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1、呼吸道九联检病原体抗体呼吸道九联检病原体抗体检测及其临床意义检测及其临床意义检验科 杨溪霖呼吸道感染n n呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统n n分为上呼吸道感染和下呼吸道感染上呼吸道感染n n常见急性上呼吸道感染，指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病n n常见病因为病毒，少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症下呼吸道感染n n包括急性气管/支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等n n由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时
2、必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素呼吸道病原体n n常见的呼吸道病原体主要有病毒、细菌、支原体、衣原体和立克次体等n n据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起n n一种病原体可引起多种临床症状，同一临床表现可由多种病原体引起呼吸道病原体感染概况一、典型一、典型一、典型一、典型“致病菌致病菌致病菌致病菌”细菌：细菌：细菌：细菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等嗜血杆菌、卡他莫拉菌等 症状：症状：症状：症状：典型，咳嗽、脓性痰、胸膜炎性胸痛，典型，咳嗽、脓性痰、胸膜炎性胸痛，一般都伴有发热，或有一般都伴有发热，或有脓血痰脓血痰 病史
3、：病史：病史：病史：悠久，古代的悠久，古代的“瘟疫瘟疫”很多细菌性很多细菌性肺炎肺炎 重症致死性肺炎很多是细菌性重症致死性肺炎很多是细菌性 上世纪上世纪5050年代以前的年代以前的肺炎肺炎90%90%以上为细以上为细菌性肺炎菌性肺炎，现在报道约在，现在报道约在40%40%左右左右 肺炎链球菌大约占在肺炎链球菌大约占在60%60%呼吸道病原体感染概况二、非典型病原体二、非典型病原体二、非典型病原体二、非典型病原体进展的、开放的概念，始用于进展的、开放的概念，始用于2020世纪世纪3030年代年代末，末，6060年代首次发现了非典型的病原体年代首次发现了非典型的病原体肺肺炎支原体炎支原体泛指各种能
4、引起肺炎的、临床表现与典型肺泛指各种能引起肺炎的、临床表现与典型肺炎不同的各种病原体（广义）炎不同的各种病原体（广义）临床症状不典型，差异大临床症状不典型，差异大在在CAPCAP中感染的比例逐年增加，据报道中感染的比例逐年增加，据报道大约占大约占40-60%40-60%，逐渐引起各国医疗工作者注意，逐渐引起各国医疗工作者注意（一）最常见的非典型病原体（一）最常见的非典型病原体肺炎支原体、肺炎衣原体、军团菌肺炎支原体、肺炎衣原体、军团菌等（狭义的非等（狭义的非典型病原体）典型病原体）感染比例高，超过感染比例高，超过“非典非典”50%”50%临床症状：干咳为主，少痰或无痰，肺外症状临床症状：干咳为
5、主，少痰或无痰，肺外症状较常见明显，尤其军团菌感染，表现相对较重，较常见明显，尤其军团菌感染，表现相对较重，多脏器受累明显。可有高热、耳鸣、相对缓脉、多脏器受累明显。可有高热、耳鸣、相对缓脉、血尿、腹痛、腹泻、肝酶升高、电解质紊乱、血尿、腹痛、腹泻、肝酶升高、电解质紊乱、精神神经症状等精神神经症状等-内酰胺类内酰胺类 （青霉素类、头孢类）、氨基糖（青霉素类、头孢类）、氨基糖苷类（链霉素）等药物无效苷类（链霉素）等药物无效治疗：呼吸喹诺酮类、大环内酯类治疗：呼吸喹诺酮类、大环内酯类（二）病毒类（二）病毒类流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、禽流感病毒等季节性或区域性流行临床症
6、状：干咳为主，少痰或无痰、呼吸困难，低氧血症治疗：主要依靠对症支持治疗。早期抗病毒治疗可能效果较好。预后取决于病毒类型和宿主对病毒的反应（三）真菌性肺炎（三）真菌性肺炎念珠菌，曲菌，新型隐球菌，放线菌，组织胞浆菌，毛霉菌属等除组织胞浆菌为原发吸入性感染外，多数为条件致病多发生在免疫低下患者和长时间接受广谱抗生素治疗的患者白色念珠菌肺炎白色念珠菌肺炎 社区获得性肺炎社区获得性肺炎l l社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia,community-acquired pneumonia,community-acquired p
7、neumonia,community-acquired pneumonia,CAPCAPCAPCAP）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺部炎症，以及住院后部炎症，以及住院后部炎症，以及住院后部炎症，以及住院后48484848小时内或特殊病原菌在潜伏期小时内或特殊病原菌在潜伏期小时内或特殊病原菌在潜伏期小时内或特殊病原菌在潜伏期10101010天内所患肺炎，又称院外获得性肺炎。天内所患肺炎，又称院外获得性肺炎。天内所患肺炎，又称院外获得性肺炎。天内所患肺炎，
8、又称院外获得性肺炎。这种肺炎之这种肺炎之这种肺炎之这种肺炎之所以被叫做所以被叫做所以被叫做所以被叫做”社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎社区获得性肺炎”是由于它很容易从社区是由于它很容易从社区是由于它很容易从社区是由于它很容易从社区中的一个成员传播到另一个中的一个成员传播到另一个中的一个成员传播到另一个中的一个成员传播到另一个。l lCAPCAPCAPCAP的发病率为的发病率为的发病率为的发病率为4.7%-11.6%4.7%-11.6%4.7%-11.6%4.7%-11.6%，其中，其中，其中，其中22%-51%22%-51%22%-51%22%-51%的的的的CAPCAPCAPCAP
9、需住院需住院需住院需住院治疗；住院治疗；住院治疗；住院治疗；住院CAPCAPCAPCAP死亡率死亡率死亡率死亡率7%7%7%7%，重症，重症，重症，重症CAPCAPCAPCAP死亡率死亡率死亡率死亡率29%29%29%29%。（数据。（数据。（数据。（数据来自西班牙）来自西班牙）来自西班牙）来自西班牙）社区获得性肺炎社区获得性肺炎 美国：感染率美国：感染率美国：感染率美国：感染率第一位第一位第一位第一位的疾病的疾病的疾病的疾病美国：每年美国：每年美国：每年美国：每年560560560560万万万万感染肺炎，感染率感染肺炎，感染率感染肺炎，感染率感染肺炎，感染率5-105-105-105-10人
10、人人人/1000/1000/1000/1000人人人人/年年年年WHOWHOWHOWHO：第二大第二大第二大第二大死因，仅次于心血管疾病死因，仅次于心血管疾病死因，仅次于心血管疾病死因，仅次于心血管疾病中国：中国：中国：中国：第五大第五大第五大第五大死因死因死因死因中国：儿童死亡的中国：儿童死亡的中国：儿童死亡的中国：儿童死亡的第一第一第一第一病因病因病因病因 各病原体在各病原体在各病原体在CAPCAPCAP中感染率中感染率中感染率各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况肺炎的诊断与治疗研究进展肺炎的诊断与治疗研究进展数据来源：数据来源：重视
11、非典型病原体在重视非典型病原体在CAP致病中的作用致病中的作用要重视非典型病原体在小儿呼吸道疾病中的致病作用等要重视非典型病原体在小儿呼吸道疾病中的致病作用等呼吸道病原菌合并感染的分析119119例小儿肺炎细菌感染例小儿肺炎细菌感染9797例，细菌感染及肺炎支原体同时感染例，细菌感染及肺炎支原体同时感染1919例。例。-检验医学与临床检验医学与临床20092009年年1212月第月第6 6卷第卷第2323期期在在SARSSARS发病前阶段，合并发病前阶段，合并MPMP感染阳性率为感染阳性率为69693 3(39(3956)56)；发病后阶段，合并发病后阶段，合并MPMP感染阳性率为感染阳性率为
12、l8l86 6(8(84343）-Joumal of Tropical Medicine Vo1 -Joumal of Tropical Medicine Vo13 3 NoNo3 Sep3 Sep20032003MpnMpn和和CpnCpn合并阳性有合并阳性有2727例占总阳性数的例占总阳性数的45450 0 -中国优生与遗传杂志中国优生与遗传杂志20012001年第年第9 9卷第卷第3 3期期9 9例例(1(12 2)患儿患儿MP-IgM MP-IgM 和和CpnCpnIgM IgM 同时阳性；同时阳性；-世界感染杂志世界感染杂志20062006年第年第6 6卷第卷第4 4期期本次调查同时
13、检测了本次调查同时检测了8 8种感染呼吸道的常见病毒，结果提示种感染呼吸道的常见病毒，结果提示MpMp、CpCp多混合有病毒感染。多混合有病毒感染。-中国人兽共患病杂志：中国人兽共患病杂志：1002-1002-2694(2005)030269-022694(2005)030269-02社区获得性肺炎社区获得性肺炎青霉素问世前：青霉素问世前：青霉素问世前：青霉素问世前：CAP80%CAP80%CAP80%CAP80%以上是由以上是由以上是由以上是由肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌所致。所致。所致。所致。1928192819281928年英国科学家弗莱明发现青霉素：年英国科学家弗莱明发现青
14、霉素：年英国科学家弗莱明发现青霉素：年英国科学家弗莱明发现青霉素：拯救了千百万肺炎患者的生命，肺炎链球菌虽仍是拯救了千百万肺炎患者的生命，肺炎链球菌虽仍是拯救了千百万肺炎患者的生命，肺炎链球菌虽仍是拯救了千百万肺炎患者的生命，肺炎链球菌虽仍是CAPCAPCAPCAP最常见的病原体，但比例已明显下降。最常见的病原体，但比例已明显下降。最常见的病原体，但比例已明显下降。最常见的病原体，但比例已明显下降。非典型的病原体非典型的病原体非典型的病原体非典型的病原体：如：肺炎支原体、肺炎衣原体、病毒、：如：肺炎支原体、肺炎衣原体、病毒、：如：肺炎支原体、肺炎衣原体、病毒、：如：肺炎支原体、肺炎衣原体、病毒
15、、嗜肺军团菌等，嗜肺军团菌等，嗜肺军团菌等，嗜肺军团菌等，明显上升明显上升明显上升明显上升!在非典型病原体感染中，在非典型病原体感染中，在非典型病原体感染中，在非典型病原体感染中，支原体肺炎支原体肺炎支原体肺炎支原体肺炎 病毒性肺炎病毒性肺炎病毒性肺炎病毒性肺炎 尤其最为常见。尤其最为常见。尤其最为常见。尤其最为常见。非典型呼吸道病原体n n这些病原体变异快，传播广，由于不易形成长期免疫力而难以预防和控制 流感病毒 副流感病毒病毒 呼吸道合胞病毒 腺病毒 呼吸道病原体检测现有的主要方法：n n病毒分离培养n n抗原检测n n抗体检测n n分子生物学方法等检测方法的比较检测方法检测方法检测方法检
16、测方法优点优点优点优点缺点缺点缺点缺点病毒分离培养病毒分离培养病毒分离培养病毒分离培养特异性高，金标准特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致标本中病原体量少时，易致假阴性。假阴性。抗原检测抗原检测抗原检测抗原检测直接免疫荧光法直接免疫荧光法简简便便、快快速速、灵灵敏敏度度和和特特异异性性均均较较高高且可用于疾病的早期诊断且可用于疾病的早期诊断需需要要特特异异性性抗抗体体、荧荧光光显显微微镜，易受采样限制镜，易受采样限制抗体检测抗体检测抗体检测抗体检测 间间 接接 免免 疫疫 荧荧 光光法法灵敏度、特异性较高灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没
17、有太大帮对疾病早期诊断没有太大帮助助酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法较快速，批量筛查较快速，批量筛查特异性不高，假阳性多特异性不高，假阳性多分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法灵敏度和特异性均很高灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵操作繁琐，价格昂贵采样抗原检测n n拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入，不是向鼻腔伸入。伸入距离为从耳垂部到鼻尖长度的一半，一般针对两周岁以下儿童，伸入距离约为拭子绒毛头的长度两倍n n拭子伸入后要轻轻捻动拭子转3圈。取样后在一小时之内洗脱到生理盐水中，12小时内送检抗原检测采样n n采样对结果影响较大n n非典型感染多为干咳，无痰/少痰n n阳性率低
18、（标本问题，病毒颗粒小）n n抗原在体内存在时间短抗原检测的劣势采样抗体检测 检测样本要求检测样本要求 本试剂盒仅适用于检测人血清。其血液采集需由本试剂盒仅适用于检测人血清。其血液采集需由专业人员无菌静脉穿刺采集。建议使用消毒或无菌技专业人员无菌静脉穿刺采集。建议使用消毒或无菌技术，以保持样本的完整性。血清样本采集后如不在术，以保持样本的完整性。血清样本采集后如不在8 8小小时内检测应时内检测应2 28 C8 C冷藏，如冷藏，如7 7天内不检测，则应冷冻天内不检测，则应冷冻（-20C-20C）保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度）保存。不要反复冻融以防止免疫球蛋白滴度降低，特别是降低，特别是
19、IgMIgM。不要使用高血脂或污染的血清。若。不要使用高血脂或污染的血清。若样本中含有微粒要离心使之澄清。样本中含有微粒要离心使之澄清。九项呼吸道病原体九项呼吸道病原体IgM抗体检测试剂抗体检测试剂九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测常见检测的九种非典型病原体l l嗜肺军团菌嗜肺军团菌l l肺炎支原体肺炎支原体l lQ Q热立克次体热立克次体l l肺炎衣原体肺炎衣原体l腺病毒腺病毒l呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒l流感病毒流感病毒(甲型、乙型甲型、乙型)l副流感病毒副流感病毒嗜肺军团菌l l广泛分布于天然淡水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌广泛分布于天然淡水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌广泛分布于天然淡
20、水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌广泛分布于天然淡水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌l l易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功能低下者。能低下者。能低下者。能低下者。l l流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间内易爆发。内易爆发。内易爆发。内易爆发。l l军团菌肺炎潜伏期为军团菌肺炎潜伏期为军团菌肺炎潜伏期为军团
21、菌肺炎潜伏期为2-102-102-102-10天，症状：发冷、不适、肌天，症状：发冷、不适、肌天，症状：发冷、不适、肌天，症状：发冷、不适、肌痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。IgMIgMIgMIgM抗抗抗抗体在感染后体在感染后体在感染后体在感染后1 1 1 1周左右出现，并可持续存在周左右出现，并可持续存在周左右出现，并可持续存在周左右出现，并可持续存在3-63-63-63-6个月。个月。个月。个月。l l我国各省市每年均有病例报告。阳性率我国各省市每年均有病
22、例报告。阳性率我国各省市每年均有病例报告。阳性率我国各省市每年均有病例报告。阳性率2%-5%2%-5%2%-5%2%-5%肺炎支原体 肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞壁的病原体壁的病原体壁的病原体壁的病原体l l经经经经14-2114-2114-2114-21天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无力干咳等症状力干咳等症状力干
23、咳等症状力干咳等症状l lIgMIgMIgMIgM抗体一般在感染后抗体一般在感染后抗体一般在感染后抗体一般在感染后1 1 1 1周出现，周出现，周出现，周出现，3-43-43-43-4周达到高峰，可持周达到高峰，可持周达到高峰，可持周达到高峰，可持续存在续存在续存在续存在3-63-63-63-6个月个月个月个月l l学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的综合症是气管支气管炎，综合症是气管支气管炎，综合症是气管支气管炎，综合症是气管支气管炎，许
24、多成年感染者是无临床症状的许多成年感染者是无临床症状的许多成年感染者是无临床症状的许多成年感染者是无临床症状的l l社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达40%40%l l冬季较多，地区性流行冬季较多，地区性流行冬季较多，地区性流行冬季较多，地区性流行Q热立克次体l lQ Q Q Q热立克次体，是介于最小细菌和病毒之间的一类独特的严格在活热立克次体，是介于最小细菌和病毒之间的一类独特的严格在活热立克次体，是介于最小细菌和病毒之间的一类独特的严格在活热立克次体，是介于最小细菌
25、和病毒之间的一类独特的严格在活细胞内寄生的原核细胞型微生物细胞内寄生的原核细胞型微生物细胞内寄生的原核细胞型微生物细胞内寄生的原核细胞型微生物 l l病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物间以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，粪中可长期带有间以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，粪中可长期带有间以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，粪中可长期带有间以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，
26、粪中可长期带有病原体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介病原体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介病原体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介病原体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶感节肢动物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶感节肢动物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶感节肢动物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶感染呼吸道。消化道等途径感染。染呼吸道。消化道等途径感染。染呼吸道。消化道等途径感染。染呼吸道。消化道等途径感染。l l大部
27、分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、大部分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、大部分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、大部分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治区均有本病流行。区均有本病流行。区均有本病流行。区均有本病流行。l l其潜伏期其潜伏期其潜伏期其潜伏期1212121239393939天，平
28、均天，平均天，平均天，平均18181818天。天。天。天。IgMIgMIgMIgM抗体一般在感染后抗体一般在感染后抗体一般在感染后抗体一般在感染后2 2 2 2周左右出现，周左右出现，周左右出现，周左右出现，4-84-84-84-8周达高峰，可持续存在周达高峰，可持续存在周达高峰，可持续存在周达高峰，可持续存在3-43-43-43-4个月。症状主要是高热，剧烈头痛，个月。症状主要是高热，剧烈头痛，个月。症状主要是高热，剧烈头痛，个月。症状主要是高热，剧烈头痛，寒颤，严重乏力，肌痛，且常有胸痛，寒颤，严重乏力，肌痛，且常有胸痛，寒颤，严重乏力，肌痛，且常有胸痛，寒颤，严重乏力，肌痛，且常有胸痛，
29、体温升高。体温升高。体温升高。体温升高。l l阳性率阳性率阳性率阳性率1%-2%1%-2%1%-2%1%-2%肺炎衣原体l l肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细胞内寄生胞内寄生胞内寄生胞内寄生l l感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播l l8 8岁以上儿童岁以上儿童岁以上儿童岁以上儿童易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原易被
30、感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原体肺炎占社区获得性肺炎比例的体肺炎占社区获得性肺炎比例的体肺炎占社区获得性肺炎比例的体肺炎占社区获得性肺炎比例的10%10%10%10%左右左右左右左右l l多数起病缓慢，潜伏期多数起病缓慢，潜伏期多数起病缓慢，潜伏期多数起病缓慢，潜伏期30303030天左右，天左右，天左右，天左右，IgMIgMIgMIgM抗体在发病抗体在发病抗体在发病抗体在发病2-32-32-32-3周周周周出现，一般来说可持续存在出现，一般来说可持续存在出现，一般来说可持续存在出现，一般来说可持续存在2-62-62-6
31、2-6个月。临床开始出现流感个月。临床开始出现流感个月。临床开始出现流感个月。临床开始出现流感样的症状如咽痛、头痛、发热。样的症状如咽痛、头痛、发热。样的症状如咽痛、头痛、发热。样的症状如咽痛、头痛、发热。l l阳性率一般在阳性率一般在阳性率一般在阳性率一般在1-5%1-5%1-5%1-5%左右左右左右左右腺病毒l l腺病毒是一种无外壳的双链腺病毒是一种无外壳的双链腺病毒是一种无外壳的双链腺病毒是一种无外壳的双链DNADNADNADNA病毒，其很多与人类上、病毒，其很多与人类上、病毒，其很多与人类上、病毒，其很多与人类上、下呼吸道感染密切有关。下呼吸道感染密切有关。下呼吸道感染密切有关。下呼吸
32、道感染密切有关。l l腺病毒肺炎多发生于腺病毒肺炎多发生于腺病毒肺炎多发生于腺病毒肺炎多发生于7 7 7 724242424月婴幼儿月婴幼儿月婴幼儿月婴幼儿。l l起病时潜伏期起病时潜伏期起病时潜伏期起病时潜伏期2-142-142-142-14天，天，天，天，IgMIgMIgMIgM抗体在发病抗体在发病抗体在发病抗体在发病1 1 1 1周左右出现，周左右出现，周左右出现，周左右出现，可持续存在可持续存在可持续存在可持续存在2-32-32-32-3个月。个月。个月。个月。l l冬春两季常见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的冬春两季常见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的冬春两季常见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的
33、冬春两季常见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的20%20%20%20%30%30%30%30%。l l阳性率：阳性率：阳性率：阳性率：15%-25%15%-25%15%-25%15%-25%，居病毒性肺炎的第二位；，居病毒性肺炎的第二位；，居病毒性肺炎的第二位；，居病毒性肺炎的第二位；呼吸道合胞病毒l l呼吸道合胞病毒是呼吸道合胞病毒是呼吸道合胞病毒是呼吸道合胞病毒是RNARNARNARNA病毒；病毒；病毒；病毒；l l呼吸道合胞病毒（呼吸道合胞病毒（呼吸道合胞病毒（呼吸道合胞病毒（RSVRSVRSVRSV）是婴幼儿下呼吸道感）是婴幼儿下呼吸道感）是婴幼儿下呼吸道感）是婴幼儿下呼吸道感染染染染(包括
34、毛细支气管炎和肺炎包括毛细支气管炎和肺炎包括毛细支气管炎和肺炎包括毛细支气管炎和肺炎)最重要的病因之最重要的病因之最重要的病因之最重要的病因之一，可能是致命性的；在年长儿和成年人中也一，可能是致命性的；在年长儿和成年人中也一，可能是致命性的；在年长儿和成年人中也一，可能是致命性的；在年长儿和成年人中也非常常见非常常见非常常见非常常见。l l在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏期为期为期为期为3-73-73-73-7天，天，天，天，IgMIgMIgMIgM抗体在发病抗体在发
35、病抗体在发病抗体在发病1 1 1 1周左右出现，可周左右出现，可周左右出现，可周左右出现，可持续存在持续存在持续存在持续存在2 2 2 23 3 3 3个月；个月；个月；个月；l l占病毒性肺炎的占病毒性肺炎的占病毒性肺炎的占病毒性肺炎的25%-35%25%-35%25%-35%25%-35%左右；位居儿童病毒左右；位居儿童病毒左右；位居儿童病毒左右；位居儿童病毒性肺炎第一位性肺炎第一位性肺炎第一位性肺炎第一位；流感病毒l l流行性感冒流行性感冒流行性感冒流行性感冒病毒是一种造成人类及动物患流行性感冒的病毒是一种造成人类及动物患流行性感冒的病毒是一种造成人类及动物患流行性感冒的病毒是一种造成人
36、类及动物患流行性感冒的RNARNARNARNA病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类:甲型、乙型、丙型甲型、乙型、丙型甲型、乙型、丙型甲型、乙型、丙型l l该病毒呈季节性周期性流行爆发（该病毒呈季节性周期性流行爆发（该病毒呈季节性周期性流行爆发（该病毒呈季节性周期性流行爆发（12121212月月月月-4-4-4-4月）月）月）月）l l甲型流感的流行每年都会发生甲型流感的流行每年都会发生甲型流感的流行每年都会发生甲型流感的流行每年都会发生 l l乙型
37、流感的流行只在每乙型流感的流行只在每乙型流感的流行只在每乙型流感的流行只在每3-63-63-63-6年爆发一次，感染人数超过总年爆发一次，感染人数超过总年爆发一次，感染人数超过总年爆发一次，感染人数超过总人口的人口的人口的人口的25%25%25%25%l l流感病毒的潜伏期为流感病毒的潜伏期为流感病毒的潜伏期为流感病毒的潜伏期为1-71-71-71-7天，天，天，天，IgMIgMIgMIgM抗体在发病抗体在发病抗体在发病抗体在发病1 1 1 1周左右出现，周左右出现，周左右出现，周左右出现，可持续存在可持续存在可持续存在可持续存在2-32-32-32-3个月个月个月个月副流感病毒l l常常引起
38、儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于呼吸道合胞病毒，它是单链的呼吸道合胞病毒，它是单链的呼吸道合胞病毒，它是单链的呼吸道合胞病毒，它是单链的RNARNA病毒病毒病毒病毒l l副流感病毒的潜伏期为副流感病毒的潜伏期为副流感病毒的潜伏期为副流感病毒的潜伏期为2-72-7天，天，天，天，IgMIgM抗体在发病抗体在发病抗体在发病抗体在发病1 1周左右出周左右出周左右出周左右出现，可持续存在现，可持续存在现，可持续存在现，可持续存在2-32-3个月
39、个月个月个月 l l副流感病毒感染全年均可发生，第副流感病毒感染全年均可发生，第副流感病毒感染全年均可发生，第副流感病毒感染全年均可发生，第1 1和第和第和第和第2 2型副流感病毒感型副流感病毒感型副流感病毒感型副流感病毒感染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学及其他儿童场所。第及其他儿童场所。第及其他儿童场所。第及其他儿童场所。第3 3型为地方性流行，传染性强型为地方性流行，传染性强型为地方性流行，传染性强型为地方性流行，传染性强l
40、 l阳性率：阳性率：阳性率：阳性率：10%-20%10%-20%l l临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断病原体潜伏期 IgM抗体产生时间病原体病原体潜伏期潜伏期IgMIgM产生时间产生时间IgmIgm存在存在存在存在时间时间时间时间嗜肺军团菌嗜肺军团菌2 2-10-10天天1 1周左右周左右3-63-6个月个月肺炎支原体肺炎支原体14-2114-21天天1 1周左右周左右3-63-6个月个月QQ热热热热立克次立克次立克次立克次体体
41、体体12-1912-19天天2 2周左右周左右3-43-4个月个月肺炎衣原体肺炎衣原体3030天左右天左右2-32-3周周2-62-6个月个月腺病毒腺病毒2-142-14天天1 1周左右周左右2-32-3个月个月呼吸道合胞呼吸道合胞3-73-7天天1 1周左右周左右2-32-3个月个月流感病毒流感病毒1 1-7-7天天1 1周左右周左右2-32-3个月个月副流感副流感2-72-7天天1 1周左右周左右2-32-3个月个月抗原抗体检测抗原抗体检测n nIgMn nIgG检测原理n n间接免疫荧光法间接免疫荧光法（IFAIFA）是基于待测样）是基于待测样本中的抗体与吸附在载本中的抗体与吸附在载玻片
42、上的抗原发生的反玻片上的抗原发生的反应。样本中存在的特异应。样本中存在的特异性抗体和抗原反应，未性抗体和抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中，抗原在下一步骤中，抗原-抗体复合物与荧光素标抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应，记的抗人球蛋白反应，用免疫荧光显微镜观察用免疫荧光显微镜观察结果结果实验步骤1n n样本的稀释：血清标本与PBS按1:1比例稀释n n稀释后的血清加入吸附剂中，彻底混匀。处理后的血清要离心10-15分钟除去沉淀，以防干扰检测实验步骤2 4.4.4.4.显微镜观察显微镜观察显微镜观察显微镜观察病原体病原体病
43、原体病原体形态或荧光模式形态或荧光模式形态或荧光模式形态或荧光模式嗜肺军团菌嗜肺军团菌杆状杆状肺炎支原体肺炎支原体细胞外围荧光模式细胞外围荧光模式立克次体立克次体球杆状球杆状肺炎衣原体肺炎衣原体球状球状腺病毒腺病毒混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒 混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）甲型流感病毒甲型流感病毒混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）乙型流感病毒乙型流感病毒混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）副流感病毒副流感病毒混合荧光模式（细
44、胞核和胞浆或胞膜）混合荧光模式（细胞核和胞浆或胞膜）5.5.结果判读结果判读 1 1）阳性结果：可以观察到腺病毒、流感病毒、呼吸）阳性结果：可以观察到腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒对阳性血清的道合胞病毒或副流感病毒对阳性血清的1-15%1-15%细胞的细细胞的细胞核、胞浆或胞膜出现苹果绿色荧光（在副流感病毒胞核、胞浆或胞膜出现苹果绿色荧光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同时观察到着色的合胞）；军和呼吸道合胞病毒中能同时观察到着色的合胞）；军团菌、衣原体或立克次体中所有的细菌呈现出苹果绿团菌、衣原体或立克次体中所有的细菌呈现出苹果绿色荧光；支原体对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色色
45、荧光；支原体对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色荧光。荧光。2 2）阴性结果：可观察到军团菌、肺炎衣原体和立克次体）阴性结果：可观察到军团菌、肺炎衣原体和立克次体无荧光，支原体、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼无荧光，支原体、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的细胞呈现红色。吸道合胞病毒和副流感病毒的细胞呈现红色。嗜肺军团菌嗜肺军团菌n n阴性：荧光弱、少、不规则嗜肺军团菌嗜肺军团菌n n阳性：荧光密集，且亮度较好，杆状形态肺炎支原体肺炎支原体n n阴性：红色细胞周围无或少量荧光，亮度弱肺炎支原体肺炎支原体n n阳性：荧光占视野50%以上，亮度好，形态为明显的细胞膜或胞浆Q热立克
46、次体热立克次体n n阴性：荧光弱、少、不规则Q热立克次体热立克次体n n阳性：荧光亮度强且数量多，形态典型肺炎衣原体肺炎衣原体n n阴性：荧光弱、少肺炎衣原体肺炎衣原体n n阳性：荧光密集，且亮度较好腺病毒腺病毒n n阴性：荧光弱、少腺病毒腺病毒n n阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒n n阴性：荧光弱、少呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒n n阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个甲型流感病毒甲型流感病毒n n阴性：荧光弱、少甲型流感病毒甲型流感病毒n n阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个乙型流感病毒乙型流感
47、病毒n n阴性：荧光弱、少乙型流感病毒乙型流感病毒n n阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个副流感病毒副流感病毒n n阴性：荧光弱、少副流感病毒副流感病毒n n阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个总结总结1 1、一卡九项，范围更广，不仅可以检测五项病毒，而且一卡九项，范围更广，不仅可以检测五项病毒，而且可以检测肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌、可以检测肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌、QQ热热立克次体立克次体2 2、检测、检测IgMIgM抗体，利于早期发现，采用间接免疫荧光法，抗体，利于早期发现，采用间接免疫荧光法，操作简便，结果快速操作简便，结果快
48、速3 3、标本为血清标本，容易采集、容易保存、标本为血清标本，容易采集、容易保存4 4、镜下荧光形态清晰，容易判定、镜下荧光形态清晰，容易判定5 5、观察荧光，准确性好、观察荧光，准确性好6 6、准确检测出哪种病原体感染，能为临床诊断、治疗提供、准确检测出哪种病原体感染，能为临床诊断、治疗提供强有力的帮助强有力的帮助临床问题总结1 1、查到病毒阳性临床意义大不大？、查到病毒阳性临床意义大不大？、查到病毒阳性临床意义大不大？、查到病毒阳性临床意义大不大？病毒性呼吸道感染虽属于自限性疾病，主要病毒性呼吸道感染虽属于自限性疾病，主要引起上呼吸道疾病，但具有较强的传染性，引起上呼吸道疾病，但具有较强的
49、传染性，而且可引起严重并发症而且可引起严重并发症病毒性呼吸道感染疾病的预后取决于病毒性呼吸道感染疾病的预后取决于病毒类病毒类型和宿主对病毒的反应型和宿主对病毒的反应临床临床主要依靠主要依靠对症支持治疗对症支持治疗，早期抗病毒治早期抗病毒治疗疗可能效果较好。可能效果较好。2 2.与凝集法查支原体不同在哪里？哪种方法准确？与凝集法查支原体不同在哪里？哪种方法准确？与凝集法查支原体不同在哪里？哪种方法准确？与凝集法查支原体不同在哪里？哪种方法准确？为什么？为什么？为什么？为什么？凝集法检查的是总抗体凝集法检查的是总抗体IgMIgM和和IgGIgG，九联检是检测，九联检是检测IgMIgM在初次感染和再
50、次感染的过程中，在初次感染和再次感染的过程中，IgGIgG和和IgMIgM抗体有不同抗体有不同的表现方的表现方式：初次感染时，几乎在所有的情况下式：初次感染时，几乎在所有的情况下IgMIgM和和IgGIgG均出现（均出现（IgMIgM早于早于IgGIgG出现）；而再次感染时可能不出出现）；而再次感染时可能不出现现IgMIgM，因此，因此IgMIgM的检测是唯一有用的诊断方法。在许多的检测是唯一有用的诊断方法。在许多疾病中病人的一生都可能存在高滴度的疾病中病人的一生都可能存在高滴度的IgGIgG，而，而IgMIgM一般一般情况情况下仅在感染后下仅在感染后2323个月存在于血清中，因此是近期个月存