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1、、实验原理、实验原理 、方法步骤、方法步骤（1 1）根尖培养）根尖培养（2 2）装片制作：解离）装片制作：解离漂洗漂洗染色染色制片制片（3 3）观察）观察(gunch)(gunch)：低倍镜观察：低倍镜观察(gunch)(gunch)高倍镜观察高倍镜观察(gunch)(gunch)实验：观察根尖分生组织细胞实验：观察根尖分生组织细胞(xbo)的有的有丝分裂丝分裂 根尖、茎尖的分生区、茎形成层、可观察到有丝根尖、茎尖的分生区、茎形成层、可观察到有丝分裂分裂(yu s fn li)(yu s fn li)。染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色第一页，共9
2、页。注：洋葱根尖分生区观察的是有丝分裂(yu s fn li)成熟区用于质壁分离第二页，共9页。第三页，共9页。根根尖尖的的培培养养(piyng)培养培养(piyng)(piyng)根尖：应每天换水根尖：应每天换水(防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根)第四页，共9页。解解 离离取材取材(qci)(qci)：取生长旺盛、取生长旺盛、带有分生区带有分生区的根尖，长的根尖，长度为根尖的度为根尖的2-3mm2-3mm。解离：解离液（解离：解离液（15%15%盐酸盐酸95%95%酒精酒精(jijng)(jijng)溶液溶液1111）；）；时间：室温时间：室温3-53-5分钟，至根尖酥软；分钟，至根尖酥软；
3、目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞第五页，共9页。漂漂洗洗(p pi i o o x x)漂洗：用清水漂洗漂洗：用清水漂洗10min10min，目的是洗去组织，目的是洗去组织(zzh)(zzh)中的解中的解 离液，便于染色离液，便于染色(防止酸碱中和防止酸碱中和)。第六页，共9页。染染色色(rns)染色染色(rns)(rns)：染液（：染液（0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸的醋酸洋红）洋红）;时间为时间为3 35 5分钟；目的是使染色分钟；目的是使染色(rns)(rns)体或染色体或染色(rns
4、)(rns)质被碱性染料染成深色，便于观察。质被碱性染料染成深色，便于观察。第七页，共9页。制制片片压片：目的是使细胞分散开。方法（用镊子压片：目的是使细胞分散开。方法（用镊子(ni(ni zi)zi)弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。）细胞未充分分散开而重叠。）第八页，共9页。低倍镜观察：找到分生区细胞（特点低倍镜观察：找到分生区细胞（特点(tdin)(tdin)：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间高倍镜观察：找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多，中期最少。不能看到某个细期的细胞最多，中期最少。不能看到某个细胞连续分裂胞连续分裂(fnli)(fnli)的过程，因细胞在解离的过程，因细胞在解离时已被杀死。时已被杀死。第九页，共9页。