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1、第4章 细菌感染染的检查方方法与防治治原则学习要点 一、细菌感感染的检查查方法1. 细菌菌学诊断标本的采集集与送检 标标本采集与与送检过程程会直接影影响到致病病菌检出的的成败. (1)应注意意无菌操作作, 避免正常常菌群的污污染。 (2)不同病病程,采取取不同标本本。 (3)采集集标本应在在使用抗菌菌药物之前前。(4)尽可可能采集病病变明显部部位的材料料。 (5)标本必须新新鲜,采集集后尽快送送检。在采集、运运送和处理理标本时应应考虑生物物安全。致病菌的检检验程序(1)显微微镜检查:包括不染染色标本和和染色标本本的检查。观观察细菌的的有无、染染色性、形形态、排列列和动力。(2)分离离培养:原原
2、则上所有有标本均应应作分离培培养,以获获得纯培养养物后进一一步鉴定。(3)生化化试验:细细菌的代谢谢活动依靠靠酶的催化化作用,不不同致病菌菌具有不同同的酶系统统,故其代代谢产物不不尽相同,籍籍此可用生生化的方法法对致病菌菌进行鉴别别。(4)血清清学试验:包括直接接检测病原原体和间接接检测特异异性抗原。采采用含有已已知特异抗抗体的免疫疫血清(标标准诊断血血清)与分分离培养出出的未知纯纯种细菌进进行血清学学试验,可可以确定致致病菌的种种或型。常常用方法是是玻片凝集集试验。 (5)药物敏感感试验:对对指导临床床选择用药药有重要意意义。方法法以单片纸纸碟法和试试管稀释法法常用。纸纸碟法根据据抑菌圈有有
3、无及大小小来判定试试验菌对该该抗菌药物物耐药或敏敏感。试管管法是以抗抗菌药物的的最高稀释释度在1624h内仍能抑抑制105107个细菌生生长的测定定管为终点点,该管含含药浓度即即最小抑菌菌浓度(MIC),为试试验菌株的的敏感度。适适用于大多多数细菌,包包括生长缓缓慢的细菌菌。 2. 血清清学诊断 用已知的细细菌或其特特异性抗原原检测患者者体液中有有无相应特特异性抗体体和其效价价的动态变变化。一般般采取病人人的血清进进行试验,故这类方方法通常称称为血清学学诊断。 血清学诊断断试验最好好取患者急急性期和恢恢复期双份份血清标本本,当后者者的抗体效效价比前者者升高4倍时方有有诊断意义义。常用于细菌菌性
4、感染的的血清学诊诊断种类有有凝集试验验、沉淀试试验、补体体结合试验验、中和试试验等。3现代细细菌学检测测技术酶免疫测定定、荧光免免疫测定、放放射免疫测测定 统称为免疫疫标记测定定技术,即即用酶、荧荧光素或放放射性核素素来标记已已知抗体或或抗原,用用来测定未未知的抗原原或抗体。这这些技术保保持了抗原原、抗体结结合的特异异性,但由由于标记物物的放大作作用却显著著地增加了了测定的敏敏感性。在在酶免疫测测定中,以以ELISSA技术应应用最为广广泛,其操操作方便,试试剂稳定,无无须特殊昂昂贵设备、无无放射性污污染,且可可自动化检检测大量标标本。 分子生物学学技术 主要包括核核酸杂交技技术和PCR技术。
5、二、细菌感感染的防治治原则 1 细菌菌感染的特特异性预防防特异性免疫疫的产生方方式(1)主动动免疫:自自然主动免免疫(患病病、隐性感感染)和人工主主动免疫(接接种疫苗、类类毒素等)(2)被动动免疫:自自然被动免免疫(通过过胎盘、初初乳)和人人工被动免免疫(注射射抗毒素、丙丙种球蛋白白、转移因因子等)人工免疫是采用人工工方法,将将疫苗、类类毒素等免免疫原性物物质或含有有某种特异异性抗体、细细胞免疫制制剂等接种种于人体,以以增强宿主主的抗病能能力。用于于人工免疫疫的疫苗、类类毒素、免免疫血清、细细胞制剂,以以及诊断制制剂(结核核菌素、诊诊断血清、诊诊断菌液等等)等生物物性制剂统统称为生物物制品。(
6、1)人工工主动免疫疫:人工主主动免疫是是将疫苗或或类毒素等等免疫原性性物质接种种于人体,使使机体主动动产生特异异性免疫力力的一种防防治微生物物感染的措措施,主要要用于预防防。死疫苗:是选用免疫疫原性强的的细菌,经经人工大量量培养后,用用理化方法法杀死而成成。死疫苗苗易于保存存,但接种种剂量大,需需接种多次次,注射的的局部和全全身性副反反应较大,且且只产生体体液免疫应应答。活疫苗:是用减毒或或无毒力的的活病原体体制成。减减毒或无毒毒病原体仍仍可在宿主主体内有一一定的生长长繁殖,一一般只需接接种一次,剂剂量较小,副副反应轻微微或无,免免疫较持久久,能同时时产生细胞胞免疫和体体液免疫;活疫苗若若以口
7、服途途径接种,尚尚有sIgA抗体体产生,形形成局部粘粘膜免疫。活活疫苗的缺缺点是需冷冷藏保存,保保存期短。类毒素: 细菌外外毒素经0.3%0.4%甲醛液作作用34周后可制制成类毒素素,其毒性性消失但仍仍保持免疫疫原性。亚单位疫疫苗:根据据细菌抗原原分析,查查明不同致致病菌的主主要保护性性免疫原存存在的组分分,然后将将之制成的的疫苗称为为亚单位疫疫苗。(2)人工工被动免疫疫:人工被被动免疫是是注射含有有特异性抗抗体的免疫疫血清或纯纯化免疫球球蛋白,或或细胞因子子等制剂,使机体即刻获得特异性免疫。人工被动免疫主要用于治疗或紧急预防。 抗毒素:抗毒素能能中和相应应外毒素。使使用马制造造的抗毒素素,应
8、注意意I型超敏反反应。丙种球蛋蛋白:从正正常成人血血清中提取取得到。可可用于紧急急预防如麻麻疹、甲型型肝炎、脊脊髓灰质炎炎等病毒的的感染。丙丙种球蛋白白也可用于于治疗丙种种球蛋白缺缺乏症患者者。其免疫疫效果不如如高效价的的特异免疫疫球蛋白。两种人工免免疫的比较较人工主动免免疫人工被动免免疫免疫物质抗原抗体或细胞胞因子等免疫出现时时间慢,244周快,立即免疫维持时时间长,数月数年短,233周主要用途预防治疗或紧急急预防2细菌感感染的治疗疗抗菌药物的的种类按化学结构构来分类:(1)-内酰胺类类:青霉素素和头孢霉霉素等。(2)大环环内酯类:红霉素、阿阿齐霉素、克拉霉素和罗红霉素等。(3)氨基基糖苷类
9、:链霉素、庆庆大霉素、卡卡那霉素及及妥布霉素素、阿米卡卡星等(4)四环环素类:四四环素、土土霉素、多多西环素和和米诺环素素等。(5)氯霉霉素类(6)多肽肽类:杆菌菌肽、多粘粘菌素、万万古霉素和和替考拉宁宁等(7)喹诺诺酮类:诺诺氟沙星、环环丙沙星等等抗菌药物的的主要作用用机制(1)影响响细胞壁的的合成 (2)影响响细胞膜的的功能 (3)影响响蛋白质的的合成 (4)影响响核酸代谢谢 复复习题一、名词解解释1. 玻片片凝集试验验 2. 最小小抑菌浓度度(MIC)3血清学学诊断 4主动免免疫5被动免免疫6人工免免疫7生物制制品8人工主主动免疫9死疫苗苗10活疫疫苗11类毒毒素12亚单单位疫苗13人工
10、工被动免疫疫二、选择题题A1型题1. 给机机体注射抗抗毒素属于于的免疫类类型是A 自然主主动免疫 B人工主动动免疫 C自然被动动免疫D人工被动动免疫 E天然免疫疫2常用人人工被动免免疫的生物物制品有 A菌苗 BB疫苗 C BCCG D类毒素 E抗毒素3给机体体注射类毒毒素属于的的免疫类型型是A自然主动动免疫 B人工主动动免疫 C自然被动动免疫D人工被动动免疫 E自然获得得性免疫4属于灭灭活疫苗的的是A口服脊髓髓灰质炎疫疫苗 B麻疹疫苗 C风疹疫苗苗D狂犬疫苗苗 E腮腺炎疫疫苗5不属于于减毒活疫疫苗的是A口服脊髓髓灰质炎疫疫苗 B麻疹疫苗 C风疹疫苗苗D狂犬疫苗苗 E腮腺炎疫疫苗6我国预预防脊髓
11、灰灰质炎的疫疫苗属于A灭活疫苗苗 B减毒活疫疫苗 C亚单位疫疫苗 D多糖疫苗苗 E基因工程程疫苗7属于亚亚单位疫苗苗的是 A白百百破三联疫疫苗 B卡介苗 C流脑多糖糖疫苗D伤寒三联联疫苗 E破伤风疫疫苗8属于减减毒活疫苗苗的是A白百破三三联疫苗 B卡介苗 C流脑多糖糖疫苗D伤寒三联联疫苗 E破伤风疫疫苗9属于死死疫苗的是是A白百破三三联疫苗 B卡介苗 C流脑多糖糖疫苗D伤寒三联联疫苗 E破伤风疫疫苗10属于于类毒素的的是A白百破三三联疫苗 B卡介苗 C流脑多糖糖疫苗D伤寒三联联疫苗 E破伤风疫疫苗11机体体可获得人人工主动免免疫的方法法是注射A抗毒素 B类毒素 C细胞因子 D抗血清 E免疫球蛋
12、蛋白12对细细菌种属的的鉴定不需进行的的检测项目目是A显微镜检检查 B分离培养 C生化试验验D血清学鉴鉴定 E药物敏感感试验13不属属于细菌生生化反应测测定的是A糖发酵试试验 B肥达试验 C吲哚试验验D甲基红试试验 E硫化氢试试验14属于于血清学诊诊断的试验验是A糖发酵试试验 B肥达试验 C吲哚试验验D甲基红试试验 E硫化氢试试验B1型题(供144题备选答答案)A白百破三三联疫苗B卡介苗C流脑多糖糖疫苗D伤寒三联联疫苗E破伤风疫疫苗1属于亚亚单位疫苗苗的是2属于类类毒素的是是3属于减减毒活疫苗苗的是4属于死死疫苗的是是(供588题备选答答案)A自然主动动免疫B人工主动动免疫C自然被动动免疫D人
13、工被动动免疫E天然免疫疫5接种破破伤风疫苗苗6对霍乱乱的终生免免疫7注射白白喉抗毒素素86个月月以内婴儿儿的抗感染染能力(供9113题备选答答案)A灭活疫苗苗B减毒活疫疫苗 C类毒素疫疫苗 D多糖疫苗苗 E基因工程程疫苗9卡介苗苗10乙型型肝炎疫苗苗11破伤伤风疫苗12流脑脑疫苗13霍乱乱疫苗三、填空题题1. 药物物敏感试验验方法以 和 常用。2. 抗菌菌药物的最最高稀释度度在1624h内仍能抑抑制105107个细菌生生长的药浓浓度即称 。3血清学学诊断试验验最好取患患者 和 双份血清标标本,当后后者的抗体体效价比前前者升高 倍倍者方有意意义。4常用的的死疫苗有有 , 和 等等5常用的的活疫苗
14、有有 , 和 等等。6常用的的被动免疫疫制剂有 和 等等。7人工被被动免疫的的主要用途途是 或 。四、问答题题1. 在采采集与运送送用于分离离病原体的的标本时应应注意些什什么?2药物敏敏感试验常常用的方法法有哪些? 3致病菌菌的检验程程序包括哪哪几个方面面?4死疫苗苗和活疫苗苗各有何优优缺点?5人工主主动免疫和和人工被动动免疫有和和不同? 参考答案一、名词解解释1 采用含有已已知特异抗抗体的免疫疫血清(标标准诊断血血清)与分分离培养出出的未知纯纯种细菌在玻玻片上进行行的一种血血清学试验验,以确定定致病菌的的种或型。2. 是抗抗菌药物在在1624h内仍能抑抑制105107个细菌生生长的最高高稀释
15、浓度度。 3用已知知的细菌或或其特异性性抗原检测测患者体液液中有无相相应特异性性抗体和其其效价的动动态变化。一一般采取病病人的血清清进行试验验,故这类方方法通常称称为血清学学诊断。4自然主主动免疫(患患病、隐性性感染)和和人工主动动免疫(接接种疫苗、类类毒素等)5自然被被动免疫(通过胎盘、初乳)和人工被动免疫(注射抗毒素、丙种球蛋白、转移因子等)6是采用用人工方法法,将疫苗苗、类毒素素等免疫原原性物质或或含有某种种特异性抗抗体、细胞胞免疫制剂剂等接种于于人体,以以增强宿主主的抗病能能力。7用于人人工免疫的的疫苗、类类毒素、免免疫血清、细细胞制剂,以以及诊断制制剂(结核核菌素、诊诊断血清、诊诊断
16、菌液等等)等生物物性制剂统统称为生物物制品(bbioprroducct)。8是将疫疫苗或类毒毒素等免疫疫原性物质质接种于人人体,使机机体主动产产生特异性性免疫力的的一种防治治微生物感感染的措施施,主要用用于预防。9是选用用免疫原性性强的细菌菌,经人工工大量培养养后,用理理化方法杀杀死而成。10是用用减毒或无无毒力的活活病原体制制成11细菌菌外毒素经经0.3%0.4%甲醛液作作用34周后可制制成类毒素素,其毒性性消失但仍仍保持免疫疫原性。12根据据细菌抗原原分析,查查明不同致致病菌的主主要保护性性免疫原存存在的组分分,然后将将之制成的的疫苗。13是注注射含有特特异性抗体体的免疫血血清或纯化化免疫
17、球蛋蛋白,或细细胞因子等等制剂,使使机体即刻刻获得特异异性免疫。人人工被动免免疫主要用用于治疗或或紧急预防防。 二、选择题题A型题1 D; 2 E; 3 B; 4 D; 5 D; 6 B; 7 C; 8 B; 9 D; 100 E;11 B; 122 E; 133 B; 144 BB型题1 C; 2 E; 3 B; 4 D; 5 B; 6 A; 7 D; 8 C; 9 B; 100 E;11 C; 122 D; 133 A三、填空题题1 单片纸碟法法,试管稀稀释法; 2. 最小抑菌菌浓度(MIC); 3急性期期;恢复期期;4; 4霍乱疫苗苗;伤寒三联疫疫苗;狂犬犬疫苗等;5口服脊脊髓灰质炎炎疫
18、苗;麻麻疹疫苗;风疹疫苗苗;腮腺炎炎疫苗等6抗毒素素;丙种球球蛋白等 7紧急预预防;特异异性治疗四、问答题题1. (11)应注意意无菌操作作, 避免正常常菌群的污污染; (2)不同病病程,采取取不同标本本;(3)采集标标本应在使使用抗菌药药物之前;(4)尽可能能采集病变变明显部位位的材料;(5)标本必必须新鲜,采采集后尽快快送检。在在采集、运运送和处理理标本时还还应考虑生生物安全。2方法以以单片纸碟碟法和试管管稀释法常常用。纸碟碟法根据抑抑菌圈有无无及大小来来判定试验验菌对该抗抗菌药物耐耐药或敏感感。试管法法是以抗菌菌药物的最最高稀释度度在1624h内仍能抑抑制105107个细菌生生长的测定定
19、管为终点点,该管含含药浓度即即最小抑菌菌浓度(MIC),为试试验菌株的的敏感度。适适用于大多多数细菌,包包括生长缓缓慢的细菌菌。3(1)显显微镜检查查;(2)分离培培养;(3)生化试试验;(4)血清学学鉴定;(5)药物敏敏感试验等等。4死疫苗苗易于保存存,但接种种剂量大,需需接种多次次,注射的的局部和全全身性副反反应较大,且且只产生体体液免疫应应答。活疫疫苗仍可在在宿主体内内有一定的的生长繁殖殖,一般只只需接种一一次,剂量量较小,副副反应轻微微或无,免免疫较持久久,能同时时产生细胞胞免疫和体体液免疫;活疫苗若若以口服途途径接种,尚尚有sIgA抗体体产生,形形成局部粘粘膜免疫。活疫苗的缺点是需冷藏保存,保存期短。5人工主主动免疫免免疫物质为为抗原;免免疫出现时时间慢,需需24周;免疫疫维持时间间长,达数数月数年;主主要用于预预防。人工工被动免疫疫免疫物质质为抗体或或细胞因子子等;免疫疫出现时间间快,立即即可见;免免疫维持时时间短,一一般23周;主要要用于治疗疗或紧急预预防。