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1、ICS 11.020 c59 23221一2008引TS中华人民共和国卫生行业标准ws 280-2008 伤寒和副伤寒诊断标准Diagnostic criteria for typhoid fever and paratyphoid fever 2008-02-28发布2008-09-01实施e A 哇f:I&.-叶=t-f=-严民三主EE奉日ILI主坐三音.ts发布_=-:ii.g主Bws 280-2008 目IJ1=1 根据中华人民共和国传染病防治法制定本标准。按照国家质检总局国家标准委公告(2005年第146号),GB 160011995伤寒、副伤寒诊断标准及处理原则自本标准实施之日起废
2、止。本标准的附录A是规范性附录。本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出。本标准由中华人民共和国卫生部批准。本标准起草单位:广西壮族自治区疾病预防控制中心、山东省疾病预防控制中心、河南省疾病预防控制中心、贵州省疾病预防控制中心、广西医科大学第一附属医院。本标准主要起草人:董柏青、毕振强、龚健、张锦、罗光汉、邹志霆、徐进、李翠云、袁海宁、林政、王鸣柳、杨进、夏胜利、田克诚。ws 280-2008 伤寒和副伤寒诊断标准1 范围本标准规定了伤寒和副伤寒的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对伤寒、副伤寒的诊断、报告。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标
3、准。2.1 伤寒和副伤寒typhoid fever and paratyphoid fever 由伤寒沙门菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起的急性肠道传染病。临床表现以持续发热、神经系统中毒症状和消化道症状、相对缓脉、玫瑰痊、肝脾肿大、白细胞减少、嗜酸性粒细胞减少或消失为特征。主要并发症为肠出血、肠穿孔、中毒性肝炎、中毒性心肌炎等。3 诊断侬据3.1 流行病学史3.1.1 病前30d内曾到过或生活在伤寒、副伤寒流行区。3.1.2 有伤寒、副伤寒患者、带菌者密切接触史。3.1.3 有喝生水等不良卫生习惯。3.2 临床表现3.2.1 不明原因持续发热。3.2.2 特殊中毒面容(表情淡漠，呆滞)，相对
4、缓脉，皮肤玫瑰磨，肝脾肿大。3.3 实验室检测3.3.1 嗜酸性粒细胞减少或消失、白细胞总数正常或低下。3.3.2 月巴达反应0抗体凝集效价二三1:80,H抗体凝集效价二三1:160者;但在高发地区，许多正常人因既往感染亦可有较高滴度，此时最好首先检查当地人群免疫水平，确定正常值。肥达反应检测方法见附录A。3.3.3 恢复期血清中特异性抗体效价较急性期血清特异性抗体效价增高4倍以上。3.3.4 从血、骨髓、粪便、胆汁中任一种标本分离到伤寒沙门菌或副伤寒沙门菌。伤寒、副伤寒沙门菌分离培养方法见附录A。4 诊断原则应综合流行病学资料、临床资料和实验室检查结果做出诊断。5 诊断5.1 带菌者无任何临
5、床表现、从粪便中分离到伤寒沙门菌或副伤寒沙门菌。5.2 疑似病例符合下列任何一项可诊断:5.2.l 同时符合3.1中任何一项和3.2.1。5.2.2 同时符合3.2.1和3.2.2中任何一项体征者。1 ws 280-2008 5.2.3 同时符合3.2.1和3.3.1。5.3 临床诊断病例符合下列任何一项可诊断:5.3.1 同时符合3.2.1、3.2.2中任何一项体征和3.3.1。5.3.2 同时符合3.2.1、3.2.2中任何一项体征和3.3.205.4 确诊病例符合下列任何一项可诊断:5.4.1 同时符合3.2.1和3.3.3。5.4.2 同时符合3.2.1和3.3.406 鉴别诊断2 大
6、，无玫瑰瘦，伤寒的病人1病原学诊断方法A.1.1 细菌培养A.1.1.1 标本采集按不同病程采集不同种类的标本人1.1.1.1 血液标本ws 280-2008 附录A(规范性附录)伤寒、自IJ伤寒实验诊断方法宜在病程的第1周第z，周采集r但只要发热未/退，两周以后、仍可获得阳性结果。无菌采集静脉血5mL10mL进行全血培养，己用抗生素者可取血凝块搅碎后做培养啕。A.1.1.1.2 粪便标本宜在病程的第3届三盈:采集患者新鲜粪便2g3g或虹拭立即送检、如不能立即送检，可用卡里-布莱尔(Crry-Blir M运琛存培养基尽快送检。A.1.1.1.3 骨髓幅喝j町程均百韶四已使用抗生蒜相其A.1.1
7、.2 分离培A.1.1.2.1 血液标按1:川oJ.-.置在增菌培养基或葡萄瑭胆蛮肉汤培养基，置于360C:!:1时障育，好别于ld，2d、7d转种血琼脂平板或营养琼脂平板，置360C士C培养2448ho.接接种于SS琼脂平板或麦康凯MC)琼脂平板上，置360C士吐。C、18h24h分A.1.1.2.2.2增I走取新鲜粪便标有!叫拭子接种于9咀挪氢铀增菌培养基(S以置36归培养18h24h后，接种到SS和l.C部吁板上，是360C士lOC、18h24h分离培乔A.1.1.2.3 骨髓标本取骨髓液做直接分离法草吉思离培养。A.1.1.3 鉴定A.1.1.3.1 菌落形态在血平板、SSfQMC培养
8、基上加中等大小、元色半透旦时面光滑的菌落，菌落边缘整齐。产H2S菌株在SS平板可形成中心黑褐色的菌落TA.1.1.3.2 形态染色为革兰阴性短杆菌。A.1.1.3.3 初步生化鉴定从分离培养平板上挑取3个5个可疑菌落，分别转种到以下培养基:双糖铁斜面(KD或三糖铁斜面(TSD和动力能基质-尿素半固体(MIU)各一支，360C士lOC培养18h24h，观察生化反应(见表A.1)。3 ws 280-2008 表A.1伤寒、副伤寒沙门菌初步生化鉴别表KI!TSI MIU 菌种斜面/底层产气H2S 动力能基质尿素大肠艾希菌A/A+/+十/+志贺菌属K/A 十/伤寒沙门菌K/A 十/十甲型副伤寒沙门菌K
9、/A 十/+乙型副伤寒沙门菌K/A+十丙型副伤寒沙门菌K/A+十注:A产酸黄色);K不产酸(红色);+阳性，阴性;+/一多数阳性;-/+多数阴性。A.1.1.3.4 血清瑕片凝集符合伤寒、副伤寒沙门菌生化反应的，取KI或TSI斜面上的菌苔做玻片凝集试验，并设盐水对照。方法:挑取KI或TSI斜面上菌苔，先用O多价血清玻片凝集，凝集者，再选用O2、04、06，7和09因子血清凝集(伤寒和丙型副伤寒沙门菌的Vi抗原能阻碍O抗原凝集，必要时制成菌悬液经lOOOC水浴30min破坏Vi抗原后，再进行血清凝集)。O抗原确定后，再用H因子血清凝集(见表A.2)。表A.2伤寒、副伤寒沙门菌血清凝集反应H抗原菌
10、型O抗原Vi I相E相伤寒沙门菌9 d 十甲型副伤寒沙门菌2(1,5)乙型副伤寒沙门菌4 b 1,2 丙型副伤寒沙门菌6,7 c 1,5 十注:()表示该抗原可能缺失。A.1.1.3.5 系统生化鉴定肠杆菌科细菌各属之间，在生化方面有类似之处，抗原方面也可有交叉反应，有时可出现不典型的菌株，因此，仅做一般生化反应和血清学鉴定，还不能做出正确的结论，需要进一步做系统的生化反应鉴定。伤寒、副伤寒沙门菌的主要生化特性见表A.3。表A.3伤寒、副伤寒沙门菌主要生化特性葡萄麦芽 甘露硫化族基甲基拘橡卫茅木胶阿拉赖氨鸟氨菌型动力糖乳糖糖醇煎糖氢质尿素红VP 酸盐醇糖伯糖酸脱 酸脱竣酶 竣酶伤寒沙门菌+十+
11、十十/一十+十+甲型副伤寒菌+e e 一/十+e+乙型副伤寒菌十 6+十/+丙型副伤寒菌+十十十 6 e+注一阴性(不产酸);十阳性(产酸);(B产酸产气;+/一多数阳性，少数阴性;一/+多数阴性，少数阴性。A.1.1.4 菌株管理建立菌株保存档案，详细记录菌株的来源、分离的时间和地点、取材患者的基本信息及流行形式(暴4 ws 280-2008 发、散发等)。各级医疗机构所分离的菌株送辖区疾病预防控制机构进行复核鉴定。菌株依据中华人民共和国传染病防治法及医学微生物菌种保藏管理办法及病原微生物实验室生物安全管理条例的规定与要求进行保存、运送与管理。A.1.1.5 培养基质量控制实验室所用的培养基
12、、试剂和诊断血清要进行质量控制。A.2 肥达反应A.2.1 标本采集宜在急性期和恢复期各采集一次，进行肥达反应试验。A.2.2 原理用标准伤寒及甲、乙、丙型副伤寒沙门菌0、H抗原菌液(诊断菌液)与稀释的待检血清反应，根据凝集效价判断血清中有无相应抗体。常用于辅助诊断。A.2.3 试剂伤寒及甲、乙、丙型副伤寒沙门菌诊断菌液。A.2.4 方法试管或凹塑板管外稀释法。详见伤寒、副伤寒防治手册)(第2版)。A.2.5 操作步骤A.2.5.1 试剂制备取伤寒及甲、乙、丙型副伤寒沙门菌诊断菌液，用生理盐水稀释成含菌1.OX 109/mL悬液备用。A.2.5.2 待检血清稀释准备6支大试管，标明稀释度。第1
13、管:取9.5mL生理盐水，加入0.5mL待检血清，混匀，成1:20血清稀释液。第2管:取第1管血清稀释液5mL，加5mL生理盐水，混匀，再取5mL加至第3管。第3管第6管:同上步骤稀释。此时第1管第6管，稀释度分别为1:20,1:40,1:80,1:160,1:320,1:640(每次稀释时必须更换吸头)。A.2.5.3 分装待检血清稀释液准备8排小试管，每排7支，或4X8凹塑板2个，标明稀释度及抗原。各排第1管(孔):每管(孔)加第1管血清稀释液0.5mL。各排第2管(孔):每管(孔)加第2管血清稀释液0.5mL。各排第5管(孔)第6管(孔):同上步骤分装。第7管(孔):只加生理盐水作空白对
14、照。A.2.5.4 加抗原将相应抗原(TO、TH、AO、AH、BO、BH、CO、CH)加入每排各稀释度管(孔中，每管(孔)0.5mL。最终血清稀释度分别为1:40,1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280。A.2.5.5 孵育将己加好血清稀释液和抗原的试管(凹塑板)振摇混匀后，置360C士lOC温箱或水浴孵育过夜，次日观察结果。A.2.6 结果观察轻轻取出试管或凹塑板，观察管(孔)底凝集物的多少及性状。阳性结果表现为液体澄清，颗粒均匀平摊于整个管(孔)底;阴性菌体集中一点，沉积于孔底，与空白对照相同。以出现50%(十+)凝集的血清最高稀释倍数的作为该血清的凝集效价。5 图A.
15、l伤寒、富IJ伤寒沙门菌检验程序ws 280-2008 A.3 标本检验程序见图A.1。血液、骨髓J 分离血清，7d-lOd后二次血清肥达反应酸础产剧居性币以门口J段却|产但不氢嘀化KF硫血EE价及出JM时-v单群在|l20分清用清血A.4 结果报告标本粪便J 亚晒酸氢例(SF)增菌36t:士lt:I叫h 斜面不产酸，底层n酸产气，硫化氢(H)阳性或阴性价多ou r-TVU圳凝片玻清血液n川玻惹ho定案菌缸做鉴脏lv制阶重jl市化不川物-1生集I淀集统凝优沉凝系川m取片 不凝集 非伤寒、副伤寒沙门菌A.4.1 病原学结果报告根据生化试验和血清学鉴定结果，符合伤寒或副伤寒沙门菌的，报告检出伤寒沙
16、门菌或检出型副伤寒沙门菌。粪便标本经分离培养后，如无可疑菌，报告未分离出伤寒、副伤寒沙门菌。血和骨髓标本培养至7d如无细菌生长，报告经7d培养无菌生长。A.4.2 血清学结果报告报告被检血清对伤寒沙门菌H抗原、伤寒沙门菌O抗原、甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌的凝集度。如果第1孔(管)无凝集，报告140;第6孔(管呈+或更强凝集，报告二三1:1 280。6 CON-o创悻国华人民共和卫生行业标准伤毒和副伤寒诊断标准WS 280-2008 中印张O.75 2008年8月第1版第1次印刷争夺出版发行:人民卫生出版社(中继线010-67616688)地址:北京市丰台区方庄芳群园3区3号楼邮编100078网址http:/E-mail: 购书热线010-67605754010-65264830 印刷:北京新丰印刷厂经销:新华书店开本880X1230 字数22千字版次2008年8月第1版书号14117 209 定价9.00元版权所有，侵权必究，打击盗版举报电话010-87613394(凡属印装质量问题请与本社销售部联系退换)1/16 BE BEE-MMMMMMMMMno mmmm 川川川2HHHHHHHHnU HHHHHHHHHHno 斟四川剧由副剧剧刷内/川川川川S川川川川w