脂肪肝的实验研究精选课件.ppt

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1、关于脂肪肝的实验研究第一页，本课件共有95页2n概述概述n脂肪肝的病因脂肪肝的病因n脂肪肝的发病机制脂肪肝的发病机制n脂肪肝实验模型的建立方法脂肪肝实验模型的建立方法n脂肪肝的诊断脂肪肝的诊断n脂肪肝的防治脂肪肝的防治第二页，本课件共有95页3概 述第三页，本课件共有95页4 脂肪肝是仅次于病毒性肝炎的第二位常脂肪肝是仅次于病毒性肝炎的第二位常见肝病，是二十一世纪肝病领域面临的新挑见肝病，是二十一世纪肝病领域面临的新挑战。对于脂肪肝的防治不仅是一个医学问题，战。对于脂肪肝的防治不仅是一个医学问题，更是一个社会问题。脂肪肝已成为消化、内更是一个社会问题。脂肪肝已成为消化、内分泌、营养、心血管等多

2、学科共同关注的问分泌、营养、心血管等多学科共同关注的问题。题。第四页，本课件共有95页520112011年年7 7月月 重庆重庆 第四届全国脂肪性肝病学术会议第四届全国脂肪性肝病学术会议 解放军解放军302302医院病理诊断与研究中心主医院病理诊断与研究中心主任、军事医学科学院博士生导师任、军事医学科学院博士生导师赵景民教授赵景民教授指出，未来十年，我国将由指出，未来十年，我国将由“病毒性肝炎大病毒性肝炎大国国”转为转为“脂肪性肝病大国脂肪性肝病大国”，应高度重视，应高度重视脂肪性肝病的防治脂肪性肝病的防治 。第五页，本课件共有95页6正常肝脏正常肝脏脂肪肝脂肪肝第六页，本课件共有95页7脂肪

3、肝大体标本切面第七页，本课件共有95页8大泡、小泡性肝大泡、小泡性肝脂肪变混杂脂肪变混杂小泡性肝脂肪变小泡性肝脂肪变第八页，本课件共有95页9重度肝脂肪变，脂变肝细胞达重度肝脂肪变，脂变肝细胞达90%第九页，本课件共有95页10脂肪肝基本概念n狭义的定义狭义的定义 肝细胞内的脂肪含量（主要是肝细胞内的脂肪含量（主要是甘油三酯甘油三酯TGTG）肝脏湿重的）肝脏湿重的5%5%，或肝组织学上每单，或肝组织学上每单位面积位面积30%30%的肝实质细胞出现脂肪变性时，的肝实质细胞出现脂肪变性时，称为称为脂肪性肝病脂肪性肝病(fatty liver disease(fatty liver disease

4、，FLD)FLD)，简称，简称脂肪肝。脂肪肝。第十页，本课件共有95页11脂肪肝基本概念n广义的定义广义的定义 脂肪肝是遗传环境代谢应激相关因脂肪肝是遗传环境代谢应激相关因素所致的，病变主体在肝小叶，以肝细胞脂素所致的，病变主体在肝小叶，以肝细胞脂肪变性为主的的临床病理综合征肪变性为主的的临床病理综合征第十一页，本课件共有95页12脂肪肝的分类n根据起病方式及病程分类根据起病方式及病程分类 急性脂肪肝：小泡性急性脂肪肝：小泡性 慢性脂肪肝：大泡性或混合性慢性脂肪肝：大泡性或混合性第十二页，本课件共有95页13脂肪肝的分类n根据病因分类根据病因分类 酒精性脂肪性肝病酒精性脂肪性肝病（alcoho

5、lic fatty liver alcoholic fatty liver disease,disease,AFLDAFLD)非酒精性脂肪性肝病非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver non-alcoholic fatty liver disease,disease,NAFLDNAFLD)酒精性脂肪肝（酒精性脂肪肝（AFL）酒精性肝炎酒精性肝炎酒精性肝纤维化酒精性肝纤维化酒精性肝硬化酒精性肝硬化单纯性脂肪肝（单纯性脂肪肝（NAFLNAFL）脂肪性肝炎（脂肪性肝炎（NASHNASH）脂肪性肝纤维化和肝硬化脂肪性肝纤维化和肝硬化第十三页，本课件共有95页14NASH

6、NASH，脂变，脂变50%50%，汇管区，汇管区中度炎症细胞浸润（中度炎症细胞浸润（HE50)HE50)第十四页，本课件共有95页15脂肪肝的流行病学调查 及预后n非酒精性脂肪性肝病（非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）：）：80%n酒精性脂肪性肝病（酒精性脂肪性肝病（AFLD）：）：5%n其余的是药物性、中毒性、遗传性、自身免其余的是药物性、中毒性、遗传性、自身免疫性等脂肪肝疫性等脂肪肝第十五页，本课件共有95页16NAFLDNAFLD的流行病学及预后的流行病学及预后n欧美、日本成人欧美、日本成人NAFLDNAFLD检出率检出率20203333，其中至少其中至少1015%1015%为为NASHN

7、ASHnNAFLDNAFLD已成为西欧、美国、澳大利亚、日已成为西欧、美国、澳大利亚、日本第一大慢性肝病及肝酶异常的首要病因本第一大慢性肝病及肝酶异常的首要病因n亚太地区亚太地区NAFLDNAFLD检出率检出率12122424第十六页，本课件共有95页17NAFLDNAFLD的流行病学及预后的流行病学及预后n代谢综合征（代谢综合征（MSMS）可使）可使NAFLDNAFLD患病风险增患病风险增加加411411倍倍nNAFLDNAFLD可使糖尿病发生风险增加可使糖尿病发生风险增加3.8113.811倍倍n肥胖者：肥胖者：NAFLNAFL发生率发生率6090%6090%，NASHNASH为为2025

8、%2025%，肝硬化，肝硬化28%28%n糖尿病和高脂血症患者糖尿病和高脂血症患者NAFLDNAFLD检出率分别检出率分别为为2178%2178%、2792%,2792%,肥胖肥胖2 2型糖尿病患者型糖尿病患者可达可达50%70%50%70%，且多为中度以上，且多为中度以上第十七页，本课件共有95页18流行病学n研究显示：研究显示：2型糖尿病患者是脂肪肝的高发人群型糖尿病患者是脂肪肝的高发人群2型糖尿病患者患型糖尿病患者患NASH危险性比一般人高危险性比一般人高2.6倍倍第十八页，本课件共有95页19中国脂肪肝的流行病学调查中国脂肪肝的流行病学调查 范建高，世界华人消化杂志，01年第1期；中华

9、消化杂志，02年第2期n818818名北京市干部：名北京市干部：18.3%18.3%n40094009名上海市职员：名上海市职员：12.8%12.8%n10501050名北京市职工：名北京市职工：11.011.0n11191119名南京市干部：名南京市干部：10.2%10.2%n1137211372名绍兴市职工：名绍兴市职工：9.58%9.58%n30153015名杭州市工人：名杭州市工人：5.2%5.2%n41004100名大庆油田工人：名大庆油田工人：5.15%5.15%n四川四川1010个寺庙和尚：个寺庙和尚：0.27%0.27%n来自广州的一项长达来自广州的一项长达3年的队列研究显示，

10、年的队列研究显示，2003年年NAFLD患患病率为病率为16.3%，而，而2008年则高达年则高达20.5%第十九页，本课件共有95页20n20112011年，北京地坛医院副院长、军事医学科年，北京地坛医院副院长、军事医学科学院博导学院博导成军教授成军教授对对北京市居民（北京市居民（37623762名）名）FLDFLD患病率患病率及其危险因素流行病学调查结果及其危险因素流行病学调查结果显示：显示：北京市常住居民北京市常住居民 FLD35.1%FLD35.1%NAFLD31.0%NAFLD31.0%AFLD4.1%AFLD4.1%在过去的在过去的710710年，中国发达地区成人年，中国发达地区成

11、人脂肪肝患病率增加了一倍脂肪肝患病率增加了一倍第二十页，本课件共有95页21NAFLDNAFLD的预后的预后nNAFLNAFL近期预后良好近期预后良好nNAFLNAFL有有1240%1240%患者患者813813年进展为年进展为NASHNASHnNASHNASH约有约有25%25%患者在患者在813813年发展为脂肪年发展为脂肪性肝硬化性肝硬化n脂肪性肝硬化患者发生原发性肝细胞癌、肝脂肪性肝硬化患者发生原发性肝细胞癌、肝功能衰竭的概率高达功能衰竭的概率高达3040%3040%第二十一页，本课件共有95页22NAFLDNAFLD相关肿瘤相关肿瘤n20142014年上海国际消化系统疾病会议：年上海

12、国际消化系统疾病会议：福建漳州报道福建漳州报道1 1例手术证实例手术证实NAFLDNAFLD相关肝癌，癌旁相关肝癌，癌旁组织并无肝硬化。组织并无肝硬化。美国国立卫生研究院的美国国立卫生研究院的Bin GaoBin Gao教授也有类似的报道教授也有类似的报道 提示提示：NAFLDNAFLD可以不经过肝纤维化、肝硬化就发生肝可以不经过肝纤维化、肝硬化就发生肝癌癌 有研究表明，有研究表明，NAFLDNAFLD与多种肿瘤的发生相关，与多种肿瘤的发生相关，包括直肠癌、乳腺癌等，也是目前研究的一项热点包括直肠癌、乳腺癌等，也是目前研究的一项热点第二十二页，本课件共有95页23非酒精性脂肪肝的病情演变非酒精

13、性脂肪肝的病情演变脂肪肝脂肪肝纤维化纤维化肝硬化肝硬化脂肪堆积致肝脂肪堆积致肝肿大肿大可逆转可逆转纤维组织形成纤维组织形成纤维组织无法纤维组织无法逆转逆转结缔组织生成破坏结缔组织生成破坏肝细胞肝细胞病变不可逆转病变不可逆转第二十三页，本课件共有95页24酒精性肝病酒精性肝病ALDALD的流行病学及预后的流行病学及预后n欧美国家嗜酒人群中欧美国家嗜酒人群中ALDALD患病率高达患病率高达84%84%，其中其中2030%2030%发展为肝硬化发展为肝硬化n在美国，在美国，ALDALD为慢性肝病最常见病因，每年为慢性肝病最常见病因，每年 1.521.52万人死于万人死于ALDALDn我国居民我国居民

14、ALDALD发病率为发病率为45%45%，北方南方，北方南方n女性对酒精敏感性高，但由于男性嗜酒者多女性对酒精敏感性高，但由于男性嗜酒者多见，见，ALDALD男女比例约男女比例约2:12:1第二十四页，本课件共有95页25酒精性肝病ALD的诊断标准第一条：n有长期饮酒史，一般超过有长期饮酒史，一般超过5 5年，年，折合乙醇量折合乙醇量40g/d40g/d，女性，女性20g/d20g/d；或或2 2周内有大量饮酒史（周内有大量饮酒史（80g/d80g/d）第二十五页，本课件共有95页26 酒精量：饮酒量饮酒量酒精度（酒精度（%）0.8n以56度二锅头为例 饮用180ml就超过80g 饮用700m

15、l就超过300g*喜力啤酒1000ml40g第二十六页，本课件共有95页27ALDALD的流行病学及预后的流行病学及预后n酒精量酒精量80160g/d80160g/d，其发生率增长，其发生率增长525525倍倍 酒精量酒精量300g/d300g/d，8 8天后就出现酒精性脂肪肝天后就出现酒精性脂肪肝nAFLDAFLD比比NAFLD NAFLD 患者患者1010年内肝硬化发生率显年内肝硬化发生率显著增高（著增高（20%20%对对1%1%）*美国胃肠病学会统计，男性平均每天饮用美国胃肠病学会统计，男性平均每天饮用80g80g酒精，可能在酒精，可能在1010年内发生肝硬化，而女性年内发生肝硬化，而女

16、性消耗同等量酒精，消耗同等量酒精，5 5年内就发生肝硬化年内就发生肝硬化第二十七页，本课件共有95页28脂肪肝的病因第二十八页，本课件共有95页29一、营养性因素一、营养性因素1 1、肥胖病、肥胖病 NAFLDNAFLD最常见和最肯定的病因最常见和最肯定的病因 肥胖伴酗酒者脂肪肝发生率达肥胖伴酗酒者脂肪肝发生率达90%90%以上以上2 2、胃肠外营养、胃肠外营养 全胃肠外营养持续时间过长可导致肝细胞脂肪变和全胃肠外营养持续时间过长可导致肝细胞脂肪变和NASHNASH3 3、营养不良、营养不良 蛋白质摄入不足或吸收不良，或胆碱、卵磷脂等缺乏蛋白质摄入不足或吸收不良，或胆碱、卵磷脂等缺乏第二十九页

17、，本课件共有95页30二、化学性致病因素二、化学性致病因素1 1、工业毒物、工业毒物 苯、二氯甲烷、二氯乙烯、钡盐等苯、二氯甲烷、二氯乙烯、钡盐等 NAFLNAFL CClCCl4 4、砷化物、三氯甲烷、磷等、砷化物、三氯甲烷、磷等 肝细胞坏死合并脂肪变肝细胞坏死合并脂肪变2 2、药物、药物 长期使用糖皮质激素、大量四环素、雌激素制剂、氨长期使用糖皮质激素、大量四环素、雌激素制剂、氨甲喋呤、胺碘酮等甲喋呤、胺碘酮等3 3、酒精中毒：、酒精中毒：90%90%酒精在肝脏转化为乙醛酒精在肝脏转化为乙醛第三十页，本课件共有95页31三、内分泌代谢因素三、内分泌代谢因素1 1、糖尿病、糖尿病 2 2型糖

18、尿病型糖尿病5070%5070%合并脂肪肝，且大多为中度或合并脂肪肝，且大多为中度或中度以上的脂肪肝中度以上的脂肪肝 NAFLDNAFLD与胰岛素抵抗（与胰岛素抵抗（IRIR）、高胰岛素血症有较强）、高胰岛素血症有较强的关联的关联2 2、高脂血症、高脂血症 关系最密切的是高甘油三酯血症，脂肪肝发病率关系最密切的是高甘油三酯血症，脂肪肝发病率为为6080%6080%，常伴有肥胖和糖尿病，常伴有肥胖和糖尿病3 3、皮质醇增多症、妊娠等亦可导致脂肪肝、皮质醇增多症、妊娠等亦可导致脂肪肝第三十一页，本课件共有95页32四、生物性致病因素四、生物性致病因素 肝炎病毒肝炎病毒HBVHBV和和HCVHCV感

19、染可引起脂肪肝感染可引起脂肪肝 特别是特别是HCVHCV感染患者中感染患者中80%80%伴脂肪肝伴脂肪肝五、遗传因素五、遗传因素 先天性代谢性肝病：肝豆状核变性、半乳糖血症、先天性代谢性肝病：肝豆状核变性、半乳糖血症、肝糖原贮积病等肝糖原贮积病等 遗传易感性：肥胖、糖尿病、原发性高脂血症遗传易感性：肥胖、糖尿病、原发性高脂血症六、其他六、其他 免疫性疾病如免疫性疾病如SLESLE、自身免疫性肝炎等、自身免疫性肝炎等 部分病因不明脂肪肝部分病因不明脂肪肝隐源性脂肪肝隐源性脂肪肝第三十二页，本课件共有95页33酒精中毒、肥胖、糖尿病酒精中毒、肥胖、糖尿病 脂肪肝的三大病因脂肪肝的三大病因第三十三页

20、，本课件共有95页34脂肪肝的发病机制第三十四页，本课件共有95页3519981998年年DayDay提出的提出的“二次打击二次打击”学说学说n第一次打击第一次打击 各种病因作用各种病因作用 肝细胞脂肪代谢异常，肝内脂肪沉积肝细胞脂肪代谢异常，肝内脂肪沉积n第二次打击第二次打击 肝细胞脂肪变性肝细胞脂肪变性 脂肪性肝炎、肝纤维化脂肪性肝炎、肝纤维化氧化应激和脂质过氧化、氧化应激和脂质过氧化、细胞因子等作用下细胞因子等作用下第三十五页，本课件共有95页36NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制n脂质代谢障碍脂质代谢障碍n激素的作用：激素的作用：胰岛素抵抗（胰岛素抵抗（IRIR）瘦素抵抗瘦素抵抗

21、n氧化应激及脂质过氧化损伤氧化应激及脂质过氧化损伤n细胞因子的作用细胞因子的作用第一次打击第一次打击第二次打击第二次打击第三十六页，本课件共有95页37肝脏在脂肪代谢中占据中心地位肝脏在脂肪代谢中占据中心地位饥饿饥饿脂库脂肪动员脂库脂肪动员脂肪酸脂肪酸肝脏肝脏-氧化氧化酮体酮体肝外组织肝外组织（脑、肌肉）利用（脑、肌肉）利用输出输出饱食饱食葡萄糖代谢葡萄糖代谢乙酰乙酰CoA合成合成脂肪酸、胆固醇脂肪酸、胆固醇VLDL（TG+胆固醇胆固醇+磷脂磷脂+载脂蛋白）载脂蛋白）脂肪组织贮存脂肪组织贮存输出输出第三十七页，本课件共有95页38-氧化氧化脂肪酸脂酰辅酶A线粒体线粒体-氧化氧化乙酰辅酶乙酰辅酶

22、A三羧酸循环三羧酸循环酮体酮体肝外组织肝外组织氧化供能氧化供能左旋肉碱左旋肉碱第三十八页，本课件共有95页39脂质代谢障碍脂质代谢障碍1 1、血中游离脂肪酸（、血中游离脂肪酸（FFAFFA）增加）增加2 2、碳水化合物摄取过多、碳水化合物摄取过多3 3、肝细胞线粒体、肝细胞线粒体-氧化障碍氧化障碍4 4、VLDLVLDL合成障碍合成障碍第三十九页，本课件共有95页40胰岛素抵抗（胰岛素抵抗（IRIR）NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制n定义：指胰岛素作用的靶组织或靶器官（主要是肝指胰岛素作用的靶组织或靶器官（主要是肝脏、肌肉和脂肪组织）对胰岛素生物作用的敏感性下脏、肌肉和脂肪组织）对胰岛

23、素生物作用的敏感性下降，即正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的降，即正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的一种状态一种状态n原因：胰岛素生物活性下降胰岛素生物活性下降，或靶器官、靶组织或靶器官、靶组织上的受体障碍及受体下调，或受体后缺陷，对胰岛素上的受体障碍及受体下调，或受体后缺陷，对胰岛素表现为一定的抵抗性，敏感性下降表现为一定的抵抗性，敏感性下降*IRIR是代谢综合征的是代谢综合征的“共同土壤共同土壤”第四十页，本课件共有95页41n胰岛素是调节脂肪合成的主要激素胰岛素是调节脂肪合成的主要激素胰岛素胰岛素胰岛素抵抗（胰岛素抵抗（IRIR）NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制脂肪组

24、织内的脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶激素敏感性脂肪酶脂肪动员脂肪动员（-）（-）脂肪组织内的脂肪组织内的脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶脂肪酸进入脂肪脂肪酸进入脂肪组织合成与贮存组织合成与贮存（+）（+）血中游离脂肪酸血中游离脂肪酸第四十一页，本课件共有95页42IRIR胰岛素抵抗（胰岛素抵抗（IRIR）NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制激素敏感性脂肪酶激素敏感性脂肪酶（TG脂酶）活性增强脂酶）活性增强脂肪动员脂肪动员脂蛋白脂酶脂蛋白脂酶活性降低活性降低脂肪组织合成脂肪组织合成与贮存与贮存血中游离血中游离脂肪酸脂肪酸肝内肝内TG合成合成入肝入肝脂肪肝脂肪肝第四十二页，本课件共有95页43n瘦素是肥胖基

25、因（瘦素是肥胖基因（obob基因）表达的蛋白质类激素，基因）表达的蛋白质类激素，主要由白色脂肪组织分泌合成主要由白色脂肪组织分泌合成n作用：抑制食欲、减少能量摄入、抑制脂肪合成、作用：抑制食欲、减少能量摄入、抑制脂肪合成、增加能量消耗增加能量消耗 *瘦素抵抗患者瘦素抵抗患者 （1 1）食欲增强，脂肪合成增多，肥胖）食欲增强，脂肪合成增多，肥胖 （2 2）高瘦素血症，干扰胰岛素的生理功能，诱）高瘦素血症，干扰胰岛素的生理功能，诱 导导IR IR，促进肝内脂肪贮积，促进肝内脂肪贮积瘦素抵抗瘦素抵抗 NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制第四十三页，本课件共有95页44氧化应激及脂质过氧化损伤氧化

26、应激及脂质过氧化损伤 NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制n肝组织内脂肪酸和肝组织内脂肪酸和TGTG增多增多 线粒体线粒体-氧化氧化速度代偿性速度代偿性 活性氧（活性氧（ROSROS）ROS 激活磷脂酶激活磷脂酶A A2 2 膜磷脂膜磷脂 花生四烯酸花生四烯酸 PGPG、LTLT等等 激活激活NF-NF-BB：细胞因子表达增强细胞因子表达增强 TNFTNF、IL-8IL-8等等 O O2 2 OHOH 1 1O O2 2 H H2 2O O2 2脂质过氧化反应脂质过氧化反应生物膜结构功能破坏生物膜结构功能破坏抑制膜蛋白功能抑制膜蛋白功能线粒体损伤线粒体损伤炎炎症症反反应应+不饱和脂肪酸不饱

27、和脂肪酸第四十四页，本课件共有95页45细胞因子的作用细胞因子的作用 NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制肝组织脂肪酸、肝组织脂肪酸、ROSROS增多增多激活激活KupfferKupffer细胞细胞释放大量细胞因子如释放大量细胞因子如TNFTNF、TGF-1TGF-1、PDGFPDGF等等肝细胞炎症、坏死、肝细胞炎症、坏死、肝纤维化肝纤维化第四十五页，本课件共有95页46细胞因子的作用细胞因子的作用 NAFLDNAFLD的发病机制的发病机制n转化生长因子（转化生长因子（TGF-1TGF-1）肝纤维化主要始动因子之一肝纤维化主要始动因子之一 TGF-1 TGF-1 肝星状细胞（肝星状细胞（H

28、SCHSC）活化增殖）活化增殖 肌成纤维细胞并分泌胶原纤维肌成纤维细胞并分泌胶原纤维n血小板衍生生长因子血小板衍生生长因子（PDGFPDGF）目前已知的目前已知的HSCHSC最强的丝裂原，能刺激最强的丝裂原，能刺激HSCHSC活化增殖活化增殖转化为肌成纤维细胞，促进肝纤维化的发生转化为肌成纤维细胞，促进肝纤维化的发生第四十六页，本课件共有95页47酒精性脂肪肝的发病机制n长期大量摄入酒精是导致长期大量摄入酒精是导致ALDALD的主要原因的主要原因n酒精对肝脏直接毒性作用酒精对肝脏直接毒性作用n氧化应激和脂质过氧化的作用氧化应激和脂质过氧化的作用n细胞因子的作用细胞因子的作用第一次打击第一次打击

29、第二次打击第二次打击第四十七页，本课件共有95页48酒精对肝脏直接毒性作用酒精对肝脏直接毒性作用 AFLDAFLD发病机制发病机制乙醇乙醇乙醛乙醛乙酸乙酸乙醇脱氢酶乙醇脱氢酶ADH微粒体乙醇氧化酶系微粒体乙醇氧化酶系MEOSNAD+NADH乙醛脱氢酶乙醛脱氢酶NAD+NADH促进自由基产生，促进膜的脂质过氧化促进自由基产生，促进膜的脂质过氧化与丙二醛（与丙二醛（MDAMDA）等形成加合物）等形成加合物 损伤肝脏损伤肝脏抑制抑制VLDLVLDL合成合成 肝内肝内TGTG转运障碍，肝转运障碍，肝TGTG堆积堆积乙醛乙醛NADH/NADNADH/NAD+抑制线粒体三羧酸循环抑制线粒体三羧酸循环 -氧

30、化氧化 肝内肝内TGTG堆积堆积第四十八页，本课件共有95页49氧化应激和脂质过氧化损伤氧化应激和脂质过氧化损伤 AFLDAFLD发病机制发病机制n酒精含量高时，其代谢主要由微粒体乙醇氧酒精含量高时，其代谢主要由微粒体乙醇氧化酶系（化酶系（MEOSMEOS）起作用）起作用nMEOSMEOS主要成分为细胞色素主要成分为细胞色素P450 P450 2E12E1（CYP2E1CYP2E1），在酒精诱导下活化，产生），在酒精诱导下活化，产生大量大量ROSROS，引发，引发氧化应激和脂质过氧化氧化应激和脂质过氧化，造，造成肝组织炎症、细胞损伤成肝组织炎症、细胞损伤第四十九页，本课件共有95页50细胞因子

31、的作用细胞因子的作用 AFLDAFLD发病机制发病机制nROSROS等激活等激活KupfferKupffer细胞释放大量细胞因子细胞释放大量细胞因子如如TGF-1TGF-1、PDGFPDGF等等 促进肝纤维化促进肝纤维化*TNFTNF在在ALDALD中占重要地位中占重要地位 长期大量饮酒长期大量饮酒 肠道菌群过度生长，肠粘膜屏障通透性肠道菌群过度生长，肠粘膜屏障通透性 肠细菌移位肠细菌移位 肠源性内毒素血症肠源性内毒素血症 激活激活KupfferKupffer细胞释放大量细胞释放大量TNFTNF 组织炎症反应、肝细胞凋亡、坏死组织炎症反应、肝细胞凋亡、坏死 激活中性粒细胞，增加激活中性粒细胞，

32、增加ROSROS的生成的生成第五十页，本课件共有95页51脂肪肝实验模型的脂肪肝实验模型的建立方法建立方法第五十一页，本课件共有95页52理想的实验模型理想的实验模型n与人类疾病特征相似与人类疾病特征相似n病变有一定发展过程，与人类发病过程相似病变有一定发展过程，与人类发病过程相似n形成率高，动物死亡率低，重复性好形成率高，动物死亡率低，重复性好n造模方法简单易行，对实验人员无伤害造模方法简单易行，对实验人员无伤害n造模停止后组织学病变逆转缓慢，便于药物造模停止后组织学病变逆转缓慢，便于药物干预研究干预研究第五十二页，本课件共有95页53脂肪肝实验模型脂肪肝实验模型nNAFLDnAFLD特殊品

33、系脂肪肝动物模型特殊品系脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型毒物或药物性脂肪肝动物模型毒物或药物性脂肪肝动物模型体外诱导模型体外诱导模型复合模型复合模型急性酒精性肝病动物模型急性酒精性肝病动物模型慢性酒精性肝病动物模型慢性酒精性肝病动物模型体外诱导模型体外诱导模型第五十三页，本课件共有95页54特殊品系脂肪肝动物模型特殊品系脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型（基因突变或基因敲除）（基因突变或基因敲除）1、ob/ob小鼠、小鼠、db/db小鼠（或小鼠（或fa/fa大鼠）大鼠）ob/obob/ob小鼠小鼠obob基因自发突变基因自发突变db/dbdb/db小鼠小鼠dbdb

34、基因自发突变基因自发突变fa/fafa/fa大鼠大鼠fafa基因自发突变基因自发突变瘦素受体缺乏瘦素受体缺乏瘦素抵抗瘦素抵抗瘦素缺乏瘦素缺乏*可出现与人类可出现与人类NAFLDNAFLD相似的特征：相似的特征：过度摄食、肥胖、高脂血症、高胰岛素血症等过度摄食、肥胖、高脂血症、高胰岛素血症等第五十四页，本课件共有95页55n特点特点：该模型虽有明显的该模型虽有明显的IRIR，但不能自发地由单，但不能自发地由单 纯性脂肪肝发展为纯性脂肪肝发展为NASHNASH、肝纤维化、肝纤维化n解决方案解决方案：+蛋氨酸蛋氨酸-胆碱缺乏（胆碱缺乏（MCDMCD）饮食、）饮食、或内毒素、或酒精、或高脂饮食、或再灌

35、或内毒素、或酒精、或高脂饮食、或再灌 注损伤方可演变为注损伤方可演变为NASHNASH、肝纤维化、肝纤维化n意义意义：研究由肝脂肪变向研究由肝脂肪变向NASHNASH进展、进展、NASHNASH向向 纤维化进展的良好模型纤维化进展的良好模型第五十五页，本课件共有95页56特殊品系脂肪肝动物模型特殊品系脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型2 2、幼龄内脏脂肪变小鼠（、幼龄内脏脂肪变小鼠（JVSJVS）模型）模型 系统性肉毒碱缺乏模型系统性肉毒碱缺乏模型表现表现：出生出生328328天，小鼠生长缓慢，肝肿大，肝天，小鼠生长缓慢，肝肿大，肝 细胞脂肪变性细胞脂肪变性机理机理：肉毒碱是转运脂肪酸进入线粒

36、体进行肉毒碱是转运脂肪酸进入线粒体进行氧化氧化 所必须的物质。所必须的物质。第五十六页，本课件共有95页57特殊品系脂肪肝动物模型特殊品系脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型3 3、FLSFLS小鼠模型小鼠模型 19991999年年SogaSoga等用同系交配法建立了一种等用同系交配法建立了一种无过度摄食、无过度摄食、不出现肥胖和糖尿病不出现肥胖和糖尿病而伴有脂肪肝的新品种。而伴有脂肪肝的新品种。表现表现：新生的：新生的FLSFLS小鼠的肝细胞内即有细小的脂肪颗粒聚集，小鼠的肝细胞内即有细小的脂肪颗粒聚集，随年龄增长进行性加重，肝脏随年龄增长进行性加重，肝脏 TGTG含量较同龄小鼠升高含量较同龄

37、小鼠升高5 5倍，伴倍，伴ALTALT和和ASTAST增高、炎症反应，而增高、炎症反应，而血脂无异常血脂无异常。1212个月多自发形成肝细胞癌（个月多自发形成肝细胞癌（HCCHCC），但），但未见肝未见肝硬化硬化意义意义：可作为人类非肥胖、糖尿病而伴有脂肪肝和人类：可作为人类非肥胖、糖尿病而伴有脂肪肝和人类NASHNASH相关相关HCCHCC机制研究的模型机制研究的模型第五十七页，本课件共有95页58特殊品系脂肪肝动物模型特殊品系脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型n特殊品系动物模型因基因突变或缺失，引起特殊品系动物模型因基因突变或缺失，引起脂肪代谢障碍，能自发形成脂肪肝脂肪代谢障碍，能自发形成

38、脂肪肝n缺点缺点：1 1、可建立先天性和幼年型脂肪肝模型，但不适于后天、可建立先天性和幼年型脂肪肝模型，但不适于后天营养障碍所致的脂肪肝的研究营养障碍所致的脂肪肝的研究 2 2、多缺乏、多缺乏NASHNASH和肝纤维化的自然演变过程，仅适和肝纤维化的自然演变过程，仅适合合NAFLDNAFLD特定发病机制的研究特定发病机制的研究3 3、实验动物成本高，来源较困难，死亡率高，缺、实验动物成本高，来源较困难，死亡率高，缺乏广泛应用的可行性乏广泛应用的可行性第五十八页，本课件共有95页59营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型1 1、蛋氨酸、蛋氨酸-胆碱缺乏（胆碱缺乏（M

39、CDMCD）饮食模型）饮食模型 国际上经典的国际上经典的NASHNASH动物模型动物模型机理机理：蛋氨酸、胆碱缺乏导致线粒体蛋氨酸、胆碱缺乏导致线粒体-氧化障碍、氧化障碍、VLDLVLDL合成减少合成减少表现表现：MCDMCD饮食小鼠，饮食小鼠，2 2周后形成周后形成NASHNASH，肝内可见活肝内可见活化的巨噬细胞浸润，伴化的巨噬细胞浸润，伴NF-NF-BB激活、炎性细胞因子、粘激活、炎性细胞因子、粘附分子等表达增加，附分子等表达增加，12W12W出现肝纤维化出现肝纤维化特点特点：MCDMCD饮食模型有明显的氧化应激、线粒体损伤及饮食模型有明显的氧化应激、线粒体损伤及细胞凋亡；与人类细胞凋亡

40、；与人类NASHNASH相比，动物多出现相比，动物多出现ALTALT过高、过高、TGTG过低、不引起过低、不引起IRIR等表现等表现第五十九页，本课件共有95页60意义意义：用于用于NSAHNSAH及肝纤维化的机制及药物筛选、药物干及肝纤维化的机制及药物筛选、药物干预研究，并为非肥胖而伴预研究，并为非肥胖而伴NASHNASH等特殊脂肪营养障碍疾等特殊脂肪营养障碍疾病提供研究思路病提供研究思路缺点缺点：MCDMCD饮食价格昂贵，且不符合人类膳食结构饮食价格昂贵，且不符合人类膳食结构第六十页，本课件共有95页61营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型2 2、高脂饮食（

41、、高脂饮食（HFDHFD）模型）模型 国内最常用的模型国内最常用的模型配方配方：多种，构造原理基本一致，主要差别在于饮多种，构造原理基本一致，主要差别在于饮食中脂肪占供能物质的比例不等（食中脂肪占供能物质的比例不等（10%71%10%71%），），含或不含高碳水化合物含或不含高碳水化合物特点特点：A A、造模周期长，约、造模周期长，约412W412W，甚至半年，成功率高，甚至半年，成功率高 B B、病变有一定的发展过程，在发病机制、临床表、病变有一定的发展过程，在发病机制、临床表现上与人类现上与人类NAFLD NAFLD 最相似，且多合并肥胖、最相似，且多合并肥胖、IRIR等等第六十一页，本课

42、件共有95页62高脂饮食常用配方高脂饮食常用配方A、华天懿等：高脂饲料喂养大鼠华天懿等：高脂饲料喂养大鼠12W12W 基础饲料基础饲料50%+50%+猪油猪油10%+10%+奶粉奶粉10%+10%+鸡蛋鸡蛋30%30%表现表现：大鼠第：大鼠第2W 2W 开始体重增长加速，至第开始体重增长加速，至第4W 4W 体重体重已明显高于对照组，肝已明显高于对照组，肝TGTG、胆固醇明显增加，肝细、胆固醇明显增加，肝细胞脂肪变胞脂肪变。意义意义：与儿童单纯性肥胖症的自然发病过程相似，对与儿童单纯性肥胖症的自然发病过程相似，对该病及并发的脂肪肝的防治研究有一定的意义该病及并发的脂肪肝的防治研究有一定的意义第

43、六十二页，本课件共有95页63高脂饮食常用配方高脂饮食常用配方B B、祁培宏等：普通饲料喂养大鼠、祁培宏等：普通饲料喂养大鼠1W1W，再用脂肪乳剂，再用脂肪乳剂灌胃灌胃4W4W 乳清酸乳清酸5%+5%+胆固醇胆固醇10%+10%+猪油猪油20%+20%+蛋黄粉蛋黄粉1%1%表现表现：肝脏体积变大，湿重增加，色黄，切面油腻；：肝脏体积变大，湿重增加，色黄，切面油腻；HEHE染色肝细胞呈大泡性脂肪变，血清、肝脏染色肝细胞呈大泡性脂肪变，血清、肝脏TGTG、胆、胆固醇显著升高固醇显著升高第六十三页，本课件共有95页64高脂饮食常用配方高脂饮食常用配方C、徐正婕、钟岚、范建高等：徐正婕、钟岚、范建高等

44、：HFDHFD饲养雄性饲养雄性SDSD大鼠大鼠 标准饲料标准饲料88%+88%+猪油猪油10%+10%+胆固醇胆固醇2%2%表现表现：4 w4 w出现肝脂肪变；出现肝脂肪变；8 w8 w呈现单纯性脂肪肝；呈现单纯性脂肪肝；12 12 ww形成形成NASHNASH，伴，伴ALTALT水平升高；水平升高；24 w24 w出现明显窦周纤出现明显窦周纤维化；维化；3648 w3648 w纤维化加剧纤维化加剧意义意义：本模型与人类肥胖症合并高脂血症及脂肪肝的病本模型与人类肥胖症合并高脂血症及脂肪肝的病例极为相似，可用于血脂调整药物防治动脉粥样硬化和例极为相似，可用于血脂调整药物防治动脉粥样硬化和脂肪肝的

45、药理研究脂肪肝的药理研究第六十四页，本课件共有95页65高脂饮食常用配方高脂饮食常用配方D、美国美国CharlesCharles等：高脂液体饲料喂养等：高脂液体饲料喂养SDSD大鼠大鼠 脂肪脂肪71%+71%+碳水化合物碳水化合物11%+11%+蛋白蛋白18%18%表现：表现：3 3周可形成全小叶肝细胞脂肪变，伴有周可形成全小叶肝细胞脂肪变，伴有TNFaTNFa和和I I型胶原型胶原mRNA mRNA 的表达增强，可诱发线粒体损伤和的表达增强，可诱发线粒体损伤和氧化应激氧化应激意义：意义：造模方法简单，所需时间较短，与人体高脂血造模方法简单，所需时间较短，与人体高脂血症性脂肪肝机制相似，是一种

46、用于该病研究的经典模症性脂肪肝机制相似，是一种用于该病研究的经典模型型缺点：缺点：每天灌胃较为繁琐，操作不当可引起动物窒息每天灌胃较为繁琐，操作不当可引起动物窒息死亡死亡第六十五页，本课件共有95页66营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型3 3、高糖饮食大鼠模型、高糖饮食大鼠模型 高蔗糖高蔗糖/果糖饮食果糖饮食 *在在WistarWistar大鼠的饮用水中加入大鼠的饮用水中加入10%10%蔗糖，蔗糖，4848小时内小时内即能在其体内观察到脂肪酸合成增加即能在其体内观察到脂肪酸合成增加 *SDSD大鼠在含蔗糖大鼠在含蔗糖70%70%的饮食喂养后出现肥胖，的饮食喂养

47、后出现肥胖，2323周可形成脂肪肝，并伴有参与脂肪合成的酶类增加，周可形成脂肪肝，并伴有参与脂肪合成的酶类增加，雄性鼠肝损伤更为严重雄性鼠肝损伤更为严重意义：意义：形成机制与部分人群，尤其是女性不良饮食习惯形成机制与部分人群，尤其是女性不良饮食习惯导致的脂肪肝相似。但是雄性鼠比雌性鼠对高糖诱导的导致的脂肪肝相似。但是雄性鼠比雌性鼠对高糖诱导的肝损伤具有更高的易感性肝损伤具有更高的易感性第六十六页，本课件共有95页67营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型4 4、禁食、禁食后高糖饲料诱发后高糖饲料诱发大鼠脂肪肝模型大鼠脂肪肝模型*LeclercqLeclercq等将

48、雄性等将雄性WisterWister大鼠禁食大鼠禁食48h48h后给予高糖饲料，后给予高糖饲料，2d2d后大鼠肝内脂肪含量较正常增加后大鼠肝内脂肪含量较正常增加235%235%，呈现肝，呈现肝细胞单纯性脂肪变性细胞单纯性脂肪变性意义：意义：禁食后再进食导致脂肪肝的可能机制为肝脏合禁食后再进食导致脂肪肝的可能机制为肝脏合成脂肪酸和脂肪酸的循环失衡，成脂肪酸和脂肪酸的循环失衡，TGTG的合成和分泌失衡的合成和分泌失衡第六十七页，本课件共有95页68营养失调性脂肪肝动物模型营养失调性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型5 5、玉米油注射大鼠脂肪肝模型、玉米油注射大鼠脂肪肝模型 墨西哥墨西哥Terraz

49、osLuchTerrazosLuch等采用皮下注射玉米油的方法等采用皮下注射玉米油的方法建立大鼠脂肪肝模型建立大鼠脂肪肝模型6 6、全胃肠外营养（、全胃肠外营养（TPNTPN）脂肪肝模型）脂肪肝模型 予成年大鼠深静脉插管，导管接电脑输液泵，将营予成年大鼠深静脉插管，导管接电脑输液泵，将营养液以养液以3ml/h3ml/h的滴速持续滴注。静脉营养液中非蛋白的滴速持续滴注。静脉营养液中非蛋白能量占能量占33%33%以上，以上，1W1W后大鼠肝脏即出现明显的脂肪后大鼠肝脏即出现明显的脂肪变性。变性。此造模方法时间短、成功率高，但操作复杂，限制此造模方法时间短、成功率高，但操作复杂，限制了实验的广泛应用

50、了实验的广泛应用第六十八页，本课件共有95页69毒物或药物性脂肪肝动物模型毒物或药物性脂肪肝动物模型 NAFLD模型模型1 1、四氯化碳（、四氯化碳（CClCCl4 4）诱发模型）诱发模型 CClCCl4 4 0.5ml/kg 0.5ml/kg，每周，每周3 3次，大鼠皮下注射次，大鼠皮下注射 表现：表现：短时间内即可观察到中央静脉周围中重度大短时间内即可观察到中央静脉周围中重度大泡性肝细胞脂肪变，伴炎症及坏死；泡性肝细胞脂肪变，伴炎症及坏死；6W6W可出现肝纤可出现肝纤维化；维化；12W12W可见肝硬化。可见肝硬化。机理：机理：CClCCl4 4诱导诱导CYP2E1CYP2E1激活及严重脂质