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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4081-2014 伤残短体线虫检疫鉴定方法Detection and identification of Prtylenchus vulnus Allen&Jesen 2014-11-19发布2015-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局SN/T 4081-2014 目。昌本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由同家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学耐究院、中华人民共和|同天津出入境检验检疫局、中华人民共和同宁波出入境检验检疫局、中华人民共
2、和同伊犁出入境检盼检疫局。本标准主要起草人:龙海、李一农、王金戚、李芳荣、顾建峰、乾义柯。SN/T 4081-2014 伤残短体线虫检疫鉴定方法1 范围本标准规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及植物产品、士壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不口J少的。凡是注日期的寻|用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T 2757 植物线虫检测规范3 符号下列符号适用于本文件。测计的线虫样本数t=J;L 虫本本长(/Lm:E!lZmm);Q 体长/最大体
3、宽;b 体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离;体长/体前端至食道腺末端的距离;正体长/尾长;C Y 尾长/月工门处体宽;gu bernacult盯盯引带长度;S段t口针长度(忡l1川m);spicule一一交合剌长度;T 1世硝腔开口至精巢末端的距离X100体长;V 虫体前端至阴门的距离x100/体长O4 方法原理中文名称:伤残短体线虫学名:Pratyln川!lUSvulnus Allen也.J esen,19 J 1 异名:AguillulinaratesisThorne,1934 Pratylench us m usicola Condit&.Horne,1938 Pratylenchus
4、ratensis Allen,1919;Serr&工Day，1919英文名:Walnul meadow nemalode;Walnul yool-lesion nemalode 分类地位:线虫门(Nemalod川、侧尾腺纳(Secernenlea)、垫jJ曰(Tylenchida)、短体科(Pralylenchi dae)、知体亚科CPratylenchinae)、知体属CPratylellchus)。伤残知体线虫是内寄生性线虫，通常破坏奇主植物根系的外层组织，随着线虫的取食，根系细胞大SN/T 4081-2014 量受损，从出现大面积病变的根系中口J分离到线虫o受害植株须根减少，根系不发达，
5、若有其他病原物，将导致根系腐烂。伤残短体线虫危害8余种植物。根据寄主范罔、传播途径、生物学和l形态学特征进行该线虫的检疫鉴定。伤残知体线虫的寄主范围、地理分布和传播途径参见附录八。5 仪器、用具和药品5.1 仪器与用具光学显微镜、体式显微镜、冰箱、力日热板、打孔器、载玻片、盖玻片、标准套筛(60口500日)、烧杯(500 mL、1000 mL)、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、凹玻片、剪刀、挑针、浅盘、玻璃纤维丝、酒精灯、培养皿、试管、纱布、干燥器、记号笔。5.2 药品指甲油、4%甲醒、军L盼油(苯盼20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸馆水20mL混合而成)、石蜡、冰乙酸。6 检疫与鉴定6.
6、1 现场检疫与取样对植物及其产品的根、鳞球茎、块茎、根状茎等地下部分进行检查.是否有根腐症状。收集述口J疑植物材料及所附带的土壤.送实验室检盼。6.2 实验室检验对于抽取的样品.可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫，具体操作过程见SJjT2757。对于少量的植物样品，直接在体视卑微镜下用解剖针对样品进行解剖o将线虫分离液在体视而微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若干条，制成临时玻片在，lr)_1J贺镜下镜检，观察线虫的形态。线虫临时玻片标本制作方法见SN/T 2757。7 伤残短体钱虫的形态学鉴定特征7.1 形态特征图形态特征见附录17.2 形态特征描述雌虫:虫体细长，温和|热杀死后虫体直伸，头区高连续
7、，唇区有34条环纹。口针发达，基部球圆形，有时前端呈杯状;中食道球椭圆形，较窄;排泄孔位于食道与肠交界处;食道腺从腹面以长叶状覆盖肠的前端。受精囊充满精子时呈长椭圆形，其长的手11分化的后阴子宫囊.长度为阴门处体宽的2倍，侧区具4条侧线，夕|、侧的侧线光滑或略呈锯齿状，中间2条侧线距离较近。尾困锥形，尾尖细困或亚锐尖、光滑，偶尔具12条环纹。雄虫:常见，头区和食道的构造与雌虫相似。侧区在交合伞处终止，交合伞延伸到尾尖。交合剌弯曲，引带简单。2 SN/T 4081-2014 7.3 测量值7.3.1 雌虫L二0.46mm0.91 mm;a二26.639.5;b二5.37.7二14.227.7;V
8、二7884;如二1611m 18m(八llcn已Jcnscn,1951)。=14:L=0.47 mm0.72 mm;=27.8:n.6;b=5.7 7.7=18.424.7;V=77 82;5L=13 11m16 11m(Loof，1960)。二10:L二0.62(0.46 O.80)mm川二33(2737);b二6.4(5.37.5)二21(l428);c二2.7(2.33.0);V二80(7883);5t二17(l618)mCRyss，lD88)。7l二80:L二O.lD(OA3 O.61)mm川二30.5(21.D37.3)冲二5.5(/1.77.0);6二1.1(3.25.2);c=2
9、0.2(l6.22S.1);c=2.4(2.0:-l.0);V=80C77 84);如=lS(l416)m(oucet6-Lax，1997)。=39:L=0.65(0.500.81)mm川=26.7 C20.830.7);b=6.8(4.89.0);b=4.7(3.47.1);c二21.0(l7.530.4);V二80(7383);出二16.7(l5 18)m(Gao ct al.,1999)。7.3.2 雄虫L二0.46mmO.73 mm川二28.339.2;b二5.37.4;c二17.529.4;T二36 66;gubernaculums 二4m6m;spicule二14m20m;St二1
10、5m18m(Allen&-Jensen，1951)。二9:L二0.49mm0.61 mm川二32.138.5;b二6.37.2二20.523.6;T二3453;St二um 15 flm(Loof,1960)。=7:L=0.57(0.460.71)mm川=:B(28 :-lS);b=6.0 C S.:-l 7.2)=21(l826);c=2.7(2.13.1);St二16(15 18)11m;spicules二17(1420)11m;gubernaculum二5(46)11m(Ryss,1988)。二80:L二0.46(0.41 0.53)mm;a二31.0(27.637.4);b二5.3(4.
11、66.0);b二4.1(3.54.6);C二20.1(15.D23.8);c二2.0(1.D 2.1);St二H.5(13 16)m;spicules二18(1521)m;gubernaculum=6.5 C5.07.0)m(oucetLax，1997)o 二20:L二0.53(0.43 O.61)mm川二30.7(21.738.4);b二6.2(5.2.72);b二4.4(3.75.7);C二19.8(l7.925.8);T二43(3155);St二15(14.517)，!lm(Gaoet al.，1999)。7.3.3 与近似种的区别与近似乎中的形态区别见表10表1五种短体线虫的形态区别短
12、体线虫种!再环数门毛IJ二度11，m侧l豆刻线受精囊形状雌虫尾形后阴子宫囊长度/I，m伤残挝体线虫斗条锥形、尾尖细圆、3;j 1319 长椭圆形216!1 P.vulnu,偶尔具12条环纹穿刺短本线虫锥形、*端钝圆、1 1百1.S倍3 1517 4条近圆形I.户enetrns无环纹阴门处体宽咖啡短体线虫4(少数亚圆柱形、2 1518 长卵圆形1750 P.coffeae 46)条术端元环纹3 SN/T 4081-2014 表1(续)短体线虫种唇环数门It二度/p.m似rJJ2S:刻线后阴子宫褒受精囊形状雌虫尾形长度/ILtll卢斯短体线虫4(少数锥形、尾端无环2 1418 长卵形1826 P.
13、loo.i 56)条纹、钊尖草地短体线虫4条长椭圆形惟形、尾立而只3 1215 142S P.ratP7ISIS 环纹8 结果判定以雌虫和l雄虫的形态学作为该线虫的鉴定依据，符合第7章形态特征和|测量值的可鉴定为伤残短体线虫。9 样本保存和;复核9.1 样品保存样品登记后，经于人签字，妥善保存。如果发现伤残知体线虫，该样品至少在4C保存3个月.以备复革命、谈判和仲裁。保存期满后，发现伤残知体线虫的样品市做销毁处理。9.2 线虫标本的保存若鉴定为伤残短体线虫.则将剩余的线虫杀死、同定制成永久玻片保存;也可以同走后放入含4川甲醇榕液的指形管中长期保存。线虫永久玻片标本制作方法见SN/T27570
14、4 SN/T 4081-2014 附录A(资料性附录)伤残短体线虫的分布、寄主范围和传播途径.1 地理分布美国、加拿大、墨西哥、阿根廷、巴西、乌拉圭、肯尼亚、由非、比利时、保加利亚、丹麦、英格兰、芬兰、法同、德同、挪威、希腊、意大利、俄罗斯、两班牙、中同、伊朗、以色列、日本、韩同、巴基斯坦、斯里兰卡、澳大利亚。A.2 寄主植物叫牛寄生80余种植物，大多数为木本植物、落叶果树、坚果类植物等，比较重要的经济作物和农作物有苹果(Malusumila)、葡萄(Vitis川fera)、干年(Prunusarm们zZaca)、桃(Prunus户ersica)、樱桃(Cerasus户seudcerasus)
15、、黑莓CR川uscrchrij乒【?训i5)人、酸橙(Ci丁卫itrusur?ztium)、芒果CM附gl厅feran盯叫IC旷正dic)、红薯C趴15盯正reae5le仰叫?nt)、玫瑰(咱Rsarugu sa)、炯草CNictla川削正at归ah归clun川1川)、棉花(G川5口军t刊川5吁勺y户iumh irsutum)，橄榄(Caaviumalbum)、核桃(uglas regia)、大豆CGlycinemcU)、芭蕉CMusabasjoo)、红杉(Lartaninii)、黄杨水CBu:rusSinica)等。A.3 传播途径自然界线虫的传播除线虫本身的运动外，主要靠农事操作、病苗、病
16、士的转移、搬运和流水传带，远距离传播出病苗或病础水调运引起。3 SN/T 4081-2014 说明八整个雌虫，B 整个雄虫;注采自Corbctt，19H。6 附录B(规范性附录)伤残短体线虫主要形态鉴定特征图5 1m C 50m A.B 20 lm D-G F G c 雌虫横切面，D 雄虫!再l丘，A 飞毛E-Jlt虫唇仄;F，G-Jit在虫尾。图B.1伤残短体结虫主要形态鉴定特征图SN/T 4081-2014 图B.2雌虫侧区(100 X)图B.3雌虫前体部门00X)图B.4雄虫前体部(100X)图B.5雌虫尾部(100 X)图B.6雄虫交合伞(100 X)图B.7雌虫受精囊(100X)图B.8雌虫阴门(100 X)寸FON-O寸同军中华人民共和同出入境检验检疫行业标准伤残短体线虫检瘟鉴定方法SN/T 4081-2014 头中国标准出版社出版北京市朝阳仄和平里内街甲2号(l00029)北京市内城以-:11训北街16号(100015)总编室:(010)68S:BS:B 网址WWW.吕pc.nel.巳口中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷争夺印张0.75字数17千字2015年12月第一次印刷1/16 2015年12月第一版印数1-1100 卅本880X 1230 7G 定价16.00只书号155066 2-293/11 SN/T 4081-2014