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1、lCS 71.040.40 CCS x 41 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3870-2021 砸蛋白中晒代氨基酸的测定液相色谱原子荧光光谱法Determination of selenoamino acid in selenoprotein一Liquid chromatography-atomic t1uorescence spectrometry 2021-05-07发布2021-11-01实施中华人民共和国农业农村部发布本文11按照c;H/T 1.1 起了户。本文!111农业农村i)种植业1J11!l挺:1:Jj们门。才水文l刊才千l赳i卢1单R利f位，:巳公司0NY/1 3
2、870-2021 J!仰的规!本;i(1主要起巾人陈i庄、文lJij琴、卒Ilk、lat光ltJ、怅创Iql、胡q11.、1的i娥、市m)lf、秦邦、刁，鸟、熊1，i、朱云3:、机ljj、ITI宗、f近亲荣。NY 11 3870-2021 晒蛋白中晒代氢基酸的测定;在相色谱原子荧光光谱法范围水文fl)jt;，j二了液扣I己的原子次)t)tiMt川.Iiq量:iI11水仰刷代氨基般的JTll，0 斗1:立:fH川于1两ili1 1!kfiJl!l可刷:;纵1iA主俐代脱/lli(ScCys,)、IJI);H四代、脱生在nJi(McSeCys)111刷代IJI毓刽股(ScMet)介如之和的拍!IJ
3、右。jI:立:1I:WJ植物拍;t刷蛋II本方法的检IUI恨分别为2 规范性引用文件仪it主1-1!YJx.t1但的文刊。3 以/代纸J;lil主(I食来说LC3.2 4 原理11)ut附仪拍!IJi 0岭而在!勺5 试剂或材料除11j)11说IYJ.本文刊所用试剂且j5.1 试剂5.1.1 主!，nJi(HCI)优级rITo5.1.2 IJI iI主(H COOI训。5.13 叶化相!i(101-l)。5.1.4 主4仪化创(NaOH)囚5.1.5 回1!1七钊1(11)。5.1.6 fJJ(化但!i(IBI-I.，)o5.1.7 磷R主414二饭l(NH，)，HPO，l。、SeMCIO.1
4、4 mg/kgo 11 成的I，;，t晒NY/T 3870-2021 5.2 溶液配制5.2.1 批酸浴液(6mol/I.)，ttl仅500m 1.1ift n主(5.1.1).fH水容至1000 ml.5.2 2 磷R宝剑二钱择手lM刊mmol/I.pH=6.0)，称1.1)(5.282日Iftf.II主刽二饭(5.1.7)持n水1.JJII水至约950 ml.JlF I 11主(5.1.2)JIt，JpH=6.0.Jll;KJ:有至000 ml.O.15 Im iJ JJ虹(水相)过泌，超7!可悦气2 mn.3 mino 5.2.3 2%/iI!I!化钊!十0.5%氢氧化节Pi将被称i以2
5、0.0g I澳化i!P(5.1.5)、5.0g结识化例(5.1.3).JlI水定容军1000 ml.5.2.4 1，5%训l刽化钊+0.5%低化钊l济i怆称11)(15,0 g则主l化节1(5.1.6)、5.0g氢YL化制1(5.1.3),F I;)(乎乎至1000 ml.5.2 5;i1皇裕?在(JO%Ud:淑100ml.t 11主(5.1.1)，JTj水定容至1000 ml.。5.2 6 级氧化俐1在f(6mol/Ll称取氢氧化创(5.1.1)24日.)lJ7K):容至100ml.。5.2.7 氧化俐1和民(1mol/I.)，称取氮氧化俐(5.1.4)4 g.JlI;K;.:E存至100m
6、l.5.3 标准品5.3.1 辆代!比在4阪标叫1，1容illi(CI:lWI0087).5.3.2 IJ基刷代半!比氮限标叫um由(GI:lWI0088)5.3.3 IiiiWP硫氨酸标111溶液(CBWI0034)。5.4 标准溶液配制5.4.1 lij目代JJIt0C阪标111储备溶液.向他代j恍氨阪标1111有液(5.:l,l)2时，转入10mL容t.tJHi 1,HI7Jc定乎乎至JOml.。5.4.2 P幕-I，iIf半脱剑酸标刊Hi行备部液:将rp占-IiII代半脱氮般标111浴液(5，:l.2)2时，转入JOml.容制j鼠1.川1;)(定容至10ml.5.4.3 I训代1硫氮股
7、怀m储备浴副主:将晒代111硫MII主t，1浴被(5，3.3)2mL转入10ml.容td:瓶1-,JIoI7K 容.10 ml.。注此标ni储备悄lUl1 c冰箱1保fi.有效用IJJI个川.5.4.4，吸取5.4.J5.4.3的标111储备液各1.00 ml.于JOml.容f甘;并l巾，HI水定容，配JI Ih且说什f;Ji!l-I 竹01位。6 仪器设备6.1，:j放!HII原子炎光l段用仪(r!iI91离子交换丰1:;fll1，而空心阴极灯).6.2!;JJi ili 1I7K Iri平仪。6.3 分析天、|EA革址。01g 丰11感地0，0001 g.6.4 Il!1i:11j):仪或
8、pH-l-。6.5 添加!过泌放1rto注!，跄1所川Z应聘加1111、f!k杯均记以币1股市i!(VI,Til!i v*I 4)1.Jitl过夜J+IJj(iI洗干净.7 试验步骤7.1 试样保存f斗检、已检内iliII f(川irlz装在她Jtf Ix tH 7fi也装袋 11，放入C冰箱1保存。7.2 试样制备你11j(试样20mg(抑l(iflJ到O.1 m)二rtJJi蛋II;Kirtr仪(6.2)配套的内lrfi材、I!-J.JlI入1mI.6mol/1.盐酸浴液(5.2.1).,H皮纸l主l水filr仪1150 c水仰40min，7JeiIJIU!转移至小烧;j;f、小.月16
9、mol/L 过低化俐惰液(5.2.6)平11 mol/1.氧化俐部?在(5.2.7)训!ipH至7.5，转移到25ml.有t.tJll11,)J117Jc容j口IIO.45/.Lm泌脱过泌.1fil!l.同H才做引1:1实验。2 NY/1 3870-2021 7.3 标准曲线制作将ScCysMcScCys和5巳M凹的混合标lfi工作浴液(5.4.1)011.，1011.、201，1.、:l01.、10L、501，1.分jJIJ导人仪器，测定:r:t色谱曲幸.以Se含i甘为柏:坐标，岭ffifJt为纵坐标.Il作标准1111线。仪古拉条件参照附及A.I刷代氮占ln标斤il￥?自色i普|￥|见m.
10、J.;1:1的13.1。7.4 试样测定在与标fl系列浴J位相|司的实验条例下将10I，L 50 11.j非洲样llfl空白部液和试样溶液分川导人仪加.测定其附而积.以保riill，tIYI.i二刊.外标法止拙，州:lli117jc御自主t:普|￥|见肝j.;-R1:1 的巳208 试验数据处理俐蛋1.1l SeCys，、MeSeCy丙和1SeM凹的含tC以刷i十)校公式(l)计1:;制代J.:Ji阪总挝J.;丁样品1-SCCyS2、McSeCys,f11 ScMct 哥拉(以晒li)之平11，按公式(2)计算。(M-Mo)XV,XIOOO 岛、八=.E(1)川X V，1、.A=Xl+X2十X
11、3HH-.(2)主1X ScAA一-i样1I!由代氨基骸介茸的数Ij(以刷计).)y，位为汪汪克n千克(mg/kg);X,一二试样叶，ScCys，含M(I)数值(以晒计).单位为毫克创千克(mg/kg);X2 试样1MeSCys 1牙茧的数I I以牺计)，1yJ位jJ克钳千克(mg/kg);X:l 出样1SeMet;JTI(I数j(以刷计)，单位为运克1J千克(mg/kg);M式样，1I!lij代氨基阶质量的数Ij(以liiffili寸，单位为纳克(ng);M o 何一lT户;、II11耐iH基酸j贝忱的到(f(以刷i十)，J(l且为纳克(ng);川一一试样J.Jlltot数i(，单位为毫克(
12、mg);V,水解液体积的数Ij，单位为电刑(ml.);V 2.lt样体积的数值.单位为微)1-(1 1.);丁、M-I，rij代氨J击阪之.fll(以i耐i十)，单位为运先例千克(mg/kg)。结果以市复制:条例下获得的2次独立测定结架的3:术平均i1i表示，保附3位有效数字。9 精密度在重复刊-条件下获得的2次独立测试生JI果的绝对差值不大于n术平均值的10%，以大斗1术平均的10%(19Ni 已不超过5%为lit旺。3 NY/T 3870-2021 附录A(资料性)高效液相-原子荧光联用仪参考条件lIJJ放li才IJ)l子生光J是川仪liHIIBi(1.()分肉、组化物(I-IC)发生和原
13、子火光)W(MS)拍!IJ;条件见者八.1 0 附录自(资料性)晒代氨基酸标准溶液和晒蛋白水解液色i昔图NY/1 3870-2021 ScCy町、McScCy刊和SCMCI标IIU在浓的液机l包F，11￥1!hi.1冬IB.1，刷蛋白水Wf浓的液桐I(己的|到见附l当2。先j(Jlll皮，ml a】76 5田400 3创200 100。MeScCys&!Mct 23456789人rmn图11.1 ScCys，、MeSeCys和ScMcl标准溶液的液相色谱图荧光强度，m 900 8回700 6 5 400 300 200 100。ScMcl 2 3 4 5 6 7 8 9人rllln图8.2洒蛋白水解液的液相色谱图,FNON-ERHFZ峰1罔农业山版社:J版Cl t京市朝阳区友H占衍18J，J-怯(11111政编filL100125*.,l叶坦1:;wWV.ccap.CO)It京印刷一厂lll，:1J!华书JtfJt);发行所发:U各地新华bmt-t:f内.,(:IIJ!C:o.75 f数15千i一2021 1 10 J-J-It)i(第I执印刷x 2021年10JlIT1版书号16109.8729 定价24.00元,.71本880mmX1230mm 1/16 版权专有侵权必究举报电话(010)59194261 NY/T 3870-2021