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1、甜菜素的合成途径:迄今为止,还未发现在同一种植物中甜菜素和花色素共存。甜菜素主要存在石竹目植物 中,这种独特的分子机理目前尚未查明。目前研究得出,甜菜素合成途径中最重要的三个酶 是酪氨酸酶、4,5多巴雌二醇双加氧酶和葡糖基转移酶。由图可知,多巴在4,5多巴雌二醇 双加氧酶基因的作用下形成4,5开环多巴,然后自发形成甜菜色素的关键生色团甜菜醛氨酸, 然后在经过一系列自发反应生成甜菜黄素。三色堇中DODA基因的合成途径:在转录组数据中发现了甜菜色素的关键基因酶的表达且表达量较高,这属于一个很奇特 的现象。所以为了进一步了解这个基因在三色堇中的作用及功能,对这个基因进行了克隆及 表达验证方面的研究。
2、4,5多巴基因的克隆研究:多巴基因最早是在真菌毒蝇伞中被成功克隆,高等植物中是在马齿范中被最先成功克 隆,有人利用基因枪技术将这个酶基因转进无甜菜素的花瓣中,证实产生了甜菜素,说明了 这个基因的重耍性,在拟南芥中也同样得到了证实。多重比对:由序列比对结果可知,三色堇中DODA基因属于第三类雌二醇双加氧基因家族(class III extradiol dioxygenase family),具有该基因家族具有的保守氨基酸序列,如金属离子结合位点 以及酶活性位点。发育树:结果表明这个基因与不产生甜菜素的植物关系更近,与产生甜菜素的植物关系更远。蛋白质结构预测:对其蛋白的疏水/亲水性进行预测发现氨基酸残基中分别在A 164位点疏水性最强 (1.822), A 106位点亲水性最强(-2.544),亲水氨基酸的数量多于疏水氨基酸,故推断其为亲 水性蛋白(左图)。Mean-s值为0.113,小于0.5。龙船花再生体系的建立:利用幼嫩叶片为外植体,首次成功建立了该花卉的再生体系。不定芽诱导率为23.7%, 不定芽进行继代培养,存活率为80.8%,生根率为30.5%。目前正在尝试更多配方和尝试悬 浮培养来提高其发芽率。当前科研成果:还有一篇中文文章在改,一篇英文文章在修改。