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1、基础医学实验技术基础医学实验技术 基本操作技术基本操作技术 溶液的配制溶液的配制 缓冲溶液缓冲溶液天津医学高等专科学校天津医学高等专科学校 基础医学部基础医学部 生物化学教研室生物化学教研室 吕学儒吕学儒基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒基基 本本 操操 作作 技技 术术溶液的配制溶液的配制缓冲溶液缓冲溶液 P39 P40 P8*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒实验一实验一 基本操作技术基本操作技术 实验目的实验目的 掌握玻璃仪器的清洗；掌握玻璃仪器的清洗；学会正确使用吸量管、微量移液器、酒精计、学会正确使用吸量管、微量移液器、酒精计、粗天平的使用。粗天平的使用。玻璃仪器玻璃仪器 烧
2、杯、试管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。烧杯、试管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒实验一实验一 基本操作技术基本操作技术一、玻璃仪器的洗涤与清洁一、玻璃仪器的洗涤与清洁（一）新购玻璃仪器的清洗（一）新购玻璃仪器的清洗清水冲清水冲沾洗衣粉刷沾洗衣粉刷清水冲清水冲蒸馏水洗蒸馏水洗（二）使用过的玻璃仪器清洗（二）使用过的玻璃仪器清洗1.一般玻璃仪器一般玻璃仪器清水冲清水冲沾洗衣粉刷沾洗衣粉刷清水冲清水冲蒸馏水洗蒸馏水洗2.容量仪器容量仪器清水冲清水冲铬酸洗液浸泡铬酸洗液浸泡清水冲清水冲蒸馏水洗蒸馏水洗3.比色杯比色杯清水冲清水冲盐酸洗液浸泡盐酸洗液浸泡清水
3、冲清水冲蒸馏水洗蒸馏水洗*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒二、刻度吸量管的使用二、刻度吸量管的使用 量取量取10ml10ml以下以下的任意体积时用。的任意体积时用。刻度标记有两种：刻度标记有两种：上为零刻度，下为总量刻度；上为零刻度，下为总量刻度；上为总量刻度，下为零刻度的。上为总量刻度，下为零刻度的。放液后，将吸量管尖在容器放液后，将吸量管尖在容器内壁上垂直停留内壁上垂直停留1515秒即可。秒即可。实验一实验一 基本操作技术基本操作技术*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒 近年来为了便于准确快速地选取吸量管，国际标准化组近年来为了便于准确快速地选取吸量管，国际标准化组织统一规定：在
4、刻度吸量管的上方印上各种彩色环，以利织统一规定：在刻度吸量管的上方印上各种彩色环，以利辨别，其容积标志如下表：辨别，其容积标志如下表：标准容量标准容量（mlml）0.10.10.20.20.250.250.50.51 12 25 51010色标色标红红黑黑白白红红黄黄黑黑红红橘红橘红环数环数单单单单双双双双单单单单单单单单实验一实验一 基本操作技术基本操作技术*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒实验一实验一 基本操作技术基本操作技术吸量管的使用吸量管的使用选择选择执管执管取液取液调准刻度调准刻度放液放液洗涤洗涤*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒三、微量移液器的使用三、微量移液器的使用
5、 1.1.调体积选取钮至所需数值。调体积选取钮至所需数值。2.2.套上吸嘴，旋紧。套上吸嘴，旋紧。3.3.垂直持握微量移液器外壳，垂直持握微量移液器外壳，按下大拇指至取液按钮。按下大拇指至取液按钮。4.4.将微量移液器吸嘴插入溶液，将微量移液器吸嘴插入溶液，徐徐松开大拇指，使其复原。徐徐松开大拇指，使其复原。5.5.排放时，重新将大拇指按下，排放时，重新将大拇指按下，比取液时高一档以排空。比取液时高一档以排空。注：注：移液过程中应控制速度，移液过程中应控制速度，力度。如需移取另一样品，按吸力度。如需移取另一样品，按吸嘴排放钮，更换吸嘴。嘴排放钮，更换吸嘴。实验一实验一 基本操作技术基本操作技术
6、*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒 四、酒精表的使用四、酒精表的使用 选择酒精表的测试范围在选择酒精表的测试范围在70%80%v/v。在没有其他量器的条件下，将在没有其他量器的条件下，将酒精以适量蒸馏水稀释，用酒酒精以适量蒸馏水稀释，用酒精表检测浓度，当刻度指向精表检测浓度，当刻度指向75时即为消毒酒精。时即为消毒酒精。实验一实验一 基本操作技术基本操作技术*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒五、托盘天平的使用五、托盘天平的使用 1 1调零点调零点 2.2.称量称量 称量时，左放物，右放码。称量时，左放物，右放码。实验一实验一 基本操作技术基本操作技术*基础医学实验技术基础医学实验技
7、术吕学儒 3.3.称量完毕称量完毕 砝码放回砝码盒中，游码移至刻度砝码放回砝码盒中，游码移至刻度“0 0”处，天平的两个托盘重叠处，天平的两个托盘重叠后，放在天平的一侧，使天平休止，以保护天平的刀口。后，放在天平的一侧，使天平休止，以保护天平的刀口。实验一实验一 基本操作技术基本操作技术*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒实验目的实验目的 熟悉三种浓度溶液配制；学习配制常用医用溶液熟悉三种浓度溶液配制；学习配制常用医用溶液一、仪器与试剂一、仪器与试剂（一）仪器（一）仪器 托盘天平、量筒（托盘天平、量筒（100ml、）、）、100ml烧杯、刻度吸管（烧杯、刻度吸管（10ml、5ml）、容量瓶
8、（）、容量瓶（50ml）酒精计、玻璃棒、药匙、毛刷。）酒精计、玻璃棒、药匙、毛刷。（二）试剂（二）试剂 95%乙醇、乙醇、NaCl固体、新洁尔灭、固体、新洁尔灭、TD。实验二实验二 溶液的配制溶液的配制*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒实验二实验二 溶液的配制溶液的配制 1.75%酒精的配制：酒精的配制：用用95%（ml/ml)酒精配制酒精配制75%的酒精的酒精50mL。用酒精表测用酒精表测75%的酒精度的酒精度 2.配制配制0.1%新洁尔灭溶液新洁尔灭溶液50ml 3.配制生理盐水配制生理盐水50ml。4.制备制备1%TD消毒液消毒液10ml。溶液的配制与稀释溶液的配制与稀释*基础医学
9、实验技术基础医学实验技术吕学儒1.缓冲原理：缓冲原理：vNaH2PO4Na2HPO4 H2PO42-是抗碱成分是抗碱成分 HPO42-是抗酸成分是抗酸成分v在溶液加少量的碱时，在溶液加少量的碱时，OH-与与H2PO42-电离产生的电离产生的H+生成生成H2O，使溶，使溶液的液的PH值不发生明显变化。值不发生明显变化。v在溶液加少量的酸时，在溶液加少量的酸时，H+与与HPO42-结合生成结合生成H2PO42-，溶液的，溶液的PH值值也不发生明显变化。也不发生明显变化。v所以，缓冲溶液具有抗酸、抗碱的作用。所以，缓冲溶液具有抗酸、抗碱的作用。实验三实验三 缓冲溶液缓冲溶液*基础医学实验技术基础医学
10、实验技术吕学儒实验三实验三 缓冲溶液缓冲溶液2.配制缓冲溶液配制缓冲溶液v用刻度吸管取浓度为用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 5.0毫升，浓度为毫升，浓度为0.2M NaH2PO4 10.0毫升，混匀后用毫升，混匀后用pH试纸测定其试纸测定其pH值。值。v用刻度吸管取浓度为用刻度吸管取浓度为0.2M Na2HPO4 10.0毫升，浓度为毫升，浓度为0.2M NaH2PO4 5.0毫升，混匀后用毫升，混匀后用pH试纸测定其试纸测定其pH值。值。问题：两种比例不同的缓冲溶液问题：两种比例不同的缓冲溶液pH值为何不同？值为何不同？*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒3.缓冲溶液的抗酸、
11、抗碱作用缓冲溶液的抗酸、抗碱作用v将制好的两种缓冲溶液各分成两份，分别加入少量盐酸及少量氢氧化将制好的两种缓冲溶液各分成两份，分别加入少量盐酸及少量氢氧化钠溶液，用钠溶液，用pH试纸测定其试纸测定其pH值。值。v多加一些盐酸及氢氧化钠溶液后又有何变化，用多加一些盐酸及氢氧化钠溶液后又有何变化，用pH试纸测定其试纸测定其pH值。值。实验三实验三 缓冲溶液缓冲溶液*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒知识拓展知识拓展v酒精又叫乙醇，是最常用的皮肤消毒剂，酒精又叫乙醇，是最常用的皮肤消毒剂，7575的酒精用于灭菌消毒；的酒精用于灭菌消毒；5050的酒精用于防褥疮；的酒精用于防褥疮；20205050
12、的酒精擦浴用于高热病人的物理的酒精擦浴用于高热病人的物理降温。不同浓度的酒精都是由高浓度降温。不同浓度的酒精都是由高浓度(95(95)酒精用蒸馏水稀释而成的。酒精用蒸馏水稀释而成的。v酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能
13、力。的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。7575的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于细菌，酒精浓度低于7575时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。*基础医学实验技术基础医学实验技术吕学儒 实验报告实验报告 1.1.名称名称 2.2.目的目的 3.3.材料材料 4.4.方法方法 5.5.结果结果 6.6.分析分析*天津医学高等专科学校天津医学高等专科学校 基础医学部基础医学部 生物化学教研室生物化学教研室 吕学儒吕学儒