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1、微生物学学复习资资料第一章 原核微微生物的的形态、构构造和功功能伴孢晶体体:少数数芽孢杆杆菌在形形成芽孢孢的同时时,会在在芽孢旁旁形成一一颗菱形形、方形形或不规规则形的的碱溶性性蛋白质质晶体,称称为伴孢孢晶体(即即内毒毒素)。L型细菌菌:在某某些环境境条件下下(实验验室或宿宿主体内内)通过过自发突突变而形形成的遗遗传性稳稳定的细细胞壁缺缺陷变异异型。1没没有完整整而坚韧韧的细胞胞壁,细细胞呈多多形态,有些能能通过细细菌滤器器,故又又称“滤滤过型细细菌”。对渗透透敏感,在在固体培培养基上上形成“油油煎蛋”似似的小菌菌落(直直径在00.1mmm左右右)古生菌:又称古古细菌,是是一个在在进化途途径上
2、很很早就与与真细菌菌和真核核生物相相互独立立的生物物类群,主主要包括括一些独独特生态态类型的的原核生生物,如如产甲烷烷菌及大大多数嗜嗜极菌。4、试比比较G+和G-细菌细细胞壁的的异同。 成 分革兰氏阳阳性细菌菌革兰氏阴阴性细胞胞肽聚糖磷磷壁酸类类脂质蛋蛋白质含量很高高(300-955)含量量较高(50)一般无(2)0含量很低低(520)0含量较高(约20)含量较高 5、简述述革兰氏氏染色法法的机制制并说明明此法的的重要性性。革兰氏染染色机制制:结晶紫紫液初染染和碘液液媒染:在细菌菌的细胞胞膜内可可形成不不溶于水水的结晶晶紫与碘碘的复合合物。乙乙醇脱色色:G细胞壁壁较厚、肽肽聚糖网网层次多多和交
3、联联致密且且不含类类脂,把把结晶紫紫与碘的的复合物物牢牢留留在壁内内,使其其保持紫紫色;GG-细胞胞壁薄、外外膜层类类脂含量量高、肽肽聚糖层层薄和交交联度差差,结晶晶紫与碘碘复合物物的溶出出,使细胞退退成无色色。复染染: GG-细菌菌呈现红红色,而而G+细细菌则仍仍保留最最初的紫紫色。重要性: 革兰兰氏染色色有着十十分重要要的理论论与实践践意义。通通过这一一染色,几几乎可把把所有的的细菌分分成革兰兰氏阳性性菌与革革兰氏阴阴性菌两两个大类类,因此此它是分分类鉴定定菌种时时的重要要指标。又又由于这这两大类类细菌在在细胞结结构、成成分、形形态、生生理、生生化、遗遗传、免免疫、生生态和药药物敏感感性等
4、方方面都呈呈现出明明显的差差异,因因此任何何细菌只只要通过过简单的的革兰氏氏染色,就就可提供供不少其其他重要要的生物物学特性性方面的的信息。第二章 真核微微生物的的形态、构构造和功功能1子实体体:是指指在其里里面或上上面可产产生无性性或有性性孢子,有有一定形形状和构构造的任任何菌丝丝体组织织2 菌物物界:指指与动物物界,植植物界相相并列的的一大群群无叶绿绿素,依依靠细胞胞表面吸吸收有机机养料,细细胞壁一一般含几几丁质的的真核微微生物3 二级级菌丝:又称气气生菌丝丝,由基基内营养养菌丝长出出培养基基外伸向向空间的的菌丝。它是担子子菌中由由相应的的异性的的初生菌菌丝进行行体细胞胞接合而而形成的的菌
5、丝。其其具有分分枝状者者称为次次生菌丝丝体。4 锁状状联合: 担子子菌亚门门中多数数担子菌菌的双核核菌丝,在在进行细细胞分裂裂时,于于菌丝的的分隔处处形成的的一个侧侧生的喙喙状结构构称锁状状联合。生理意义义:保证证了双核核菌丝在在进行细细胞分裂裂时,每每节(每每个细胞胞)都能能含有两两个异质质(遗传传型不同同)的核核,为进进行有性性生殖,通通过核配配形成担担子打下下基础。锁锁状联合合是双核核菌丝的的鉴定标标准,凡凡是产生生锁状联联合的菌菌丝均可可断定为为双核。锁锁状联合合也是担担子菌亚亚门的明明显特征征之一。简答题1、细菌菌、放线线菌、酵酵母菌、霉霉菌四大大类微生生物的菌菌落有何何不同?为什么
6、么?菌落 细菌菌 酵酵母菌 放线菌菌 霉霉菌含水形态态 很很湿或较较湿 较湿 干燥燥或较干干燥 干燥外观形态态 小小而突起起或大而而平坦 大而而突起 小而而紧密 大而而疏松或或大而致致密菌落透明明度 透明或或稍透明明 稍稍透明 不透透明 不透明明菌落与培培养基结结合程度度 不结结合 不结合合 牢牢固结合合 较较牢固结结合菌落颜色色 多多样 单调调,一般般呈乳脂脂或矿烛烛色,少少数红色色或黑色色 十分多多样 十分分多样菌落正反反面颜色色的差别别 相相同 相同 一般般不同 一般般不同菌落边缘缘 一一般看不不到细胞胞 可可见球状状,卵圆圆状或假假丝状细细胞 有时可可见细丝丝状细胞胞 可可见粗丝丝状细
7、胞胞气味 一般有有臭味 多带带酒香味味 带带有泥腥腥味 往往有有霉味原因:因因为细菌菌、放线线菌、酵酵母菌和和霉菌的的形态和和生理类类型不尽尽相同,所所以在其其菌落形形态,构构造等特特征上也也有各自自的特点点。2、试比比较细菌菌、放线线菌、酵酵母菌和和霉菌细细胞壁成成分的异异同。 细菌分为为G+和和G-,GG+肽聚聚糖含量量高,GG-含量量低;GG+磷壁壁酸含量量较高,而而G-不不含磷壁壁酸;GG+类脂脂质一般般无,而而G-含含量较高高;G+不含蛋蛋白质,GG-含量量较高。放放线菌为为G+,其其细胞壁壁具有GG+所具具有的特特点。酵酵母菌和和霉菌为为真菌,酵酵母菌的的细胞壁壁外层为为甘露聚聚糖
8、,内内层为葡葡聚糖;而霉菌菌的细胞胞壁成分分为几丁丁质、蛋蛋白质、葡葡聚糖。3青霉素素只对处处于生长长繁殖旺旺盛时期期的细胞胞有抑制制作用,而而对处于于休止状状态的细细胞没有有抑制作作用,请请分析这这种说法法的正误误,并说说明你的的理由。原因:青青霉素抑抑制肽聚聚糖的合合成过程程,形成成破裂的的细胞壁壁,代谢谢旺盛的的细菌才才存在肽肽聚糖的的合成,因因此此时时有青霉霉素作用用时细胞胞易死亡亡。作用用机制:青霉素素破坏肽肽聚糖合合成过程程中肽尾尾与肽桥桥间的转转肽作用用。对革兰阳阳性菌有有效,由由于革兰兰阴性菌菌缺乏五五肽交连连桥所以以青霉素素对其作作用不大大。补充:第三章 病毒和和亚病毒毒1温
9、温和性噬噬菌体:噬菌体体侵染宿宿主后,并并不增殖殖,裂解解,而与与宿主DDNA结结合,随随宿主DDNA复复制而复复制,此此时细胞胞中找不不到形态态上可见见的噬菌菌体,这这种噬菌菌体称为为温和性性噬菌体体或溶源源噬菌体体。2溶原原菌:含含有温和和性噬菌菌体的细细菌称为为溶源性性细菌。 溶源性噬菌体附着或整合在宿主染色体上,一道复制。 3包涵体体:4类病毒毒:是一一类只含含RNAA一种成成分,专专性寄生生在活细细胞内的的分子病病原体。1、什么么叫烈性性噬菌体体?简述述其裂解解性生活活史。 烈性噬噬菌体:凡在短短时间内内能连续续完成吸吸附、侵侵入、增增殖、成成熟、 裂解这这五个阶阶段而实实现其繁繁殖
10、的噬噬菌体,称称为烈性性噬菌体体。 吸附 噬菌体体尾丝散散开,固固着于特特异性受受点上。 侵入 尾鞘收收缩,尾尾管推出出并插入入到细胞胞壁和膜膜中,头头部的核核酸注入入到宿主主细胞中中,而蛋蛋白质衣衣壳留在在细胞壁壁外。 增殖 增殖过过程包括括核酸的的复制和和蛋白质质的生物物合成。注注入细胞胞的核酸酸操纵宿宿主细胞胞代谢机机构,以以寄主个个体及细细胞降解解物和培培养基介介质为原原料,大大量复制制噬菌体体核酸,并并合成蛋蛋白质外外壳。 成熟(装装配)寄寄主细胞胞合成噬噬菌体壳壳体(TT4噬菌菌体包括括头部、尾尾部),并组装装成完整整的噬菌菌体粒子子。 裂解(释释放)子子代噬菌菌体成熟熟后,脂脂肪
11、酶和和溶菌酶酶促进宿宿主细胞胞裂解,从从而释放放出大量量子代噬噬菌体。第四章 微生物物的营养养和培养养基1生长长因子:一类对对微生物物正常代代谢必不不可少且且又不能能从简单单的碳、氮氮源自行行合成的的所需极极微量的的有机物物。2 基团团移位:指一类类既需特特异性载载体蛋白白的参与与,又需需耗能的的一种物物质运送送方式。其其机制分分两步:(1)HHPr被被PEPP激活,(22)糖经经磷酸化化而进入入细胞内内。3 选择择性培养养基:选选择培养养基是一一类根据据某微生生物的特特殊营养养要求或或其对某某化学、物物理因素素的抗性性而设计计的培养养基,具具有使混混合菌样样中的劣劣势菌变变成优势势菌的功功能
12、,广广泛用于于菌种筛筛选等领领域。如如酵母富富集培养养基中的的孟加拉拉红抑制制细菌的的生长而而对酵母母菌无影影响,偏偏酸性的的环境有有利于酵酵母菌的的生长。4 鉴别别性培养养基:培培养基中中加入能能于某一一菌的无无色代谢谢产物发发生显色色反应的的指示剂剂,从而而用肉眼眼就能使使该菌菌菌落与外外形相似似的它种种菌落相相区分的的培养基基就称鉴鉴别性培培养基。1试比较较细胞膜膜运输营营养物质质的四种种方式。比较项目目 单纯纯扩散促进扩扩散主动动运输基基因移位位特异载体体蛋白无慢由浓至至稀内外外相等无特异性性不需要要不变 无无竞争争性无H2OO、COO2、OO2甘油油、乙醇醇、少数数氨基酸酸、盐类类、
13、代谢谢抑制剂剂有快由浓浓至稀内内外相等等特异性不不需要不变有有有竞争性性有SO442+、PPO433+、糖糖(真核核生物)有快由稀稀至浓内内部浓度度高得多多特异性性需要不变有有有竞争性性有有快由稀稀至浓内内部浓度度高得多多特异性性需要改变有有有竞争性性有运送速度度溶质运送送方向平衡时内内外浓度度运送分子子能量消耗耗运送前后后溶质分分子载体饱和和效应与溶质类类似物运送抑制制剂运送对象象举例氨基酸、乳乳糖等糖糖类、NNa+、CCa2+等无机机离子葡萄糖、果果糖、甘甘露糖、嘌嘌呤、核核苷、脂脂肪酸等等2、什么么是鉴别别性培养养基?试试以EMMB培养养基为例例,分析析其鉴别别作用的的原理。 鉴别性培养
14、基:培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。 EMB作用原理 其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。在低酸度时,这两种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落,因而易于辨认。尤其是大肠杆菌,因其强烈分解乳搪而产生大量的混合酸,菌体带H+故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,所以菌落染上深紫色,从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。3、简述配制培养基的基本原则:P91 培养基是是人工配配制的
15、供供不同微微生物生生长繁殖殖,或用用于积累累代谢产产物的营营养基质质。所以以配制培培养基时时应注意意以下原原则:1目的明明确 22营养协协调 33理化适适宜 44 经济济节约1.根据据微生物物的不同同选用不不同的培培养基,2.注意各种营养物质的浓度与配比。3.注意将培养基的pH值控制在一定范围内。6、试述述配制培培养基的的基本过过程及应应该注意意的问题题。配制培养养基的基基本过程程是:按培养基基的配方方称取各各种药品品,用量量太少的的药品应应配制成成溶液后后再取一一定量加加入。将各种药药品加水水溶解,通通常是加加所需水水量的一一半。若配固体体培养基基,按22%的用用量称取取琼脂,用用水将琼琼脂
16、浸湿湿一下,用用手挤去去琼脂中中过多的的水分,加加入2的的溶液中中。加热至琼琼脂全部部溶解,并并补足所所需的全全部水量量。用1moolNaaOH和和1moolHCCL调节节pH至至要求值值。用分装器器将培养养基分装装入试管管或三角角瓶中,塞塞上棉塞塞并包扎扎,灭菌菌后备用用。注意事项项:配制过程程中,在在加热熔熔化琼脂脂时,要要不断搅搅拌,以以防糊底底。分装时不不要让培培养基沾沾染试管管口或瓶瓶口,以以防培养养过程中中容易污污染杂菌菌。同时还应应考虑培培养基的的氧化还还原电位位及原材材料的经经济、易易购和来来源广泛泛的原则则。Ashbby无氮氮培养基基:(富富集好氧氧性自生生固氮菌菌用) 甘露
17、醇醇1%,KKH2PPO4 0.225%,MMgSOO4.77H2OO 0.02%,NaaCL 0.002% ,CaaSO44.2HH2O 0.001%,CCaCOO3 00.055%。试试述其碳碳源 氮氮源 能能源物质质各是什什么? CaCCO3起起什么作作用?该培养基基的 C 素来源和能量来源均来自甘露醇。该培养基基未提供氮素来源,根据据所 学学 知 识,只有能固氮的微生物才能在无氮培养基上生长。该培养基的矿质营养物质包括:Mg2+, KK+, CCu2+ , Na+, PPO43-, SO442- HPPO42-, PO443-, CaCCO3 主要用来作缓冲物质调节培养基的 pHH 值
18、 , 以保持 pHH 不变。据此我们们可推知该培养基可用于培养自生固氮菌等微生物。第五章微生生物的新新陈代谢谢1次生代代谢产物物:指某某些微生生物生长长到稳定定期前后后,以结结构简单单,代谢谢途径明明确,产产量较大大的初生生代谢产产物作前前体,通通过复杂杂的次生生代谢途途径所合合成的各各种结构构复杂的的化学物物。如抗抗生素,生生物碱,信信息素等等。2 EDD途径: EED是是少数EEMP途途径不完完整的细细菌所特特有的利利用葡萄萄糖的替替代途径径,为微微生物所所特有。一一分子葡葡萄糖经经ED途途径可生生成两个个丙酮酸酸并净生生成一个个ATPP、一个个NADDH+HH+和一一个NAADPHH+H
19、+。ED途径径的特点点:aKKDPGG裂解为为丙酮酸酸和3-磷酸甘甘油醛bb存在一一特征性性酶KDDPG 醛缩酶酶c其终终产物两两分子丙丙酮酸来来历不同同,其一一由KDDPG直直接裂解解而成,另另一则有有3-磷磷酸甘油油醛经EEMP 途径转转化而来来d产能能效率低低。TCA循循环特点点:a氧氧虽不直直接参与与其中反反应,但但必须在在有氧条条件下运运转b每每分子丙丙酮酸可可产生44个NAADH+H+,一一个FAADH22,一个个GTPP, 总总共相当当于155个ATTP,因因此产能能效率极极高cTTCA位位于一切切分解代代谢和合合成代谢谢的枢纽纽地位,不不仅可以以为微生生物的合合成代谢谢提供各各
20、种碳架架原料,而而且还与与人类的的发酵生生产密切切相关。3 发酵酵:目前前泛指任任何好氧氧型或厌厌氧型微微生物来来生产有有用代谢谢产物或或食品饮饮料的一一类生产产方式。( 无氧等外外源氢受受体的条条件下,底底物脱氢氢后产生生的还原原力不经经呼吸链链而直接接传递给给某一内内源性中中间代谢谢物接受受,以实实现底物物水平磷磷酸化的的一类生生物氧化化反应。)4 异型型乳酸发发酵(HHMP):凡葡萄糖经乳酸发酵后除主要产生乳酸外,还产生乙醇,乙酸和CO2等多种产物的发酵称异型乳酸发酵。5 生物物固氮:大气中中的分子子氮通过过微生物物固氮酶酶的催化化作用而而还原成成氨的过过程,生生物界中中只有原原核生物物
21、才有固固氮能力力。生物固氮氮6要素素:ATTP的供供应,还还原力及及其传递递载体, 固氮酶酶,还原原底物NN2,镁镁离子,严严格的厌厌氧环境境。固氮酶除除了催化化N2生生产NHH3外,还还具有催催化2HH+ +2e-H2反反应的氢氢化酶活活性。肽聚糖分分成分33个阶段段:a在在细胞质质中合成成,合成成PARRK核苷苷酸,UUDP作作为糖载载体。B在细胞胞膜中合合成,合合成肽聚聚糖单体体 , 称作细细菌萜醇醇的类脂脂载体。C在细胞胞膜外合合成,交交联作用用形成肽肽聚糖。青霉素作作用于肽肽聚糖的的合成过过程,对对肽聚糖糖已合成成好的细细菌(处处于停滞滞期)无无作用。转肽作用用可被青青霉素抑抑制,其
22、其作用机机制是:青霉素素是肽聚聚糖单体体五钛尾尾末端的的D-丙丙氨酰-D-丙丙氨酸的的结构类类似物。应用营养养缺陷型型菌株解解除正常常的反馈馈调节。举举例:aa赖氨酸酸发酵bb肌氨酸酸的生产产生物氧化化的形式式包括某某物质与与氧结合合,脱氢氢和失去去电子33种。生生物氧化化的过程程可分为为脱H,递H,受H33个阶段段,生物物氧化的的功能有有产能,产产还原力力,和产产小分子子中间代代谢产物物3种。生生物氧化化的类型型包括呼呼吸,无无氧呼吸吸,发酵酵3种。底物脱氢氢4种途途径:EEMP,HMPP,EDD,TCCA循环环。EMP途途径的特特点和意意义:供供应ATTP形式式的能量量和NAADH22形式
23、的的还原力力,连接接其他三三个重要要途径的的桥梁,为微生物合成提供多种重要的中间产物,通过逆向反应可进行多糖合成。HMP当当葡萄糖糖经一次次磷酸化化脱氢生生成6-磷酸葡葡萄糖酸酸后,在在6-磷磷酸葡萄萄糖酸脱脱酶作用用下,再再次降解解为144分子CCO2和和1分子子磷酸戊戊糖。作作用:供应合合成原料料;产还原原力;作为固固定COO2的中中介;扩大碳碳源的利利用范围围;连接EEMP途途径。特特点:葡葡萄糖不不经EMMP途径径和TCCA循环环而得到到彻底氧氧化,并并能产生生大量NNADPPH+HH+形式式的还原原力及多多种重要要的中间间产物。 呼吸,又又称好氧氧呼吸,特特点是底底物按常常规方式式脱
24、氢后后,脱下下的氢经经完整的的呼吸链链又称电电子传递递链传递递,最终终被外源源分子氧氧接受,产产生水并并释放AATP 形式的的能量。无氧呼吸吸:指一一类呼吸吸链末端端的H受受体为外外源无机机氧化物物(少数数为有机机物)的的生物氧氧化。特特点:底底物按常常规方式式脱氢后后,经部部分呼吸吸链递氢氢,最终终由氧化化态的无无机物或或有机物物受氢,并并完成氧氧化磷酸酸化途径径产能反反应。碳酸盐呼呼吸:是是一类以以CO22或碳酸酸盐作为为呼吸链链末端氢氢受体的的无氧呼呼吸。根根据其还还原产物物不同分分为两类类;产甲甲烷菌产产生的甲甲烷的碳碳酸盐呼呼吸,其其二是产产乙酸菌菌产生乙乙酸的碳碳酸盐呼呼吸。第六章
25、微生生物的生生长及其其控制。1恒浊器器:根据据培养器器内微生生物的生生长密度度,借光光电控制制系统控控制培养养液流速速,以达达到菌体体密度高高,生长长速率恒恒定的连连续培养养器。2恒化器器:通过过保持有有一种生生长限制制因子的的培养液液的流速速不变,可可使微生生物始终终处在低低于其最最高生长长速率的的条件下下进行生生长繁殖殖的连续续培养器器。3同步生生长:通通过获得得同步培培养物的的手段,使使细胞群群体中各各个体都都处于分分裂步调调一致的的生长状状态4连续培培养:指指微生物物接种到到培养基基里以后后的整个个生长期期间,微微生物能能持续地地以比较较恒定的的生长速速率常数数进行生生长,从从而导致致
26、微生物物的生长长过程能能“不断断”地进进行下去去的一种种培养方方法。优优点:高高效、低低耗、利利于自控控、产品品质量稳稳定。缺缺点菌种易易于退化化;容易污污染;营养物物的利用用率低于于分批培培养。 因此连连续时间间是有限限的5 石碳碳酸系数数:在一一定时间间内,被被试药剂剂能杀死死全部供供试菌的的最高稀稀释度与与达到同同效的石石碳酸的的稀释度度之比。PP17991、什么么是典型型生长曲曲线?它它可分几几期?划划分的依依据是什什么?各各期特点点如何?典型型生长曲曲线 :将少量量纯种单单细胞微微生物接接种到恒恒容积的的液体培培养基中中培养。在在适宜条条件下,其其群体就就会有规规律地生生长,定定时取
27、样样测定细细胞含量量,以细细胞数目目的对数数值作纵纵坐标,以以培养时时间作横横坐标,就就可以画画出一条条有规律律的曲线线,这就就是微生生物的典典型生长长曲线。 划分的依据:单细胞微生物。 (1)延滞期(停滞期、调整期) 特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃;e.对外界不良条件的反应敏感。 (2) 对数期 特点:此时菌体细胞生长的速率常数R最大,分裂快,代时短,细胞进行平衡生长,菌体内酶系活跃,代谢旺盛,菌体数目以几何级数增加,群体的形态与生理特征最一致,抗不良环境的能力强。稳定期 特点:a.生长速率常数为零
28、;b.菌体产量达到最高;c.活菌数相对稳定;d.细胞开始贮存贮藏物;e.芽孢在这个时期形成;f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 衰亡期 特点:a.细胞形态多样;b.出现细胞自溶现象;c.有次生代谢产物的形成;d.芽孢在此时释放。 2、延滞期有何特点?如何缩短延滞期?影响延滞长短的因素。特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃;e.对外界不良条件的反应敏感。消除:a. 以对数期的菌体作种子菌 ;b. 适当增大接种量 :一般采用3%8%的接种量,根据生产上的具体情况而定,最高不超过1/10。c. 培养基的成分:
29、种子培养基尽量接近发酵培养基 。影响延滞滞长短的的因素:1接种种龄 22接种量量 3培培养基成成分。33、微生生物培养养过程中中pH变变化的规规律如何何?如何何调整?微生生物的生生命活动动过程中中会自动动地改变变外界环环境的ppH,其其中发生生pH改改变有变变酸和变变碱两种种过程,在在一般微微生物的的培养中中往往以以变酸占占优势,因因此,随随着培养养时间延延长,培培养基的的pH会会逐渐下下降。PPH的变变化还与与培养基基的组分分尤其是是碳氮比比有很大大关系,碳碳氮比高高的培养养基经培培养后ppH会明明显下降降;相反反,碳氮氮比低的的培养基基经培养养后,其其pH常常会明显显上升。措施:分分为“治
30、治标”和和“治本本”两大大类,前前者指根根据表面面现象而而进行直直接、及及时、快快速但不不持久的的表面化化调节,后后者指根根据内在在机制而而采用的的间接、缓缓效但可可发挥持持久作用用的调节节。治标:11)过酸酸时:加加NaOOH等碱碱液中和和2)过碱碱时:加加H2SSO4等等酸液中中和治本:11)过酸酸时:加加适当氮氮源:加加尿素,NNaNOO3或蛋蛋白质。提提高通气气量2)过碱碱时:加加适当碳碳源:加加糖,乳乳酸,醋醋酸,柠柠檬酸或或油脂。 降低通通气量44、试述述高温灭灭菌的方方法。11、干热热灭菌法法(1)原原理:干干热可使使细胞膜膜破坏、蛋蛋白质变变性和原原生质干干燥,并并可使各各种细
31、胞胞成分发发生氧化化变质。(22)应用用范围:1)烘烘箱内热热空气灭灭菌法(11501700,12hrr):金金属器械械、洗净净的玻璃璃器皿。22)火焰焰灼烧法法:接种种环、接接种针等等。2、湿湿热灭菌菌: 即即以1000以上的的加压蒸蒸气进行行灭菌。(11)相同同温度及及相同作作用时间间下,湿湿热灭菌菌法比干干热灭菌菌法更有有效:湿湿热空气气穿透力力强,能能破坏维维持蛋白白质空间间结构和和稳定性性的氢键键,能加加速其变变性。(22)种类类:1)常压法法a.巴巴氏消毒毒法: 用较低低的温度度处理牛牛乳或其其他液态态食品,杀杀死其中中可能存存在的无无芽孢病病原菌而而又不损损害营养养与风味味的消毒
32、毒方法。aa)低温温维持法法(LTTH):要求662.88保持330miin;bb)高温温瞬时法法(HTTST):要求求71.7维持至至少155s;bb.煮沸沸消毒法法:a)适用范范围:一一般用于于饮用水水的消毒毒。b)条件:1000下数分分钟。cc.间隙隙灭菌法法:又称称丁达尔尔灭菌法法或分段段灭菌法法。a) 适用用范围:适用于于不耐热热培养基基的灭菌菌。b) 条件件:800一1000下蒸煮煮1560分分钟,三三天。22)加加压法:a.常常规加压压法a) 适用用范围:适合于于一切微微生物学学实验室室、医疗疗保健机机构或发发酵工厂厂中对培培养基及及多种器器材、物物料的灭灭菌。bb) 条条件:1
33、121(压力力为lkkgccm2),时间间维持115220分钟钟,也可可采用在在较低的的温度(1155,即0.7kggcmm2下维维持355分钟的的方法。b.连续加压灭菌法:在发酵行业里也称“连消法”。a) 适用范围:在大规模的发酵工厂中作。培养基灭菌用。主要操作是将培养基在发酵罐外连续不断地进行加热、维持和冷却,然后才进入发酵罐。b) 条件:在135140下处理5一l 5秒钟率的菌体 实验室为主微生物的的抗药性性:抗药药性主要要通过遗遗传途径径产生,如如基因突突变,遗遗传重组组和质粒粒转移等等。 产产生原因因:a产产生一种种能使药药物失去去活性的的酶b把把药物作作用的靶靶位加以以修饰和和改变
34、cc形成救救护途径径d使药药物不能能透过细细胞膜ee通过主主动外排排系统把把进入细细胞内的的药物泵泵出细胞胞外。第第八章 微生物物的生态态名词解释释1互生:指两种种可以单单独生活活的生物物,当其其生活在在一起时时,通过过各自的的代谢活活动而有有利于对对方或偏偏利于一一方的生生活方式式。2拮拮抗:指指由某种种生物所所产生的的某种代代谢产物物可抑制制他种生生物的生生长发育育甚至杀杀死它们们的一种种相互关关系。3大肠菌菌群:指指任何可可发酵乳乳糖产酸酸产气的的G-,杆杆状,无无芽孢,兼兼性厌氧氧的肠道道细菌,典典型代表表是E.colli。4 BOOD5:即五日日生化需需氧量。指指在200下,1LL污
35、水中中所含的的有机物物,在进进行微生生物氧化化时,五五日内所所消耗的的分子氧氧的 毫毫克数。1 简述述微生物物与生物物环境间间五种常常见的关关系,并并各举一一例。互互生:指指两种可可以单独独生活的的生物,当当其生活活在一起起时,通通过各自自的代谢谢活动而而有利于于对方或或偏利于于一方的的生活方方式。共共生:指指两种生生物共居居在一起起,相互互分工协协作、相相依为命命,甚至至达到难难分难解解、合二二为一的的一种相相互关系系。寄生生:指一一种小型型生物生生活在另另一种较较大型生生物的体体内或体体表,从从中摄取取营养进进行生长长繁殖,并并使后者者蒙受损损害甚至至死亡的的现象.拮抗:指由某某种生物物所
36、产生生的某种种代谢产产物可抑抑制他种种生物的的生长发发育甚至至杀死它它们的一一种相互互关系。混菌培养: 又称混菌发酵或混合发酵指在发酵工业中采用两种或两种以上的具有互补性质的菌种进行混合培养我国卫生生部门对对饮用水水的卫生生标准为为:每mml水细细菌总数数不超过过1000个,大大肠菌群群数每升升水不超超过3个个。举例1.互生。金金黄色葡葡萄球菌菌的生长长为本来来在平板板上不能能生长的的嗜血流流感菌提提供生长长因子,后后者在其其菌苔周周围形成成卫星菌菌落。2. 共共生。根根瘤菌与与豆科植植物间的的共生形形成根瘤瘤共生体体,根瘤瘤菌固定定大气中中的气态态氮为植植物提供供氮素养养料;豆豆科植物物的根
37、的的分泌物物能刺激激根瘤菌菌的生长长,同时时还为根根瘤菌提提供保护护和稳定定的生长长条件。3.寄生生。冬虫虫夏草是是子囊菌菌寄生于于鳞翅目目幼虫而而形成的的。第九章1 类毒毒素:若若用0.3%-0.44%的甲甲醛溶液液对外毒毒素进行行脱毒处处理,可可获得失失去毒性性但仍保保留其原原有免疫疫原性的的生物制制品,称称为类毒毒素。2 半抗抗原:缺缺乏免疫疫原性而而有免疫疫反应性性的的抗抗原。3 干扰扰素:是是高等动动物细胞胞在病毒毒或dssRNAA等诱生生剂的刺刺激下,所所产生的的具有高高活性的的,广谱谱抗病毒毒等功能能的特异异性糖蛋蛋白,相相对分子子质量很很小。4.抗原原:抗原是指一一类能诱诱导机
38、体体发生免免疫应答答并能与与相应抗抗体或TT淋巴细细胞受体体发生特特异性免免疫反应应的大分分子物质质。抗原原一般应应同时具具备两个个特征:a免疫疫原性bb免疫反反应性。外毒素:指在病病原细菌菌生长过过程中不不断向外外界环境境分泌的的一类毒毒性蛋白白,有的的属于酶酶有的属属于酶原原,有的的属于毒毒蛋白。内毒素:G-细细胞壁外外层的组组分之一一,其化化学成分分是脂多多糖。炎症:是是机体对对病原体体的侵入入或其他他损失的的一种保保护性反反应,它它既是一一种病理理过程,又又是一种种防御病病原体入入侵的积积极的免免疫反应应。补体:实实为一补补体系统统,是存存在于正正常人体体和高等等动物血血清中的的一组非
39、非特异性性血清蛋蛋白。主主要成分分是B球球蛋白。抗体:是是高等动动物在抗抗原物质质的刺激激下,由由浆细胞胞所产生生的能与与相应抗抗原在体体内外发发生特异异性结合合的免疫疫球蛋白白。有55个特点点:a仅仅有鱼类类以上的的脊椎动物物浆细胞胞所产生生b必须须有相应应抗原刺刺激免疫疫细胞后后才能产产生c能能与相应应抗原发发生特异异性,非非共价和和可逆的的结合dd其化学学本质是是一类具具有体液液免疫功功能的球球蛋白ee因抗体体是蛋白白质,故故具抗体体功能也也可作抗抗原去刺刺激异种种生物产产生相应应的抗体体,即抗抗抗体。目前,纯纯化后的的Ig已已分五类类,其统统一名称称为IggM,AA,D,G,EE.典型
40、的IIg分子子是由一一长一短短两对多多肽链对对称排列列而成的的一个YY型分子子。近对对称轴的的一对较较长的肽肽链称为为重链或或H链,外外侧一对对较短的的肽链称称为轻链链或L链链。8.用什什么方法法可获得得大肠杆杆菌(EE.cooli)的组氨氨酸缺陷陷型?筛选营养养缺陷型型菌株一一般要经经过诱变变、淘汰汰野生型型,检出出和鉴定定营养缺缺陷型44个环节节。将筛选得得到的缺缺陷型菌菌株分别别涂在不不加任何何氨基酸酸的基本本培养基基和加有有组氨酸酸的基本本培养基基上,若若前者不不长后者者长出菌菌落,即即为组氨氨酸缺陷陷型。第七章1质粒:凡游离离于原核核生物核核基因组组以外,具具有独立立复制能能力的小小
41、型共价价闭合环环状的ddsDNNA分子子。2F因子子:又称称F质粒粒或性因因子,是是大肠杆杆菌等细细菌决定定性别并并有转移移能力的的质粒3溶源转转变:当当正常的的温和噬噬菌体感感染其宿宿主而使使其发生生溶源化化时,因因噬菌体体基因整整合到宿宿主的核核基因组组上,而而使宿主主获得了了除免疫疫性外的的新遗传传性状的的现象。4Amees实验验:利用用细菌营营养缺陷陷型的回回复突变变来检测测环境或或食品中中是否存存在化学学致癌剂剂的有效效方法。5光复活活作用:把经UUV照射射后的微微生物立立即暴露露于可见见光下时时,就可可出现明明显降低低其死亡亡率的现现象,此此即光复复活作用用。6 准性性生殖:是一种
42、种类似有有性生殖殖但比它它更原始始的两性性生殖方方式,这这是一种种在同种种而不同同菌株的的体细胞胞间发生生的融合合,它可可不借减减数分裂裂而导致致低频率率的基因因重组并并产生重重组子。其其过程是是:a菌菌丝联结结b形成成异核体体c核融融合d体体细胞交交换和单单倍体化化。7 营养养缺陷型型:营养养缺陷型型是指通通过诱变变而产生生的缺乏乏合成某某些营养养物质如如氨基酸酸、维生生素和碱碱基等的的能力,必必须在其其基本培培养基中中加入相相应的营营养成分分才能正正常生长长的变异异株1什么叫叫基因重重组?简简述原核核生物和和真核生生物基因因重组的的主要形形式。PP2233两个独立立基因组组内的遗遗传基因因
43、通过一一定的途途径转移移到一起起,形成成新的稳稳定基因因组的过过程,称称基因重重组。原核生物物的基因因重组:1转化化 2转转导 33接合真核:11有性杂杂交 22准性杂杂交2什么叫叫营养缺缺陷型菌菌株?在在实验室室中如何何从野生生型菌株株获得营营养缺陷陷型菌株株,请设设计一个个具体的的方案。3简述营营养缺陷陷型菌株株筛选的的主要步步骤和方方法P2221筛选营养养缺陷型型菌株一一般要经经过诱变变、淘汰汰野生型型,检出出和鉴定定营养缺缺陷型44个步骤骤。S1 诱诱变剂处处理;紫紫外线S2淘汰汰野生型型:1青青霉素法法 2菌菌丝过滤滤法S3 检检出缺陷陷型:11夹层培培养法;先在培培养皿的的底部到到
44、一层不不含菌的的基本培培养基,待待凝,添添加一层层混有经经诱变剂剂处理菌菌液的基基本培养养基,其其上再浇浇一层不不含菌的的基本培培养基,经经培养后后,对首首次出现现的菌落落用记号号笔一一一标在皿皿底。然然后,再再向培养皿皿内到一一层含有有特定生生长因子子的基本本培养基基,长出出的形态态较小的的菌株,多多数是营营养缺陷陷型菌株株。2限量补补充培养养法 33逐个检检出法 4影印印平板法法S4 鉴鉴定缺陷陷型:生生长谱法法:把营营养缺陷陷型细胞胞制成适当当浓度的的悬液,取取0.11ml与与基本培培养基混混合后,倾倾注在培培养基内内,待凝凝固,表表面干燥燥后,然然后再在在培养皿皿表面加加上微量量待鉴定
45、定缺陷型型所需的的营养物物粉末,如如氨基酸酸,维生生素,碱碱基等。经经培养后后,若发发现此营营养物的的表面有有生长圈圈产生,就就说明此此菌就是是该营养养物的缺缺陷型突突变株。4简述诱诱变育种种中应坚坚持的基基本原则则1选择简简便有效效的诱变变剂 22挑选优优良的出出发菌株株 3处处理单细细胞或单单孢子悬悬液 44选用最最适的诱诱变剂量量 5充充分利用用复合处处理的协协调效应应 6利利用和创创造形态态,生理理与产量量间的相相关指标标 7设设计高效效筛选方方案8创创造新型型筛选方方法。5简述55种生物物菌种保保藏的方方法1冰箱保保藏法 2石蜡蜡油封藏藏法 33甘油悬悬液保藏藏法4冷冷冻干燥燥保藏法
46、法 5液液氮保藏藏法6试述从从自然界界中进行行菌种分分离筛选选的一般般步骤1)采集集菌样2) 富富集培养养:利用用选择性性培养基基原理,向向所采土土样中加加入某些些特殊营营养物并并创造一一些有利利于待分分离对象象生长的的条件,使使样品中中少量的的能分解解利用该该营养物物的微生生物大量量繁殖,以以提高其其在群体体中的比比例,以以便于分分离。EEg:通通过配制制选择性性培养基基,选择择一定的的培养条条件来控控制无关关的微生生物至少少是数量量上减少少尽量无无关的微微生物如:碳源源利用的的控制,可可选定糖糖,淀粉粉、纤维维素,或或者石油油等,以以其中的的一种为为唯一碳碳源,选选择利用用这唯一一碳源才才能大量量正常生生长的微微生物,而而淘汰其其它微生生物。3 )纯纯种分离离:将增增殖培养养效果显显