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1、临床标本采集与运送规范大石人民医院医院感染管理科蔡永利2010.8.30环镜卫生学监测的采样方法（一）空气 1采样方法平板暴露法 2.采样时间选择消毒处理后、操作前进行采样。3采样高度与地面垂直高度1.5米。4布点方法室内面积30 m2，设一条对角线取3点，即中心一点，两端各距墙1米处各一点；室内面积30 m2，设东、西、南、北、中五点，其中东、西、南、北点均距墙1米。采样方法：将普通营养琼脂平板（直径为9厘米）放在室内各采样点处，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。（二）物体表面 1采样时间在消毒处理后进行采样。2采样方法用5cmx5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体
2、表面，连续采样4个，用浸有含相应中和剂无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投人10 ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。3采样面积100 cm2。（三）医护人员手 1采样时间在消毒后立即采样。2采样面积及方法被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30 cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投人10 ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉式子直接涂
3、擦采样。临床徽生物标本采集与送检规范（一）医院感染标本的采集和运送原则 1发现医院感染应及时采集微生物标本做病原学检查，医院微生物标本送检率力争不应低于70%。2尽量在抗菌药物使用前采集标本。3标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。4标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。5以棉拭子采集的标本，如咽拭、肛拭或伤口拭子，立即送检。6盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。7送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境、必要时应注明选用何种抗菌药物。（二）常见医院感染标本送检方法 1.血液与骨髓 (1)通常采血部位为肘静
4、脉。疑为细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。(2）采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注人血培养基前，应更换针头或过火消毒针头。血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保贮。(3)每次采血量成人5一10 ml,婴幼儿1一5 ml，培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。(4)怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次用药前采血。(5）每例至少采血两次，间隔0.5一1小时，以利于提高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。(6）对疑为细菌性骨髓炎或伤寒
5、患者，在病灶部位或骼前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1 ml做增菌培养。2尿液 (1)中段尿：女性采样前应先用肥皂水或01高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻转包皮冲洗，用0.1新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干后收集标本。(2)导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿管者可用0.3碘伏消毒尿道口处的导尿管壁，用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液，或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿、留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本：(3）尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难，或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。(4）送检标本以晨起第一次尿液为佳。(5）室温下尿
6、标本耽搁稍久，可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。尿液不能立即送检者，可暂存490C冰箱。3.痰液(1)咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用450C 10%氯化钠液雾化吸人导痰。(2）对咳嗽乏力或昏迷患者，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。(3)双侧肺部感染伴人工气道，如气管切开或气管插管者，可用吸痰管经人工气道估插至肺支气管水平吸引痰液。(4）对重症、难治或伴免疫抑制，或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染可采用环甲膜穿刺经气管吸引（TI
7、A)、经胸壁穿刺肺吸引（LA)、经纤维支气管镜或人工气道做防污染双套管毛刷（PSB)或防污染支气管肺泡灌洗（PBAL）采集无G咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。(5)痰标本不能及时送检者，可暂存4冰箱。室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感杆菌检出率则明显下降。4.伤口、烧伤创面与脓液 (1)无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。(2)对未渍破的脓肿宜用碘伏、75酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检；也可用于切开排脓时用无菌棉拭子采样。5.粪便(1）排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便2一3g（液状
8、粪便则取絮状物），盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉试挑取粪便插人Cmy一BLair运送培养基或pH 7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率。(2)对不易获取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭子（又称肛拭）采集。将试子前端用无菌甘油水湿润然后插人肛门4一5 cm（幼儿2一3 cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出置运送培养基内送检。6.咽拭、口腔拭子(1)患者清水漱口后，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭数次，插人运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。(2）对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。7.浆膜腔积
9、液、脑脊液 (1)浆膜腔积液包括胸水、腹水如心包液、关节液和鞘膜液等，以严格无菌操作抽取数毫升液体置无菌试管或小瓶送检对易自凝的标本可添加抗凝剂。(2)严格无菌操作下采取脑脊液数毫升于无菌试管。标本采集后应立即送检，以防细菌死亡。疑似有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖，不可置冰箱保存。8生殖道标本(1)根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，先用生理盐水局部清洗，以无菌棉拭子插人尿道口1-2 cm停留十余秒钟。轻轻旋转拭子后退出。(2)对外阴部糜烂、溃疡者，生理盐水清洗后用棉拭子擦取病灶边缘的分泌物。(3）阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭子采集。(4）子宫内分泌物需用无菌导管
10、抽取，导管外套一层保护膜，插人子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染。(5)女性盆腔脓肿，应在阴道局部消毒后，由直肠子宫凹陷处进针抽取。(6）前列腺液需进行前列腺按摩获取。9组织标本 (1)表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除。对窦道和痰管应深部刮取管壁组织。(2)深部组织标本可经皮肤穿刺采集或手术切取。标本置无菌容器并加少量生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液，或置血平皿送检。(3)尸检标本应于死后20小时采取，以防肠道等菌群侵入引起感染。(4）做病原体分离的组织标本，不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组织块，可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中510秒钟
11、使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中央部位组织送检。10静脉导管 (1)从患者体内拔出静脉导管，用无菌技术剪去导管体外部分。体内段导管立即置于平皿上做滚动涂布接种。不能做床旁种者，将导管置含有少量生理盐水的无菌试管内送检。(2)也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或用于血培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌。参考文献1消毒技术规范卫生部2002年版2医院感染管理规范（试行）卫生部200(）年版3刘振声，金大鹏医院感染管理学北京：军事医学科学出版社4杨华明，易滨现代医院消毒学北京：人民军医出版社：5钟秀玲，程棣妍现代医院夔染护理学北京：人民军医出版社6朱士俊现代医院感染学共京：人民军医出版社广州市番禺区大石人民医院医院感染管理科