《GA∕T 1644-2019 法庭科学 疑似毒品中甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮检验 液相色谱-质谱法(公共安全).pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《GA∕T 1644-2019 法庭科学 疑似毒品中甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮检验 液相色谱-质谱法(公共安全).pdf（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、ICS 13.310 A 92 GA 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA/T 法庭科学 疑似毒品中甲卡西酮、卡西酮、4-甲基甲卡西酮检验 液相色谱-质谱法 Forensic sciencesExamination methods for methcathinone,cathinone and mephedrone in suspected drugs LC-MS -发布-实施 中华人民共和国公安部中华人民共和国公安部 发布发布 GA/T I 前 言 本部分按照GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些
2、专利的责任。本部分由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC 179/SC1）提出并归口。本标准起草单位：公安部物证鉴定中心，福建省公安厅。本标准主要起草人：常颖，高利生，李航麒，郑珲，张春水，赵阳，贺剑锋，翟晚枫，黄星，刘克林，李彭，赵彦彪，郑晓雨，杨虹贤，徐鹏，钱振华等。GA/T 1 法庭科学 疑似毒品中甲卡西酮、卡西酮和 4-甲基甲卡西酮检验 液相色谱-质谱法 1 范围 本标准规定了法庭科学领域疑似毒品中甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮的液相色谱-质谱（LC-MS）定性检验方法和定量检验方法。本标准适用于法庭科学领域疑似毒品体外样品中甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡
3、西酮的定性分析和定量分析。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 48832008 数据的统计处理和解释 正态样本离群值的判断和处理 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 JJF 1059.12012 测量不确定度评定与表示 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。4 原理 对疑似毒品样品中的甲卡西酮（结构式参见附录 A 中图 A.1）、卡西酮（结构式参见图 A.2）和 4-甲基
4、甲卡西酮（结构式参见图 A.3）进行提取。采用液相色谱-质谱检测，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和离子丰度比作为定性判断依据，用外标单点法进行定量分析。5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合GB/T 6682中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯，试剂包括：a）乙腈；b）甲醇；c）甲酸；d）标准溶液：GA/T 2 1）标准物质溶液：1.0mg/mL甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮等三种标准物质溶液；2）标准工作溶液：分别移取甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮等三种标准物质溶液适量，用甲醇稀释，配制成0.1g/mL的甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮标准工作溶液。5.
5、2 材料 材料包括：a）具盖离心管；b）有机微孔滤膜：0.22m。6 仪器和设备 仪器和设备包括：a）液相色谱仪（LC）：配有二极管阵列（DAD）或紫外检测器（UV）；b）液相色谱-质谱仪（LC-MS）：配电喷雾离子源、三重四极杆质量分析器；c）电子天平：分度值d：0.01mg；d）离心机；e）涡旋振荡器；f）10mL、1mL和100L移液器或移液管；g）10mL瓶口移液器。7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 称取样品约10mg于具盖离心管中，加入10mL甲醇，密封并振荡10min，6000r/min离心5min，离心后取出适量上清液稀释，用0.22m的有机系微孔滤膜过滤，供
6、LC-MS分析。同时用LC-MS分析标准工作溶液进行质量控制。7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 液相色谱-质谱仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：C18柱（100mm 2.1mm,1.8m）或其他等效柱；b）流动相：A：0.1%甲酸溶液，B：乙腈；c）梯度程序：见表 1；表 1 梯度洗脱条件 时间 min A B 0 90%10%2.8 90%10%GA/T 3 3.0 60%40%5.0 60%40%5.1 90%10%d）柱温：35C；e）进样体积：5L；f）流速：0.3mL/min；g）离子源：电喷雾离子源（ESI）；h）检测方式：正离
7、子模式；i）扫描模式：多反应监测 MRM；j）雾化气、干燥气和碰撞气：均为高纯氮气；k）雾化气压力：25 psi；l）干燥气温度：350；m）干燥气流量：10L/min；n）定性定量离子和毛细管出口电压 Fragmentor，碰撞能量（CE）见表 2，相关图谱参见附录 B。表 2 质谱参考条件 名称 定量离子对 定性离子对 毛细管出口电压 V 碰撞能量 eV 甲卡西酮 164.2131.1 164.2131.1 85 20 164.277.2 50 卡西酮 150.1117.0 150.1117.0 80 25 150.1105.1 20 4-甲基甲卡西酮 178.2160.2 178.216
8、0.2 85 10 178.2145.1 20 7.1.2.2 进样 分别吸取（空白）甲醇溶液、标准工作溶液和样品提取液适量，按7.1.2.1条件进样分析。7.1.3 记录 分别记录标准物质和样品中目标物的保留时间、定性离子对及离子丰度比。7.2 定量分析 7.2.1 含量范围预分析 预分析的目的在于要对样品中的甲卡西酮、卡西酮和4-甲基甲卡西酮含量进行初测，以计算准确定量分析时所用样品的称量重量，从而保证准确定量时样品溶液中目标物的最终浓度尽可能接近所使用标准工作液的浓度。如果样品溶液中目标化合物的浓度过高，可适当减少样品称量重量，或将样品提取液用甲醇稀释后进行分析。GA/T 4 如果样品溶
9、液中目标化合物的浓度过低，可适当增加样品称量重量，或将样品提取液挥干、定容后进行分析。按照公式（1）计算样品中目标组分的百分含量。()01230201000CA VVVwAVm+=（1）式中：w样品中甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的百分含量，用百分比（%）表示；C0标准工作液中甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；A样品溶液中甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的色谱峰面积值；V1样品溶液初次定容体积，单位为毫升（mL）；V2从 V1中移取样品溶液的体积，单位为毫升（mL）；V3将 V2稀释时加入甲醇的体积，单位为毫升（mL）；A0标准工作液中
10、甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的色谱峰面积值；m用于测定的样品的称量重量，单位为毫克（mg）。7.2.2 准确定量分析 7.2.2.1 称量重量的计算 根据预分析中甲卡西酮(卡西酮或4-甲基甲卡西酮)含量测定结果，选择合适的定容体积、稀释倍数（样品提取操作参数选择参见附录C），并按照公式（2）计算出样品称量重量（m）。0100CVDmw=%（2）式中：m称量重量，单位为毫克（mg）；C0标准工作液中甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；V初次定容体积，单位为毫升（mL）；D稀释倍数；w样品中甲卡西酮(卡西酮或 4-甲基甲卡西酮)的预分析百分含量，
11、用百分比（%）表示。7.2.2.2 样品提取 根据7.2.2.1计算结果，平行称取样品2份于具盖离心管中（如需提供定量结果的不确定度，则平行称取样品6份），根据预分析含量范围，加入相应初次定容体积的甲醇。密封并振荡10min，振荡均匀后用0.22m有机系微孔滤膜过滤；如果样品溶液需要稀释，移取1mL样品提取液至另一试管中，按照稀释倍数进行稀释定容，离心后取上清液供LC-MS分析。7.2.2.3 含量计算 按照公式（1）计算样品中甲卡西酮(卡西酮或4-甲基甲卡西酮)百分含量。7.2.2.4 相对相差计算 GA/T 5 对两个平行测定数据按照公式（3）进行相对相差（RD）计算。100%120X-X
12、RD=X（3）式中：相对相差，用百分比（%）表示；1、2两个样品平行定量测定的含量数值；0两个样品平行定量测定含量的平均值。7.2.2.5 异常值检验 根据GB/T 48832008，按照公式（4）对6份（或5份）平行测定数据进行格拉布斯（Grubbs）可疑值判别。i0iX-XG=s（4）式中：可疑值；0平均值；6 个（或 5 个）数据的单次测定标准差。Grubbs 统计量。8 结果评价 8.1 定性结果评价 阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，样品中目标物的色谱峰保留时间与浓度接近的定性用标准工作溶液一致（相对误差在 2.5%之内）、目标物的定性离子（至少两对定性离子）与浓度接近的定性
13、用标准工作溶液一致，且离子丰度比与浓度接近的定性用标准工作溶液相比，相对偏差不超过表3规定的范围，空白甲醇溶液无干扰，则可判断样品中检出目标物。表 3 离子丰度比的最大允许偏差范围 离子丰度比 50%2050 1020 10%最大允许相对偏差 20 25 30%50%阴性结果评价：样品未出现与 1ng/mL 定性用标准工作溶液一致的色谱峰，空白甲醇溶液无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物。LC-MS 分析，检出限为 1ng/mL。8.2 定量结果评价（外标法及内标法）8.2.1 含量结果有效性 对两个平行测定数据进行相对相差（RD）计算，当RD10%时，数据有效；当RD10%时，需要重新检验
14、。GA/T 6 8.2.2 异常值检验 对6份（5份）平行测定数据进行Grubbs可疑值判别，GiGn（95）时，数据有效，GiGn（95）时，应剔除该数据，但只能剔除1个数据，否则本次测定无效，需要重新检验。当测定次数 n=6 时，G6（95）=1.822；当测定次数 n=5 时，G5（95）=1.672。8.2.3 含量结果计算 以 2 份样品含量测定的平均值作为含量结果（如需提供定量结果的不确定度，则以 6 份或 5 份样品含量测定的平均值作为含量结果）。8.3 含量结果表述 定量检验完成后，检验结果应表述为：从样品中检出甲卡西酮(卡西酮或4-甲基甲卡西酮)成分，其中甲卡西酮（卡西酮或4
15、-甲基甲卡西酮）含量为.%。8.4 测量不确定度的评定与表述 如需提供测量不确定度，测定结果的不确定度评定与表述按JJF 1059.12012的规定执行。GA/T 7 附录 A（资料性附录）甲卡西酮、卡西酮和 4-甲基甲卡西酮结构式 A.1 甲卡西酮结构式见图 A.1。NHO 图A.1 甲卡西酮结构式 A.2 卡西酮结构式见图 A.2。NH2O 图 A.2 卡西酮结构式 A.3 4-甲基甲卡西酮结构式见图 A.3。图 A.3 4-甲基甲卡西酮结构式 GA/T 8 附录 B（资料性附录）甲卡西酮、卡西酮和 4-甲基甲卡西酮相关谱图 B.1 甲卡西酮的质谱图见图 B.1。a）甲卡西酮的MRM图谱
16、b）甲卡西酮164.277.2的提取MRM图谱 c）甲卡西酮164.2131.1的提取MRM图谱 图B.1 甲卡西酮质谱图 B.2 卡西酮的质谱图见图 B.2。a）卡西酮的MRM图谱 b）卡西酮150.1117的提取MRM图谱 GA/T 9 c）卡西酮150.1105.1的提取MRM图谱 图B.2 卡西酮质谱图 B.3 4-甲基甲卡西酮的质谱图见图 B.3。a）4-甲基甲卡西酮的MRM图谱 b）4-甲基甲卡西酮178.2160.2的提取MRM图谱 c）4-甲基甲卡西酮178.2145.1的提取MRM图谱 图B.3 4-甲基甲卡西酮质谱图 GA/T 10 附录 C（资料性附录）外标定量法标准溶液制备操作参数 外标定量法样品提取操作参数选择见表 C.1。表 C.1 外标定量法样品提取操作参数选择表 预分析含量 初次定容体积 mL 稀释倍数 标准溶液浓度 mg/mL 50%100%20 21 0.1 30%50%20 11 0.1 10%30%10 11 0.1 5%10%30 -0.1 2%5%20-0.1 1%2%10 -0.1 0.1%1%10-0.01 _