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1、食用菌菌种的分离与纯化食用菌菌种的分离与纯化 一、目的和要求一、目的和要求 掌握了解食用菌组织分离的掌握了解食用菌组织分离的方法和实际操作技术，明确食用方法和实际操作技术，明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重菌组织分离在食用菌生产中的重要性。要性。二、材料和用具二、材料和用具 试管斜面试管斜面PDAPDA培养基、平菇较培养基、平菇较成熟的子实体、酒精灯、接种针、成熟的子实体、酒精灯、接种针、75%75%酒精，升汞、火柴以及恒温培酒精，升汞、火柴以及恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。养箱、无菌操作台、解剖刀等。三、原三、原 理理 在食用菌生产中采用组织分离的在食用菌生产中采用组织分离的方法繁殖母
2、种是大多数菌类普遍采用方法繁殖母种是大多数菌类普遍采用的方法，而组织分离成功与否是与种的方法，而组织分离成功与否是与种菇子实体的选择、分离过程中的操作菇子实体的选择、分离过程中的操作方法等分不开的。这直接关系到所繁方法等分不开的。这直接关系到所繁菌种的优劣。因此食用菌组织分离是菌种的优劣。因此食用菌组织分离是食用菌生产中的重要环节之一。食用菌生产中的重要环节之一。四四 、分、分 组组 以以班为单位，每个同学接种班为单位，每个同学接种2 2支试管支试管母种母种(平菇平菇)。采用菌盖与菌柄交界处组织。采用菌盖与菌柄交界处组织进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离
3、。五、方法与步骤五、方法与步骤 1 1、选菇、选菇 平菇选朵大肉厚的作种菇。平菇选朵大肉厚的作种菇。2 2、种菇消毒、种菇消毒 将选好的种菇剪去过长的菌柄，将选好的种菇剪去过长的菌柄，放入接种箱内进行消毒种菇均用放入接种箱内进行消毒种菇均用75%75%的酒精擦洗菌盖、菌柄。然后再用的酒精擦洗菌盖、菌柄。然后再用升汞擦洗消毒。升汞擦洗消毒。3 3、组织分离接种、组织分离接种 用无菌解剖刀从菌柄中部纵向用无菌解剖刀从菌柄中部纵向切开，或把种菇撕开，在菌盖与菌切开，或把种菇撕开，在菌盖与菌柄交界处或菌盖带菌褶部分挑取一柄交界处或菌盖带菌褶部分挑取一小块组织，移接到试管小块组织，移接到试管PDA培养基
4、培养基上。上。4 4、菌种培养及保存、菌种培养及保存 置置2828左右温度下培养左右温度下培养3 35 5天就天就可看到组织上产生白色绒毛状菌丝，可看到组织上产生白色绒毛状菌丝，并向培养基上生长。菌丝长满斜面后，并向培养基上生长。菌丝长满斜面后，管口用塑料薄膜或防潮纸包扎，即可管口用塑料薄膜或防潮纸包扎，即可放入放入55电冰箱中保藏。电冰箱中保藏。六、作六、作 业业 根据观察结果比较同一菌种不同根据观察结果比较同一菌种不同部位组织分离后菌丝生长情况，评价部位组织分离后菌丝生长情况，评价何种部位更适宜该菌种的组织分离繁何种部位更适宜该菌种的组织分离繁殖，并对操作的各个环节提出改进建殖，并对操作的各个环节提出改进建议。议。