《SN∕T 3427-2012 山茶花腐病菌检疫鉴定方法(出入境检验检疫).pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《SN∕T 3427-2012 山茶花腐病菌检疫鉴定方法(出入境检验检疫).pdf（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准?山茶花腐病菌检疫鉴定方法?发布?实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书?中华人民共和国出入境检验检疫行?业?标?准山茶花腐病菌检疫鉴定方法?中 国 标 准 出 版 社 出 版北京市朝阳区和平里西街甲?号?北京市西城区三里河北街?号?总编室?网址?中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷?开本?印张?字数?千字?年?月第一版?年?月第一次印刷印数?书号?定价?元书书书前?言?本标准按照?给出的规则起草?本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口?本标准起草单位?中华人民共和国宁波出入境检验检疫局?中华人民共和国上海出入境检验检疫局?中华人民共和
2、国山东出入境检验检疫局?本标准主要起草人?张建成?张慧丽?郑炜?杨翠云?厉艳?封立平?陈先锋?山茶花腐病菌检疫鉴定方法?范围本标准规定了山茶花腐病菌的检疫和鉴定方法?本标准适用于山茶?上山茶花腐病菌?的检疫鉴定?规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的?凡是注日期的引用文件?仅注日期的版本适用于本文件?凡是不注日期的引用文件?其最新版本?包括所有的修改单?适用于本文件?进出境植物苗木检疫规程?原理?分类地位学名?异名?英文名?中文名?山茶花腐病菌?异名?山茶菌核病菌?山茶花腐病菌属真菌界?子囊菌门?子囊菌纲?柔膜菌目?核盘菌科?叶杯菌属?山茶花腐病菌通常只侵染山茶属?植物的花?地理分
3、布和寄主参见附录?检疫鉴定依据以山茶花腐病菌在寄主植物上的症状特征以及菌核?产孢瓶梗和小型分生孢子的形态特征为鉴定依据?仪器设备冰箱?解剖镜?最低?生物显微镜?恒温光照培养箱?高压蒸汽灭菌锅?接种针?镊子?酒精灯?玻璃盒或塑料盒?纸巾或滤纸?喷雾器?培养皿?直径?手术剪?手术刀?标签?载玻片?盖玻片等?试剂和培养基?体积分数?乙醇?次氯酸钠?纯乳酸?可添加?甲基蓝?马铃薯葡萄糖琼脂培养基?抽样口岸查验进境山茶属植物时?按照?对山茶属苗木进行抽样与取样?检验方法?现场检验重点检查样品的花?观察样品的花是否有符合?疑似症状特征?采集那些变褐?变干或任何可疑症状的花?花尽可能的多?至少?朵?进一步作
4、实验室检验?标注品名?数量?生产国及取样地点?取样人和取样日期等样品信息?实验室检验?寄主病原物观察观察花瓣上是否有病斑?菌核?分生孢子座?花基部是否形成白色环状菌丝体?显微观察潮湿时?花瓣上可产生褐色至黑色有光泽的液滴?解剖镜下挑取黑色液滴?以乳酸?可添加?甲基蓝?为载浮剂?生物显微镜下?观察产孢瓶梗和分生孢子座?保湿培养选取无褐变或初侵染未腐烂的花和花瓣?根据样品的大小选择合适的培养皿或塑料盒?内置一层灭菌滤纸?滤纸上放置灭菌的毛巾或纸巾?加入无菌水?放入恒温恒湿光照培养箱中?光照培养?培养?后在解剖镜下观察?按照?中的描述挑取子实体?制片后在显微镜下观察?如果没有变化?继续保湿培养?并定
5、期进行观察?培养?周仍无变化?则停止培养?植物材料经高压蒸汽灭菌处理?分离培养取感病花瓣病健交界处组织数块?用?溶液表面消毒?无菌水冲洗?次?置于?平板上?于?光照下培养?如无新感病组织可用?可用其他部位如花瓣基部的白色菌丝环或菌核代替花瓣分离?待菌落出现后观察菌落的形态?颜色?生长速率及子实体等培养性状?显微镜检分生孢子座?产孢细胞?分生孢子的形态特征?将疑似山茶花腐病菌的菌株转到新鲜?平板上纯化?保存备用?鉴定特征?危害症状主要症状是花瓣变褐和花坏死?首先在花瓣的基部?出现棕色小斑点?斑点逐步扩展?最后向上蔓延至整个花瓣?大约每天?边缘腐烂?严重时?花维管束变黑?完全坏死?干腐?脱落?参见
6、图?和图?但花的结构保持良好?即使整个枯萎的花经手挤压后花瓣不会脱落?环境湿润时?花瓣基部或中心产生褐色至黑色有光泽的小?液滴?直径?在显微镜下?可以看到产生大量分生孢子梗和链状分生孢子的分生孢子座?在长期受侵染的植株上?分 生 孢 子 座 汇 集 形 成 粘 性 黑 斑?参 见图?分生孢子座的出现可被用作确定性的诊断特征?在花受侵染的后期?将花倒置并移除萼片?可见围绕花瓣基部出现一个白色至灰白色毛毯状近似环状的不育菌丝?乍看像寄主的组织?参见图?该环状菌丝体是该病害的一个典型特征?菌核感染后?周?周?菌核开始在花瓣基部即花萼处形成?最初由一层密集的灰白色菌丝覆盖?成熟的菌核?黑色坚固?盘状?
7、花瓣状?形状大小近似葡萄干?用手指揉搓花瓣基部?可以检测菌核为坚硬平坦的结构?菌核会在落叶堆中保持生长?花腐烂后的残余物常常与菌核粘附在一起呈环状?菌核在冬季结束时产生子囊孢子?子囊孢子侵染新花?病菌的培养性状菌落为白色毛毯状?表面菌丝以辐射状生长?参见图?下培养每周生长速率达到?培养基上培养?周后产生的分生孢子座?子座黑色?湿润?直径?周后形成水溶性黑色粘液?周后?有些菌株可形成盘状凸起的菌核?直径?通常以环状出现于毯状菌丝层之下的琼脂表面?无性态分生孢子座由膨大的中心细胞和在其上分枝的深褐色圆筒状细胞簇生组成?圆筒状细胞上产生产孢梗?产孢梗瓶梗状?透明至褐色?长?宽?每个带有突起的?深杯形
8、囊领?此处产生小型分生孢子?小型分生孢子褐色?圆形至卵形?直径?单核?包含一个大油球?有些孢子连接成短链?断裂时可见一个微小的基部附属物?在与前端孢子的连接处通常带有?条细毛?如果孢子保持链状?附属物随孢子的成熟而延长?参见图?有性态春季?菌核在土壤中萌发产生子囊盘?但子囊盘不作为鉴定的必要特征?子囊盘盘状?直径?具柄?宽?根据菌核在土壤中深度不同?长?柄和盘表面具粉状菌绒?幼时米色至淡肉桂色?老熟变深?子囊盘最初为酒杯形?老熟变平坦?子囊含?个孢子?圆柱形?子囊孢子倾斜锯齿状排列?透明?单胞?卵形至倒卵形?有油滴状斑点?参见图?侧丝丝状?长不超过子囊?基部?宽?顶部稍膨胀?结果评定如检出菌核
9、?为害症状?病部特征符合?鉴定特征?可直接判定为山茶花腐病菌?如未检出菌核?病菌的培养性状和无性态特征符合?鉴定特征?判定为山茶花腐病菌?鉴定时?注意与引起山茶花腐烂的其他病原菌的区别?参见附录?病材料的保存带有环状菌丝体?分生孢子座和菌核的花朵?应妥善保存?山茶花腐病菌?纯分离物要标注菌株来源?寄主?分离时间?鉴定人?菌株在含?甘油的冻存管中于?保存?或将菌株转接在?斜面上培养?待菌丝体张满斜面后?置于?下保存?并定期?转管?保存期满后?需经灭菌处理?附?录?资料性附录?山茶花腐病菌的地理分布和寄主?地理分布亚洲?日本?大洋洲?新西兰?欧洲?英国?意大利?美洲?美国?加利福尼亚州?北卡罗来纳
10、州?佛罗里达州?佐治亚州?路易斯安那州?俄勒冈州?南卡罗来纳州?德克萨斯州?乔治亚州?病菌的寄主山茶 花 腐 病 菌 通 常 只 侵 染 山 茶 属?植 物 的 花?主 要 包 括 山 茶 花?茶梅?和其他山茶属?观花植物?附?录?资料性附录?山茶花腐病菌为害特征图?说明?花瓣变褐?受侵染后?先在花瓣的基部出现棕色小斑点?斑点逐步扩展?最后至整个花?花坏死?花瓣的肋变黑?干腐?落花?花瓣上产生的分生孢子座?白色环状菌丝体?花瓣基部形成菌核?注?引自?图?花受害特征图?附?录?资料性附录?山茶花腐病菌培养性状和显微形态特征图图?在?培养基上的培养性状?说明?分生孢子座和产孢瓶梗?箭头示囊领?小型
11、分生孢子?箭头示基部附属物?注?引自?图?产孢瓶梗和分生孢子座?说明?菌核上产生的子囊盘?子囊和子囊孢子?注?引自?图?子囊盘及子囊孢子?附?录?资料性附录?引起山茶花腐的几种病原菌的主要区别表?引起山茶花腐的几种病原菌的主要区别种类灰葡萄孢核盘菌山茶花腐病菌有性态?无性态?引起病害引起山茶花的腐烂引起山茶花腐烂引起山茶花腐病感病花瓣表现通常广泛并不规则地侵染花瓣?花瓣易碎?并提前凋落花瓣易碎?并提前凋落先侵染基 部 再 延 伸 至 整 个花瓣?病花结构保持良好?在 揉 搓 情 况 下 也 能 保 持完好病组织上的菌丝菌丝体较粗?白色?通常因为带有大量分生孢子和分生孢子梗而呈灰色菌丝体白色或微灰色?形态规律?有 时 簇 状 或 团 状?通 常 比?毯状的菌丝体茂盛感染的植 株 花 瓣 基 部 周 围生长有白 色 毯 状 紧 密 的 菌丝?无孢子菌核菌核 产 生 在 寄 主 表 面?通 常 较小?不局限于花基部产生?不会与花的组织结合菌核较大?较圆?不平坦?且不会在自然情况下与寄主组织结合菌核扁 平 葡 萄 干 状?较 大?常联合成环状?可以与寄主组织结合培养性状偶尔 会 产 生 透 明 的 小 型 分 生孢子分生孢子是透明的?非棕色分生孢子棕色?链状?产孢瓶梗顶端具囊领子囊不产生依附于明显单独的菌核上?从不形成环状有时生长在环状的菌核上?参?考?文?献?