免疫标记的应用与评价-资料上课讲义.ppt

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1、免疫标记的应用与评价免疫标记的应用与评价-资料资料免疫标记的应用免疫标记的应用n n干细胞的确定CD34/CD38/CD90HPC/PBSC定量分析1.移植治疗的日益普及2.移植门槛的降低3.干细胞采集的确定4.有效干细胞的确定要求(CD34、CD90、CD38等)CD34+的分析:未动员前外周血中CD34+细胞14%,CD34+/CD38-细胞1/2500,CD34+/CD38-/CD90+细胞1/10000。各家单抗不同、操作不一,结果难以比较。内毒素、单纯化疗(骨髓抑制)、细胞因子、化疗联合细胞因子等的动员。n n淋巴细胞和NK细胞确定和定量分析n n淋巴细胞分化增殖异常的信号n n淋巴

2、细胞与髓系细胞的鉴别n n混合性白血病和未确定性(型)白血病的诊断n n造血干细胞病变的信号n n疾病的预后判断T T细胞标记细胞标记T细胞及其亚群 T祖细胞(pro-T)的表型为CD34+、TdT+、CD10+、CD7+、未成熟T细胞标志CD3、CD4和CD8。在T细胞发育过程中,CD7是最早出现的T细胞标志,且贯穿表达在整个T细胞分化发育过程中。胸腺细胞要分化发育为有功能的成熟T细胞,细胞表面标志需经历一定的变化过程。从 CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-(即CD4、CD8双阴性)CD7+、CD1+、CD2+

3、、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+(即CD4、CD8双阳性),最后发育成CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8-、TCR+和CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8+、TCR+单阳性的两群成熟胸腺细胞,然后进入外周淋巴器官和血液,执行免疫功能。但在正常外周血中通常存在CD3+、CD4+、CD8-(TH/TI),CD3+、CD4-、CD8+(TS/TC),CD3+CD4+CD8+和CD3+CD4-CD8-四种表型不同的T细胞,它们分别占T细胞总 数 的 60%70%,20%30%,1%3%,1%10%。前三种表型细胞的TCR主要为TCR,而CD4-CD8-T细胞主要表达TCR

4、,他们都执行细胞免疫功能。n nCD2是绵羊红细胞受体和淋巴细胞功能相关抗原-2(LFA-2),表达于人95%T细胞、50%70胸腺细胞和大颗粒淋巴细胞(LGLNK)的表面。CD3是T细胞表面抗原,表达于成熟胸腺细胞、静息和激活的的外周血T细胞,是鉴定T细胞的重要标志,其胞浆和膜CD3是早期和普通型T细胞白血病的主要分型标记。n nCD5、CD7是T细胞白血病较特异的标记,也是髓系白血病时最常见的伴随标记。CD15、CD45则是白细胞的共同标记抗体,在淋巴瘤的诊断中有一定的价值。而CD25和CD28主要分布于活化T淋巴细胞表面,为活化T淋巴细胞标志。胸腺细胞、静止T细胞、静止B细胞以及NK细胞

5、表面无表达。主要用于淋巴细胞疾病的免疫分型。外周血淋巴细胞CD25+、CD28+占54%86%n n末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和II类人类白细胞抗原(HLA-DR)的阳性表达对早期T细胞白血病的诊断有重要价值。TCR、的基因重排检测有利于恶性T细胞疾病细胞异常克隆存在的确定。n n另外,8090和95以上的NK细胞表达CD16和CD56。用CD3-CD16+CD56+可定义NK细胞。B细胞标记细胞标记 B细胞 B细胞的分化主要分为B祖细胞、前B细胞、未成熟B细胞、成熟B细胞、活化B细胞和浆细胞6个阶段。(1)B祖细胞(pro-B):此期最早识别的B细胞特异性抗原是CD19,同时表达CD34

6、、细胞核TdT、HLA-DR、CD40、CyCD22。(2)前B细胞(pre-B):CD34和TdT消失,出现CyCD79、CD10、CD20、CD9、CDw78、CD74,c+(胞浆IgM重链)。(3)未成熟(早期)B细胞(immature B cell):CD9、CD10消失,出现 SIgM、CD22。CD20、CD24、CD40、CD72、CD74、CDw78、CD79表达增加。其他新的B抗原CD37、CD2、CDw75、CDw76相继出现。(4)成熟B细胞(mature B cell):SIgM和IgD同时表达,并出现CR、FcR和丝裂原受体,上述B细胞抗原继续存在。(5 5)活活化化

7、B B细细胞胞(activated activated B B cellcell):成成熟熟B B细细胞胞被被抗抗原原或或丝丝裂裂原原刺刺激激后后,成成为为活活化化B B细细胞胞,继继之之增增生生和和分分化化。在在此此过过程程伴伴随随表表达达B B细细胞胞激激活活抗抗原原CD23CD23、CD77CD77、CD80CD80、CD86CD86和和其其他他激激活活相相关关抗抗原原如如CD25CD25、CD26CD26、CD30CD30、CD69CD69、CD70CD70、CD71CD71、CD38CD38等等。膜膜结结合合型型IgIg逐逐渐渐减减少少,分分泌泌型型IgIg逐渐增加,并可发现逐渐增加

8、,并可发现IgIg基因重链类型转换。基因重链类型转换。(6 6)浆浆细细胞胞(plasma plasma cellcell):激激活活B B细细胞胞进进一一步步分分化化成成为为产产生生抗抗体体的的浆浆细细胞胞,这这时时获获得得PC-1PC-1、PCA-1PCA-1和和CD138CD138浆浆细细胞胞特特异异抗抗原原,CD85CD85表表达达增增加加,CD38CD38抗抗原原再再出出现现。而而SIgSIg和和上上述述B B抗抗原原消失。消失。CD79CD79仍可存在于胞质中。仍可存在于胞质中。B细胞上的CD抗原分为:B细胞限制性(特异性)抗原:CD19、CD20、CD21、CD22、CD77 和

9、CD79,它们的表达只限于B细胞上,在鉴别细胞系上是十分重要的标志。B细胞相关性抗原:CD5、CD9、CD10、CD23、CD24、CD37、CD40、CD53、CD72、CD73、CD74、CDw75、CDw76、CDw78、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD86、CD124和CD139。而B细胞表面的受体SIg,是B细胞特异性识别抗原的受体,也是B细胞重要的特征标志。n nCD19CD19、CD20CD20、CD21CD21、CD22CD22和和CD24CD24都是都是B B细细胞白血病和淋巴瘤最常用的标记抗体。对中国人胞白血病和淋巴瘤最常用的标记抗体。对中国人而言,而

10、言,CDl9CDl9是特异性和敏感性最高的。是特异性和敏感性最高的。CD19CD19是一是一种早期的、谱系特异的泛种早期的、谱系特异的泛B B细胞表面抗原,从最早细胞表面抗原,从最早期期B B细胞前体细胞阶段即表达,持续存在直至细胞前体细胞阶段即表达,持续存在直至B B细细胞终末阶段,分化为浆细胞时丢失。胞终末阶段,分化为浆细胞时丢失。CD19CD19存在于存在于9090外周血、脾脏、淋巴结或扁桃体中的外周血、脾脏、淋巴结或扁桃体中的B B细胞和细胞和近近5 5的骨髓细胞。在造血系统的骨髓细胞。在造血系统CD19CD19只表达于正只表达于正常和恶性常和恶性B B细胞。外周血细胞。外周血T T细

11、胞、单核细胞、粒细细胞、单核细胞、粒细胞和血小板表面不表达胞和血小板表面不表达CD19CD19。CD24CD24对对B B细胞白血细胞白血病细胞表达的敏感性接近病细胞表达的敏感性接近CD19CD19,且有较高的特异,且有较高的特异性。性。CD20CD20和和CD22CD22与与CD19CD19和和CD24CD24有相同的特异性,有相同的特异性,但敏感性不够,但敏感性不够,CD20CD20的表达往往伴随性的表达往往伴随性CD19CD19的的阳性而出现。阳性而出现。n nCD10、TdT都是早期B细胞的标记,其中CD10的表达可出现在90%的B系统ALL的原始细胞上。一般来说,这类白血病患者有超过

12、一半,甚至三分之二以上,在免疫表型中出现淋巴细胞分化的明显不协调,如,CD22阳性与CD10表达同时出现在ALL白血病细胞上。而免疫球蛋白重链(IgH)的基因重排更是B细胞异常克隆性增生的标记。异常增生克隆性T细胞也有15%20%呈现IgH的基因重排。髓系细胞标记髓系细胞标记n n这类抗体包括CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD36、CD45、CD68、CD41、CD42、CD61、CD63和CD117等。这些免疫标记种类繁杂,缺乏特异性和敏感性(与淋巴细胞标记抗体相比)。很多情形下,上述标记也出现在正常的髓细胞表达上。3.3.髓系标记髓系标记 从髓系祖细胞从髓系祖细胞终末

13、分化的成熟细终末分化的成熟细胞(粒细胞、单核细胞、血小板和红细胞)间胞(粒细胞、单核细胞、血小板和红细胞)间各阶段细胞特征性标志还不十分清楚。各阶段细胞特征性标志还不十分清楚。根据粒细胞和单核细胞上的髓系抗原表达试将其根据粒细胞和单核细胞上的髓系抗原表达试将其大致分为七种类型大致分为七种类型:(1 1)粒粒细细胞胞和和单单核核细细胞胞上上都都有有较较强强表表达达的的抗抗原原有有:CD13CD13、CDw17CDw17、CD32CD32、CD87CD87、CD88CD88、CD89CD89、CDw92CDw92、CD93CD93、CD156CD156、CD157CD157、CD163CD163。

14、其其中中CD13CD13在在原原粒粒细细胞胞质质中中表表达达比膜上早,在比膜上早,在AMLAML诊断上十分重要。诊断上十分重要。(2 2)以以粒粒细细胞胞为为主主,但但也也存存在在于于单单核核细细胞胞的的抗抗原原有有:CD15CD15和和CD65CD65。CD65CD65是是特特异异性性髓髓系系抗抗原原,强强表表达达在在成成熟熟粒细胞,弱表达在单核细胞上。粒细胞,弱表达在单核细胞上。(3 3)基本表达在粒细胞上的抗原有:)基本表达在粒细胞上的抗原有:CD16bCD16b和和CD66CD66。(4 4)以以单单核核细细胞胞为为主主,但但也也表表达达在在粒粒细细胞胞的的抗抗原原有有:CD14CD1

15、4和和CD33CD33。CD14CD14主主要要强强表表达达在在单单核核-巨巨噬噬细细胞胞,弱弱表表达达在在粒粒细细胞胞上上。CD33CD33抗抗原原分分布布只只限限于于造造血血系系统统内内,表表达达在在髓髓系系祖祖细细胞胞CFU-CFU-GEMMGEMM、CFU-GMCFU-GM、CFU-GCFU-G、CFU-MCFU-M以以及及相相应应的的白白血血病病细细胞胞上上。约约80%AML80%AML原原粒粒细细胞胞表表达达CD33CD33抗抗原原,而而终终末末分分化化的的粒粒细细胞胞CD33CD33抗抗原原弱弱表表达达。CyCD33CyCD33先先于于mCD33mCD33表表达达,故故在在AML

16、-M0AML-M0诊诊断断上上CyCD33CyCD33加加CyCD13CyCD13十分有用。十分有用。(5 5)基本只表达在单核细胞上的抗原有:)基本只表达在单核细胞上的抗原有:CD16CD16、CD64CD64、CD68CD68、CD91CD91、CDw136CDw136和和CD65CD65。CD68CD68是目是目前发现可靠的检测造血系统内单核前发现可靠的检测造血系统内单核-巨噬细胞巨噬细胞系统的特异标志,用系统的特异标志,用CD68CD68单抗可将单抗可将AML-M1AML-M1M3M3与与AML-M4AML-M4及及AML-M5AML-M5区别开来。区别开来。(6)造血干、祖细胞抗原有

17、:CD34和CD90。CD34和CD90虽列在髓系抗原中,但都属于造血干、祖细胞抗原。CD34除表达在早期造血干、祖细胞外,还表达在约40%的AML和60%的ALL上,这些CD34+的白血病细胞可能来自具有多系性分化能力的分化不良的前身细胞。(7)其他髓系相关抗原:这些抗原主要存在于其他系细胞上,但在某些髓系细胞上也有表达,如:CD4、CD7、CD9、CD10、CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD38等。巨巨核核细细胞胞系系 在在巨巨核核细细胞胞系系发发育育过过程程中中依依次次出出现现PPOPPO、CD41aCD41a(b/ab/a)、CD41bCD41b(bb)和和CD61CD6

18、1(aa)、CD42CD42(bb)。还还可可表表达达CD36CD36(强强)。血血小小板板具具有有丰丰富富的的胞胞内内颗颗粒粒,正正常常情情况况下下血血小小板板处处于于静静止止状状态态。目目前前研研制制出出的的抗抗血血小小板板单单抗抗如如CD9CD9、CDw17CDw17、CD31CD31、CD36CD36、CD41aCD41a、CD41bCD41b、CD42aCD42a、CD42bCD42b、CD61CD61,主主要要都都针针对对静静止止的的血血小小板板。当当血血小小板板被被激激活活时时,血血小小板板中中颗颗粒粒内内容容物物释释放放,整整合合到到活活化化的的血血小小板板质质膜膜内内,成成为

19、为一一些些激激活活抗抗原原,如如CD62 CD62(P-P-选选择择素素)、CD63CD63及及CD107aCD107a和和CD107bCD107b。红细胞系红细胞系 血小板血小板GPb GPb(CD36CD36强)、血型糖强)、血型糖蛋白蛋白A A、H H。4.干祖细胞系CD34抗原选择性地表达在不成熟的造血干细胞、祖细胞上,是一个阶段特异而非系特异的抗原。多能造血干细胞(CFU-GEMM)和定向造血干细胞(CFU-GM,CFU-Meg、BFU-E、BFU-Eo、CFU-Bas)、T祖细胞(pro-T)、B祖细胞(pro-B)都在CD34+群内。CD34+抗原在早期造血祖细胞内呈高水平表达,

20、随着细胞成熟其表达呈进化性下降,继而消失。目前CD34已作为能识别人类最早造血干、祖细胞的重要标志。现知更早期的干细胞为CD34-。CD34CD34+、CD38CD38-细胞在形态上缺乏分化特点,是更细胞在形态上缺乏分化特点,是更幼稚、能维持长期造血的启动细胞(幼稚、能维持长期造血的启动细胞(LTC-ICLTC-IC)。)。LTC-ICLTC-IC细胞以细胞以CD34CD34+、CD45ROCD45RO+、HLA-DRHLA-DR-为主,为主,多处于多处于G G0 0和和G G1 1期。期。CD34CD34+、CD38CD38+细胞则大多处于细胞则大多处于造血祖细胞阶段,可形成各系造血集落,但

21、不造血祖细胞阶段,可形成各系造血集落,但不能维持长期造血。故能维持长期造血。故CD38CD38抗原是造血干细胞向抗原是造血干细胞向多系定向分化的标志之一,并随一定的分化过多系定向分化的标志之一,并随一定的分化过程表达上调。鉴于程表达上调。鉴于CD34CD34抗原可以识别出造血干、抗原可以识别出造血干、祖细胞,结合其它相关分化抗原的表达可以作祖细胞,结合其它相关分化抗原的表达可以作为造血细胞不同发育阶段的标志。如为造血细胞不同发育阶段的标志。如CD34CD34+、CD33CD33+细胞群为多能干细胞向髓系定向的标志。细胞群为多能干细胞向髓系定向的标志。CD34CD34+、CD19CD19+多为多

22、能干细胞向多为多能干细胞向B B系定向的祖细系定向的祖细胞。而胞。而CD34CD34+、TdTTdT+、CD10CD10+、CD7+CD7+则被认为是则被认为是向向T T系定向的祖细胞。系定向的祖细胞。最近发现CD90(Thy-1)是比CD34更早的干、祖细胞标志,故现人们多把CD34-、CD90+,Lin-细胞视为造血干细胞的重要标志。n nCD15CD15则在分化较好的则在分化较好的AMLAML中表达;血型糖蛋中表达;血型糖蛋白白A A表达在除红系祖细胞外的红系细胞上,占表达在除红系祖细胞外的红系细胞上,占FABFABM6M6患者的患者的40%40%左右,左右,CD71CD71可弥补血型糖

23、蛋白可弥补血型糖蛋白A A的的不足,在爆式红系细胞集落形成单位(不足,在爆式红系细胞集落形成单位(BFU-EBFU-E)和红系细胞集落形成单位(和红系细胞集落形成单位(CFU-ECFU-E)阶段的祖细)阶段的祖细胞亦可表达阳性;胞亦可表达阳性;CD41CD41、CD42CD42和和CD61CD61是常用的是常用的原始巨核细胞标记,但原始巨核细胞标记,但CD61CD61往往随往往随CD41CD41、CD42CD42的阳性而表达。另外,的阳性而表达。另外,CD56CD56作为神经细胞粘附分作为神经细胞粘附分子(子(NCAMNCAM)通常在)通常在NKNK细胞和细胞和T T细胞上表达。在细胞上表达。

24、在13%13%41%41%的的AMLAML中,中,CD15CD15表达阳性;在分化的表达阳性;在分化的单核细胞和单核细胞和t t(8;218;21)、)、+8+8等核型改变时,也呈阳等核型改变时,也呈阳性表达。性表达。n nMPO、HLA-DR、TdT和溶菌酶抗体在髓系细胞上也应用极广。其中,除原始单核细胞白血病、巨核细胞白血病和红系白血病外,其他髓系白血病细胞都有可能阳性;HLA-DR除早幼粒细胞白血病外,其他髓系白血病均可呈阳性;TdT仅表达在极微分化的早期髓系细胞上;溶菌酶可部分弥补CD14、CD36对原始单核细胞的不敏感。特殊检验的应用特殊检验的应用n n慢淋问题(活化的淋巴细胞标记)

25、n n恶组问题(附带的T/B细胞标记)n n慢性白血病的标记要慎重Acute myeloid leukaemian nAcutemyeloidleukaemiawithrecurrentgeneticabnormalitiesn nAcutemyeloidleukaemiawithmultilineagedysplasian nAcutemyeloidleukaemiaandmyelodysplasticsyndrome,therapy-relatedn nAcutemyeloidleukaemianototherwisecategorizedAcute myeloid leukaemiaAc

26、ute myeloid leukaemiaAcute myeloid leukaemian nTheblast%isloweredfrom30%(FAB)to20%(WHO)n nMedianageofonset=60yrsn nIncidence410/100,000n nEtiologyMyeloblasts versus lymphoblastsAcute myeloid leukaemiaAcute lymphoblastic leukaemiaAcute myeloid leukaemia:cytochemistryMyeloperoxidaseMyeloperoxidaseSuda

27、nBlackBSudanBlackBNon-specificesteraseNon-specificesterasea a-naphthylbutyrate-naphthylbutyratea a-naphthylacetate-naphthylacetateCytochemistry:MPOCytochemistry:NSECytochemistryAcute myeloid leukaemia:role of immunophenotypingn nDistinctionofminimallydifferentiatedAMLfromDistinctionofminimallydiffer

28、entiatedAMLfromacutelymphoblasticleukaemiaacutelymphoblasticleukaemian nRecognitionofAML-M7RecognitionofAML-M7n nRecognitionofspecificAMLsub-categories(e.gRecognitionofspecificAMLsub-categories(e.gCD56+veAML)CD56+veAML)n nDiagnosisofbiphenotypicleukaemiaDiagnosisofbiphenotypicleukaemian nHowever,imm

29、unophenotypingisnotmandatoryinHowever,immunophenotypingisnotmandatoryintypicalcasesofAML,unlikeinALLwhereatypicalcasesofAML,unlikeinALLwhereaphenotypicdiagnosisisneededineverycasephenotypicdiagnosisisneededineverycaseAcute myeloid leukaemia:role of immunophenotypingPanel of monoclonal antibodies in

30、classification of acute leukaemian nHaemopoieticprecursors:CD34,HLA-DR,Tdt,CD45n nB-lineage:CD19,CD20,CD22,CD79an nT-lineage:CD2,CD3,CD5,CD7n nMyeloid:CD13,CD33,CD117,anti-MPOn nMegakaryocytic:CD41,CD61Acute myeloid leukaemia with recurrent genetic abnormalitiesn nAcutemyeloidleukaemiawitht(8;21)(q2

31、2;q22);Acutemyeloidleukaemiawitht(8;21)(q22;q22);AML1/ETOAML1/ETOn nAcutemyeloidleukaemiawithabnormalbonemarrowAcutemyeloidleukaemiawithabnormalbonemarroweosinophilsandinv(16)(p13q22)ort(16;16)(p13;q22);eosinophilsandinv(16)(p13q22)ort(16;16)(p13;q22);CBFCBFb b/MYH11/MYH11n nAcutepromyelocyticleukae

32、mia(AMLwithAcutepromyelocyticleukaemia(AMLwitht(15;17)(q22;q12);t(15;17)(q22;q12);PMLPML/RARRARa aandvariantsandvariantsn nAcutemyeloidleukaemiawith11q23(Acutemyeloidleukaemiawith11q23(MLLMLL)abnormalities)abnormalitiesAcute myeloid leukaemia with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOn nt(8;21)isthecommonesttra

33、nslocationinAMLn nAssociatedwithAML-M2morphologyn nTumourmasses(granulocyticsarcoma)Acute myeloid leukaemia with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOn nMorphologyn nLargeblasts,heavilygranulatedLargeblasts,heavilygranulatedn nFrequentAuerrodsFrequentAuerrodsn nVariabledysplasiaingranulocyticseriesVariabledyspl

34、asiaingranulocyticseriesn nRarecaseswithblastcount20%Rarecaseswithblastcount20%n nImmunophenotypen nCD13+CD33+anti-MPO+CD13+CD33+anti-MPO+n nCD19+CD19+CD34+CD34+CD56CD56Acute myeloid leukaemia with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOAcute myeloid leukaemia with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOAcute myeloid leukaemia

35、 with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETODetection of fusion genes by FISHDetection of fusion genes by FISHAcute myeloid leukaemia with t(8;21)(q22;q22);AML1/ETOn nPrognosisn nGoodresponsetochemotherapyandhighGoodresponsetochemotherapyandhighcompleteresponseratecompleteresponseraten nLongtermdiseasefreesurviv

36、alLongtermdiseasefreesurvivaln nAdversefactorsAdversefactorsn nadditionalchromosomalchangese.g.9q-additionalchromosomalchangese.g.9q-n nCD56+veCD56+veAcute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or Acute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or t(16;16)(p13;q22);CBFt(16;16)(p13;q22);CBFb b b b/MYH11/

37、MYH11n nGranuolocyticandmonocyticfeaturesn nAML-M4(acutemyelomonocyticleukaemia)morphologyn nAbnormaleosinophilswithcoarsebasophilicgranulesAcute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or Acute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or t(16;16)(p13;q22);CBFt(16;16)(p13;q22);CBFb b b b/MYH11/MYH11Acute

38、 myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or Acute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or t(16;16)(p13;q22);CBFt(16;16)(p13;q22);CBFb b b b/MYH11/MYH11n nCytochemistryn nAbnormaleosinophilsareCAE+veAbnormaleosinophilsareCAE+ven nImmunophenotypen nGranulocyticandmonocyticmarkersGranulocyticandmonocyti

39、cmarkersn nCo-expressionofCD2inblastpopulationCo-expressionofCD2inblastpopulationn nPrognosisn nFavourableFavourableAcute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or Acute myeloid leukaemia with inv(16)(p13q22)or t(16;16)(p13;q22);CBFt(16;16)(p13;q22);CBFb b b b/MYH11/MYH11Acute promyelocytic leukaemia

40、n nAMLwitht(15;17)(q22;q12);PML/RARaandvariantsn nCharacteristicmorphologyn nAssociatedwithdisseminatedintravascularcoagulationAcute promyelocytic leukaemiaAcute promyelocytic leukaemiaAcute promyelocytic leukaemian nImmunophenotypen nCD33+CD13+CD33+CD13+n nHLA-DRandCD34negativeHLA-DRandCD34negative

41、n nCo-expressionofCD2andCD9Co-expressionofCD2andCD9n nGeneticsn nt(15;17)(q22;q12)t(15;17)(q22;q12)n nVariants:t(11;17)(q23;q12)Variants:t(11;17)(q23;q12)PLZF/RARPLZF/RARa a;t(5;17)(q32;q12)t(5;17)(q32;q12)NPM/RARNPM/RARa a;t(11;17)(q13;q12)t(11;17)(q13;q12)NuMA/RARNuMA/RARa aAcute promyelocytic leu

42、kaemiaAcute promyelocytic leukaemian nTreatmentn nAll-transretinoicacid(ATRA)All-transretinoicacid(ATRA)n nArsenicforrelapsecasesArsenicforrelapsecasesn nRARRARa avariants:resistanttoATRAvariants:resistanttoATRAn nPrognosisn nFavourablewhentreatedoptimallywithATRAFavourablewhentreatedoptimallywithAT

43、RAfollowedbyanthracyclinesfollowedbyanthracyclinesAcute myeloid leukaemia with 11q23 abnormalitiesn nInfantleukaemian nTherapyrelatedAMLafterexposuretoDNAtopoisomeraseIIinhibitorsn nAcutemonocyticandmyelomonocyticleukaemian nAssociatedwithMLLrearrangementAcute myeloid leukaemia with multilineage dys

44、plasian nFollowingMDSorMDS/MPDn nWithoutantecedentMDSn nDysplasiain50%ofcellsinatleast2linesn nPoorprognosisAML and MDS,therapy relatedn nAlkylatingagentrelatedn nTopoisomerasetypeIIinhibitorrelatedAcute myeloid leukaemia not otherwise categorizedn nEquivalenttoFABclassificationn nAMLminimallydiffer

45、entiatedAMLminimallydifferentiatedn nAMLwithoutmaturationAMLwithoutmaturationn nAMLwithmaturationAMLwithmaturationn nAcutemyelomonocyticleukaemiaAcutemyelomonocyticleukaemian nAcutemonoblasticandmonocyticleukaemiaAcutemonoblasticandmonocyticleukaemian nAcuteerythroidleukaemiaAcuteerythroidleukaemian

46、 nAcutemegakaryoblasticleukaemiaAcutemegakaryoblasticleukaemian nAcutebasophilicleukaemiaAcutebasophilicleukaemian nAcutepanmyelosiswithmyelofibrosisAcutepanmyelosiswithmyelofibrosisn nMyeloidsarcomaMyeloidsarcomaAML without maturationAcute myeloid leukaemia with maturationAcute monocytic leukaemiaErythroleukaemiaAcute leukaemia of ambiguous lineagen nMixedmyeloidandlymphoidcharacteristicsn nBiclonal(twoclones)n nBiphenotypic(twocharacteristicsonsameblastcell)免疫标记的评价免疫标记的评价n n必须进行的工作n n检测中的对照问题(与细胞化学有类似)n n协同(共同)表达问题n n筛选与快速检测问题n n抗体选择问题n n重复性和精确性检测问题结束结束

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