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1、1【颅脑创伤患者血清胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯【颅脑创伤患者血清胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的变化】胶质神经元肿瘤醇化酶的变化】胶质神经元肿瘤【颅脑创伤患者血清胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶的变化】胶质神经元肿瘤【摘要】目的 研究颅脑创伤患者外周血清胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neurospecificenolase,NSE)的浓度变化。方法 按病情轻重（格拉斯哥评分）将 40 例单纯颅脑创伤病人分为轻型（11 例）、中型（14 例）、重型（15 例）三组。用酶联免疫法测定各组不同时间
2、点外周血 GFAP 和 NSE 蛋白水平的变化，同时进行平均动脉压、颅内压和脑灌注压的监测及预后评估并将上述结果进行方差分析。结果 GFAP、NSE 与病情轻重、预后、平均动脉压、颅内压和脑灌注压均具有相关性（P1,血清胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(neuro specific enolase,NSE)即是新近受到广泛重视的两个特异性标记物之一2。两者来源不同，损伤后释放机制各异，本研究通过联合检测GFAP 和 NSE 在颅脑创伤患者血清中的浓度及相应变化，以期进一步细化两者的临床意义，报道如下。1 资料与方
3、法11 一般资料选取温州医学院附属二院神经外科20XX年 9 月至20XX年4 月收治的单纯颅脑外伤患者 40 例。入选标准包括：外伤后 4 h 内来院；既往无神经精神系统异常史；非酒精或毒品成瘾者。其中男性 28 例,女性 12 例，年龄 1861 岁,平均369 岁。按格拉斯哥昏迷评分(GCS)将患者分为轻型（GCS13，11 例）、中型（813，14 例）、重型（GCS8，15 例）颅脑损伤三组。另收集对照组 10 例，为温州医学院附属二院门诊常规体检的健康人群。另外，根据是否接受开颅手术又分为手术组 17 例和非手术组 23 例。每位患者均被详细告知实验过2程和目的，并签署知情同意书。
4、病情危重者由患者家属代为实施。12 方法对于非手术组患者分别于入院后的当时（均值为伤后 23 h）、6 h、8 h、12 h、16 h、24 h、48 h 各时刻采集静脉血 5 ml；对于手术患者分别于术前以及术后 2 h、4 h、8 h、24 h 各时刻采集静脉血 5 ml。采集的静脉血在 30 min内离心（3000 r/min，10 min），分离出血清后超低温（80）保存以备批量检测。GFAP 和 NSE 测定采用酶联免疫法（sigma，美国）。13 颅内压、平均动脉压和脑灌注压监测及预后评估对于重症脑外伤患者监测颅内压（intracranial pressure，ICP），使用海鹰牌
5、 xxxx 监护仪(中国），将光纤探头置于硬膜外，持续监测 38 d，平均 5 d。据 ICP 变化调节脱水剂的应用时间和剂量，决定是否开颅手术及所采用的手术方式。根据患者入院时(治疗前)测定的右上肢血压值计算平均动脉压（meanarterial pressure，MAP），再根据 ICP 和 MAP 计算脑灌注压（cerebral perfusionpressure，CPP），CPP=MAP-ICP。并按照最高 ICP 小于和大于等于 25 mmHg，最低 CPP 大于等于和小于 60 mmHg，MAP 大于等于和小于 60 mmHg 分组并记录数据。入院 3 周后进行预后评估，按照效果分成
6、 5 个等级：1 死亡；2 植物状态；3 严重残疾；4 一般残疾；5 效果良好。14 统计学方法血清 NSE、GFAP 值的计算根据试剂盒标准样品测定的直线回归方程求出，各组计量资料采用均数标准差(xs)表示，采用方差分析及 t 检验，不满足正态分布的采用非参数检验方法，以 P3。GFAP 表达量的增加是星形细胞对神经元损伤的适应性改变3-4,在神经元损伤后的修复保护中有重要意义5。NSE 是一种神经系统特异性可溶性胞浆蛋白质，主要存在于神经元细胞浆中,脑组织损伤后 NSE 从损伤的神经元漏出,通过破坏的血脑屏障进入脑脊液和体循环6-7。本研究发现，各颅脑外伤组 GFAP 和 NSE 在入院早
7、期均较对照组高，初步验证了两种神经生化标志物的效能。同时，发现两者均与颅脑创伤伤情有关，即GCS 评分越高，GFAP 和 NSE 水平越高。提示两者均可以评估脑损伤程度。ICP 253mmHg、MAP 60 mmHg、CCP 60 mmHg 为预示脑外伤预后好坏的节点 8-11。本实验将 ICP、CPP、MAP 按照节点划分，与外周血 GFAP、NSE 水平进行了相关性的检测和分析，结果亦提示 GFAP 和 NSE 与脑外伤患者伤情及预后相关，尤其入院初 NSE 及 GFAP 浓度越高，预后越差。本研究发现 GFAP 在脑外伤后较 NSE 上升缓慢，其原因可能与 GFAP 的释放需要 AS 接
8、受神经元或者其他 AS 调控后再分泌入血12-13，而 NSE 则可因受损神经元细胞破碎而直接入血有关14。NSE 抵达峰值后下降较快，可能与蛋白的降解有关，在这一点上，笔者的结果与 Woertgen 等14报道一致。同时发现下降不明显者预后往往较差，提示与继发性脑损伤引起 NSE 持续释放入血有关14-15。本研究进一步观察了伤后或术后 24 h 不同 NSE 水平与预后的关系，发现伤后或术后 24 h NSE10g/L 的患者要比 NSE10 g/L 预后效果好，表明伤后或者术后 24 h 血清 NSE 浓度变化可能反映继发性脑损害程度。限于条件,48h 后的 GFAP 和 NSE 浓度尚
9、待后继研究以进一步明确其与继发性脑损伤的关系。本研究还发现，大多数患者 GFAP 在 2 d 左右达到高峰，此后持续下降，但有 2 例患者 GFAP 一直没有增加，治疗到第 3 天死亡，对死亡病理进行解剖，观察 AS 细胞的形态发现其胞体缩小,侧枝减少甚至死亡。这可能与继发颅内并发症使 AS 对神经元的反应敏感性下降有关13。而这两例患者 NSE 浓度则持续升高，也进一步说明 NSE 与 GFAP 产生机理不同。神经生化标志物在一定程度上解决了脑外伤早期神经系统损伤程度及预后评估的难题。检测外周血 GFAP 及 NSE，方法便利实用。NSE 与 GFAP 都能评估伤情并与患者预后相关。GFAP 伤后上升消退缓慢，而 NSE 上升消退迅速。联合检测 GFAP、NSE 将会对脑外伤患者具有更加准确的诊断及预后评估价值。