《DNA的粗提取与分离.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《DNA的粗提取与分离.ppt（20页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、选修选修I I 专题专题5 5 课题课题1 1DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 二、基础知识二、基础知识 提取提取DNADNA的的方法方法1 1、提取生物大分子的基本思路、提取生物大分子的基本思路选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子或化学性质的生物大分子2 2、生物大分子、生物大分子主要指蛋白质、酶和核酸主要指蛋白质、酶和核酸3 3、提取、提取DNADNA的基本思路的基本思路利用利用DNADNA与与RNARNA、蛋白质和脂质等在物理和化蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取学性质方面的差异，提取DNADNA，去除
2、其他成分去除其他成分5 5、讨论：、讨论：思考在什么浓度下，思考在什么浓度下，思考在什么浓度下，思考在什么浓度下，DNADNADNADNA的的的的溶解度最小？溶解度最小？溶解度最小？溶解度最小？如何通过控制如何通过控制如何通过控制如何通过控制NaClNaClNaClNaCl溶溶溶溶液的浓度使液的浓度使液的浓度使液的浓度使DNADNADNADNA在盐溶液在盐溶液在盐溶液在盐溶液中中中中溶解或析出溶解或析出溶解或析出溶解或析出？思考题：思考题：DNADNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？DNA的提取原理的提取原理1DNADNA在氯化钠溶液中的溶解度，随着在氯化钠
3、溶液中的溶解度，随着氯化钠的浓度的变化而改变的氯化钠的浓度的变化而改变的思考题思考题2 2：利用什么原理来将利用什么原理来将DNADNA与蛋白质分离开？与蛋白质分离开？DNA的提取原理的提取原理2DNA不溶于酒精，不溶于酒精，而细胞中的某些蛋白而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。质则溶于酒精。DNA的提取原理的提取原理3DNADNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋蛋蛋蛋白白白白酶酶酶酶能能能能水水水水解解解解蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质，但是对但是对但是对但是对DNADNADNADNA没有影响没有影响没有影响没有影响大大大大多多多多数数数数蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质不不不不能能能能
4、忍忍忍忍受受受受6060606080808080C C C C的的的的高高高高温温温温，而而而而DNADNADNADNA在在在在80808080C C C C以上才会变性以上才会变性以上才会变性以上才会变性洗洗洗洗涤涤涤涤剂剂剂剂可可可可以以以以溶溶溶溶解解解解细细细细胞胞胞胞的的的的细细细细胞胞胞胞膜膜膜膜，去去去去除除除除脂脂脂脂质质质质和和和和蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质,但对但对但对但对DNADNADNADNA没有影响没有影响没有影响没有影响DNADNA的鉴定：的鉴定：思考题思考题3 3：依据什么原理来鉴定依据什么原理来鉴定DNADNA？DNADNA与二苯胺与二苯胺（沸水浴）（沸水浴）会染
5、成蓝色，因此，会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定二苯胺可以作为鉴定DNADNA的试剂的试剂 实验流程析出和鉴定析出和鉴定材料选取材料选取获得DNA滤液去杂质去杂质二、实验设计（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取（一）实验材料的选取（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含DNADNADNADNA的滤液的滤液的滤液的滤液讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？n思考思考:若是动物细胞，如何获取若是动物细胞，如何获取DNADNA滤液？滤液？2 2、植物细胞、植物细胞植植物物细细胞胞需需要要先先用用一一定定的的洗洗涤涤剂剂和和食
6、盐溶解细胞膜食盐溶解细胞膜n思考思考:若是植物细胞，如何获取若是植物细胞，如何获取DNADNA滤液？滤液？实例：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液讨讨论论：如如果果研研磨磨不不充充分分，会会对对实验结果产生怎样的影响？实验结果产生怎样的影响？（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质为为了了纯纯化化提提取取的的DNADNA需需要要将滤液作进一步处理将滤液作进一步处理讨讨论论：此此步步骤骤获获得得的的滤滤液液中中可可能含有哪些细胞成分？能含有哪些细胞成分？答答：可可能能含含有有核核蛋蛋白白、
7、多多糖糖和和RNA等等杂质杂质为为什什么么反反复复地地溶溶解解与与析析出出DNADNA，能能够够去去除除杂杂质质（四）（四）（四）（四）DNADNADNADNA的析出与鉴定的析出与鉴定的析出与鉴定的析出与鉴定DNADNA与二苯胺与二苯胺（沸水浴）（沸水浴）会染成蓝色，因此，会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定二苯胺可以作为鉴定DNADNA的试剂的试剂 鸡血细胞液中鸡血细胞液中鸡血细胞液中鸡血细胞液中DNADNA的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图防止血液凝防止血液凝固固为了去除破裂的细胞膜等物质。为了去除破裂的细胞膜等物质。2mol/L2mol/L鸡血细胞液
8、中鸡血细胞液中鸡血细胞液中鸡血细胞液中DNADNA的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图纱布过滤纱布过滤纱布过滤纱布过滤纱布过滤纱布过滤纱布过滤纱布过滤滤液滤液滤液滤液滤液滤液滤液滤液去除不溶于氯化钠溶液的杂质去除不溶于氯化钠溶液的杂质除去溶解在低盐溶液中的杂质。除去溶解在低盐溶液中的杂质。0.14mol/L(DNA0.14mol/L(DNA析出析出析出析出)5 5、过滤、过滤、过滤、过滤取纱布上的滤物取纱布上的滤物取纱布上的滤物取纱布上的滤物6 6、加冷酒精使、加冷酒精使、加冷酒精使、加冷酒精使DNADNA析出析出析出析出鸡血细胞液中鸡血细胞液中鸡血细胞液中
9、鸡血细胞液中DNADNA的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图的粗提取实验流程图除去溶解在酒精中的杂质。除去溶解在酒精中的杂质。7 7、DNADNA鉴定鉴定鉴定鉴定DNADNADNADNA与二苯胺与二苯胺与二苯胺与二苯胺（沸水浴）（沸水浴）（沸水浴）（沸水浴）会染成蓝色会染成蓝色会染成蓝色会染成蓝色24.(双选)下列有关实验的叙述，正确的是()A在DNA粗提取和鉴定实验中，可以用甲基绿代替二苯胺检测B用斐林试剂检测还原性糖时，可以用葡萄汁代替苹果或梨匀浆C在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时，可以用表皮细胞代替根尖细胞D平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法20112011年深圳一模年深圳一模BDBD正确的操作是正确的操作是实验实验成功的前提，下面是高中生物教材中有关成功的前提，下面是高中生物教材中有关实验实验操作操作简图简图。请请回答：回答：(1)若用图示中滤液C做“DNA的粗提取与鉴定”实验，则图中实验材料A可以是_ 等，研磨前加入的B是 。菜花(洋葱)洗涤剂和食盐