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1、生物安全实验室使用程序生物安全实验室使用程序三级个人防护要求三级个人防护要求 实验室生物安全防护的内容包括实验室生物安全防护的内容包括 1、安全设备、个体防护装置和措施（一级防护）2、实验室的特殊设计和建设要求（二级防护）3、严格的管理制度和标准化的操作程序和规程等方面采取综合措施实验室生物安全防护的目的实验室生物安全防护的目的 确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。一、个人防护装备一、个人防护装备 是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷濺物以及意外接种等）
2、危险的一种物理屏障。（一）个人防护所涉及的部位（一）个人防护所涉及的部位 1、眼睛、2、头面部、3、躯体、4、手、5、足、耳（听力）6、呼吸道（二）个人防护装备包括（二）个人防护装备包括 1、眼镜（安全镜、护目镜）2、口罩、面罩、防毒面具 3、帽子 4、防护衣(实验服、隔离衣、连体衣、围裙)5、手套 6、鞋套 7、听力保护器等。二、个人防护装备选择原则二、个人防护装备选择原则 实验室工作人员可根据不同级别的生物安全水平的操作来选择个人防护装备。结合所进行工作的性质来选择着装和装备。要求工作人员应掌握的要点要求工作人员应掌握的要点 1、必须十分了解和掌握自己工作性质和特点。2、所涉及的实验工作需
3、要使用个人防护装备的类型。3、正确的使用方法。三、各级生物安全实验室三、各级生物安全实验室 个体防护装备的配备原则个体防护装备的配备原则BSL1实验室实验室 1、工作人员在实验时应穿工作服，戴防护眼镜。2、工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。BSL2实验室实验室 除符合BSL1的要求外，还应该符合下列条件：1、在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。2、当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除
4、去手套。3、一次性手套不得清洗和再次使用。4、当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、戴N95口罩、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。BSL3实验室实验室 除符合除符合BSL2的要求外，还应该符的要求外，还应该符合下列条件合下列条件 1、在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备。2、当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。3、工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿
5、工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。4、工作时必须戴手套（两付为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。5、在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。6、在使用传染性物质或已被污染的仪器时，需戴手套。在使用电话、计算机等设备进行文书工作前，必须脱掉手套。7、谨记不能带着手套离开BSL-3实验室。所有离开BSL-3实验室的物品必须正确消除污染，并放在干净的容器或袋子中。8、有可能溅出或喷出传染性物质、危险试剂时，需使用面部和眼部防护器具。9、当有程序不能在生物安全柜内处理时，要组合使用适当的操作人员防护设备（如面罩、呼吸器）和物理容器设备。四、
6、个体防护装备的四、个体防护装备的注意事项注意事项 1、个人防护用品应符合国家规定的有关标准；2、在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备；3、对个人防护装备的选择、使用、维护应有明确的书面规定、程序和使用指导；4、使用前应仔细检查，不使用标志不清、破损或泄漏的防护用品。（一）眼睛防护装备（一）眼睛防护装备 1、安全眼镜和护目镜（物理、化学和生物因素）1）在所有易发生潜在眼睛损伤的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施；2）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度。一般而言：一般而言：佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目的。只有在进行有可能发生
7、化学和生物污染物质溅出的实验时，必须佩戴护目镜。进行有潜在爆炸的反应和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时，必须佩戴面罩或同时佩戴面罩和护目镜或安全眼镜。建议：工作人员在生物安全实验室中工作时不配戴隐型眼镜。不得戴眼镜防护装备不得戴眼镜防护装备 离开实验室区域离开实验室区域！安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害。但对某些特殊的操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时佩戴安全眼镜显然是不够安全的！1）用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿、碾磨物品；2）或在使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害（例如在压力或温度突然增加或降低的情况下）的实验室操作时。在这些情况下，有必要保护整个面部和喉部，应该
8、佩戴护目镜或面罩。a、安全镜 b、安全护目镜不得戴眼镜防护装备离开实验室区域不得戴眼镜防护装备离开实验室区域！眼镜配戴和卸下方法示意图眼镜配戴和卸下方法示意图2、洗眼装置、洗眼装置 如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。事后必须立即填写事故报告单并立即报告主管领导。洗眼装置洗眼装置要求要求 1）洗眼装置应安装在室内明显和易取的地方，并保持洗眼水管的通畅，便于工作人员紧急时使用。2）工作人员应掌握其操作方法。固定式洗眼装置固定式洗眼装置（二）淋浴装置和（二）淋浴装置和 应急消毒喷淋装置
9、应急消毒喷淋装置1、规定：规定：-BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置；-BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。2、要求：要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。应急消毒喷淋装置应急消毒喷淋装置 在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导！（三）头面部防护装备（三）头面部防护装备 口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染；仅适用于BSL-1或 BS
10、L-2实验室中使用；正确佩戴和卸下口罩示意图正确佩戴和卸下口罩示意图 一般在使用时可同时一般在使用时可同时佩戴面罩，以组合使用佩戴面罩，以组合使用的方法保护整个面部的方法保护整个面部,单独使用不能对工作人单独使用不能对工作人员提供呼吸保护。员提供呼吸保护。（四）防护面罩（四）防护面罩 1、对整个脸部进行防护：必须使用一种标准的防护面罩以罩住整个脸部，或使用口罩加护目镜（或口罩加安全镜）。2、保护部分面部：配戴安全眼镜或护目镜，但必须戴口罩以保护部分面部或配戴标准防护面罩。注意事项：注意事项：1）在使用防护面罩时常常同时佩带安全镜或护目镜或口罩。2）实验完毕后必须先摘下手套，然后用手卸下防护面罩
11、。防护面罩防护面罩一次性面罩一次性面罩防护帽防护帽 在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。要求：要求：工作人员在实验操作时应佩带防护帽。一次性简易防护帽一次性简易防护帽（五）呼吸防护装备（五）呼吸防护装备 1、当实验室操作不能安全有效的将气溶胶限定在一定的范围内，要求使用呼吸防护装备。2、使用和维护指导书包括在相应活动的安全操作程序手册中，并按指导书及培训的要求使用。3、呼吸防护的有效装备 -防毒面具（面具、个人呼吸器和正压防护服）呼吸防护装备使用：呼吸防护装备使用：1）在进行高度危险性的操作（清理溢出的感染性物质和气溶胶）时，可
12、以采用防毒面具来进行防护。2）根据危险类型来选择防毒面具。4、防毒面具 1）在防毒面具中装有一种可更换的过滤器，它可以保护佩戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物以及气溶胶损害的影响。2）过滤器必须与防毒面具的正确类型相配套。3）为了达到理想的防护效果，每一个防毒面具都应与操作者的面部相吻合。4）应安排工作场所监控、医学评估和对呼吸器使用者的监督，以确保其始终正确使用该类装备。5）应对呼吸器作个体适应性测试。（六）手部防护装备（手套）（六）手部防护装备（手套）1、手套应在实验室工作时使用。2、在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以及 接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人
13、员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。3、手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。4、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。5、对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训。6、一次性手套不得重复使用。一次性手套必须先消毒后丢弃。规范的使用手套方法的几个要点规范的使用手套方法的几个要点 1、手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护。2、手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，将其浸
14、入水中观察是否有汽泡来检查手套的质量。3、手套的使用 1）一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室）；2）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和BSL-3实验室）应该佩戴两副手套；3）在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验；4）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖；乳胶手套乳胶手套 聚脂手套聚脂手套 4、手套的清洗和更换：1)使用一次性手套，不可再次使用。用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃；2)不得戴着手套离开实验室区域；3)在脱去手套之前，应该用自来水或肥皂和水加以彻底清洗、摘除并消毒（BS
15、L-1实验室）；4)脱去手套后,拉下袖口将手遮住；5)工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜之前,应该脱去外层手套丢入生物安全柜内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套，以避免污染门捏手、电灯开关、电话等（BSL-2和BSL-3实验室）。在撕破、损坏或手套污染时应及时更换手套。5、避免手套“触摸污染”1)戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）；2)避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏手等；3)如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部；4)注意尽量不去触摸工作台面和其他物品。6、戴手套注意要点:1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类
16、型和尺寸的手套。2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部。戴手套戴手套 7、脱手套过程及注意要点:1）用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；2）用戴着手套的手拿住该手套；3）用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；4）脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；5）丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。脱手套脱手套 8、洗手 根据(GB 19489-2004）要求:1）应该安装洗手装置，该装置可以是脚控或红外控制的洗手池，或者配置一个酒精擦手器。2）洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常洗手。（1）在处理活体病原材料或动物等生
17、物危害物质后；（2）在脱去手套之后和离开实验室之前；（3）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时；（4）在继续脱卸其他个人防护设备之前。洗手一般使用肥皂和水或使用酒精擦手器。洗手一般使用肥皂和水或使用酒精擦手器。（七）身体防护（七）身体防护 防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服；2、清洁的防护服应放置在专用存放处；隔离衣隔离衣 连体防护连体防护 3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中；4、每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁；5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换；6、离开实验室区域之前应脱去防护服。实验服（实验服（BSL
18、-1 实验室）实验室）-前面应该能完全扣住。隔离衣和连体衣（隔离衣和连体衣（BSL-2和和BSL-3实验室）实验室）-比实验服将更适合于在微生物实验室以及生物安全柜中的操作工作。当有可能发生危险物质（血液或培养液等化学或生物危害物质喷溅）到工作人员身上时，应该在实验服或隔离衣外面再穿上塑料高颈保护的围裙。禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙。隔离衣穿戴方式隔离衣穿戴方式 隔离衣脱去方式隔离衣脱去方式 解开颈和腰部的系带，将隔离衣从颈处和肩处脱下。把外面污染面卷向里面，将其折叠或卷成包裹状，丢弃在消毒箱内。隔离衣脱去方式隔离衣脱去方式（八）足部防护（八）足部防
19、护 当实验室中存在物理、化学和生物危险因子的情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套。可以防止实验人员足部（鞋袜）避免受到损伤。BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋。禁止在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋、露趾和机织物鞋面的鞋。建议使用皮制或合成的不渗液体的鞋类以及防水、防滑的一次性或橡胶靴子。鞋套使用方法示意图鞋套使用方法示意图 靴套使用方法示意图靴套使用方法示意图（九）实验人员外套（九）实验人员外套 1、实验外套（工作服、长袖衣服等）如反复使用，必须经得起杀菌消毒。2、选择衣服必须是舒适、不变形、抗静电、耐用。3、工作人员在进入实验室工作区前，必须
20、要求其应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。4、离开实验室到非实验区前，实验衣应该脱下并留在实验室。5、所有实验衣服应在实验室消毒或设备清洗，工作人员不应该在家清洗实验衣服。6、当工作完毕后须脱下工作服并洗手，不得穿着工作服离开实验室。对于可再次使用的工作服必须实行先消毒后清洗的原则。个体防护设备的使用个体防护设备的使用 1、在使用生物安全柜时应穿着个体防护服。2、进行一级和二级生物安全水平的操作时，可穿着普通实验服。前面加固处理的反背式实验隔离衣具有更好的防护效果。3、在进行三级和四级生物安全水平（防护服型实验室除外）的操作使用时。手套应套在隔离衣的外面，可以戴加有松紧带
21、的套袖来保护实验操作人员的手腕。有些操作可能还需要戴口罩和安全眼镜。在危害评估的基础上使用个体防护设备。操作感染动物和传染性材料时都要使用个体防护设备。工作人员自我防护工作人员自我防护 1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。3、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。4、为了防止眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。5、严禁穿着实验室
22、防护服离开实验室，（如去餐厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间）等非实验区。6、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。7、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。8、禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。9、在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。个体防护个体防护 1、在实验室内穿着反背衣；2、只在实验室区域穿着实验室防护服；3、洗手池为脚动、肘动或自动控制。手的保护手的保护 处理感染性材料、可能污染的仪器以及工作表面时，戴两层手套。呼吸保护呼吸保护 当生物安全柜不能安全地控制气溶胶时，实验室中的所有工作人员均要佩戴呼吸保护装置。操操 作作 1）在生物安全柜外面进行感染性
23、材料的工作时，提供黏膜保护的防护装置；2）将与微生物因子有关的特定危害告知工作人员；3）要求工作人员阅读所有操作和规程的说明（包括安全手册或操作手册），并遵照执行；4）工作人员每年接受对规程更改部分的知识更新追加培训；5）所有污染废弃物在处理之前先高压灭菌。（十）进入（十）进入BSL-3实验室的更衣程序实验室的更衣程序 1、进入、进入BSL-3实验室更换个人防护程序实验室更换个人防护程序更衣路线（）更衣具体要求说 明男更衣间女更衣间换实验室专用拖鞋换棉布分体服，戴内层手套戴一次性口罩，无纺布帽子棉布分体服、拖鞋专人专用每步更衣互相着装检查。正压间换实验室专用鞋及鞋套穿实验室防护服实验人员戴N9
24、5口罩及防护目镜。戴外层手套每步更衣互相着装检查。应严格执行正确着装，才能进入下一房间。洁净区缓冲一更缓冲间缓冲此区为洁净与半污染区之间的缓冲半污染区走廊缓冲二更缓冲间缓冲2、出、出BSL-3实验室更换个人防护程序实验室更换个人防护程序更衣路线（）更衣具体要求说 明污染区 用消毒剂浸泡外层手套5分钟，脱去外层手。二更缓冲间半污染区走廊 缓冲一更缓冲间 依次除去双层口罩、防护目镜、实验室防护服、鞋套，放入高压消毒袋内，再次消毒液浸泡手套后除去内层手套。防护目镜用70%酒精棉球消毒。洁净区与半污染区的缓冲洁净区 用70%酒精棉球擦拭面部裸露部位,并用3%硼酸水漱口。正压间 更换实验室专用鞋男更衣间女更衣间 更换棉布分体服、根据情况可淋浴。更换个人服装谢谢！