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1、ICS 65.020.20 B 05 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3714一2020植物品种特异性(可区别性)、一致性和稳定性测试指南踊虫草Guidelines for the conduct of tests for distinctness,uniformity and stability一Scarlet Caterpillar-fungus Cordyceps militaris(L.)Fr.2020-08-26发布2021-01-01实施:主1r中华人民共和国农业农村部发布前言.川.川.川.川.叮.叶山.们川.川.川.川.叫.们目.川.川.川.川.川.1 I范在应固l卜E
2、-2 规范性引用文件3 术语和l定义目次4符号.5 繁殖材料的要求6 测试方法NY/1 3714-2020 7 特异性(可区别性)、一致性和稳定性结果的判定.,.3 8 性状表.3 9 技术问卷.4 附录A(规范性附录)性状表附录(规范性附录)性状表的解释 附录C(规范性附录)技术问卷格式参考文献.15 I NY/T 3714-2020 本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会(SAC/TC277)归口。本标准起草单位:上海市农业科学院、南京野生植物综合利用研究院、农业农村部科技发展中心、江苏康能生物工程股份有限公司。本标准主要起草人:李传华、林群英、唐浩、王琅、朱丽娜、张劲松、唐庆九、夏t
3、辰荣、陈海荣。11 NY/T 3714-2020 范围植物品种特异性(可区别性)、一致性和稳定性测试指南蜗虫草本标准规定了踊虫草Cordyce卢smilitaris(L.)Fr.品种特异性(可区别性)、一致性和l稳定性测试的技术要求和结果要IJ定的-般原则。本标准适用Z耐巾古口刮临叫2 3 GB/T 3.1 个体3.4 群体目测对一批个体或个体的特定部位进行目测,获得一个群体记录。3.5 个体目测对一批个体或个体的特定部位进行逐个目测,获得一组个体记录。4 符号下列符号适用于本文件:MG群体测盘。MS,个体测结.VG,群体目测。文件。离子NY/T 3714-2020 VS,个体目由IJ.QL,
4、质盘性状。QN,数茧;性状.PQ,假质盘性状.(a),标注内容在附录B的B.2中进行了详细解释。C+),标注内容在B.3中进行了详细解释。5 繁殖材料的要求5.1 繁殖材料以母种形式提供。5 2 提交的菌利t数量:提交的菌种数量至少为3支试管母种。母利试管规格为080-200)mmX 08-20)mm,使用POA培养基,25C培养,随俗10d-14 d,商丝活力强。5.3供试品种菌种的保存:测试单位收到菌种后,应立自jl扩繁留存菌种,并按NY/T1731的规定保存。如有特殊保藏要求,应提供保藏的详细说明。5.4 供试菌种的处理要求提交的菌种不应进行任何影响品利性状表达的处理。5.5 除非审批机
5、关允许或要求进行处理,提交的繁殖材料一般不进行任何影响品种性状正常表达的处理。如果已处理,应提供处理的详细说明。5.6 提交的繁殖材料应符合中国植物检疫的有关规定。6 测试方法6.1 测试周期测试周期至少为2个独立的生长周期。6.2 测试地点测试通常在一个地点进行。如果某些性状在该地点不能充分表达,可在其他符合条件的地点对其进行观测。6.3 栽培试验6.3.1 试验设计测试应在能保证菌种正常生长、性状正常表达以及有利于观测的条件下进行。茵丝、菌落的性状测试采用POA培养基进行平板培养。栽培种为液体非1,液体利:培养基配方为葡萄糖20 g、蛋白!的5 g、牛肉浸背3g、酵母浸1J1 g,jl水至
6、1 000 mL,液体利振荡培养,120r/min,温度20C,培养7d.采用玻璃瓶为容器,规格为120mm X 95 mm.每瓶栽培基质为25g、营养液37.5mL.营养液配方葡萄糖20g、蛋白陈5g、水1000mL.在一致的环境下发菌、出子实体。每小区至少100瓶,共设2个重复。必要时,近似品种与待测品种相邻摆放。共试品种有特别;要求的,按要求增加相应条件。6 3.2 栽培管理按当地主栽品种栽培模式和管理方式进行,各小区管理应严格一致.6.4 性状观调l6.4.1 观测时期性状观由l应按照l附录A的表A.l和l表A.2列出的生育阶段进行。表8.1对这些生育阶段进行了解释。6.4.2 观j!
7、IJ方法性状观调l应按照表A.l和表A.2规定的观测方法进行.2 NY/T 3714-2020 6 4.3 观测数量除非另有说明,个体观测(VS、MS)性状时菌丝体取样数量不少于4个平板,子实体取样数盘不少于60个,在观测个体某个部位时,每个个体取样数:!J:为1个.群体观汩(VG、MG)性状时应观测验个小区或规定大小的混合样本。6.5 附加测试必要时,可选用表A.2中的性状或本文件未列出的性状进行附加l测试。7 特异性(可区别性)、一致性和稳定性结果的判定7 1 总体原则特异性(可区别性)、一致性和l稳定性的判定按照GB/T19557.1确定的原则进行。72 特异性(可区别性)的判定待测品种
8、应明显区别于所有已知品种。在测试中,当待识品种至少在一个性状上与最为近似的品种具有明显且可重现的差异时./l可判定待测品种具备特异性(可区别性。7.3 一致性的判定对于测试品种,一致性判定时,采用1%的群体标准和至少95%的接受概率。当样本大小为60个时,最多可以允许有2个异型株。对于个体差异大的性状,一致性程度不能低于同类型品种在该性状的个体差异。7.4 稳定性的判定如果一个品种具备一致性,则可认为该品种具备稳定性。一般不对稳定性进行曲!IJ试,必要时,可以栽培该品种的下一批次菌种,与以前提供的繁殖材料相比,若性状表达无明显变化,则可判定该品种具备稳定性。8 性状表8.1 概述根据测试衍耍,
9、将性状分为基本性状、选j!IJ性状,基本性状是测试中必须使用的性状,选测性状是测试中可以选择使用的性状。表A.1列 出了基本性状,表A.2列出了逃泪性状.性状表列出了性状名称、表达状态及相应的代码和标准(标样)品种、观调l时期和方法等内容。8.2 表达类型根据性状表达方式,将性状分为质盐性状、假质盘性状和1数盘性状3种类型.8.3 表达状态和相应代码8.3.1 将每个性状划分为一系列表达状态,以便于定义性状和l规范描述;赋予每个表达状态一个相应的数字代码,以便于数据记录、处理和品种描述的建立与交流。8.3.2 对于质结性状和假质量性状,所有的表达状态都应当在测试指南中列出;对于数量性状,所有的
10、表达状态也都应当在测试指南中列出,倒数代码的表达状态可描述为前一个表达状态到后一个表达状态的形式。8 4 标准(标样)品种性状表中列出了部分性状有关表达状态可参考的标准(标样品种,以助于确定相关性状的不同表达状态和1校正环珑因素引起的差异。8 5 性状表的解释附录B对性状表中的观测时期、部分性状观训IJ方法进行了补充解释。8.6 分组性状本文件中,品种分组性状如下a)子实体:形状(表A.1中性状11);3 NY/T 3714一2020b)子实体:子挺壳(表A.1中性状13)。9 技术问卷申请人应按附录C给出的格式坝写蜗虫草技术问卷。4 A.1 蜻虫草基本性状见表A.lorf号性状1li丝lOC
11、生长速度QN+)菌丝。15C生长速度QN 2+l 菌丝。20C生长速度QN 3+l 菌丝25C生长速度QN 4+)菌丝30C生民速度QN 5+)菌丝疏密度E QL+)菌落也萦7 QL+)菌丝体:拮抗8 QL+)菌丝体转色IIt间QN 9+l 附录A(规范性附录)性状表表A.l蜗虫草基本性状观测时WJ表达状态和l方法00 他MS 中快00 f且MS 假到中中中到快快00 慢MS 慢到中中巾到快快。慢MS 慢到中中中到快快。世MS!l!到中中中到快快02 疏VG 中密02 无VG 有02 元VG 有03 早VG 早到中中中l1IJ晚l监NY/T 3714-2020 标准(标样)品种代码2 3 I
12、2 3 4 内蒙.ll.1在1号5 黄山虫草l号2 3 4 内蒙虫草I号5 黄111虫草l号2 3 4 内紫虫草1号5 百业l号2 3 4 5 黄山虫草1号云虫l号2 内i齿业1,1.1号3 内蒙虫草1号就山虫草1号9 9 黄山虫草1号2 内兹虫草1号3 4 灰白虫草2号5 5 NY/T 3714-2020 Pf号性状子实体:接种后到子实体原基形成时间10 QN a)子实体:形状11 PQ(.l+l 子实体颜也PQ 12(.l+l 于实体子囊ft13 QL(.l+l 子实体长/.l!QN 14.l(+l 于实体=直径QN 15(al+l 子实体=原基形成到于实体成熟时间QN 16(.l 子实体
13、直径与度的比1QN 17 A.2 蜗虫草选测性状见表A.20表A.l(续观测lI.ml表达状态和l方法21 早MG 早到中中中到晚晚22 针状VG 柱状锤状22 浅黄色VG 战前色到中等黄色中等黄包中得货色到橙黄色橙黄色22 无VG 有22 短MS 短到中中中到长长22 细MS 却l到中中中到粗租22 早MG 早到中中中到晚晚22 MS 小到中中中到大大表A.2蜗虫草选jj1lj性状序号性状观测时JPJ夜达状态和方法虫草酸1H喜醉)含盐22 低18 QN MG 中+l 高虫草素。脱氧腺背古草I23 低19 QN MG 中+l 高6 标准标样品种代码i 2 大抱头虫草3号3 4 5 组1虫草2号
14、内蒙虫草l号2 大抱头虫草3号3 灰白血1t2号l 大抱头虫草3号2 3 4 内蒙虫草l号5 尖头草5号l 大抱头虫草3号9 大抱头虫草3号l 2 内蒙虫草I号3 细虫草2号4 5 细虫草2号I 2 中抱头虫草l号3 4 大抱头虫草3号5 细虫草2号2 大抱头虫草3号3 4 黄山虫草l号5 尖头1,15号I 2 内蒙虫草l号3 4 大抱头虫草3号5 标准(标样品种代码2 Gl 3a 3 G8.1 2 内蒙虫草1号3 NY/T 3714-2020 表A.2(续)序号性状观测时期表达状态标准(标样品种代码和l方法虫草多融业含革t23 低1 20 QN MG 中2+l 高G7a 3 虫草腺背含量23
15、 低GI6a 21 QN MG 中2+l 高G14a 3 7 NY/T 3714-2020 B.1 蜗虫草生育阶段见表B.1。代码口O01 02 03 名称国落阶段丽丝阶段商挫体转包21 19JI桔子实体阶段22 于实体阶段23 干实体来后阶段B.2 涉及多个性状的解释附录B(规范性附录)性状表的解释表B.1 蜗虫草生育阶段描述母种接种于平版,菌落直径达90mm,占平额2/3液体种接种于大米培养基.发商结束囱业体开始转包i1i佳体扭i结.基发生原基顶瑞尖,带有臼色于实体技状或顶端开始膨大于实体烘干后青水盐13%菌丝体和l子实体性状解释涉及所用培养基为大米培养基(大米与营养液比例为1:1.5)。
16、(a)观测成熟度为70%-80%的第一溜l子实体。蜗虫草菌丝体和子实体各阶段见图B.l,其中代码22成熟度为70%-80%。发菌Mll转鱼原基且主生制j撒于实体阶段01 02 03 21 图.l蜗虫草菌丝体和子实体生长阶段于实体性状或1i1;J开始膨大22 B.3 涉及单个性状的解释性状分级和l图中代码见表A.1和表A.2。性状1菌丝:10C生长速度。性状2菌丝:15C生长速度。性状3囱丝:20C生l主速度。性状4m;i丝:25C生L速度。性状5j丝:30C生长速度。茵丝不同温度生长速度测量用打孔器定盘(5mm)将供试31利1接种于直径90rnm的培养mL中,将培养皿分别宣于10C、15C、2
17、0C、25C、30C避光培养10 d.采用十字划线法划终止线,测量商落直径。茵丝生长速度按式(B.1)计算。8(A1+A2)/25 x.(B.1)7 NY/T 3714-2020 式中:X 菌丝生长速度,单位为毫米每天(mm/d);A,图B.3中十字划线中菌落直径水平线段,单位为毫米(mm);A,一一图B.3中十字划线中的菌落直径竖直线段,单位为毫米(mm),图.2菌丝生长速度测量性状6菌丝:疏密度。用打孔器定:!il(5mm)将供试品种接种于直径90mm的培养皿中.PDA培养基,培养温度(25士1)C.避光培养。培养15 d后观察菌丝密度差异,见图B.3,疏P 2 图.3菌丝疏密度密3 性状
18、7菌落:色素。用打孔然定盘(3mm)将供试品种接种于直径90mm的培养皿中.PDA培养基,培养温度(25土l)C.避光培养.15d后观察培养基表面有无色素生成,见阁B.4,无性状8菌丝体:拍抗,见医IB.5,图.4菌落:色素有9 性状9t由卢丝体:转色时间。从接利至茵丝转色完全所用的时间。性状11子实体:形状,见l辈IB.6,性状12子实体颜色,见图B.7,不同蜗虫草品种子实体颜色是在相同栽培及同等光照条件下观察的结果.9 NY!T 3714-2020 无有9 图B.5菌丝体:结抗牵|状位状2 锤状3 图B.6子实体:形状浅黄包浅黄色到中等黄色2 中!)i黄色中等黄色到橙黄色4 根货色5 3
19、图B.7子实体:颜色性状13子实体.子囊壳,见图B.8.箭头示子裳壳凸起部位。元有910 图8.8子实体:子囊壳NY/T 3714-2020 性状14子实体,度,见图B.90 图.9子实体长度性状15子实体直径,见图B.lO。取样方法:选取最具代表性子实体,测:监部位为子实体中间直径最粗的部位。工图.lO子实体:直径性状18虫草酸(甘露醇)含盐,测定方法见NY/T22790 性状19虫草素(3-脱氧l踉刮)含量,测定方法见NY/T21160 性状20虫草多销含盘,测定方法见NY/T1676。性状21虫草腺背含盘,泪1)定方法见NY/T2116。11 NY/T 3714-2020(申请人或代理机
20、构签章)C.1 晶种暂定名称C.2 申请测试人信息姓名地址:附录C(规范性附录)技术问卷格式蜗虫草技术问卷电话号码:传真号码手机号码:邮箱地址:育种者姓名(如果与申请测试人不同),C.3 生物学分类 属 种 亚种 变种中文名:拉丁名:C.4 晶种来源(在相符的类型中打、j)野外采集驯化 系统选育 突变种 发现 其他 C.5 待测品种的具有代表性彩色照片(品种照片粘贴处)(如果照片较多,可另附页提供)申请号:申请日.(由审批机关填写)C.6 晶种的选育背景、育种过程和育种方法,包括系谐、培育过程和所使用的亲本或其他繁殖材料来源与名称的详细说明12 NY/T 3714-2020 C.7 品种适于生
21、长的区域或环境以及栽培技术的说明C.S 其他高助于辨别待测品种的信息(如品种用途、品质和抗性,请提供详细资料)C.9 品种种植或测试是否需要特殊条件在相符的中打、J)是 否【(如果回答是,请提供详细资料)C.10 品种繁殖材料保存是否需要特殊条件(在相符的中打、j)是 否(如果回答是,请提供详细资料)C.11 待测品种需要指出的性状在合适的代码后中打.j,若有测量值,lf填写在表C.l中。表C.l待测品种需要指出的性状j于号性状表达状态代码测量值菌丝疏密度性状的疏中毯2 菌落色芳(性状7)元 有囱丝体转色时间(性状9)早1 早到中2 3 巾3 中5日11血晚5 子实体形状(性状11)告|状4
22、柱状锤状3 5 于实体子囊壳(性状)3)无有9 13 NY/T 3714-2020 表C.1(纹;)序号性状表达状态代码测i草值子实体直径与长度的比直性状17)小到中2 6 中3 中到大4 大5 C.12 在自己认知范围内,为近似的品种的明显差异。近似品种名f;j;待测品种表达状态14 NY/T 3714-2020 参考文献lJ中华人民共和国农业部.NY/T 528-2010 食用茵茵种生产技术规程SJ北京:中国农业出版社,2010年2J中华人民共和国农业部NY/T1846-2010 食用茵茵种检验规程SJ北京.中国农业出版社.2010年,15 ONON-寸汇的H讪Z*中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店衔18号楼)(邮政编码100125网址)化学工业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销争导*印张!.25 字数25千字2020年12月北京第1次印刷导开本880mmX1230mm l/16 2020年12月第1版书号16109.8399 定价34.00元特版权专有侵权必究举报电话(010)59194261