的控制情况况 4%4%6%6%：血糖控制正常：血糖控制正常 6%6%7%7%：血糖控制比较理想：血糖控制比较理想 7%7%8%8%：血糖控制一般：血糖控制一般 8%8%9%9%：控制不理想：控制不理想 9%9%：血糖控制很差，慢性：血糖控制很差，慢性并发症发生发展的危险高并发症发生发展的危险高3.测定测定GHb主要是利用主要是利用GHb和和GHb的物理化学性质的不同而的物理化学性质的不同而进行的，目前主要的检测方法进行的，目前主要的检测方法有有5种：种：离子交换高效液相色谱法离子交换高效液相色谱法-HbA1c的金的金标准、微柱法、标准、微柱法、电泳法、亲和层析法、免疫法电泳法、亲和层析法、免疫法 方法与原理方法与原理4.临床意义临床意义在糖尿病的筛查中有早期提示的在糖尿病的筛查中有早期提示的价值。价值。在糖尿病的治疗中，在糖尿病的治疗中，HbA1C是是评价血糖控制好坏的重要标准。评价血糖控制好坏的重要标准。预示微、小血管并发症，估计糖预示微、小血管并发症，估计糖尿病慢性并发症的发生与发展情尿病慢性并发症的发生与发展情况。况。谢谢 谢！谢！