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1、ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1248.10-2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范第10部分:弯子包叶斑病Technical specification on evaluation of maize resistance to pests-Part 1 0:Curvularia leaf spot 2016-10-26发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T 1248.10-2016 目。吕学叫牛，-ni 林农省。北所河究心棚中剧愣驯服士且脚括学h不1叶技业分业农部农省个国林SU注1荆为所所晋盼草究究主医研研驯DN学护才、如相比L科
2、保洁利。即丑物物石分出荆作植允定部给出EKE鉴四提惮惮刷町立E航叮节目抗病病穗叶膜茎茎zf病抱斑黑缩M1子国省王米斑斑黑花米霉抱抱枯弯灰瘤粗T种冲刷认E大小丝矮玉腐镰镰纹.TV币主喜比弘弘朵朵处处弘热弘时附时时wquu制阮缸4部部部部部部部部部I照农草究要123456789uluu为按由起研主T第第第第第第第第第第第第第分分分分护分盯一一一一一一一一一一一一一部部部部保部N一一一一一一一一一一一一一本本本本物本古且，直A!院I 1 范围玉米抗病虫性鉴定技术规范第10部分:弯抱叶斑病本部分规定了玉米抗弯抱叶斑病鉴定技术方法和抗性评价标准。NY/T 1248.10-2016 本部分仅适用于栽培玉米
3、CZeamays L.)自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米近缘种对弯抱叶斑病抗性的田间鉴定和评价。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1 弯子包叶斑病curvularia leaf spot 向弯子包属CCurvulariaBoedijn)真菌侵染、引起以植株叶片产生大量典型的点状近圆形病斑为特征的玉米病害。在中同，主要致病种为新月弯抱Curvularialunata CWakker)BoedijnJ。3 弯子包菌接种体制备3.1 病原物分离以常规组织分离法从发病植株叶片的典型病斑上分离弯子包叶斑病病原物。分离物经形态学鉴定确认为弯子包属真菌后，进行纯化培养和致病性
4、测定。3.2 病原物种的鉴定对用作抗病性鉴定接种体的病原物应进行种的鉴定，依据形态学特征(参见附录A)确定病原物的种级分类地位。3.3 接种体繁殖接种体繁殖方法为:将在马铃薯葡萄糖琼脂CPotatodextrose agar,PDA)平板培养基上培养的病原菌接种于经高压灭菌的高粱粒上扩大繁殖(参见附录A)，在250C280C下培养5d7 d，菌丝布满高粱粒，倒出并铺于垫有灭菌纸的瓷盘中保湿，待大量产生分生于包子后阴干待用。4 抗病性鉴定圃4.1 鉴定圃设置鉴定圃具备良好的自然发病环境，能够进行田间灌溉和排涝，或具备叶面喷雾设施。4.2 鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列。鉴定选育品种时，每份材
5、料种植2行，每15份品种设1组已知高抗、高感对照材料(见附录B);鉴定种质资源时，每份材料种植l行，每50份种质设1组已知高抗、高感对照材料。鉴定小区两端应种植不少于2行的保护行。4.3 种植要求鉴定材料播种时间与大田生产相同。鉴定小区行长5m，行距与植株密度根据各区域品种试验要求确定，条播或穴播。对选育品种进行抗性鉴定时，双行留苗二三50株;对种质资源等材料进行抗性鉴定时，单行留茵注25株。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。l NY/T 1248.10-2016 5 接种5.1 接种时期接种时期为玉米喇叭口期(11叶期)至抽雄初期，接种选择在傍晚或阴天时进行，同批次鉴定材料应在同一天完成
6、。5.2 接种方法采用叶片喷雾法接种。将不同地点来源的3个4个弯子包菌菌株分别繁殖后i昆合.用水洗下分生抱子，再经过滤，制备浓度为(1X 103;个分生lliI回rin06:个分生抱子/mL的接种悬浮液，再加入0.01%吐温20(VjV)。喷雾接利础费1疆翩瞩噩噩嚣国噩噩噩噩瞌蜻取株。5.3 接种时的田间管理接种前应进行田间浇供病害发生所需的6 病情调查6.1 7 抗性评价7.1 鉴定有效性判别当设置的高感对照材料发7.2 抗性评价标准依据鉴定材料群体发病程度(病情级别)确表2玉米对弯子包叶斑病抗性的评价标准病情级别抗性高度抗病Higr巾resistant(高抗HR)3 抗病Resistant
7、(抗R)3 中度抗病Modcratelyresistant(中抗MR)7 感病SUSCCPibJc(感S)9 高度感病HighJysusceptibJe(高感HS)7.3 重复鉴定浇水或叶面喷雾，提在同一天内完成。NY/T 1248.10-2016 若鉴定材料初次鉴定时表现为高度抗病、抗病、中度抗病，应在第二年进行重复鉴定。7.4 抗性评价对初次鉴定结果和重复鉴定结果进行比较，以记载的最高病情级别为最终鉴定结果，并依此对鉴定材料进行抗性评价(见附录B)。3 NY/T 1248.10-2016 附录A(资料性附录)玉米弯子包叶斑病病原菌A.1 学名和形态描述A.1.1 新月弯子包(无性态)/新月
8、旋于包腔菌(有性态)是中国的主要致病种。无性态学名:Curvularialunata CWakker)Boedijn 有性态学名:Cochlibolus lU71tus Nalson et Haasis 在PDA平板培养基上菌落圆形，周缘整齐，气生菌丝绒絮状，灰白色，菌落背面呈黑褐色;分生抱子梗单生或丛生，多隔，直立或弯曲，有时分枝，顶部常呈屈膝状合轴式延伸，(70270)mX(24)m;分生于包子着生于抱子梗的顶侧部，暗褐色，弯曲，椭圆形、圆柱形、宽纺锤形等，少数呈Y形，向一侧弯曲，多数为由3个隔膜间隔的细胞组成，中间2个细胞膨大、色深，而两端细胞颜色较淡，(l832)mX(816)m;分生
9、于包子以一端或两端萌发为主。有性态新月旋于包腔菌在自然界中较少见。A.1.2 在我国还有其他一些弯抱菌也能够引起玉米的弯子包叶斑病。苍臼弯子包，学名:Curvulariaallesces Boedijn 不等弯抱，学名:Curvularia i71equalis(Shear)Boed ij n 间型弯子包，学名:Curvularia intermedia Boedijn 棒弯抱，学名:Curvularia clavata J ain 弯抱菌形态分类学论著见参考文献。A.2 弯子包菌的培养和保存马铃薯葡萄糖琼脂(Potatodextrose agar,PDA)培养基:马铃薯200g，葡萄糖20g
10、，琼脂18g 20 g,7.K 1000 mL PDA培养基用于弯子包菌的培养和保存，培养温度为250C280C;保存采用斜面试管，保存温度为40C，保存期限为一年以上。高粱粒培养基:高粱粒浸泡1h2 h.装入1000mL容量三角瓶中(约700mL高粱粒).于1210C下灭菌1h.冷却后待用。4 NY/T 1248.10-2016 附录B(规范性附录)鉴定结果汇总和对照用自交系B.1 鉴定结果汇总表格玉米抗弯抱叶斑病鉴定结果整理后填入鉴定结果表格，见表B.1。表B.1一一一年玉米抗弯子包叶斑病鉴定结果表编号川种/种质名称来源病情级别抗性评价注1:鉴定地点一一一。注2:接种病原菌分离物编号一-一
11、。注3:接种日期。调查日期。鉴定技术负责人(签字):B.2 抗病对照自交系沈137，对弯抱叶斑病表现稳定的中度抗病(Moderatelyresistant,MR)至抗病(resistant，R)反应，选自同外玉米杂交种6JKll1。B.3 感病对照自交系掖478，对弯抱叶斑病表现稳定的高度感病(Highlysusceptible,HS)，选自自交系U8112和沈5003的组配后代。3 NY/T 1248.10-2016 参考文献 l Ellis M.R.1971.Dcmatiaceous hyphomycetcsR.Kew,England:Commonwealth Mycological In
12、stitute 2 Manamgoda D.S.Cai L.McKenzie E.H.C.,et al.2012.A phylogcnetic and taxonomic re-cvaluation of thc Bi-olari;Co(hliobolus-Curvularia complexJ.FungalDi vcrs町.56(1):131-144 3J张天宇.2010.小国真菌志:第30卷蠕形分生抱子真菌M.北京:科学出版社4JReid L.悦，ZhuX.Y.2005.Scrccning corn for resistancc to common discases in CanadaR.Agricul ture and Agri-Food Canada 6