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1、血细胞分析仪原理及散点图临床血细胞分析仪原理及散点图临床应用应用一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 二、散点图案例分析一、血细胞各通道分析原理及散点图分析一、血细胞各通道分析原理及散点图分析血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，参数，如直方图，DIFFDIFF散点图，散点图，NRBCNRBC散点图等。实验散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。DIFFWB
2、C/BASONRBC半导体激光荧光染色（聚次甲基+噁嗪）主要原理FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息）SFL侧向荧光：核酸含量（DNA、RNA)DIFF通道分析原理4DL(阴离子表面活性剂）完全溶解RBCPLT 在WBC膜上打孔溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在SSC显示复杂程度是最大的。4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度化学粘附化学粘附大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附嗜酸粒细胞大分子有机酸RNA/DNA荧光染
3、色原理成熟白细胞：高荧光特性网织红细胞：弱荧光特性血小板：成熟RBC：原始细胞：幼稚细胞：微弱荧光特性 无荧光特性 极高荧光特性 极高荧光特性荧光染色WBC分类的优势检测异常细胞提供幼稚粒细胞信息（IG）提供原始细胞信息（Other）10SFB溶血剂（酸性，低渗）溶解RBCPLT除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态Baso保持原状纵坐标：前向散射光（纵坐标：前向散射光（FSC）反反映细胞大小映细胞大小横坐标：侧向散射光（横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度反映细胞内部复杂程度嗜碱其它有 核细胞嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该溶液中受到保护，
4、而其他有核细胞则被 溶解成裸核WBC/BASO 通道分析原理NRBC通道分析原理NR溶血剂完全溶解RBC，PLTWBC保持原状NRBC溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量NRBC%=NRBC#/NRBC_WBC#出现有核红时WBC的修正红系增生活跃时，外周血易见较多的红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在，在WBC 计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。WBC增多对增多对RBC计数的干扰计数的干扰RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L时，需校正红系统参数贫血越严重，对R
5、BC影响越大血红蛋白通道光光电电比色法比色法SLS（十二（十二烷烷基磺酸基磺酸钠钠）：无）：无氰氰无毒无毒二、散点图案例分析二、散点图案例分析嗜碱性粒细胞增多症在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外DIFF散点图上，中性区域的左下方也为嗜碱区域，也出现了大量的散点。BASO%：仪器13.4%镜检13.5%AML-M1(例1)不可信不可信DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。IMI散点图也提示大量原始细 胞。镜检发现有77.5%的原始细胞。细胞表面标志CD13和CD33阳 性，CD36阴性；为急性髓细 胞性白血病。AML-M2DIFF散点图显示白细胞完全融合
6、且不分类。IMI散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现有90%的原始细胞、3%的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。AML-M3DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒 细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼 粒细胞。AML-M4DIFF散点图，白细胞区域出现大量灰白色散点，完全融合，不分类。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼 稚
7、粒细胞。AML-M5bDIFF散点图淋巴与单核 融为一体，不分类，IMI散点图显示大量原始细胞 和幼稚粒细胞。镜检发现59%的原始细胞，0.5%的早幼粒细胞，单 核细胞24.5%。慢粒危象DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点，中性粒细胞上方也有少 量散点，IMI散点图也出现大量红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现38.5%的原始细胞，幼 稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯 酶染色阴性或弱阳性，可被氟化 钠抑制。这是一例慢粒急单变。MDSDIFF：淋巴细胞和单核细胞之间界限不清，提示出现原 始细胞。中性粒细胞散点向 左下方延伸到嗜碱区域。IMI：少
8、量红点NRBC：幼红镜检：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC范*，女，67y。2016.11，诊 断为MDS伴原始细胞增多（10%）DIFF散点图淋巴与单核区域融 合，提示出现原始细胞报警提示异常淋巴细胞/原始细 胞，异淋？镜检：47%原始淋巴细胞，未见 异淋。血片POX（-）。急淋变MDS急淋变急性T淋巴细胞白血病DIFF散点图淋巴与单核完 全融合，IMI散点图几乎没有红色散点，仪器提示异 常淋巴/原始淋巴细胞。镜检发现有59.5%的异常淋 巴细胞。本例被诊为ATL。CLL淋巴与单核区域分界不 清，仪器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。镜检：L：86.5%，幼淋2.0%异
9、型淋巴细胞异型淋巴细胞增高与 多种病毒感染及变态 反应有关。常见有：传染性单核 细胞增多症、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、肾综合征出血热等病 毒性感染。特点：胞体增大，胞 质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化，荧光强度最强。散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。原原因因：疟疟原原虫虫裂裂殖殖体体破破裂裂，疟疟色色素素从从感感染染的的血血细细胞胞中中释释放放出出来来，继继而而被被白白细细胞胞吞吞噬噬，吞吞噬噬 了了疟疟色色素素的的白白细细胞胞侧侧向向散散射射光光强强度度改改变变，显显示示在在散散点点图图靠靠近近中中性性粒粒细细胞胞一一侧
10、侧，但但也也被被仪仪器器 以以EoEo特有的红色标示出来。特有的红色标示出来。张时民等张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例.中华临床医师杂志，中华临床医师杂志，2011,52011,5（2 2）:633-635:633-635疟疟原虫感染的散点原虫感染的散点图图（一）（一）从仪器从仪器报警报警EOEO增高增高或或无无EOEO分类分类结果的结果的1 5011 501份份标本中发现有标本中发现有9 9份份疟疟 原虫标原虫标本，本，6 6份份散点图表现为散点图表现为EOEO与与NEGNEG之间之间间距缩小间距缩小(图图1)1)，3 3份份报警白细胞散报警白细胞散 点图点图异常异常,且散点图显示且散点图显示EOEO与与NEGNEG之间无间距之间无间距(图图2)2)。其他其他1 4921 492份散点图基本正常。因为是真性份散点图基本正常。因为是真性EOEO增多，表现在散点图上是增多，表现在散点图上是EO EO 数量增加，为正常分类散点图数量增加，为正常分类散点图(图图3)3)。戴燕，万海英等.XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志，2008,31（7）:763-766疟疟原虫感染的散点原虫感染的散点图图（二）（二）谢谢