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1、ICS 65.020.01 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3428一2019大豆晶种大豆花叶病毒病抗性鉴定技术规程Technical code of practice for evaluation of soybean resistance to soybean mosaic virus disease 2019-01-17发布2019-09-01实施题萨局中华人民共和国农业农村部发布目。昌本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业农村部提出并归口。本标准起草单位z南京农业大学、全国农业技术推广服务中心。本标准主要起草人z李凯、智海剑、
2、张毅、盖钩锚、何艳琴、董志敏、刘佳、杨中路。NY/T 3428-2019 I NY/T 3428-2019 大豆品种大豆花叶病毒病抗性鉴定技术规程范围本标准规定了大豆抗大豆花Iq-病毒病人工接种鉴定技术和l抗病性评价标准。本标准适用于各类大豆利1质资源、品种、2 规范性引用文件3 术语和定义3.3 致病性病原物侵染3.4 人工接种在适宜条件下3.5 抗性评价cvaluation 根据采用的中/i:R标准非rI.:Ii;fll3.6 株系strain 同利病毒的不同来源的、血泊学相关的、对同一寄主的不同品利z具有致病力差异的分离物。3.7 接种体inoculum 用于接利1以引起病害的病原体或病
3、原体的一部分。3.8 接种悬浮液inoculwn suspension 用于接种的含有定量接种体的液体。3 9 NY/T 3428-2019 3.10 3.11 3.12 病情级别disease rating scale 定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。发病株率percentageof infected plants 一定植株群体中发病植株所占的百分率。病情指数disease index 通过对植株个体发病程度病情级别)数值的综合计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式。大豆花叶病毒病soybean mosaic virus dise 由大豆花叶病毒(soybeanmosaic vir
4、us,SMV)(参见，附录A中的A.1)所引起的以叶部花叶、坏死或花叶与坏死并存、茎尖坏死、植株矮化及籽粒斑驳症状为主的大豆病害。4 大豆花叶病毒接种体制备和保存采集田间典型大豆花叶病毒病症状的植株叶片，人工汁液摩擦接种法在感病大豆(菜豆)品种上分离纯化大豆花叶病毒分离物，分离物经生物学和血清学鉴定，确认其为大豆花叶病毒(soybeanmosaic virus,SMV)，对阳性大豆花叶病毒分离物进行致病性测定，根据在不同抗性的鉴别寄主品种引发的症状反应划分SMV株系参见A.2.2)，所用品种种子的质量要求按GB4404.2的规定执行。病毒毒源、保存在防虫温(网)室感病大豆品种上，或将具有典型症
5、状的病叶保存在液氮中或一200C以下的冰箱内。5 鉴定条件和试验设计5.1 鉴定所用仪器设备微波炉、紫外灯、植物组织研磨机、电子秤、烧杯、量筒、pH计、研钵、研棒、接种刷、一次性PE手套等，防虫网室(防虫网规格为60目。5.2 鉴定环境在防虫温室或田间防蜘网室进行人工接种鉴定，适宜温度在(25土3)OC。5.3 试验设计鉴定材料随机排列，3次重复，每份材料每次重复留苗15株-20株。5.4 试验对照晶种选择1个感病对照和1个抗病对照。感病对照要求高度感病，选择标准为规定接种量及适宜环境条件下病情指数能达到50左右，且感病性稳定;抗病对照选用抗大豆花叶病毒病品种，规定接种量及适宜环境条件下病情指
6、数在10以下，且抗病性稳定。为减缓抗病对照、感病对照的抗性变异，可将对照品种在元病地隔离繁殖，冷库保存，一次繁殖，供5年以上使用。5.5 株系选择选择我国不同大豆生态区优势株系作为鉴定株系。5.6 鉴定材料精选待鉴定品种种子，剔除斑驳粒种子。种子质量需符合GB/T19557.4的要求。6 接种6.1 接种时期大豆植株幼苗期真叶完全展开时接种。6.2 接种方法NY/T 3428-2019 采用人工汁液摩擦接种法，从感病品种上采集已鉴定病毒株系的病叶，于灭过菌的研钵中加入病叶量10倍的0.01mol/L、pH为7.4的磷酸缓冲液进行充分研磨，制备接种体悬浮液。利用紫外灯消毒的接种刷蘸取少量悬浮液，
7、在展开的2片真叶上摩擦创造微伤口接种病毒。6.3 接种前后管理接种前后杂草及时拔除，温(网室光照充足，正常防虫、浇水，保证植株正常生长。7 病情调查7.1 病情分级苗期病情分级及相对应的描述见表1。表1大豆苗期抗大豆花叶病毒病鉴定病情级别划分病情级别症状描述O 免疫、元症状或仅在接种叶上出现局部枯斑1 轻花叶或部分非接种叶片上出现肉眼可见微小坏死斑2 黄斑花叶、叶片轻度皱缩或多数坏死，斑直径在5nun以下或有部分叶脉坏死，其长度小于10nun 3 重花叶、叶片皱缩卷曲或坏死斑连片或主叶脉坏死长度大于20nun4 叶片严重皱缩且植株矮化或叶片因坏死脱落，或坏死面积超过叶片面积50%，或出现顶枯，
8、植株停止生长7.2 调查时间接种后30d左右，感病对照发病率95%以上，病情指数(Dl)50，调查被鉴定品种发病情况。7.3 调查方法调查记录被鉴定品种每一植株的病情级别及相应级别的植株数，按式(1)计算病情指数。2(s X n)11=.，,.X 100.(1)NXS 式中:D1一一病情指数;S 一一各病情级别代表数值;n一一该病情级别相应植株数，单位为株;N一一调查总株数，单位为株;S一一最高病情级别代表数值。8 抗性评价8.1 抗性评价标准根据所鉴定品种3次重复病情指数的平均值确定品种抗性水平，划分标准见表20表2大豆品种对大豆花叶病毒病抗性的评价标准抗性水平病情指数(DI)高抗(HR)D
9、I=O 抗(R)ODI20 中抗(MR)20DI35 中感(MS)35DI50 感(S)5070 3 NY/T 3428-2019 A.1 学名和理化特性A.11 学名大豆花111病毒，株系附录A(资料性附录)大豆花时病毒病病原和株系病毒科、马铃薯Y病毒j禹。寄主细胞中有风轮状、d4 d，oC下可30、8101、铁NY/T 3428-2019 表A.l(续)株系南农诱变308101 铁丰25Davis Buffalo 早熟18Kwanggyo 齐黄1号科丰1号1138-2 SC13 一1MN/M 一1M一IM，N一/M一1M一/一N/N 一/一一/一SC14 一1M一/一一1M一1M一/一一/
10、一一/一一/一一/MSC15 一1M一1M一1MN/M 一1M一1MN/M N/M 一1M一1MSC16 一1M一/一一/M一1MN/一NI一N/一一/一SC17 一1MN/M-1M 一1M一1MN/M 一1MN/N 一/一一1MSC18 一1M一1M一/一一/一一/一一/一一/一曰:19一1MN/N 一1M一/一一INN/N 一/N一1M目:20一1MN/N 一1M一/一一INN/N N/N 一/一一/一SC21 一1MN/N 一1M-/一一/M一1M一/一SC22 一/MN/M,N 一1M一/一一1M一1M一/一一1M注:接种叶反应/上位叶反应，一=无症状，M=花叶，N=坏死，M，N=花叶
11、、坏死共存。5 NY/T 3428-2019 附录B(规范性附录)鉴定记载表格大豆品种抗大豆花叶病毒病鉴定结果记载表见表B.1。表B.l年大豆晶种抗大豆花叶病毒病鉴定结果记载表材料编号品种/材重复病情级别株数病情平均病料名称。2 3 4 指数情指数I E E I E 皿播种日期月/日):接种日期(月/日):鉴定地点:接种病毒株系z调查日期(月/日):鉴定技术负责人签字):6,抗性。FON-RgH星中华人民共和国农业行业标准大豆晶种大豆花叶病毒病抗性鉴定技术规程NY/T 3428-2019*中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼(邮政编码:100125网址:)北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销*开本880rnmX1230rnm 1/16 印张0.75字数15千字2019年8月第1版2019年8月北京第1次印刷书号16109 4801 定价18.00元告奋*版权专有侵权必究举报电话(010)59194261 NY/T 3428-2019