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1、免疫组织化学（实用篇）免疫组织化学（实用篇）(immunohistochemistryimmunohistochemistry)临床病理诊断中常用的抗体简介临床病理诊断中常用的抗体简介 人体组织细胞分类人体组织细胞分类上皮细胞：包括鳞状上皮，腺上皮，尿路上皮。上皮细胞：包括鳞状上皮，腺上皮，尿路上皮。间叶组织：包括脂肪，肌肉，血管，纤维结缔组织，骨间叶组织：包括脂肪，肌肉，血管，纤维结缔组织，骨和软骨组织，间皮。和软骨组织，间皮。神经组织：神经元，胶质细胞，神经纤维。神经组织：神经元，胶质细胞，神经纤维。淋巴造血：淋巴细胞，粒细胞，浆细胞，单核细胞。淋巴造血：淋巴细胞，粒细胞，浆细胞，单核细胞
2、。内分泌和神经内分泌组织：甲状腺，肾上腺，垂体，胰内分泌和神经内分泌组织：甲状腺，肾上腺，垂体，胰腺的内分泌腺，各器官的神经内分泌细胞等腺的内分泌腺，各器官的神经内分泌细胞等其他：黑色素细胞，性腺其他：黑色素细胞，性腺常用上皮性标记物常用上皮性标记物 l细胞角蛋白（细胞角蛋白（cytokeratin,CKcytokeratin,CK）l上皮膜抗原（上皮膜抗原（epithelial membrane antigen,EMAepithelial membrane antigen,EMA）l癌胚抗原（癌胚抗原（carcinoembryoniccarcinoembryonic antigen,CEAa
3、ntigen,CEA）l其他：其他：villinvillin，Moc-31Moc-31，MUCMUC（粘蛋白）系列等（粘蛋白）系列等CytokeratinCytokeratin（keratinkeratin或或CKCK）上皮细胞的骨架形成蛋白（中间丝），上皮细胞的骨架形成蛋白（中间丝），维持上皮细胞的结构和功能维持上皮细胞的结构和功能分为分为I I型和型和II II型型(酸性和碱性或中性），酸性和碱性或中性），编码基因分别位于编码基因分别位于17q21.217q21.2和和12q13.1312q13.13，共，共5454个基因个基因表达方式与组织类型和细胞分化程度有表达方式与组织类型和细胞分化
4、程度有关，具有高度的特异性关，具有高度的特异性蛋白具有不同的分子量和等电点蛋白具有不同的分子量和等电点细胞中细胞中keratinkeratin常成对出现（酸性和碱常成对出现（酸性和碱性配对出现）性配对出现）根据氨基酸序根据氨基酸序列，将列，将KeratinKeratin按按分子量和等电点分子量和等电点进行二维分类进行二维分类CKCK抗体抗体常用的常用的CKCK抗体抗体AE1/AE3:AE1/AE3:（CK panCK pan）l最常用，胞浆呈细丝状阳性最常用，胞浆呈细丝状阳性l正常上皮细胞阳性表达，肝细胞阴性。正常上皮细胞阳性表达，肝细胞阴性。l在其他肿瘤，如小细胞癌，尿路上皮癌，室管膜瘤，胸
5、在其他肿瘤，如小细胞癌，尿路上皮癌，室管膜瘤，胸腺瘤，间皮瘤，上皮样肉瘤，上皮样血管内皮瘤，平滑腺瘤，间皮瘤，上皮样肉瘤，上皮样血管内皮瘤，平滑肌肉瘤，滑膜肉瘤等常呈阳性表达肌肉瘤，滑膜肉瘤等常呈阳性表达常用的常用的CKCK抗体抗体CK7CK7和和CK20CK20：分子量为分子量为54KD,54KD,正常乳腺，肺，尿路上皮阳性表达，胃正常乳腺，肺，尿路上皮阳性表达，胃肠道，肝细胞，前列腺阴性表达肠道，肝细胞，前列腺阴性表达主要用于乳腺癌，肺腺癌与胃肠道癌的诊断与鉴别诊断主要用于乳腺癌，肺腺癌与胃肠道癌的诊断与鉴别诊断胰腺癌，胆管癌，卵巢和子宫内膜腺癌，尿路上皮癌阳胰腺癌，胆管癌，卵巢和子宫内膜
6、腺癌，尿路上皮癌阳性表达。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌阴性表达性表达。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌阴性表达与与CK20CK20和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。值。常用的常用的CKCK抗体抗体CK7CK7和和CK20CK20：分子量分子量46KD46KD，正常胃肠道，尿路上皮，正常胃肠道，尿路上皮，MerkelMerkel细胞阳性表细胞阳性表达，肝细胞，乳腺，肺阴性表达达，肝细胞，乳腺，肺阴性表达主要用于胃肠道腺癌，卵巢粘液性癌，主要用于胃肠道腺癌，卵巢粘液性癌，MerkelMerkel细胞癌的诊断细胞癌的诊断鳞癌，甲状腺肿瘤，胸腺瘤阴性表达鳞
7、癌，甲状腺肿瘤，胸腺瘤阴性表达胆道和胰管的腺癌，小肠类癌，前列腺和间皮阳性表达胆道和胰管的腺癌，小肠类癌，前列腺和间皮阳性表达与与CK7CK7和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。和其他抗体合用对判断腺癌的来源具有重要价值。常用的常用的CKCK抗体抗体CK5CK5/C/CK6K6：l分子量为分子量为58KD58KD和和56KD56KD的角蛋白，存在于鳞状上皮、导管上的角蛋白，存在于鳞状上皮、导管上皮的基底细胞、肌上皮细胞和间皮细胞，腺上皮不表达皮的基底细胞、肌上皮细胞和间皮细胞，腺上皮不表达l用于鳞癌和腺癌别，间皮瘤和腺癌的鉴别用于鳞癌和腺癌别，间皮瘤和腺癌的鉴别l导管上皮良恶性增生的鉴
8、别导管上皮良恶性增生的鉴别34BE1234BE12（CKHCKH）:高分子量细胞角蛋白，前列腺基高分子量细胞角蛋白，前列腺基底细胞标记，用于前列腺癌的诊断。底细胞标记，用于前列腺癌的诊断。CK19:CK19:40KD40KD的角蛋白，在单层上皮和间皮中表达，在的角蛋白，在单层上皮和间皮中表达，在肝细胞不表达，用于鉴别肝细胞癌和胆管细胞癌；甲肝细胞不表达，用于鉴别肝细胞癌和胆管细胞癌；甲状腺肿瘤中，甲状腺乳头状癌常阳性表达，良性和其状腺肿瘤中，甲状腺乳头状癌常阳性表达，良性和其他癌很少表达。他癌很少表达。CK14CK14：50KD50KD的角蛋白，在复层上皮表达，是鳞状上皮的角蛋白，在复层上皮表
9、达，是鳞状上皮的主要标记物。的主要标记物。常用的常用的CKCK抗体抗体 间叶组织的标记物间叶组织的标记物 波形蛋白（波形蛋白（vimentinvimentin，VIMVIM）肌组织标记物：肌组织标记物：DesminDesmin（结蛋白）（结蛋白）,actinactin（肌动蛋（肌动蛋白）白）,myogeninmyogenin（肌浆蛋白），（肌浆蛋白），MyoD1MyoD1（肌调节蛋白）（肌调节蛋白）等等脉管标记：血管内内皮细胞的标记物：脉管标记：血管内内皮细胞的标记物：CD34,CD31,CD34,CD31,淋淋巴管巴管D2-40D2-40组织细胞的标记物：组织细胞的标记物：CD68,CD16
10、3,CD68,CD163,等等间皮细胞的标记物：间皮细胞的标记物：calretinincalretinin，mesothelialmesothelial等等用于鉴别软组织肿瘤的来源用于鉴别软组织肿瘤的来源淋巴造血系统的标记淋巴造血系统的标记 淋巴造血组织，尤其淋巴细胞在其发育和分化过淋巴造血组织，尤其淋巴细胞在其发育和分化过程中能形成许多分化性抗原，应用这些分化性抗原的程中能形成许多分化性抗原，应用这些分化性抗原的特异性单克隆抗体能区分出免疫表型不同的细胞系，特异性单克隆抗体能区分出免疫表型不同的细胞系，而且还能区分出同一细胞系的不同亚型和不同分化阶而且还能区分出同一细胞系的不同亚型和不同分化
11、阶段的细胞群，因此可以利用此特性来诊断和分类恶性段的细胞群，因此可以利用此特性来诊断和分类恶性淋巴瘤和白血病。淋巴瘤和白血病。淋巴造血系统的标记淋巴造血系统的标记白细胞共同抗原（白细胞共同抗原（leucocyteleucocyte common common antigen,LCA,CD45antigen,LCA,CD45）免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin(immunoglobulin IgIg)全全B B细胞标记物细胞标记物:CD20,CD79a,PAX5,Bob1:CD20,CD79a,PAX5,Bob1等等全全T T细胞标记物：细胞标记物：CD3,CD43,CD5,CD
12、7,CD2CD3,CD43,CD5,CD7,CD2等等T T淋巴细胞亚群标记物：淋巴细胞亚群标记物：CD4,CD8CD4,CD8粒细胞和单核粒细胞和单核巨噬细胞相关标记物巨噬细胞相关标记物:MPO,CD34,CD68:MPO,CD34,CD68等等浆细胞标记：浆细胞标记：CD38CD38，CD138CD138其他：其他：CD30,TDT,CD15CD30,TDT,CD15，CD56CD56，ALKALK，MUM1MUM1神经组织标记物神经组织标记物 胶质纤维酸性蛋白胶质纤维酸性蛋白 (glialglial fibrillaryfibrillary acidic protein acidic p
13、rotein GFAP)GFAP)S-S-lOOlOO蛋白蛋白(S(S100 Protein)100 Protein)神经元特异性烯醇酶神经元特异性烯醇酶 (Neuron Specific(Neuron Specific EnolaseEnolase，NSE)NSE)髓磷脂碱性蛋白髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein(myelin basic protein，MBP)MBP)神经内分泌系统标记物神经内分泌系统标记物 lNSE(NeuronNSE(Neuron Specific Specific EnolaseEnolase,神经元特异性烯醇酶神经元特异性烯醇酶)lCgA(c
14、hromograninCgA(chromogranin A A 嗜铬颗粒蛋白嗜铬颗粒蛋白A)A)lSyn(synaptophysinSyn(synaptophysin 突触囊泡蛋白突触囊泡蛋白)lCD56CD56器官或组织特异性抗原标记物器官或组织特异性抗原标记物 l前列腺标记物：前列腺标记物：PSA PSA，PSAPPSAP，PSMAPSMA，P504sP504sl甲状腺标记物：甲状腺标记物：TGTG，CTCT，TTF-1TTF-1l甲状旁腺：甲状旁腺：PTHPTHl黑色素细胞标记物：黑色素细胞标记物：MB45MB45，S100S100，MelanAMelanAl肺腺癌的标记物：肺腺癌的标记
15、物：TTF-1TTF-1，SP-ASP-A和和B B，NapsinNapsin A Al肝细胞癌标记物：肝细胞癌标记物：Hep-1Hep-1l乳腺：乳腺：MammaglobioMammaglobio，GCDFP15GCDFP15l结肠：结肠：CDX2CDX2，B-B-catenincateninl宫颈癌：宫颈癌：P16P16病原体的标记病原体的标记 EBVEBVHPVHPVHBsAgHBsAg 和和HBCAgHBCAgMCV MCV 与肿瘤预后相关的标记物lKi67Ki67：核阳性，与肿瘤增殖相关，细胞周期中除：核阳性，与肿瘤增殖相关，细胞周期中除G0G0期细期细胞外，其余细胞均表达。肿瘤阳性
16、细胞数越高，预后越胞外，其余细胞均表达。肿瘤阳性细胞数越高，预后越差。差。lP53P53：核阳性，肿瘤抑制基因，突变型：核阳性，肿瘤抑制基因，突变型P53P53蛋白稳定表达，蛋白稳定表达，P53P53蛋白阳性表明肿瘤预后差。蛋白阳性表明肿瘤预后差。lnm23nm23：胞浆阳性，抗转移基因，其表达降低与肿瘤的高：胞浆阳性，抗转移基因，其表达降低与肿瘤的高转移能力，复发相关。转移能力，复发相关。与肿瘤多药耐药相关的标记物Her-2Her-2ERCC1ERCC1PRM1PRM1BRCA1BRCA1作用机制作用机制抗凋亡，参与调抗凋亡，参与调节节P13K/AKP13K/AK途径和途径和MAPKMAPK
17、激活途径激活途径过表达使停滞在过表达使停滞在G2/MG2/M期的损伤期的损伤DNADNA迅速恢复迅速恢复DNADNA修复的限速修复的限速酶，吉西他滨的酶，吉西他滨的结合位点结合位点高表达使细胞修高表达使细胞修复能力增强复能力增强阳性部位阳性部位胞膜胞膜胞核胞核胞浆胞浆胞浆胞浆/核核判断标准判断标准 +耐药药物耐药药物环磷酰胺环磷酰胺三苯氧胺三苯氧胺氨甲喋呤氨甲喋呤顺氯氨铂顺氯氨铂吉西他滨吉西他滨/顺铂顺铂顺铂顺铂与肿瘤多药耐药相关的标记物MDR1MDR1GSTGSTTSTSMDM2MDM2作用机制作用机制药泵作用药泵作用解毒作用解毒作用解毒作用解毒作用转化作用转化作用阳性部位阳性部位胞膜和浆胞
18、膜和浆胞浆胞浆胞浆胞浆胞浆胞浆判断标准判断标准 +10%10%耐药药物耐药药物恩环类恩环类紫衫类紫衫类长春花碱（新碱）长春花碱（新碱）顺铂顺铂恩环类恩环类氮芥氮芥环磷酰胺环磷酰胺5-FU5-FU多药耐药多药耐药与肿瘤靶向药物有关的免疫标记物作用靶点作用靶点肿瘤类型肿瘤类型TratugumabTratugumab(赫赛汀）赫赛汀）HER2HER2乳腺癌和胃癌乳腺癌和胃癌CetuximabCetuximab（艾比妥）（艾比妥）EGFREGFR结肠癌，非腺癌结肠癌，非腺癌BevacizumabBevacizumab（阿瓦斯汀）（阿瓦斯汀）VEGFVEGF转移性大肠癌，肾癌转移性大肠癌，肾癌Lmati
19、nibLmatinib（格列卫）（格列卫）C-KitC-Kit胃肠道间质瘤，慢粒胃肠道间质瘤，慢粒RituximabRituximab（美罗华）（美罗华）CD20CD20淋巴瘤淋巴瘤免疫组织化学在外科病理诊断中的应用免疫组织化学在外科病理诊断中的应用免疫组织化学在外科病理诊断中的应用免疫组织化学在外科病理诊断中的应用恶性肿瘤性质恶性肿瘤性质?癌组织的起源癌组织的起源?良性还是恶性良性还是恶性?肿瘤是原位还是侵袭性肿瘤是原位还是侵袭性?肿瘤分类肿瘤分类?癌的预后（包括分期）癌的预后（包括分期）决定治疗的靶向决定治疗的靶向其它方面其它方面 .未分化恶性肿瘤的性质未分化恶性肿瘤的性质?最佳首选的抗体
20、组合方案：最佳首选的抗体组合方案：CK-panCK-pan（如如MNF-116MNF-116），），或鸡尾酒调制的或鸡尾酒调制的CKCK抗体抗体 （上皮性肿瘤）（上皮性肿瘤）LCALCA（淋巴瘤）淋巴瘤）S100S100蛋白（恶性黑色素瘤，虽然一些癌会阳性蛋白（恶性黑色素瘤，虽然一些癌会阳性表达）表达）恶性肿瘤的性质恶性肿瘤的性质LCALCACytokeratinCytokeratinS100S100淋巴瘤淋巴瘤+*+*-癌癌-+-/+-/+恶性黑色素瘤恶性黑色素瘤-+肉瘤肉瘤-（有时（有时+）-/+-/+一些淋巴瘤一些淋巴瘤 LCA LCA 阴性表达阴性表达,尤其是间变性大细胞性淋巴瘤尤其是
21、间变性大细胞性淋巴瘤和淋巴母细胞性淋巴瘤和淋巴母细胞性淋巴瘤 儿童小圆细胞肿瘤的性质儿童小圆细胞肿瘤的性质淋巴瘤淋巴瘤/白血病白血病:LCA+,CD99+/LCA+,CD99+/横纹肌肉瘤横纹肌肉瘤:DesminDesmin+,MyoD1+,+,MyoD1+,myogeninmyogenin+EwingEwing肉瘤肉瘤/PNET:CD99+,PNET:CD99+,SynSyn /+/+神经母细胞瘤神经母细胞瘤:CD99CD99,SynSyn+,NB84a+,NB84a+促结缔组织生成性小细胞肿瘤促结缔组织生成性小细胞肿瘤:CK+,CK+,DesminDesmin+,+,WT1+WT1+癌可能
22、的起源癌可能的起源较常见的临床情况：较常见的临床情况：淋巴结或其它部位不明起源的转移癌淋巴结或其它部位不明起源的转移癌卵巢腺癌，怀疑为胃肠道癌转移卵巢腺癌，怀疑为胃肠道癌转移膀胱腺癌，怀疑为侵犯膀胱腺癌，怀疑为侵犯/转移的前列腺癌或结肠癌转移的前列腺癌或结肠癌有结肠癌病史的患者肺部有一孤立性结节：结肠癌有结肠癌病史的患者肺部有一孤立性结节：结肠癌转移还是新的肺原发性肿瘤？转移还是新的肺原发性肿瘤？不明起源癌的免疫组织化学应用不明起源癌的免疫组织化学应用器官特异性标记物甲状腺：Thyroglobulin（在100%滤泡和乳头状癌+）TTF-1 Calcitonin（在90%髓样癌+）前列腺:PS
23、A女性生殖道：CA125（黏液型常常阴性；间皮瘤和有时肺、乳腺及胰胆管腺癌会表达阳性）不明起源癌的免疫组织化学应用不明起源癌的免疫组织化学应用器官特异性标记物肺：TTF-1（80%腺癌阳性）乳腺：BRST-2/GCDFP-15（50%病例阳性；但涎腺和汗腺也会阳性）肝：HEP-1（90%阳性）肠：CDX-2（100%一致性强阳性）膀胱：Uroplakin（50%阳性）应用特殊的应用特殊的CKCK抗体：抗体：不明起源的腺癌不明起源的腺癌CK7 和 CK20 都是非器官特异性标记物，但对腺癌的起源判断十分有用 CK 7CK 7CK20CK20CK7+CK20+CK7+CK20+-女性生殖道黏液腺癌
24、女性生殖道黏液腺癌-一些胃癌一些胃癌-胰腺癌胰腺癌-胆管癌胆管癌CK7+CK20 CK7+CK20-各种腺癌各种腺癌-肺癌肺癌-乳腺癌乳腺癌-女性生殖道癌女性生殖道癌CK7 CK7 CK20+CK20+-胃肠腺癌胃肠腺癌CK7 CK7 CK20 CK20-前列腺癌前列腺癌-肾细胞癌肾细胞癌-肝细胞癌肝细胞癌举例：举例：CK7CK7和和CK20CK20联合应用：联合应用：3535岁女性，左颈淋巴结肿大，活检提示为转移性腺癌，岁女性，左颈淋巴结肿大，活检提示为转移性腺癌，CTCT扫描未发现原发灶，免疫组化标记显示肿瘤细胞表扫描未发现原发灶，免疫组化标记显示肿瘤细胞表达达CK7CK7（-），），CK
25、20(+)CK20(+)，CDX2CDX2（+），提示结直肠来），提示结直肠来源，肠镜检查在横结肠发现源，肠镜检查在横结肠发现12mm12mm的病灶，活检证实的病灶，活检证实为腺癌。为腺癌。不明起源的鳞癌或鳞样癌中的不明起源的鳞癌或鳞样癌中的免疫组织化学应用免疫组织化学应用因为不同部位的鳞状细胞或鳞状细胞癌并不显示其独特的免疫表型，鉴别较困难CD5：阳性支持胸腺起源CK20：阳性提示为膀胱的移行细胞癌不明起源的小细胞癌中不明起源的小细胞癌中免疫组织化学的应用免疫组织化学的应用CK20：Merkels 细胞癌阳性表达TTF-1：90%肺小细胞癌阳性表达，但在肺外的小细胞癌也会阳性（40%）卵巢腺
26、癌：原发还是肠起源卵巢腺癌：原发还是肠起源?卵巢起源卵巢起源肠起源肠起源CK7CK7+CK20CK20(但常会黏液腺癌阳性但常会黏液腺癌阳性表达表达)+CDX-2CDX-2(但黏液型可以阳性但黏液型可以阳性)+膀胱活检腺癌：膀胱活检腺癌：原发，前列腺还是结直肠起源原发，前列腺还是结直肠起源?膀胱腺癌膀胱腺癌前列腺癌前列腺癌结直肠腺癌结直肠腺癌CK7CK7+(65-80%)+(65-80%)CK20CK20+(50-85%)+(50-85%)+PSAPSA+CDX-2CDX-2+(80%)+(80%)+-catenin-catenin (细胞核细胞核)+肺腺癌：原发还是结直肠起源肺腺癌：原发还是
27、结直肠起源?肺起源肺起源结直肠起源结直肠起源CK7CK7+CK20CK20+TTF-1TTF-1+CDX-2CDX-2+肿瘤良恶性鉴别肿瘤良恶性鉴别在以下一些情况形态学诊断困难：在活检组织中挤压变形的细胞是癌细胞还是正常的淋巴细胞?黏膜活检中藏有癌细胞吗?增殖的细胞是良性增生还是恶性肿瘤?人为挤压的活检标本人为挤压的活检标本有些活检（如支气管活检）显示人为挤压或烧灼（小细胞癌常见）：不能确认失常的细胞是否为癌细胞若 CK 阳性的非正常上皮细胞存在于一定的部位（如间质）或以某种组织结构（如浸润性条索）存在则可诊断为癌不需再次活检就可作出诊断鼻咽部活检：有没有癌鼻咽部活检：有没有癌?对部分鼻咽癌（
28、NPC）病例诊断较难，因为肿瘤细胞被大量的淋巴细胞和浆细胞所掩盖（淋巴上皮癌样）CK-pan 染色:仔细观察异常的阳性表现，如在完整的黏膜组织中有不规则的岛状、带状或单个分散的阳性细胞（正常仅表面及隐窝上皮细胞CK+）胃活检：是弥漫型癌胃活检：是弥漫型癌?胃活检可能有不易察觉的弥漫性癌；对印戒细胞癌和黏液细胞癌的鉴别可能困难CK-pan染色：存在于固有膜中异常部位（正常没有CK+的细胞）和以异常结构（单个或索状细胞）存在的肿瘤细胞可被来辩认出来浆膜腔积液或活检：异常细胞浆膜腔积液或活检：异常细胞是癌细胞还是反应性间皮细胞是癌细胞还是反应性间皮细胞?浆膜腔积液或活检中的一些异常细胞很难确定是癌细
29、胞浆膜腔积液或活检中的一些异常细胞很难确定是癌细胞还是反应性间皮细胞还是反应性间皮细胞免疫组织化学的应用免疫组织化学的应用：BerEP4 BerEP4 或或 MOC-31MOC-31：阳性倾向为癌阳性倾向为癌TTF-1TTF-1：肺癌表达阳性肺癌表达阳性CalretininCalretinin：阳性倾向为间皮细胞阳性倾向为间皮细胞反应性淋巴组织增生还是淋巴瘤反应性淋巴组织增生还是淋巴瘤?诊断一个淋巴瘤须符合以下条件：诊断一个淋巴瘤须符合以下条件：异常免疫结构异常免疫结构侵袭性侵袭性/破坏性的依据破坏性的依据异常的免疫表型异常的免疫表型正常免疫结构正常免疫结构 （反应性淋巴组织：淋巴结或结外）（
30、反应性淋巴组织：淋巴结或结外）B B 淋巴细胞淋巴细胞(CD20+)CD20+)形成的结节形成的结节T T 淋巴细胞淋巴细胞(CD3+)CD3+)；仅孤立的小群细胞或仅孤立的小群细胞或小群小群 CD20+CD20+细胞细胞表明表明 B B 细胞淋巴瘤的异常免疫结构细胞淋巴瘤的异常免疫结构B B 淋巴细胞滤泡淋巴细胞滤泡 （CD20+CD20+）弥漫成片弥漫成片CD20+CD20+的的B B淋巴细胞淋巴细胞*异常免疫表型不适用于异常免疫表型不适用于T T细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤,因为反应性病变会有成片因为反应性病变会有成片的的T T淋巴细胞淋巴细胞异常的免疫表型：异常的免疫表型：B B 淋巴细胞淋巴
31、细胞免疫球蛋白限制性轻链正常不表达或只表达少数B细胞的标记的异常表达CD5CD43Cyclin D1Bcl-2 在生发中心细胞表达未成熟细胞标记物（TdT）阳性表达属异常免疫表型，须与属异常免疫表型，须与 CD3CD3染色结果染色结果比较相比较比较相比较异常的免疫表型：异常的免疫表型：T T 淋巴细胞淋巴细胞T细胞亚型的异常表达：CD4+CD8+或 CD4 CD8 全T细胞标记的丢失 CD2、CD3、CD5、CD7正常不表达或仅少数T细胞表达的标记的表达：ALK、CD56、-T 细胞受体未成熟细胞标记物（TdT）阳性表达乳腺：导管增生或导管原位癌乳腺：导管增生或导管原位癌?导管增生与DCIS很
32、难鉴别-这对病人的治疗非常关键在芯针穿刺中更加困难免疫组化方法：高分子量 CK（如 34E12）在良性病变强阳性表达，但在 DCIS 通常阴性ER 在良性病变中通常呈局灶性阳性表达，而在低度DCIS 呈弥漫强阳性表达，提示为克隆（肿瘤）性过程原位癌或浸润性癌原位癌或浸润性癌?在腺管周围有基底或肌上皮细胞的器官，此问题已能够解决，如乳腺、前列腺、涎腺在原位病变中，仍然有完整的基底或肌上皮细胞围绕，虽然有时拉长或稀疏了，而浸润性病变周围缺乏这些细胞乳腺的原位癌或浸润性癌乳腺的原位癌或浸润性癌?Actin、calponin 或 p63能清晰地显示乳腺肌上皮细胞硬化性腺病与小管癌的鉴别小叶癌化的导管内
33、癌/硬化性腺病还是真正的浸润性癌?前列腺原位癌还是浸润性癌前列腺原位癌还是浸润性癌?34E12、CK14或 p63能清晰地显示基底细胞PIN还是前列腺浸润性癌?拥挤或看上去不寻常的腺泡病灶：良性（如硬化性腺病或腺病）还是前列腺癌淋巴瘤的分类淋巴瘤的分类由于现代淋巴瘤分类需要免疫组织化学支持，因此应该应用免疫组化染色标记 B B祖细胞祖细胞前前B B细胞细胞未成熟的未成熟的B B细胞细胞成熟的成熟的B B细胞细胞激活的激活的 B B 细胞细胞浆细胞浆细胞前体细胞前体细胞;非抗原依赖型非抗原依赖型初始初始 B B细胞细胞;非抗原依赖型非抗原依赖型生发中心和标志生发中心和标志;抗原依赖型抗原依赖型T
34、dTTdTCD20,CD22CD20,CD22CD19,PAX5CD19,PAX5CD79aCD79aCD10CD10Bcl-6Bcl-6CD138CD138细胞浆细胞浆 CD22CD22淋巴瘤分类淋巴瘤分类CD20 CD20 和和 CD3 CD3 组合组合CD20+CD20+B B细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤;必要时增加必要时增加其它标记物染色其它标记物染色CD3+CD3+T T或或NKNK细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤;如需要可增加如需要可增加其它标记物染色其它标记物染色（如（如CD56,CD30CD56,CD30）CD20-CD20-CD3-CD3-非淋巴造血系统肿瘤非淋巴造血系统肿瘤?浆细胞瘤浆细胞瘤?
35、浆母细胞性淋巴瘤浆母细胞性淋巴瘤?T T 细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤?淋巴母细胞性淋巴瘤淋巴母细胞性淋巴瘤?内分泌肿瘤的分类内分泌肿瘤的分类检测激素产物胰岛细胞瘤：分泌胰岛素的肿瘤很少为恶性，而分泌胃泌素或胰高血糖素的肿瘤常为恶性垂体腺瘤：高泌乳素血症是由泌乳素瘤（肿瘤细胞prolactin+）还是由于泌乳素抑制因子紊乱刺激泌乳素分泌的另一类肿瘤软组织肿瘤的分类软组织肿瘤的分类标记物是有限的纤维组织细胞瘤没有可靠的标记物S100：神经鞘膜肿瘤(良性：弥漫；恶性：片状或甚至阴性)EMA：神经外周细胞瘤,滑膜肉瘤Actin，desmin：肌和肌纤维母细胞肿瘤Cytokeratin：滑膜肉瘤、上皮样肉瘤、
36、横纹肌样瘤软组织肿瘤的分类软组织肿瘤的分类CD31：血管肿瘤CD34：血管肿瘤、孤立性纤维性肿瘤、隆突性皮肤纤维肉瘤、血管周细胞瘤、梭形细胞脂肪瘤、上皮样肉瘤CD99：Ewings肉瘤/PNETHMB45：血管周上皮样细胞肿瘤重要的特异性标记物，如血管平滑肌脂肪瘤、淋巴管肌瘤病、糖瘤肝脏肿瘤的分类肝脏肿瘤的分类是肝细胞肝癌（HCC）还是上皮样血管平滑肌脂肪瘤HCC最好的标记物是HEP-1（阳性 90%）HMB-45标记上皮样血管平滑肌脂肪瘤性腺肿瘤的分类性腺肿瘤的分类支持性索肿瘤诊断的几种标记物：InhibinCD99 Melan-A/MART-1 生殖细胞肿瘤标记物：PLAPc-kit/CD
37、117胸膜起源的恶性肿瘤分类胸膜起源的恶性肿瘤分类鉴别间皮瘤与腺癌非常困难支持间皮瘤诊断的标记Calretinin高分子量CK（如CK5/6）WT1支持腺癌诊断的标记BerEP4（尽管在间皮瘤中偶尔也有阳性表达）MOC-31TTF-1（肺源性腺癌）肿瘤的预后判断：预后因子肿瘤的预后判断：预后因子激素受体，如 ER/PR+在乳腺癌中提示良好预后增殖标记物（Ki67）是某些类型肿瘤的预后因子癌基因及抑癌基因产物，c-erbB2,Rb,p16,p21,p27,ALK1肿瘤的预后判断：预后因子肿瘤的预后判断：预后因子在某些淋巴瘤中，免疫组化标记可以提供预后信息高Ki67表达与套细胞淋巴瘤的不良预后有关
38、间变性大细胞淋巴瘤：ALK+者预后好于ALK-者原发性系统性原发性系统性 ALCLALCL的总体生存率的总体生存率(FaliniFalini et al,1999)et al,1999)0510年ALCL,ALK+100%50%ALCL,ALK-肿瘤预后因素：病变范围肿瘤预后因素：病变范围 由于有些肿瘤呈弥漫性生长方式而且细胞较小（与间由于有些肿瘤呈弥漫性生长方式而且细胞较小（与间质细胞相似），因此很难确定其病变范围，如弥漫性胃癌、质细胞相似），因此很难确定其病变范围，如弥漫性胃癌、乳腺小叶癌。乳腺小叶癌。CK-panCK-pan能够显示所有肿瘤细胞能够显示所有肿瘤细胞肿瘤预后因素：病变范围肿
39、瘤预后因素：病变范围在肿瘤切除标本中，由于切缘烧灼后的出现的假象，很难判断切缘挤压的细胞是肿瘤细胞还是炎症细胞，标记CK-pan可以解决这一问题肿瘤预后因素：隐匿性转移的分期肿瘤预后因素：隐匿性转移的分期淋巴结和骨髓微转移通常提示预后差对形态学上阴性的前哨淋巴结，应常规应用免疫染色：乳腺癌使用 CK黑色素瘤使用 S100 或 HMB45前哨淋巴结阳性提示应进行淋巴结清扫确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子针对肿瘤细胞已知畸变或特异性的生物学特征的靶向治疗方法日益增多靶向治疗费用常常较高，所以判断肿瘤是否会对治疗有反应是非常重要的需要明确是否有相关靶分子的表达免疫染色的可靠性和可重复性至关重要（阳性
40、/阴性和染色强度）确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子乳腺癌：激素受体（ER,PR）激素（如 Tamoxifen）用于乳腺癌治疗已有相当长的时间了ER/PR阳性表达的肿瘤比阴性更敏感确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子抗-CD20（Rituximab）：愈来愈多地用于 B 细胞淋巴瘤和结节性淋巴细胞为主型Hodgkins淋巴瘤的治疗只有表达 CD20有反应治疗后，残余或复发的肿瘤会出现 CD20 失表达（抗-CD20 不再有效）确定治疗的靶分子确定治疗的靶分子 抗c-erbB2（Herceptin,Trastuzumab）已在表达、尤其是强阳性表达c-erbB2 的乳腺癌病人有效。确定治疗的靶分子确定
41、治疗的靶分子STI-571（Gleevec,Imatinib），是酪胺酸激酶受体抑制剂，对胃肠间质瘤治疗有效显然在进行治疗前须确证c-kit/CD117的阳性表达肿瘤学家常要求病理学家对各种肉瘤进行 c-kit 染色，希望对阳性病例进行 STI-571 治疗决定治疗靶分子决定治疗靶分子抗表皮生长因子受体（anti-EGFR,Gefitinib）：应用在肺癌、头颈部癌及一些其它类型的癌的治疗EGFR 正常表达在上皮细胞，通常在癌组织中强阳性表达证实诊断证实诊断 有时根据形态学特征已确定或几乎确定诊断，但因为病变罕见或必需免疫组织化学证实时，要做一些有针对性、有限的免疫组化染色。证实诊断证实诊断某
42、些病变的诊断可得以证实:Rosai-Dorfman 疾病（S100 蛋白）郎格罕氏细胞组织细胞增生症（S100 蛋白,CD1a）胃肠道间质瘤（c-kit/CD117）类癌（Syn/CgA）感染,如 CMV,疱疹,肺孢子囊虫,弓形虫病例1 女，36岁，临床有轻度接触性出血症状，宫颈活检，外院怀疑低分化鳞形细胞癌诊断：（宫颈活检）：慢性宫颈炎伴淋巴滤泡形成，局灶性鳞状上皮呈CIN改变，建议临床随访。免疫标记：“异型细胞”表达CK(-),LCA(+),P16(-),Syn(-),CgA(-),CD56(-)。免疫组化协助诊断，明确良恶性免疫组化协助诊断，明确良恶性病例病例2 2女，50岁，左乳腺肿块
43、，行肿块切除。巨检：带皮组织一块，大小8cm5.5cm3cm，皮下见一肿块，最大径4.5cm，灰红色，质中，边界不清。诊断：诊断：（左乳肿块）：乳腺皮肤隆突性纤维肉瘤，最大径（左乳肿块）：乳腺皮肤隆突性纤维肉瘤，最大径4.5cm4.5cm，肿，肿瘤近靠外侧切缘，标本上切缘，下切缘，内侧切缘及基底切瘤近靠外侧切缘，标本上切缘，下切缘，内侧切缘及基底切缘未见肿瘤组织残存。缘未见肿瘤组织残存。免疫组化：肿瘤细胞表达：免疫组化：肿瘤细胞表达：CD34CD34（+），），S100S100（-），），DesDes（-），），SMASMA（-），），Ki67Ki67约约3%3%（+）。）。免疫组化明确肿瘤起
44、源，判断切缘情况免疫组化明确肿瘤起源，判断切缘情况病例病例3 3 女，48岁，发热半月入院。入院后抗感染治疗无效，腹部B超示肝左叶一小斑片状低密度影，腹腔淋巴结肿大。CT：肝内病灶，左肺门，腹腔，纵膈淋巴结肿大，左肺小结节影。临床考虑淋巴瘤，为明确诊断行胸腔镜下纵膈肿瘤活检。诊断：（纵膈淋巴结活检）：少量淋巴组织和结缔组织，其中见小灶异型细胞，免疫组化表达CK（+），CK7（+），TTF1（+），LCA（-），S100（-），CD3（-），CD20（-），CK20（-），MPO（-），hep-1（-），倾向为上皮源性恶性肿瘤，以肺腺癌可能性大。免疫组化明确转移性肿瘤的起源免疫组化明确转移性肿瘤
45、的起源病例病例4 4女，71岁，十年前颈部淋巴结活检诊断B细胞淋巴瘤。化疗后好转。此次因上腹疼痛20天入院胃镜：胃体大弯前壁1.5cm1.2cm溃疡，质脆，易出血明确淋巴瘤的诊断和分型诊断：（胃体前，后壁）：弥漫大B细胞淋巴瘤，结合免疫组化倾向为生发中心来源。免疫组化：CD20（+），CD79a（+），CD3（-），CD7（+），CD10（-），MUM（-），Bcl6（+），CD43（-），CK（-），Ki67约90%（+）病例病例5 5女，72岁，反复上腹饱胀两年入院。胃镜活检诊断低分化腺癌，行全胃切除。大体：胃窦小弯见溃疡型肿块，大小6cm4cm2cm。病理诊断：胃窦小弯侧低分化腺癌。清扫的淋巴结中多少枚转移？HE观察3/18？判断微小转移灶，明确肿瘤分期判断微小转移灶，明确肿瘤分期诊断：诊断：胃窦小弯侧低分化腺癌。淋巴结9/18枚见癌转移。结束语结束语免疫组织化学是外科病理学家一个重要的，不可缺失的工具正确使用免疫组织化学对诊断具有很大帮助应用不当，可能造成误诊，如结节性淋巴组织增生用 bcl-2+来支持滤泡性淋巴瘤的诊断，而正确的诊断是套区细胞淋巴瘤结束语结束语没有一个免疫组化的标志是对某器官或疾病绝对特异的。免疫组织化学不能代替认真的形态学观察，而且必须结合形态学做出解释。根据形态学所见提出的问题及鉴别诊断来选择抗体组合，盲目滥用大量抗体会造成诊断的困难。