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1、第一章第一章 走进细胞走进细胞第第2节节 细胞的多样性与统一性细胞的多样性与统一性关于显微镜关于显微镜原核细胞与真核细胞原核细胞与真核细胞一一二二细胞学说的建立细胞学说的建立三三显微镜的发展史显微镜的发展史显微镜的分类显微镜的分类 普通光学显微镜的基本结构普通光学显微镜的基本结构 显微镜的使用方法显微镜的使用方法 临时装片的制作临时装片的制作荷兰人：列文虎克荷兰人：列文虎克光学显微镜光学显微镜德国人：卢斯卡德国人：卢斯卡 电子显微镜电子显微镜u 显微镜的发展史显微镜的发展史显微镜显微镜 虎克在虎克在1717世纪中期世纪中期制做的复式显微镜制做的复式显微镜 19世纪中期的显微镜世纪中期的显微镜
2、超高压透射电子显微镜超高压透射电子显微镜 20世纪初期的显微镜世纪初期的显微镜 带自动照相机的光学显微带自动照相机的光学显微镜镜 装有场发射枪的装有场发射枪的 扫描电子显微镜扫描电子显微镜 现代显微镜可以分为两大类：一类是光学现代显微镜可以分为两大类：一类是光学显微镜，另一类是非光学显微镜。这两类显微显微镜，另一类是非光学显微镜。这两类显微镜又可根据不同的情况分成若干类型，如下表镜又可根据不同的情况分成若干类型，如下表所示所示u 显微镜的分类显微镜的分类u 普通光学显微镜的基本结构普通光学显微镜的基本结构l普通光学显微镜的构造可分为两部分：l机械装置：机械装置：镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、
3、镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋推动器、粗动螺旋和微动螺旋微动螺旋等。l光学系统：光学系统：目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈虹彩光圈等普普通通光光学学显显微微镜镜基基本本构构造造1.取镜和安放取镜和安放 置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿一定距离。镜检者姿势要端正。台边沿一定距离。镜检者姿势要端正。（取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，（取、放显微镜时应一手握住镜臂，一手托住底座，使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使使显微镜保持直立、平稳。切忌用单手拎提；且不论使用单筒显微
4、镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以用单筒显微镜或双筒显微镜均应双眼同时睁开观察，以减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。）减少眼睛疲劳，也便于边观察边绘图或纪录。）u 显微镜的使用方法显微镜的使用方法l置显微镜于固定的桌上。置显微镜于固定的桌上。l将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，调节标本移动螺旋，使观察的目的物处于物镜的正下方。动螺旋，使观察的目的物处于物镜的正下方。l调节粗准焦螺旋，使物镜（调节粗准焦螺旋，使物镜（1010）与标本靠近，眼睛）与标本靠近，眼睛在测向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。在测向注视物镜，防止物镜和载玻片相碰。l用
5、左眼向物镜里观察，如果见到目的物，但不十分清用左眼向物镜里观察，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细准焦螺旋，至目的物清晰为止。楚，可用细准焦螺旋，至目的物清晰为止。l通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部通过玻片夹推进器慢慢移动玻片，认真观察标本各部分，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的分，找到合适的目的物，仔细观察并记录所观察到的结果。结果。2.低倍镜的操作低倍镜的操作3.高倍镜的操作高倍镜的操作l使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的物后使用高倍镜前，必须先用低倍镜观察，发现目的物后将它移至视野正中处。将它移至视野正中处。l旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即
6、停旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没止旋动，这说明原来低倍镜并没有调准，目的物并没有真正找到，必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下有真正找到，必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊，调节细准焦螺旋，直到视野清观察目的物有点模糊，调节细准焦螺旋，直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系，防止镜头与载玻片强力接触，损坏镜或下降的关系，防止镜头与载玻片强力接触，损坏镜头或载玻片。头或载玻片。4.油镜的操作油镜的操作l如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。先用
7、低倍如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。l在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调在载玻片上滴一滴香柏油，将油镜移至正中，缓慢调节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。节粗调螺旋使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。然后再用细准焦螺旋微微向上调（切忌不用粗准焦螺然后再用细准焦螺旋微微向上调（切忌不用粗准焦螺旋）即可。旋）即可。l油镜观察完毕，用油镜纸将镜头上的油擦净，另用擦油镜观察完毕，用油镜纸将镜头上的油擦净，另用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头，再用擦镜纸揩干。镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头，再
8、用擦镜纸揩干。（应特别注意不要因在下降镜头时用力过猛，或者调焦（应特别注意不要因在下降镜头时用力过猛，或者调焦时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）时误将粗调节螺旋向反方向转动而损坏镜头及载玻片）5.换片换片 观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油镜）转回到低倍物镜，取出标需先将高倍物镜（或油镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油镜）下换片，以防损坏镜头。高倍物镜（或油镜）下换片，以防损坏镜头。6.显微镜使用后的整理显微镜
9、使用后的整理 观察结束后调节粗准焦螺旋，使载物台下降到最观察结束后调节粗准焦螺旋，使载物台下降到最低，取下玻片，擦干净镜体，罩上防尘罩，然后放回低，取下玻片，擦干净镜体，罩上防尘罩，然后放回原处。原处。成像原理成像原理 光路：光源光路：光源虹彩光圈虹彩光圈聚光镜聚光镜通光孔通光孔标本（一标本（一 定要透明）定要透明）物镜物镜镜筒镜筒目镜目镜眼。眼。1.当物体位于透镜物方当物体位于透镜物方二倍焦距以外二倍焦距以外时，则在像方二倍时，则在像方二倍 焦距以内、焦点以外形成焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实像缩小的倒立实像；2.当物体位于透镜物方当物体位于透镜物方二倍焦距上二倍焦距上时，则在像方二倍焦
10、距上时，则在像方二倍焦距上 形成形成同样大小同样大小的的倒立实像倒立实像；3.当物体位于透镜物当物体位于透镜物方二倍焦距以内方二倍焦距以内，焦点以外时，则在像，焦点以外时，则在像 方二倍焦距以外形成方二倍焦距以外形成放大的倒立实像放大的倒立实像；4.当物体位于当物体位于透镜物方焦点透镜物方焦点上时，则上时，则像方不能成像像方不能成像；5.当物体位于当物体位于透镜物方焦点以内透镜物方焦点以内时，则时，则像方也无像像方也无像的形成，的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚像。而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚像。2、物体放大倍数、物体放大倍数目镜放大倍数目镜放大倍数
11、物镜放大倍数物镜放大倍数 1、显微镜成像是显微镜成像是倒像倒像 3、放大倍数与镜头长短的关系、放大倍数与镜头长短的关系目镜：放大倍数越大，镜头越短目镜：放大倍数越大，镜头越短物镜：放大倍数越大，镜头越长物镜：放大倍数越大，镜头越长即：放大倍数与物镜镜头长度成正比，与目镜即：放大倍数与物镜镜头长度成正比，与目镜 镜头成反比镜头成反比光学显微镜的最大放大倍数：光学显微镜的最大放大倍数：1500倍倍5、先低倍后高倍镜观察：、先低倍后高倍镜观察：高倍镜视野高倍镜视野极小极小，较暗较暗，不容易找到目标；，不容易找到目标；将低倍镜下观察部位移至视野中央后再换高将低倍镜下观察部位移至视野中央后再换高 倍镜；
12、倍镜；使用细准焦螺旋调焦。使用细准焦螺旋调焦。6、检查、检查“污点污点”的方法：的方法：依次检查载依次检查载玻片玻片、目镜目镜、物镜物镜等。等。4、放大倍数与视野中观察到的物像数目的关系、放大倍数与视野中观察到的物像数目的关系放大倍数越大，观察到的物像数目越少放大倍数越大，观察到的物像数目越少1.擦拭载玻片、盖玻片擦拭载玻片、盖玻片2在载玻片的中央滴一滴清水在载玻片的中央滴一滴清水 3在洋葱内表皮用刀片划出一个约在洋葱内表皮用刀片划出一个约1cm2的正方形（在使的正方形（在使 用刀片时注意安全），用镊子撕取洋葱内表皮用刀片时注意安全），用镊子撕取洋葱内表皮 4将内表皮置于载玻片的清水中，并使之
13、铺开将内表皮置于载玻片的清水中，并使之铺开5从一侧开始慢慢盖上盖玻片，不能有气泡产生从一侧开始慢慢盖上盖玻片，不能有气泡产生6在盖玻片的一侧滴一滴染液在盖玻片的一侧滴一滴染液7然后用吸水纸从另一侧吸取多余的染液，使洋葱表皮然后用吸水纸从另一侧吸取多余的染液，使洋葱表皮 细胞均匀染色细胞均匀染色8显微镜下观察显微镜下观察u临时装片的制作（洋葱表皮）临时装片的制作（洋葱表皮）知识梳理：知识梳理：一、高倍镜的使用步骤一、高倍镜的使用步骤（尤其要注意第尤其要注意第1 1和第和第4 4步步）1 1 在低倍镜下找到物象，将物象移至（在低倍镜下找到物象，将物象移至（）2 2 转动（转动（），换上高倍镜。），
14、换上高倍镜。3 3 调节（调节（）和（和（），使视野亮度适宜。），使视野亮度适宜。4 4 调节（调节（），使物象清晰。），使物象清晰。视野中央视野中央转换器转换器光圈光圈反光镜反光镜细准焦螺旋细准焦螺旋3 物镜：物镜：（）螺纹，镜筒越（）螺纹，镜筒越（），放大倍数越大。），放大倍数越大。目镜：（目镜：（）螺纹，镜筒越（）螺纹，镜筒越（），放大倍数越大。），放大倍数越大。有有长长无无短短二、显微镜使用常识二、显微镜使用常识1 调亮视野的两种方法调亮视野的两种方法（）、（）、（）。）。2 高倍镜：物象（高倍镜：物象（），视野（），视野（），看到细胞数目），看到细胞数目 （）。）。低倍镜：物象（低倍
15、镜：物象（），视野（），视野（），看到的细胞数），看到的细胞数 （）。）。放大光圈放大光圈使用凹面镜使用凹面镜 大大暗暗少少小小亮亮多多三、问题三、问题 1 是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为 什么？什么？2 为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观 察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？3 用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不 行？行？1 低倍镜的视野大，透镜数少低倍镜的视野大，透镜数少,通过的光多；高倍通过的光多；高倍镜
16、视野小，透镜数多镜视野小，透镜数多,通过的光少，但放大的倍数高通过的光少，但放大的倍数高 。2 低倍镜视野大，便于寻找目标；高倍镜放大倍数大，低倍镜视野大，便于寻找目标；高倍镜放大倍数大，便于仔细观察。如果直接用高倍镜观察，往往由于观察对便于仔细观察。如果直接用高倍镜观察，往往由于观察对象不在视野范围内而找不到。象不在视野范围内而找不到。3 不行，此时转粗准焦螺旋，容易压坏玻片不行，此时转粗准焦螺旋，容易压坏玻片 。也不对。低倍物镜和高倍物镜的焦距差别很小，应该也不对。低倍物镜和高倍物镜的焦距差别很小，应该用细准焦螺旋。用细准焦螺旋。4 在不同的放大倍数显微镜下观察到的细胞在不同的放大倍数显微镜下观察到的细胞 有何区别？有何区别？视野亮度视野亮度物象大小物象大小细胞数量细胞数量10101010（低倍）（低倍）亮亮小小 多多15401540（高倍）（高倍）暗暗大大 少少