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1、脱落细胞学检查技术及基本知识第一节第一节 标本采集和涂片制作标本采集和涂片制作一、标本采集一、标本采集w原原则则:尽尽量量减减少少受受检检者者的的痛痛苦苦,取取得得合合作作;方方法法简简便便、实实用用、经经济济;尽尽量量取取得得足足够够供供诊诊断断的的细细胞胞成成分分;及及时时快快速速送送检检立立刻刻制制片片;绝绝对对避避免免污污染染;标标本本号号标标记记清楚。清楚。w途径:途径:细针穿刺;脱落细胞学检查细针穿刺;脱落细胞学检查12/15/20222常用方法:常用方法:w直直视视采采集集法法:直直接接用用刮刮片片刮刮取取、吸吸管管吸吸取取、刷洗刷洗w自自然然分分泌泌液液采采取取法法:痰痰涂涂片
2、片、尿尿液液涂涂片片、前列腺液涂片、乳头溢液涂片前列腺液涂片、乳头溢液涂片w灌洗法:灌洗法:空腔器官、盆腔或腹腔空腔器官、盆腔或腹腔w摩擦法:摩擦法:鼻咽、食管、胃鼻咽、食管、胃w针针穿穿抽抽吸吸法法:浆浆膜膜腔腔关关节节腔腔积积液液,淋淋巴巴结结、软组织、甲状腺、肝软组织、甲状腺、肝12/15/20223浆膜腔积液的处理:浆膜腔积液的处理:w抽出应立即送检(抽出应立即送检(4保存,保存,24h24h内处理完标内处理完标本本)w对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和标本的严重凝固,需处理,淋巴细胞分离标本的严重凝固,需处理,淋巴细胞分离液或低渗方法可去除红细胞
3、,凝固的积液液或低渗方法可去除红细胞,凝固的积液将凝块吸出,剩余液体离心涂片。将凝块吸出,剩余液体离心涂片。12/15/20224二、涂片制作二、涂片制作(一)要求:(一)要求:1标本要新鲜标本要新鲜2操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形;勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形;3玻片要清洁玻片要清洁4涂片要牢固涂片要牢固5涂片数量涂片数量6标号准确标号准确12/15/20225(二)涂片制备方法(二)涂片制备方法w推片法推片法w涂抹法涂抹法w压拉涂片法压拉涂片法w吸管推片法吸管推片法w喷射法喷射法w印片法印片法12/15/20226(三)涂片
4、的固定(三)涂片的固定w目的:目的:保持细胞形态结构,防止其自溶。w 固固定定液液:首选95酒精,乙醇乙醚,氯仿乙 醇w 注注意意事事项项:巴氏染色,涂片勿在空气中干燥后染色;固定时间不短于15分钟(48h内进行巴氏染色);固定液要达到90以上;液体标本离心后涂片,待潮干后再固定,宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜的刷片、针吸涂片应立即固定。12/15/20227w固定方法:带湿固定 干燥固定w固定时间:1530min(四)涂片的染色(四)涂片的染色目目的的:使细胞结构清晰显示;应用各种染色使细胞浆与核恰当显示不同颜色;使细胞透明度高,结构清晰。方方法法:常规染色为巴氏染色,配合HE、Gie
5、msa、特染等。12/15/202281 巴氏染色法巴氏染色法 水化:水化:固定好的涂片80、70、50乙醇蒸馏水 各1min 染核:染核:苏木素染35min 分色:分色:1盐酸中数秒,水洗 蓝化:蓝化:置饱和碳酸锂溶液中1min,水洗 脱水:脱水:50、70、80、95乙醇各1min 染浆:染浆:置于橘黄G液中染24min95乙醇洗2次置于 EA36染液中45min 脱水:脱水:95、无水乙醇各12min二甲苯透明2 3min 2 封片:封片:中性树胶封固12/15/20229w结结果果判判定定:胞胞核核呈呈紫紫蓝蓝色色,核核仁仁红红色色,底底层层细细胞胞、中中层层细细胞胞和和表表层层角角化
6、化前前细细胞胞为为淡淡蓝蓝色色,不不全全角角化化细细胞胞(角角化化前前细细胞胞)呈呈粉粉红色,角化细胞呈桔黄色。红色,角化细胞呈桔黄色。w适适用用于于上上皮皮细细胞胞染染色色和和阴阴道道涂涂片片观观察察女女性性激素的影响激素的影响w优点:细胞具有多色性优点:细胞具有多色性w缺点:染色程序较复杂缺点:染色程序较复杂12/15/202210注意事项:注意事项:w染液要充分溶解染液要充分溶解w苏苏木木素素要要染染前前月月余余配配制制,用用时时每每天天过过滤滤1次次,加加新新液。室温低时不易着色,可液。室温低时不易着色,可20的假阴性的假阴性 2 具体部位难确定具体部位难确定 3 肿瘤分型困难肿瘤分型
7、困难 4 非肿瘤性疾病诊断研究少非肿瘤性疾病诊断研究少细胞诊断学与病理诊断的关系细胞诊断学与病理诊断的关系 细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断,因细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断,因此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。12/15/202227 辅助检查辅助检查w组织化学组织化学w免疫组化免疫组化w流式细胞仪流式细胞仪DNA分析分析w染色体倍体分析染色体倍体分析w电镜电镜12/15/202228第二章第二章 脱落细胞检查的基本知识脱落细胞检查的基本知识 第一节第一节 细胞诊断学的基本概念细胞诊断学的基本概念一、细胞增生活跃一、细胞增生活跃 细胞体积增
8、大,核明显增大,核染色质增多,颗粒细胞体积增大,核明显增大,核染色质增多,颗粒 增粗,核仁增大增多,核浆比例失常,胞浆蓝染(增粗,核仁增大增多,核浆比例失常,胞浆蓝染(巴氏),可伴核分裂像。巴氏),可伴核分裂像。二、组织修复细胞二、组织修复细胞 组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞 特特征征:细细胞胞多多成成片片出出现现,似似合合体体细细胞胞,排排列列规规则则;细细胞胞稍稍增增大大,胞胞核核也也增增大大,核核不不深深染染,胞胞浆浆尚尚丰丰富富,深深染;核仁明显增大或增多;可能出现核分裂像染;核仁明显增大或增多;可能出现核分裂像。12/15/2
9、02229组织修复细胞组织修复细胞12/15/202230三、细胞化生三、细胞化生 1 未未成成熟熟的的鳞鳞状状上上皮皮化化生生细细胞胞的的特特征征:似似正正常常上上皮皮外外底底层层细细胞胞大大小小;多多成成群群出出现现,可可呈呈铺铺砖砖式式排排列列;细细胞胞呈呈圆圆或或卵卵圆圆形形,边边缘缘有有小小突突起起;胞胞浆浆常常有有小空泡使胞浆透亮。小空泡使胞浆透亮。2 成成熟熟的的鳞鳞状状上上皮皮化化生生细细胞胞的的特特征征:细细胞胞似似正正常常鳞鳞状状上上皮皮中中层层细细胞胞大大小小;多多成成群群出出现现,细细胞胞呈呈多多边边形形,有有锐锐角角突突起起,形形态态多多样样;胞胞浆浆中中常常见见小小
10、空空泡泡。胞浆少,排列紧密,无细胞间桥。胞浆少,排列紧密,无细胞间桥。12/15/202231鳞状化生鳞状化生12/15/20223212/15/20223312/15/202234四、储备细胞增生四、储备细胞增生 储备细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼储备细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼稚细胞(或未分化细胞)。稚细胞(或未分化细胞)。形态特征:形态特征:细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;圆或卵圆形,胞浆有小突起;圆或卵圆形,胞浆有小突起;胞浆淡染可见小空泡;胞浆淡染可见小空泡;核偏位,可能大小稍不一致;核偏位,可能大小稍不一致;核染色质匀细
11、,可见核仁和几个大小一致的核粒;核染色质匀细,可见核仁和几个大小一致的核粒;细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。12/15/202235成团增生的基底细胞成团增生的基底细胞支气管黏膜支气管黏膜12/15/202236五、细胞增生五、细胞增生细胞分裂增强,数目增多,体积可增大,形态可出现异常。细胞分裂增强,数目增多,体积可增大,形态可出现异常。细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁明细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁明显,核膜增厚,甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。显,核膜增厚,甚至轻度不规则。可分为轻度和重
12、度增生。六、细胞分化六、细胞分化从幼稚细胞发育成具有完备结构和功能的成熟细胞的过程。从幼稚细胞发育成具有完备结构和功能的成熟细胞的过程。上皮细胞分化的形态表现:上皮细胞分化的形态表现:1 细胞体积由小到大细胞体积由小到大2 胞浆量由少到多胞浆量由少到多3 核浆比由大到小核浆比由大到小4 饱和由大到小饱和由大到小5 染色质排列由疏松到致密染色质排列由疏松到致密6 核仁由大到小,由多到少核仁由大到小,由多到少 12/15/202237增生柱状上皮混杯状细胞增生柱状上皮混杯状细胞12/15/202238七、细胞核分裂像七、细胞核分裂像 病理性分裂像应与核碎裂鉴别(核染色质呈大小不病理性分裂像应与核碎
13、裂鉴别(核染色质呈大小不 等的块状)等的块状)八、细胞退行性变八、细胞退行性变 细胞退变包括变性和坏死,涂片中二者鉴别较困难,细胞退变包括变性和坏死,涂片中二者鉴别较困难,统称退变。统称退变。1 人工引起的退变人工引起的退变 原因:原因:标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或低渗溶液中;固定液浓度或时间不适合,过湿或过干低渗溶液中;固定液浓度或时间不适合,过湿或过干 形态特征:形态特征:细胞呈大片结构不清,细胞均增大或均缩细胞呈大片结构不清,细胞均增大或均缩小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变形式一致。小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变形式一致。12/15/
14、202239核分裂像核分裂像12/15/2022402 细胞自然退变细胞自然退变 原原因因:细细胞胞脱脱落落过过久久,细细胞胞营营养养不不良良,炎炎症症、放放疗疗、化化疗的影响,肿瘤表面供血不足,细胞生理性衰老疗的影响,肿瘤表面供血不足,细胞生理性衰老 类型类型:(1)肿肿胀胀性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核肿肿大大,染染色色质质模模糊糊、断断裂裂并并淡淡染染,核核内内有有空空泡泡。胞胞浆浆空空泡泡状状、蜂蜂窝窝状状或或网网孔孔状状,胞界不清胞膜消失。胞界不清胞膜消失。(2)固固缩缩性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核缩缩小小,胞胞浆浆红红染染、橘橘黄黄、淡淡黄黄或或多多彩彩,常常出出现现核核周周
15、晕晕,核核固固缩缩,染染色色质质致致密密,核核碎裂核膜消失。碎裂核膜消失。12/15/202241脱落细胞肿胀性退变过程脱落细胞肿胀性退变过程12/15/202242细胞退行性变细胞退行性变12/15/202243细胞退行性变细胞退行性变12/15/202244第二节第二节 正常脱落细胞形态正常脱落细胞形态一、上皮细胞一、上皮细胞(一)复层鳞状上皮(一)复层鳞状上皮由底层到表层分为:基底层、中层、表层由底层到表层分为:基底层、中层、表层1基底层细胞:基底层细胞:(1)内底层细胞:单层立方或柱状,很)内底层细胞:单层立方或柱状,很少脱落。少脱落。(2)外底层细胞:)外底层细胞:23层层12/15
16、/2022452中层细胞中层细胞3表层细胞表层细胞(1)角化前细胞角化前细胞(2)不全角化细胞不全角化细胞(3)完全角化细胞完全角化细胞12/15/20224612/15/20224712/15/20224812/15/202249储储备备细细胞胞增增生生 不不成成熟熟鳞鳞化化成成熟熟化化生生细细胞胞12/15/202250(二)柱状细胞(二)柱状细胞类型:单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上类型:单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上皮、复层柱状上皮皮、复层柱状上皮涂片中常见:涂片中常见:1纤毛柱状上皮细胞纤毛柱状上皮细胞2黏液柱状上皮细胞黏液柱状上皮细胞3储备细胞储备细胞12/15/202251气管壁:
17、黏膜、黏膜下层、外膜气管壁:黏膜、黏膜下层、外膜支气管黏膜:黏膜上皮及固有层支气管黏膜:黏膜上皮及固有层12/15/202252支气管黏膜支气管黏膜12/15/202253成团、多核纤毛柱状上皮成团、多核纤毛柱状上皮12/15/202254多核纤毛柱状上皮多核纤毛柱状上皮12/15/202255成团增生的基底细胞成团增生的基底细胞支气管黏膜支气管黏膜12/15/202256(三)移行上皮细胞(三)移行上皮细胞 1 表层表层 2 中层中层 3 低层低层(四)上皮细胞成团脱落的形态(四)上皮细胞成团脱落的形态(四)上皮细胞成团脱落的形态(四)上皮细胞成团脱落的形态 1 鳞状上皮鳞状上皮 2 纤毛柱
18、状上皮纤毛柱状上皮 3 黏液柱状上皮黏液柱状上皮12/15/202257移行上皮细胞移行上皮细胞12/15/202258纤毛柱状上皮细胞纤毛柱状上皮细胞12/15/202259增生的柱状上皮增生的柱状上皮12/15/202260二、间皮细胞二、间皮细胞 1 分化程度:成熟型和幼稚型 2 大小:大、中、小 3 胞浆嗜色性:嗜酸性、嗜碱性 4 花边间皮细胞 5 创伤性间皮细胞12/15/202261增生的间皮细胞增生的间皮细胞12/15/202262三、非上皮细胞三、非上皮细胞 1 内皮细胞内皮细胞 2 成纤维细胞成纤维细胞 3 组织细胞组织细胞 4 多核异物巨细胞多核异物巨细胞 5 血细胞血细胞
19、12/15/202263肺泡吞噬细胞肺泡吞噬细胞 多核多核12/15/202264四、背景成分四、背景成分 红细胞红细胞 炎细胞炎细胞 多核巨细胞多核巨细胞 坏死物坏死物 黏液等黏液等12/15/202265炎症增生时脱落细胞的形态炎症增生时脱落细胞的形态一、一般形态特征一、一般形态特征(一)上皮细胞(一)上皮细胞急性炎症:退化变性坏死急性炎症:退化变性坏死慢性炎症:增生再生化生,退化变性慢性炎症:增生再生化生,退化变性1鳞状上皮细胞鳞状上皮细胞(1)细胞核:核肥大、核固缩、核碎裂)细胞核:核肥大、核固缩、核碎裂12/15/202266 (2)细胞形态:变形(梭性、星形、蝌蚪)细胞形态:变形(
20、梭性、星形、蝌蚪形、不规则形),核改变不明显形、不规则形),核改变不明显柱状上皮的鳞状化生。常见底层和中柱状上皮的鳞状化生。常见底层和中层细胞团(正常或轻度畸形)层细胞团(正常或轻度畸形)2柱状上皮细胞:柱状上皮细胞:纤毛柱状上皮常成片脱落,纤毛柱状上皮常成片脱落,以固缩退变为主。以固缩退变为主。(1)细胞核:固缩退变)细胞核:固缩退变(2)细胞形态:缩小)细胞形态:缩小12/15/20226712/15/202268变性,无核纤毛丛变性,无核纤毛丛12/15/202269 3病毒感染所致的上皮细胞改变病毒感染所致的上皮细胞改变 (1)单纯疱疹病毒:鳞状细胞核肿大,弱嗜)单纯疱疹病毒:鳞状细胞
21、核肿大,弱嗜碱性不透明,大的嗜酸性包涵体,多核碱性不透明,大的嗜酸性包涵体,多核巨细胞细胞变性。巨细胞细胞变性。(2)巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞浆见)巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞浆见嗜酸性包涵体。嗜酸性包涵体。12/15/202270病毒感染的柱状上皮病毒感染的柱状上皮12/15/202271(二)上皮增生再生化生时的形态(二)上皮增生再生化生时的形态1增生增生共同特点:胞浆嗜碱性共同特点:胞浆嗜碱性胞浆相对减少,核浆比略大胞浆相对减少,核浆比略大核增大可见核仁核增大可见核仁核分裂活跃核分裂活跃(1)鳞状上皮)鳞状上皮(2)纤毛柱状上皮)纤毛柱状上皮12/15/202272增生基底细胞增
22、生基底细胞12/15/202273增生柱状细胞及少量基底细胞增生柱状细胞及少量基底细胞12/15/2022742再生:再生上皮和基底层细胞再生:再生上皮和基底层细胞 再生细胞核大染色深,染色质结块及有丝分裂,核仁大、多,浆略嗜碱性,见双核多核,常见炎细胞。3化化生生:不成熟的鳞状化生上皮似基底层与棘层细胞之间的过渡细胞,成熟的鳞状化生上皮与正常鳞状上皮很难区分。如化生的细胞核染色质增粗,染色深,核大,染色大小异常称不典型化生或异型化生。12/15/202275鳞状化生鳞状化生12/15/202276(三)各种炎症时脱落细胞的特征(三)各种炎症时脱落细胞的特征1急性炎症:急性炎症:上皮细胞常严重
23、退变,有较多 中性粒细胞、吞噬细胞、坏死 细胞碎屑,纤维素。2亚急性炎症:亚急性炎症:退变上皮细胞、坏死细胞碎 屑和增生上皮细胞,中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞 和淋巴细胞。3慢性炎症:慢性炎症:较多成团的增生上皮细胞,淋 巴细胞浆细胞。12/15/2022774 肉芽肿性炎肉芽肿性炎w上皮样细胞:上皮样细胞:w朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊断结核不可靠,朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊断结核不可靠,需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。w干酪样坏死:若邻近出现上皮样细胞,更支持结干酪样坏死:若邻近出现上皮样细胞,更支持结核的诊断。核的诊断。w其他细胞:大量单核细
24、胞、淋巴细胞其他细胞:大量单核细胞、淋巴细胞12/15/202278类上皮细胞,类上皮细胞,12/15/202279核异质和角化不良的脱落细胞形态核异质和角化不良的脱落细胞形态(一)核异质(一)核异质 1轻度核异质细胞:轻度核异质细胞:又称炎性核异质,病因 去除多能恢复。多见于鳞状上皮的中、表 层细胞。与炎性增生细胞的鉴别:与炎性增生细胞的鉴别:核虽大,但染色 质仍为细颗粒状,分布均匀,无染色加深 和核畸形。12/15/20228012/15/20228112/15/2022822重重度度核核异异质质细细胞胞:见于慢性炎症,可发展为癌细胞,又称癌前核异质。核增大12倍,染色质粗颗粒状,分布略不
25、均,核膜增厚,核仁大、多,胞浆与正常细胞相似,核浆比轻度增大。见于癌前病变、原位癌、浸润癌的细胞 与与癌癌细细胞胞的的鉴鉴别别:核异型性中等,核浆比无明显改变。12/15/20228312/15/20228412/15/202285(二)角化不良(二)角化不良w又又称称异异常常角角化化、不不成成熟熟角角化化、细细胞胞内角化内角化w细细胞胞呈呈圆圆形形,核核深深染染,胞胞浆浆呈呈深深红红色色,巴巴氏氏染染色色呈呈桔桔黄黄色色,此此种种细细胞胞出出现现在在底底层层、中中层层时时,可可能能为为癌癌前前病病变变的的表表现现,在在老老年年和和更更年年期期妇妇女女应高度重视。应高度重视。12/15/202
26、286角化不良角化不良12/15/202287三、放疗对细胞形态的影响三、放疗对细胞形态的影响(一)良型上皮细胞的改变(一)良型上皮细胞的改变 1 急性放射反应 2 上皮细胞持续性放射改变(二)癌细胞放射后的改变(二)癌细胞放射后的改变(三)放射灵敏度、放射治疗反应及灵敏反应(三)放射灵敏度、放射治疗反应及灵敏反应 1 放射灵敏度 2 放射治疗反应 3 灵敏反应12/15/202288放射治疗后放射治疗后12/15/202289第三节第三节 肿瘤脱落细胞形态肿瘤脱落细胞形态一、一般特征一、一般特征(一)核异型性(一)核异型性 1核大大小不等核大大小不等2核染色质深染粗糙核染色质深染粗糙3核畸形
27、核畸形4核浆比明显增大核浆比明显增大5核仁增大增多核仁增大增多6核分裂像增多,病理性核分裂像核分裂像增多,病理性核分裂像7瘤巨细胞瘤巨细胞8裸核裸核12/15/202290核异型性核异型性12/15/202291鳞癌鳞癌12/15/202292(二)胞浆异型性(二)胞浆异型性1高分化:胞浆丰富,有特征性分化物质高分化:胞浆丰富,有特征性分化物质2低分化:胞浆少低分化:胞浆少3染色:嗜碱性染色红中带蓝,深染染色:嗜碱性染色红中带蓝,深染4胞胞浆浆出出现现吞吞噬噬异异物物:细细胞胞碎碎片片、红红细细胞胞,封入现象封入现象12/15/202293肺鳞癌肺鳞癌12/15/202294(三)癌细胞团(三
28、)癌细胞团癌具有成巢的倾向,可见单个散在的癌具有成巢的倾向,可见单个散在的细胞,也可见成团的癌细胞细胞,也可见成团的癌细胞(四)涂片背景成分(四)涂片背景成分较多红细胞和坏死组织,继发感染可较多红细胞和坏死组织,继发感染可见中性粒细胞。见中性粒细胞。12/15/202295腺癌细胞腺癌细胞12/15/202296(五)恶性肿瘤细胞与核异质细胞的鉴别(五)恶性肿瘤细胞与核异质细胞的鉴别细胞结构细胞结构恶恶性性核异质核异质核大小不一畸形核大小不一畸形 明显明显轻中度轻中度核膜核膜明显增厚不均明显增厚不均轻度增厚轻度增厚染色质染色质结块或粗颗粒,其间结块或粗颗粒,其间有透明间隙有时呈墨有透明间隙有时
29、呈墨水滴状水滴状多呈细颗粒状,少数多呈细颗粒状,少数结块,无墨水滴状结块,无墨水滴状核仁核仁大而多大而多12个,轻度增大个,轻度增大病理性核分裂病理性核分裂有有无无胞浆胞浆嗜碱性嗜碱性胞浆的质和量尚正常胞浆的质和量尚正常核浆比核浆比显著增大显著增大轻度增大轻度增大12/15/202297二、常见癌细胞的形态特征二、常见癌细胞的形态特征(一)鳞状细胞癌(一)鳞状细胞癌 1分化好分化好2分化不好分化不好12/15/20229812/15/20229912/15/2022100分化不好分化不好12/15/2022101角化性鳞癌角化性鳞癌12/15/2022102小细胞性鳞癌小细胞性鳞癌12/15/2022103(二)腺癌(二)腺癌12/15/2022104癌细胞排成花瓣状癌细胞排成花瓣状12/15/2022105腺癌细胞成团腺癌细胞成团12/15/2022106(三)未分化癌(三)未分化癌12/15/2022107小细胞未分化癌小细胞未分化癌12/15/2022108大细胞未分化癌大细胞未分化癌12/15/2022109此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢