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1、动物疫病口蹄疫监测实施方案一、监测目的了解口蹄疫病原感染分布情况及高风险区域的发病情况，跟踪监测病毒变异特点与趋势，查找传播风险因素。证明免疫无疫区状态。评估畜群免疫效果，掌握群体免疫状况。同时，开展猪塞内卡病毒A型（Seneca virus A，SVA）监测，评估危害性。二、监测对象猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物。三、监测范围全县。猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活畜交易市场、屠宰场、无害化处理厂等。注：散养户以一个自然村为一个监测采样的流行病学单元。四、监测时间免疫抗体监测：每半年进行一次集中监测，定点监测根据实际情况安排。病原监测：每半年进行一次集中监测，每季度进行一
2、次定点监测。同时，按照国家口蹄疫参考实验室具体采样时间安排，配合做好重点区域重点场所采样工作。五、监测方式（一）被动监测任何单位和个人发现猪、牛、羊、鹿等偶蹄动物或野生动物出现水泡、跛行、烂蹄等类似口蹄疫的症状，应及时向当地兽医主管部门、动物卫生监督机构和/或动物疫病预防控制机构报告，动物疫病预防控制机构应及时采样进行监测。（二）主动监测1.病原监测采用先抽取场群，在场群内再抽取个体的抽样方式开展监测采样。选择场群时要考虑猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活畜交易市场、屠宰场的比例。2.抗体监测选择场群时要综合考虑猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活
3、畜交易市场及屠宰场的比例。六、监测内容和数量重点选择辖区内种畜场、奶牛场和规模养殖场开展口蹄疫病原学检测和免疫抗体检测，每次每个场至少采集样品30份，不少于6场（村）次。在开展上述监测外，应开展月度常规监测，监测内容和数量根据实际情况确定。监测数据及时按程序上报监测信息系统。七、检测方法（一）病原检测对牛羊食道-咽部分泌物（OP液）、猪颌下淋巴结或扁桃体，采用RT-PCR方法或实时RT-PCR方法检测口蹄疫病原。（二）非结构蛋白抗体检测采用非结构蛋白（NSP）抗体ELISA方法进行检测。在免疫状况下，对NSP抗体检测阳性的，需进一步确认。可重复采样检测NSP抗体，根据抗体阳性率变化判断是否感染
4、病毒。具体方法是，在NSP首次监测2-4周后（期间不能进行免疫）进行二次采样检测（两次采样检测的动物要保持一致）。对NSP抗体阳性率等于或低于首次检测结果的，可排除感染。（三）免疫抗体检测猪免疫28天后，其他畜免疫21天后，采集血清样品进行免疫效果监测。O型口蹄疫抗体：液相阻断ELISA或正向间接血凝试验，合成肽疫苗采用VP1结构蛋白ELISA进行检测；A型口蹄疫抗体：液相阻断ELISA；（四）亚洲型口蹄疫抗体检测继续采用液相阻断ELISA检测亚洲I型口蹄疫抗体。各县（市、区）要结合动物免疫背景，绘制不同免疫群体抗体衰减曲线，对于可疑群体及时开展排查。（五）SVA检测1.血清检测：间接ELIS
5、A或竞争ELISA方法；2.病原检测：采用Real-time RT-PCR方法，结合病原分离及序列测定。八、判定标准（一）免疫合格个体1.液相阻断ELISA：牛、羊抗体效价27，猪抗体效价26；2.正向间接血凝试验：抗体效价26；3.VP1结构蛋白抗体ELISA：抗体效价25。（二）免疫合格群体免疫合格个体数量占群体总数的70%（含）以上。（三）可疑阳性个体1.免疫家畜非结构蛋白抗体ELISA检测阳性的；2.未免疫家畜血清抗体检测阳性的。（四）可疑阳性群体群体内至少检出1个可疑阳性个体的。（五）监测阳性个体牛羊的食道-咽部分泌物（O-P液），猪的颌下淋巴结或扁桃体用RT-PCR或实时RT-PCR检测，结果为阳性。（六）确诊阳性个体监测阳性个体经省级疫控机构实验室确诊，结果为阳性。（七）确诊阳性群体群体内至少检出1个确诊阳性个体的。（八）临床病例按照口蹄疫防治技术规范处置。- 5 -