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1、全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第五章第五章血浆脂蛋白代谢紊乱的血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验生物化学检验 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学KEY POINTSClassification and functions of the main lipids,lipoproteins and apolipoproteins in the blood.Characteristics and functions of the main receptors,lipid-binding proteins
2、and enzymes related to the lipoprotein metabolism.Definition and types of hyperlipidemia.Relationship between the abnormity of lipoprotein metabolism and atherosclerosis.Evaluation,comparison and clinical significance of lipid determinations.全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学Major Objectives了
3、解了解脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。熟悉熟悉脂蛋白的特征、脂代谢有关酶类的特点和生脂蛋白的特征、脂代谢有关酶类的特点和生理功能、高脂蛋白血症分型及其特征。理功能、高脂蛋白血症分型及其特征。掌握掌握血浆脂类组成及脂蛋白的分类、主要载脂蛋血浆脂类组成及脂蛋白的分类、主要载脂蛋白和脂蛋白受体的特征与功能、血浆脂蛋白代谢白和脂蛋白受体的特征与功能、血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验。紊乱的生物化学检验。重点重点血浆脂蛋白的分类和特征、血浆脂蛋白代谢血浆脂蛋白的分类和特征、血浆脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验。紊乱的生物化学检验。难点难点血浆载脂蛋白和脂蛋白受体的特征
4、与功能。血浆载脂蛋白和脂蛋白受体的特征与功能。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学Brief Contents第一节第一节 血浆脂蛋白及其代谢血浆脂蛋白及其代谢第二节第二节 脂蛋白代谢紊乱脂蛋白代谢紊乱第三节第三节 脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第一节第一节 血浆脂蛋白及其代谢血浆脂蛋白及其代谢 一、血浆脂蛋白的分类一、血浆脂蛋白的分类 二、血浆脂蛋白的组成和特征二、血浆脂蛋白的组成和特征 三、载脂蛋白的组成和特征三、载脂蛋白的组成和特征
5、四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白 五、血浆脂蛋白的代谢五、血浆脂蛋白的代谢 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、血浆脂蛋白的分类一、血浆脂蛋白的分类血浆脂质总量为血浆脂质总量为4.07.0g/L。包括：包括：1.胆固醇胆固醇 (total cholesterol，TC)游离胆固醇游离胆固醇(free cholesterol，FC)胆固醇酯胆固醇酯 (cholesterol ester，CE)2.磷磷 脂脂 (Phospholipid，PL)3.甘油三酯甘油三酯 (triacylglycerol/triglycerid
6、e，TG)4.游离脂肪酸游离脂肪酸(free fatty acid，FFA)全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学血浆脂蛋白结构血浆脂蛋白结构 脂蛋白一般以不溶于脂蛋白一般以不溶于水的水的TG和和CE为核心，为核心，表面覆盖有少量蛋白表面覆盖有少量蛋白质和极性的质和极性的PL、FFA，从而使脂蛋白颗粒从而使脂蛋白颗粒能稳定地分散在血浆能稳定地分散在血浆中。中。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学(一一)超速离心法超速离心法 根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进行离心时，因漂浮根据各种脂蛋白在一定密度的介质中
7、进行离心时，因漂浮速率不同而进行分离的方法。速率不同而进行分离的方法。乳糜微粒乳糜微粒(chylomicron，CM)极低密度脂蛋白极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein，VLDL)低密度脂蛋白低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)高密度脂蛋白高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)中密度脂蛋白中密度脂蛋白中密度脂蛋白中密度脂蛋白(intermediate intermediate density lipoprotein,IDL)density lipoprotein,IDL)全国高等学校医学规划
8、教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）电泳法（二）电泳法根据血浆脂蛋白表面根据血浆脂蛋白表面电荷量大小不同，在电荷量大小不同，在电场中，其迁移速率电场中，其迁移速率也不同，分为：也不同，分为：乳糜微粒乳糜微粒 -脂蛋白脂蛋白 前前-脂蛋白脂蛋白 -脂蛋白脂蛋白全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学超速离心法与电泳法分离血浆脂蛋白的超速离心法与电泳法分离血浆脂蛋白的相应关系相应关系 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白的组成和特征二、血浆脂蛋白的组成和特征 全国高
9、等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三、载脂蛋白的组成和特征三、载脂蛋白的组成和特征 脂蛋白中的蛋白部分称为脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白载脂蛋白(apolipoproteinapolipoprotein，apoproteinapoprotein，Apo)Apo)。载脂蛋白在脂蛋白代谢中的载脂蛋白在脂蛋白代谢中的生理功能生理功能：（1）构成并稳定脂蛋白的结构。构成并稳定脂蛋白的结构。（2）修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性。）修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性。（3）作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细）作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞表面脂蛋
10、白受体的结合及其代谢过程。胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学载载脂脂蛋蛋白白的的特特征征及及生生理理功功能能全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白四、脂蛋白受体和脂蛋白结合蛋白 Brown和和Goldstein于于1974年研究家族性高胆固醇血年研究家族性高胆固醇血症症(familial hypercholesterolemia，FH)患者代谢患者代谢缺陷时，在成纤维细胞膜上发现了缺陷时，在成纤维细胞膜上发现了LDL受体受体(LDL re
11、ceptor，LDLR)的存在。以后相继发现有的存在。以后相继发现有VLDL受体受体和和清道夫受体等。清道夫受体等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（一）低密度脂蛋白受体（一）低密度脂蛋白受体受体结构受体结构 由由836个氨基个氨基酸残基组成酸残基组成36面体结构蛋白，面体结构蛋白，分子量约分子量约115kD，由五由五种不同的区域种不同的区域构成构成全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学LDL受体基因结构及功能受体基因结构及功能 人人LDL受受体体基基因因长长度度45kD，由由18个个外外显显子子和和
12、17个个内内含含子组成子组成。受受体体亲亲和和性性 含含ApoB100的的脂脂蛋蛋白白可可与与LDL受受体体以以高高亲亲和力结合。和力结合。LDL受受体体广广泛泛分分布布于于肝肝、动动脉脉壁壁平平滑滑肌肌细细胞胞、肾肾上上腺腺皮皮质质细细胞胞、血血管管内内皮皮细细胞胞、淋淋巴巴细细胞胞、单单核核细细胞胞和和巨巨噬细胞噬细胞。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学LDL受体途径受体途径（LDL receptor pathway）若胞内若胞内游离胆固醇游离胆固醇浓度升高，浓度升高，则：则：抑制抑制HMGCoA还原酶，以还原酶，以减少自身的胆固醇合成；减少
13、自身的胆固醇合成；抑制抑制LDL受体基因的表达，受体基因的表达，减少减少LDL受体的合成，从而受体的合成，从而减少减少LDL的摄取；的摄取；激活内质网激活内质网ACAT，使游使游离胆固醇在胞质内酯化成胆离胆固醇在胞质内酯化成胆固醇酯贮存，以供细胞的需固醇酯贮存，以供细胞的需要。要。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）极低密度脂蛋白受体 结构与结构与LDL受体类似。受体类似。仅仅 对对 含含 ApoE的的 脂脂 蛋蛋 白白VLDL、VLDL残残粒粒有有高高亲亲和和性性结结合合，对对LDL为为显显著的低亲和性。著的低亲和性。在在肝肝内内几几乎乎未
14、未发发现现，广广泛泛分分布布在在代代谢谢活活跃跃的的心心肌肌，骨骼肌、脂肪组织等细胞骨骼肌、脂肪组织等细胞.VLDL受受体体不不受受细细胞胞内内胆胆固醇负反馈抑制。固醇负反馈抑制。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（三）清道夫受体（三）清道夫受体(scavenger receptor，SR)清道夫受体结构清道夫受体结构 SRs分为分为SR-A、SR-B、SR-C、SR-D、SR-E和和SRF六大类。六大类。清道夫受体配体清道夫受体配体 均为多阴离子化合物均为多阴离子化合物。乙乙酰酰化化或或氧氧化化等等修修饰饰的的LDL；多多聚聚次次黄黄嘌嘌呤呤核
15、核苷苷酸酸，多多聚聚鸟嘌呤核苷酸；鸟嘌呤核苷酸；多糖如硫酸右旋糖酐；多糖如硫酸右旋糖酐；细菌脂多糖，如内毒素等。细菌脂多糖，如内毒素等。清道夫受体功能清道夫受体功能 1.巨巨噬噬细细胞胞通通过过清清道道夫夫受受体体清清除除细细胞胞外外液液中中的的修修饰饰LDL，尤尤其其是是氧氧化化LDL，是是机机体体的的一一种种防防御功能。御功能。2.具具有有清清除除血血管管过过多多脂脂质质和和病病菌菌毒素等毒素等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（四）（四）LDL受体相关蛋白受体相关蛋白（LRP）LRP体内分布：广泛，在肝细胞、巨噬细胞、平体内分布：广泛，在
16、肝细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞、神经细胞等均有表达，以肝实质细胞滑肌细胞、神经细胞等均有表达，以肝实质细胞中含量最丰富。中含量最丰富。LRP功能：能识别多种配体（蛋白酶一蛋白酶抑功能：能识别多种配体（蛋白酶一蛋白酶抑制剂、毒素的受体、某些病毒、乳铁蛋白等）并制剂、毒素的受体、某些病毒、乳铁蛋白等）并在体内清除之。在体内清除之。LRP是含是含ApoE的的CM残粒、残粒、VLDL残粒的受体，使富含残粒的受体，使富含ApoE的的CM残粒、残粒、VLDL残粒能从血浆中快速清除。残粒能从血浆中快速清除。LRP与动脉粥样硬化（与动脉粥样硬化（AS）的形成有密切关系。的形成有密切关系。LRP参与了参与了LDL
17、的氧化过程，与血管损伤有关。的氧化过程，与血管损伤有关。LRP与泡沫细胞的生成有关。与泡沫细胞的生成有关。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（五）（五）HDL受体和受体和HDL结合蛋白结合蛋白 在不同细胞的表面及细胞内已分离出了多种可与在不同细胞的表面及细胞内已分离出了多种可与HDL结合的蛋白质。结合的蛋白质。某些蛋白质可特异性识别并以高亲和力与某些蛋白质可特异性识别并以高亲和力与HDL结结合，引发下游的生物学效应，称之为合，引发下游的生物学效应，称之为HDL-R。有些蛋白质也可与有些蛋白质也可与HDL结合，但不产生或只产生结合，但不产生或只产生
18、较弱的效应，则称之为较弱的效应，则称之为HDL结合蛋白（结合蛋白（HBP）。）。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（六）胆固醇酯转运蛋白（六）胆固醇酯转运蛋白 胆固醇酯转运蛋白（胆固醇酯转运蛋白（CETP）属于脂质转运蛋白（属于脂质转运蛋白（lipid transfer protein，LTP），），是由肝、小肠、肾上腺、脾、是由肝、小肠、肾上腺、脾、脂肪组织及巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白。脂肪组织及巨噬细胞合成的一种疏水性糖蛋白。cDNA编码的编码的CETP含含476氨基酸残基，分子量为氨基酸残基，分子量为53kD；成成熟熟CETP含含4个天
19、冬酰个天冬酰N-糖链，分子量为糖链，分子量为74kD。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学CETP对胆固醇的逆转运过程对胆固醇的逆转运过程 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学五、血浆脂蛋白的代谢五、血浆脂蛋白的代谢（一）血浆脂蛋白代谢密切相关的酶类（一）血浆脂蛋白代谢密切相关的酶类参与脂质代谢的酶有：参与脂质代谢的酶有：脂蛋白脂肪酶（脂蛋白脂肪酶（lipoprotein lipase，LPL）肝脂酶（肝脂酶（hepatic triglyceride lipase，HTGL）LCAT等。等。全国高等学校
20、医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1LPLLPL是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种糖蛋白，分子量为糖蛋白，分子量为60kD。ApoC为其必需的辅因子。为其必需的辅因子。作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。脂蛋白之间转移胆固醇、磷脂及载脂蛋白。活性活性LPL以同源二聚体形式存在，通过静电引力以同源二聚体形式存在，通过静电引力与毛细血管内皮细胞表面的多聚
21、糖结合，肝素可与毛细血管内皮细胞表面的多聚糖结合，肝素可以使此结合形式的以使此结合形式的LPL释放入血，并提高其活性。释放入血，并提高其活性。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2HTGLHTGL亦亦称称为为肝肝性性LPL（hepatic LPL）其其特特点：点：HTGL活性不需要活性不需要ApoC作为激活剂；作为激活剂；SDS可可抑抑制制HTGL活活性性，而而不不受受高高盐盐浓浓度度及及鱼精蛋白的抑制；鱼精蛋白的抑制；主主要要作作用用于于小小颗颗粒粒脂脂蛋蛋白白如如VLDL残残粒粒、CM残残粒粒及及HDL，调调节节胆胆固固醇醇从从周周围围组组织织
22、转转运到肝，使肝内的运到肝，使肝内的VLDL转化为转化为LDL。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学3LCATLCAT由由416个氨基酸残基组成，分子量为个氨基酸残基组成，分子量为6.3kD，属于糖蛋白。属于糖蛋白。LCAT由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋白由肝脏合成释放入血液，以游离或与脂蛋白结合的形式存在。结合的形式存在。作用是将作用是将HDL中的卵磷脂的中的卵磷脂的C2位不饱和脂肪酸转位不饱和脂肪酸转移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯，移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯，使使HDL变成成熟的变成成熟的HDL球状颗粒。球状颗粒。
23、全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）血浆脂蛋白代谢（二）血浆脂蛋白代谢外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和外源性代谢途径：饮食摄入的胆固醇和TG在小肠中合成在小肠中合成CM及其代谢过程。及其代谢过程。内源性代谢途径：包括内源性代谢途径：包括 由肝脏合成由肝脏合成VLDL，VLDL转变为转变为IDL和和LDL，LDL被肝脏或其它器官代谢的过程。被肝脏或其它器官代谢的过程。HDL的代谢过程。的代谢过程。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1CM代谢代谢从食物中摄取的脂质从食物中摄取的脂质(主要是主要是T
24、G)，在肠内被胰腺在肠内被胰腺分泌的脂酶水解成脂肪酸和甘油一酯（分泌的脂酶水解成脂肪酸和甘油一酯（MG），），由由肠粘膜吸收进入细胞内再重新合成肠粘膜吸收进入细胞内再重新合成TG及磷脂。及磷脂。新合成的新合成的TG与少量的胆固醇、磷酯、与少量的胆固醇、磷酯、ApoB48、ApoAI构成构成CM，经淋巴管至胸导管进入血液循环。经淋巴管至胸导管进入血液循环。CM在血液中从在血液中从HDL转移获得转移获得ApoC和和ApoE而变化而变化成熟型成熟型CM。接着接着CM中的中的TG被被LPL水解产生甘油一酯及脂肪酸，水解产生甘油一酯及脂肪酸，后者被细胞摄取利用或贮存。后者被细胞摄取利用或贮存。剩下的残留
25、物被称为剩下的残留物被称为CM残粒残粒(CM remnant)，随血随血液进入肝脏迅速被代谢。液进入肝脏迅速被代谢。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学CM代谢代谢全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2VLDL、IDL、LDL代谢代谢体内合成的内源性体内合成的内源性TG与与ApoB100、C、E等在肝等在肝脏合成脏合成VLDL释放入血液。释放入血液。TG经血管壁的经血管壁的LPL水解生成脂肪酸被末梢组织利水解生成脂肪酸被末梢组织利用。用。失去失去TG之后的之后的VLDL转变成转变成VLDL残粒（残粒（I
26、DL）。）。IDL有两条代谢途径：一是直接经肝脏有两条代谢途径：一是直接经肝脏ApoE受体受体结合摄取进入肝细胞代谢；二是经结合摄取进入肝细胞代谢；二是经HTGL作用转作用转变成以变成以ApoB100和游离胆固醇为主要成份的和游离胆固醇为主要成份的LDL，经末梢组织的经末梢组织的LDL-R结合进入细胞内，进行代结合进入细胞内，进行代谢。谢。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学VLDL、IDL、LDL代谢代谢全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学3HDL代谢代谢在肝脏和小肠合成时属于未成形的在肝脏和小肠合成
27、时属于未成形的HDL（nascent HDL，HDLn）。）。HDLn获取获取CM、VLDL表层的磷脂和表层的磷脂和ApoA而变成园盘状的而变成园盘状的新生新生HDL。新生新生HDL从末梢组织细胞膜获得游离胆固醇，经从末梢组织细胞膜获得游离胆固醇，经LCAT作用作用生成生成CE进入进入HDL内部，形成成熟型内部，形成成熟型HDL3和球型和球型HDL2。HDL3在在CETP介导下，与介导下，与VLDL、LDL进行进行CE/TG交换，交换，使末梢组织的使末梢组织的FC输送到肝脏。输送到肝脏。HDL2中的中的TG经肝脏的经肝脏的HTGL作用，可以再变成作用，可以再变成HDL3，使使HDL在逆转运中再
28、利用，从而防止动脉粥样硬化的发生。在逆转运中再利用，从而防止动脉粥样硬化的发生。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第二节第二节 脂蛋白代谢紊乱脂蛋白代谢紊乱一、高脂蛋白血症一、高脂蛋白血症二、低脂蛋白血症二、低脂蛋白血症全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、高脂蛋白血症一、高脂蛋白血症高脂血症（高脂血症（hyperlipidemia）是指血浆中胆固醇和是指血浆中胆固醇和/或或TG水平升高。水平升高。由于血脂在血中以脂蛋白形式运输，因而实际上由于血脂在血中以脂蛋白形式运输，因而实际上高脂血症就是高脂蛋
29、白血症高脂血症就是高脂蛋白血症（hyperlipoproteinemia，HLP）。）。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（一）高脂蛋白血症的分型（一）高脂蛋白血症的分型 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）原发性高脂蛋白血症（二）原发性高脂蛋白血症 家族性多基因性高胆固醇血症家族性多基因性高胆固醇血症家族性高胆固醇血症家族性高胆固醇血症家族性异常家族性异常-脂蛋白血症脂蛋白血症家族性乳糜微粒血症家族性乳糜微粒血症 家族性高甘油三酯血症家族性高甘油三酯血症 其他家族性高脂血症其他家族性高脂血症全
30、国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（三）继发性脂蛋白血症（三）继发性脂蛋白血症 糖尿病糖尿病甲状腺功能减退甲状腺功能减退 肾脏疾患肾脏疾患肥胖症肥胖症 酗酒酗酒 药物药物全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（四）高（四）高HDL血症血症血浆血浆HDL-胆固醇（胆固醇（HDL-C）含量超过含量超过2.6mmol/L，定义为高定义为高HDL血症。血症。CETP及及HTGL活性降低是引起高活性降低是引起高HDL血症的主要原因。若血症的主要原因。若CETP缺陷，缺陷，HDL内的内的CE蓄积，使蓄积，使HDL增多
31、；若增多；若HTGL活性活性降低，降低，HDL被肝细胞摄取减少并使被肝细胞摄取减少并使HDL2HDL3转换过程减转换过程减慢而停留在血液中，并使其浓度增加，出现高慢而停留在血液中，并使其浓度增加，出现高HDL血症。血症。高高HDL血症分为原发性和继发性两类。血症分为原发性和继发性两类。原发性高原发性高HDL血症的病因有：血症的病因有：CETP缺损；缺损；HTGL活性降低；活性降低；其他。其他。继发性高继发性高HDL血症病因有：血症病因有：运动失调；运动失调；饮酒过量；饮酒过量；原原发性胆汁性肝硬化；发性胆汁性肝硬化；治疗高脂血症的药物引起；治疗高脂血症的药物引起；其他。其他。全国高等学校医学规
32、划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、低脂蛋白血症二、低脂蛋白血症 低脂蛋白血症的诊断低脂蛋白血症的诊断 血血清清TC在在3.3mmol/L以以下下，或或TG在在0.45mmol/L以以下下，或或LDL-C在在2.1mmol/L以以下下者者，属属于于低低脂脂蛋蛋白白血血症症。TC和和TG同同时时降降低低者者多多见见，脂脂蛋蛋白白中中多见多见HDL、LDL和和VLDL降低。降低。病因病因 原发性低脂蛋白血症的原因有原发性低脂蛋白血症的原因有ApoA缺乏或变异、缺乏或变异、LCAT缺乏症、无缺乏症、无-脂蛋白血症（脂蛋白血症（Tangier病）、病）、无无-脂蛋白血症
33、、低脂蛋白血症、低-脂蛋白血症等。脂蛋白血症等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学三种无脂蛋白血症的主要特点三种无脂蛋白血症的主要特点 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学第三节第三节 脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验一、血浆脂质测定一、血浆脂质测定二、血浆脂蛋白测定二、血浆脂蛋白测定三、血浆载脂蛋白测定三、血浆载脂蛋白测定四、血浆脂代谢相关酶的测定四、血浆脂代谢相关酶的测定五、脂质相关蛋白基因突变分析五、脂质相关蛋白基因突变分析六、血脂和脂蛋白检测的临床应用六、血脂和脂蛋白检
34、测的临床应用 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学一、血浆脂质测定一、血浆脂质测定（一）（一）TG测定测定 1化学法化学法 2酶法测定酶法测定 （二）（二）TC测定测定 1化学法化学法 2酶法测定酶法测定 （三）（三）FFA测定测定（四）磷脂测定（四）磷脂测定 全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（一）甘（一）甘 油油 三三 酯酯 测测 定定1化学法化学法 基本操作步骤包括：基本操作步骤包括：TG的的抽提抽提分离（有机溶剂），去除干扰物分离（有机溶剂），去除干扰物PL、FG等等（吸附剂）或分溶抽提；（吸
35、附剂）或分溶抽提；皂化皂化 使使TG水解生成甘油；水解生成甘油；氧化氧化 甘油成甲醛甘油成甲醛（过碘酸）；（过碘酸）；显色显色定量甲醛。定量甲醛。A.甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色（甲醛与变色酸在硫酸溶液中加热产生紫红色（Eegriwe反反应），应），570nm测定吸光度。测定吸光度。B.甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下加热生成黄色的产物甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下加热生成黄色的产物（Hantgsch反应），反应），412nm测定吸光度。测定吸光度。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2甘甘 油油 三三 酯酯 酶酶 法法 测测 定定评价：操作简
36、便，快速准确，并能在自动化生物化学分析仪评价：操作简便，快速准确，并能在自动化生物化学分析仪上进行批量测定。上进行批量测定。所测结果包括了血清中所测结果包括了血清中FG，如何解决？如何解决？全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学TG参考范围与临床意义参考范围与临床意义血血清清TG参参考考范范围围：成成人人0.451.69mmol/L（40150mg/dl）。目目前前我我国国的的血血脂脂异异常常防防治治建建议议提提出出，成成年年人人的的合合适适TG水水平平1.69mmol/L（150mg/dl）；1.69mmol/L为为TG升高。升高。TG升升高高可可
37、见见于于家家族族性性高高TG血血症症、家家族族性性混混合合性性高高脂脂血血症症、冠冠心心病病、动动脉脉粥粥样样硬硬化化、糖糖尿尿病病、肾肾病病综综合合症症、甲甲状状腺腺功功能能减减退退、胆胆道道梗梗塞塞、糖糖原原累累积症、妊娠、口服避孕药、酗酒等。积症、妊娠、口服避孕药、酗酒等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）（二）总总 胆胆 固固 醇醇 测测 定定血清中胆固醇血清中胆固醇：CE占占70；FC占占30。测定方法分为化学法和酶法两大类。测定方法分为化学法和酶法两大类。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验
38、生物化学1化学比色法化学比色法一一般般包包括括：抽抽提提；皂皂化化；毛毛地地黄黄皂皂苷苷沉沉淀淀纯纯化化；显色比色四个阶段。显色比色四个阶段。颜色反应颜色反应有三类：有三类：（1）胆胆固固醇醇与与醋醋酐酐-硫硫酸酸试试剂剂产产生生蓝蓝绿绿色色。如如L-B法法、Abell法。法。（2）胆固醇与高铁硫酸试剂产生紫红色，如硫磷铁法。）胆固醇与高铁硫酸试剂产生紫红色，如硫磷铁法。（3）胆胆固固醇醇与与邻邻苯苯二二甲甲醛醛硫硫酸酸生生成成紫紫红红色色，如如邻邻苯苯二二甲甲醛法。醛法。代表性的方法：代表性的方法：（1）硫硫磷磷铁铁法法（Bowman法法）：用用无无水水乙乙醇醇提提取取胆胆固固醇醇，沉淀蛋白
39、质，提取液中加硫磷铁试剂显色。沉淀蛋白质，提取液中加硫磷铁试剂显色。（2）Abell法法：血血清清中中加加入入氢氢氧氧化化钠钠乙乙醇醇溶溶液液，使使CE皂皂化化为为FC；加加入入正正己己烷烷-水水提提取取后后，FC进进入入正正己己烷烷相相，以以醋醋酐酐-硫酸试剂显色定量。硫酸试剂显色定量。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学2.总总 胆胆 固固 醇酶法测定醇酶法测定l（1）CE在胆固醇酯酶在胆固醇酯酶(cholesterol esterase，CHE)作作用下水解成用下水解成FC和和FFA；l（2）FC再经胆固醇氧化酶再经胆固醇氧化酶(choles
40、terol oxidase，COD)氧化成氧化成4胆甾烯酮和胆甾烯酮和H2O2；l（3）再分别定量再分别定量O2的消耗或者的消耗或者H2O2的生成量，或者的生成量，或者4胆甾烯酮生成量，以作为胆甾烯酮生成量，以作为FC的定量依据。的定量依据。lA.测定测定4胆甾烯酮法胆甾烯酮法 240nmlB.定量定量O2的消耗的消耗 电位测量电位测量lC.测定测定H2O2的生成量的生成量全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学TC参考范围与临床意义参考范围与临床意义血血清清TC参参考考范范围围：成成人人2.855.69mmol/L（110220mg/dl）。目目前前
41、我我国国的的血血脂脂异异常常防防治治建建议议中中以以5.17mmol/L（200mg/dl）为为合合适适水水平平，5.205.66mmol/L（201 219mg/dl）为为临临界界范范围围或或边边缘缘升升高高，5.69mmol/L（220mg/dl）为升高。为升高。高胆固醇血症和高胆固醇血症和AS的发生有密切关系。的发生有密切关系。TC升高见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾升高见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病病综合征综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等。此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩糖尿病等。此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也可使等也可
42、使TC升高。升高。TC降低见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性降低见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性肿瘤、营养不良、巨细胞性贫血等。肿瘤、营养不良、巨细胞性贫血等。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（三（三）游离脂肪酸测定游离脂肪酸测定 FFA在在血血中中浓浓度度很很低低，成成人人0.40.9mmol/L；儿儿童童和和肥肥胖胖成成人人稍高。其含量水平受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等因素影响。稍高。其含量水平受脂代谢、糖代谢和内分泌功能等因素影响。血血中中FFA半半寿寿期期为为12min，极极短短。血血清清中中的的FFA是是与与清清蛋蛋白白结合进行
43、运输。结合进行运输。FFA测测定定标标本本：一一定定要要注注意意在在4条条件件下下分分离离血血清清并并进进行行测测定定。因因为为血血中中有有各各种种脂脂肪肪酶酶存存在在，易易使使血血中中TG和和PL的的酯酯型型脂脂肪肪酸酸分分解解成成非非酯酯化化的的FFA，使使血血中中FFA值值上上升升。贮贮存存的的标标本本仅仅限限于于24h内。内。血清血清FFA测定方法测定方法：1非非酶酶法法测测定定 非非酶酶法法测测定定包包括括滴滴定定法法、比比色色法法、原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法和和高高效效液液相相层层析析法法。前前三三种种方方法法准准确确性性差差，高高效效液液相层析法仪器太昂贵，不便于批量操
44、作。相层析法仪器太昂贵，不便于批量操作。2酶酶测测定定法法 血血清清中中主主要要用用脂脂肪肪酶酶测测定定。可可分分别别测测定定产产物物乙乙酰酰CoA、AMP或或辅辅酶酶A(CoA)，进进行行定定量量。酶酶法法测测定定结结果果准准确确可靠快速，易于批量检测。可靠快速，易于批量检测。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（四）磷脂测定（四）磷脂测定血清中血清中PL包括包括：卵磷脂卵磷脂(60)和溶血卵磷脂和溶血卵磷脂(210)；磷脂酰乙醇胺等磷脂酰乙醇胺等(2)；鞘磷脂鞘磷脂(20)。血清血清PL定量方法定量方法:1化学测定法化学测定法 抽提分离；抽提分
45、离；灰化；灰化；显色、比色。显色、比色。2酶酶测测定定法法 可可分分别别利利用用磷磷脂脂酶酶A、B、C、D等等4种种酶酶作作用用，加加水水分分解解，测测定定其其产产物物，对对PL进进行行定定量量，一一般般多多采采用用磷磷脂脂酶酶D(PL-D)。PL-D可可作作用用于于含含有有卵卵磷磷脂脂、溶溶血血卵卵磷磷脂脂和和鞘鞘磷磷脂脂以以及及含含胆胆碱的磷脂，这三种磷脂约占血清总磷脂的碱的磷脂，这三种磷脂约占血清总磷脂的95。该法快速准确，便于自动化仪器进行批量检测。该法快速准确，便于自动化仪器进行批量检测。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白
46、测定二、血浆脂蛋白测定（一）电泳法（一）电泳法（二）超速离心法（二）超速离心法（三）脂蛋白胆固醇测定（三）脂蛋白胆固醇测定1沉淀分离法沉淀分离法 2均相测定法均相测定法 3间接法间接法（四）（四）Lp(a)测定测定全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学二、血浆脂蛋白测定二、血浆脂蛋白测定（一）电泳分离法（一）电泳分离法原理：原理：不同脂蛋白因蛋白质含量不同、其电荷量不不同脂蛋白因蛋白质含量不同、其电荷量不同，故可用电泳方法进行分离，并根据血浆脂蛋白同，故可用电泳方法进行分离，并根据血浆脂蛋白电泳迁移率不同予以判断确认。电泳迁移率不同予以判断确认。方法
47、：方法：（1）预染、电泳预染、电泳:血浆脂蛋白用亲脂染料如苏丹黑血浆脂蛋白用亲脂染料如苏丹黑B等进行预染再电泳；等进行预染再电泳；（2）扫描、计算：扫描、计算：置于光密度计内进行扫描，计算置于光密度计内进行扫描，计算出各种脂蛋白的百分比，该数值乘以血浆总脂量，出各种脂蛋白的百分比，该数值乘以血浆总脂量，即可求出即可求出-脂蛋白、脂蛋白、-脂蛋白和前脂蛋白和前-脂蛋白含量。脂蛋白含量。电泳支持物电泳支持物一般常用醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶或一般常用醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。聚丙烯酰胺凝胶。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（二）超速离
48、心分离纯化法（二）超速离心分离纯化法超速离心法：超速离心法：根据血浆中各种脂蛋白的比重根据血浆中各种脂蛋白的比重(密密度度)的差异，在强大离心力作用下进行分离纯化的差异，在强大离心力作用下进行分离纯化的一种方法。的一种方法。一般操作方法一般操作方法：将血浆置于已准备好的不同密：将血浆置于已准备好的不同密度梯度的盐溶媒介质中，在强大离心力作用下，度梯度的盐溶媒介质中，在强大离心力作用下，各脂蛋白依其自身的各脂蛋白依其自身的Sf不同，分散于离心管中不同，分散于离心管中的密度梯度溶媒层，达到分离纯化的目的。的密度梯度溶媒层，达到分离纯化的目的。超速离心法是分离纯化脂蛋白的有效技术超速离心法是分离纯化
49、脂蛋白的有效技术,目前目前广泛应用于脂蛋白、载脂蛋白代谢的研究中。广泛应用于脂蛋白、载脂蛋白代谢的研究中。全国高等学校医学规划教材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学（三）血浆脂蛋白胆固醇测定（三）血浆脂蛋白胆固醇测定脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前以脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量依据。白的定量依据。高密度脂蛋白高密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(HDL-C)低密度脂蛋白低密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(LDL-C)极低密度脂蛋白极低密度脂蛋白-胆固醇胆固醇(VLDL-C)全国高等学校医学规划教
50、材全国高等学校医学规划教材 临床检验生物化学临床检验生物化学1.沉淀分离法沉淀分离法原理：原理：脂蛋白的组成及理化性质不同，在不同的聚阴离子、脂蛋白的组成及理化性质不同，在不同的聚阴离子、2价金属离子价金属离子(Mn2+，Mg2+、Ca2+、Ni2+、Co2+)及不同及不同pH值条件下，使脂蛋白与聚阴离子结合形成复合物沉淀，以值条件下，使脂蛋白与聚阴离子结合形成复合物沉淀，以达到分离定量各种脂蛋白的目的。达到分离定量各种脂蛋白的目的。方法：方法：（1）肝素肝素-锰锰沉淀血清中沉淀血清中VLDL和和LDL，离心沉淀，离心沉淀，HDL则留在上清液，再定量则留在上清液，再定量HDL-C量，即为血浆量