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1、关于临床常用免疫学检查第一页，本课件共有106页血清免疫球蛋白的检测 免疫球蛋白是指由浆细胞所产生的,具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白.主要分为IgG,IgA,IgM,IgE和IgD五类.第二页，本课件共有106页一 免疫球蛋白G检测 IgG是人体含量最多和最主要的Ig,占总Ig的70%-80%,是唯一能通过胎盘的Ig.具有抗细菌、抗病毒和抗寄生虫等功能。参考值单向免疫扩散法：7.6-16.6g/L第三页，本课件共有106页临床意义1.IgG增高多克隆性增高:IgG、IgA、IgM均增高。见于慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、肺结核、链球菌感染和自身免疫性疾病如SLE、RA。单克隆性增高：仅I
2、gG增高，主要为免疫增殖性疾病如分泌型多发性骨髓瘤IgG型。第四页，本课件共有106页2.降低:先天性体液免疫、联合免疫缺陷症:Brutons病。获得性免疫缺陷症：HIV、重链病、轻链病、肾病综合症、免疫抑制剂应用患者。第五页，本课件共有106页二 免疫球蛋白A检测 分为血清型（占85%）和分泌型（占15%）两种。sIgA存在于外分泌液中，与局部感染、炎症或肿瘤等病变有密切相关。参考值 单向免疫扩散法：血清IgA 710-3350mg/L，SIgA 唾液 314mg/ml，泪液 30-80mg/ml 第六页，本课件共有106页临床意义1.增高:IgA型MM、SLE、RA、肝硬化、湿疹和肾脏疾病
3、。2.降低:反复呼吸道感染、非IgA型MM、重链病、轻链病、原发性和继发性免疫缺陷症和自身免疫性疾病。第七页，本课件共有106页三 免疫球蛋白M检测 IgM是分子量最大的Ig,占总Ig的5%-10%,具有很强的吞噬、杀菌、凝集作用。在种系发生、个体发育及抗原初次免疫后，都首先出现IgM，以后才是IgG。参考值单向免疫扩散法:0.48-2.12g/L第八页，本课件共有106页临床意义1.增高:病毒性肝炎初期、肝硬化、SLE、RA等，原发性巨球蛋白血症IgM单克隆性增高。2.降低:先天性免疫缺陷症、免疫抑制疗法后、淋巴系统肿瘤、肾病综合症、非IgM型MM。第九页，本课件共有106页1.免疫球蛋白下
4、降 先天性:见于体液免疫缺损和联合免疫缺陷病.一种是免疫球蛋白全缺,另一种是球蛋白缺一或二种,最多见的是缺乏IgG易患脓性感染,缺乏IgA易患反复呼吸道感染,缺乏IgM患者易患败血症.获得性:获得性免疫缺陷病、丢失增多(肾病综合症、脱落性皮炎），淋巴网状系统肿瘤（淋巴瘤、何杰金氏病）、中毒性骨髓疾病等。第十页，本课件共有106页2.高免疫球蛋白血症感染:各种感染特别是慢性细菌感染,如慢性骨髓炎、慢性肺脓肿，子宫内感染时脐血或出生后两日内的新生儿IgM可达0.2-0.3以上.自身免疫性疾病、肝脏疾病（慢活肝、原发性胆汁肝硬化、隐匿性肝硬化）。第十一页，本课件共有106页六 血清M蛋白检测 M蛋白
5、或称单克隆免疫球蛋白，是一种单克隆B细胞增殖产生免疫球蛋白及其分子片断，具有相同结构和电泳迁移率。第十二页，本课件共有106页 参考值阴性 临床意义见于单克隆免疫球蛋白增殖病：MM 巨球蛋白血症 重链病(、重链)轻链病(、轻链)半分子病：IgA、IgG型 7sIgG病。第十三页，本课件共有106页血清补体检测 补体(complement,C)是一组具有酶原活性的糖蛋白,共有20余种组分,具有溶细胞、调理作用、中和与溶解病毒和炎症介质、清除免疫复合物等作用.按功能分为经典途径、旁路激活途径、膜攻击组分和调节分子4种。第十四页，本课件共有106页 一总补体溶血活性检测（CH50）抗原:绵羊红细胞
6、+抗体:兔抗羊红细胞抗体(溶血素)+补体 溶血100806040201234 血清(ml)溶血%溶血程度与补体含量的关系第十五页，本课件共有106页参考值试管法:50-100u/ml临床意义主要反映补体传统途径活化的活性程度.1 CH50增高:见于急性炎症、组织损伤（风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、多发性关节炎、伤寒）和某些肿瘤。第十六页，本课件共有106页2 CH50降低：更有意义。见于肾小球肾炎、自身免疫性疾病（SLE、RA）、感染性心内膜炎、病毒性肝炎、慢性肝病和遗传性血管神经水肿。第十七页，本课件共有106页四 补体C3检测 C3是补体系统中含量最多的物质，在传统途径和旁路途经
7、中发挥重要作用。参考值单向免疫扩散法：1.14+0.27g/l临床意义1增高：急性炎症、传染病早期、肿瘤、排斥反应。2降低：消耗增多：肾炎、活动性SLE、RA。合成不足：肝病。大量丧失：肾病综合症、大面积烧伤等。第十八页，本课件共有106页五 补体C4检测 C4在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用。参考值单扩：0.55+0.11g/L 临床意义1增高:组织损伤性疾病.2降低:狼疮性肾炎、SLE、自身免疫 性肝炎、型糖尿病、胰腺癌、多发 性硬化症、RA、IgA型肾炎、遗传性 IgA缺乏症。第十九页，本课件共有106页细胞免疫检测 CD（clustetr differe
8、ntiation）：白细胞分化抗原。CD3：总T细胞，CD4：T辅助细胞（TH），CD8：T抑制细胞（TS）参考值CD3:60-86%,CD4:28-58%,CD8:19-48%,CD4/CD8=0.9-2.0/1第二十页，本课件共有106页 临床意义免疫状态的检测指标.CD3CD3下降下降:自身免疫性疾病、免疫缺陷病、放自身免疫性疾病、免疫缺陷病、放疗、化疗后、肾上腺素治疗后疗、化疗后、肾上腺素治疗后 CD4CD4下降下降:恶性肿瘤、免疫缺陷病、免疫抑恶性肿瘤、免疫缺陷病、免疫抑制剂的使用、病毒感染、严重创伤、大手术制剂的使用、病毒感染、严重创伤、大手术 CD8CD8下降：自身免疫性疾病、变
9、态反应疾下降：自身免疫性疾病、变态反应疾病病第二十一页，本课件共有106页CD4/CD8增高：自身免疫性疾病、恶性肿瘤、病毒感染、变态反应CD4/CD8下降：HIV（0.5)、传单、巨细胞病毒感染等器官移植排斥反应的监测:升高预示可能发生排斥发应;持续下降提示感染发生,0.2必须停止使用免疫抑制剂.第二十二页，本课件共有106页病毒性肝炎血清标志物检测第二十三页，本课件共有106页甲型肝炎病毒标志物检测甲型肝炎病毒抗原和RNA检测 参考值均阴性 临床意义HAVAg阳性:HAVAg在发病前两周可从粪便中排出.HAV-RNA阳性:早期诊断及特异性诊断.在病人粪便中检出表明病人急性感染,且病人及其排
10、泄物皆为传染原.第二十四页，本课件共有106页甲型肝炎病毒抗体检测 机体可产生IgM,IgG,IgA,HAV-IgM是病毒衣蛋白抗体,HAV-IgA是肠道粘膜分泌的局部抗体,HAV-IgG可长期存在.参考值均为阴性.第二十五页，本课件共有106页 临床意义抗HAV-IgM阳性:是机体早期诊断指标,说明机体正处于感染期,是感染的特异性指标.抗HAV-IgA阳性:早期和急性期在粪便中测得,是早期诊断指标之一.抗HAV-IgG阳性:阳性提示既往感染,可作为流行病学调查指标.第二十六页，本课件共有106页乙型肝炎病毒标志物检测Dane颗粒乙肝表面抗原(HBsAg)乙肝核心抗原(HBcAg)HBe抗原D
11、NADNA多聚酶第二十七页，本课件共有106页第二十八页，本课件共有106页HBsAg:具有抗原性,无传染性 参考值阴性 临床意义 1.HBsAg为乙肝患者首先出现的病毒标志物,可作为乙肝的早期诊断和普查项目.在急性肝炎潜伏期即可阳性,而临床表现及肝功异常要在4周后才出现,乙肝发病时HBsAg达高峰.是诊断乙肝最常用的指标.第二十九页，本课件共有106页2.3个月后不转阴,以变为慢性:慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌3.慢性HBsAg携带者第三十页，本课件共有106页HBsAb:针对HBsAg产生,有一定的中和作用,阳性表明机体有一定免疫力.参考值阴性 临床意义阳性提示急性感染后康
12、复,在发病后转阳或效价升高有意义.一般3-6月后出现,可持续多年.判断疫苗的质量最主要的指标.接受HBsAb阳性血的受血者,可出现短暂阳性.第三十一页，本课件共有106页HBeAg:核心颗粒的可溶性蛋白,具有抗原性 参考值阴性 临床意义 HBeAg阳性是乙肝传染性的标志物,具有传染性,病人处于活动期.HBeAg与DNA复制成正比,也和肝损成正比.母婴传播 判断急性乙肝的预后第三十二页，本课件共有106页HBeAb:比HBsAb转阳要早.参考值阴性 临场意义 急性肝炎患者HBeAg转阴,HBeAb出现,认为病情好转,预后良好,病毒复制水平下降,传染性降低,但并非无传染性.潜在HBeAb阳性可能是
13、慢性迁延和恶性变信号.第三十三页，本课件共有106页HBcAg:存在于Dane颗粒核心,是一种核心蛋白,被HBsAg包裹,一般测不出来.参考值阴性 临床意义乙肝传染性活动性病变的标志:HBsAg、HBeAg和HBcAb等指标是体内存在乙肝病毒的间接标志，而HBcAg是直接标志，与HBVDNA呈正相关，可反映HBV活动性复制程度。第三十四页，本课件共有106页HBcAb:有IgG、IgM、IgA三种。参考值阴性 临床意义 1 HBcAb总抗体：主要反映IgG。HBV感染的指标 乙肝急性期的辅助诊断：“窗口期”流行病学调查的指标 献血员的筛选 观察疫苗的安全性第三十五页，本课件共有106页2 HB
14、cAb-IgM 急性乙肝的诊断:感染早期HBcAb-IgM上升,数月后不论HBsAg是否消失,HBcAb-IgM都稳定.HBsAg阴性急性感染者HBcAb-IgM阳性且高滴度,也可诊断.第三十六页，本课件共有106页 判断病毒复制的指标:有助于区别慢活肝或非活动性肝炎,慢活肝HBcAb-IgM阳性，低度低。有助于鉴别近期感染或即往感染第三十七页，本课件共有106页3 HBcAb-IgG 流行病学调查 有助于区别慢活肝或非活动性肝炎:特别是急性乙肝和乙肝携带者急性发作第三十八页，本课件共有106页前S2和前S2抗体:参考值阴性 临床意义 Pre-S2阳性提示复制活跃,有传染性,处于早期感染.抗P
15、re-S2抗体阳性是在乙肝急性期及恢复早期,提示预后良好.第三十九页，本课件共有106页HBV-DNA:参考值阴性 临床意义 乙肝的直接诊断依据 母婴垂直传播第四十页，本课件共有106页丙型肝炎病毒标志物的检测HCV-RNA 参考值阴性临床意义 早期病原学诊断判断预后第四十一页，本课件共有106页HCV-IgM 参考值阴性 临床意义急性丙肝患者4周后阳性,6个月内治愈转阴,否则转变为慢性.第四十二页，本课件共有106页HCV-IgG:出现慢,2-6月后阳性 参考值阴性 临床意义 抗HCV-IgG阳性表明已有HCV 献血员筛选 第四十三页，本课件共有106页肿瘤标志物检测 肿瘤标志物(tumor
16、 marker):肿瘤在发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤反应而产生的一种物质。反映细胞恶变各阶段表型及基因特征性。第四十四页，本课件共有106页甲种胎儿蛋白（AFP）：早期胎儿肝脏合成，出生后受抑制。当肝脏细胞或生殖腺胚胎组织恶变时显著增高。参考值定性:阴性，定量:20ug/l 临床意义 原发性肝癌的诊断与预后:.300ug/L第四十五页，本课件共有106页生殖腺胚胎癌中的运用:在睾丸癌、卵巢癌、畸胎癌的诊断、疗效观察和预后判断中均有意义。其他：鉴别妊娠和绒毛癌；在胎盘梗塞、剥离、羊水栓塞、胎儿先天性开放性神经管畸形，病毒性肝炎、肝硬化。第四十六页，本课件共有106页癌胚
17、抗原（CEA）：胎儿早期的消化管和某些组织均可合成，孕6个月后下降，出生后极低。参考值15ug/l 临床意义 由内胚层分化来的恶性肿瘤：尤其是消化道腺体的肿瘤检出率较高.某些良性肿瘤:直肠息肉轻度一过性增高,结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病、肺气肿、支气管哮喘 其他体液：良性胸腹水CEA血清,胃液CEA增高对诊断胃癌有一定价值.第四十七页，本课件共有106页癌抗原125（CA-125)属于糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤的上皮细胞。临床意义卵巢癌的诊断、疗效观察、判断复发、有重要意义。妇科恶性肿瘤：卵巢上皮细胞肿瘤、透明细胞癌、生殖细胞肿瘤、宫颈癌中均升高。其他：肝癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌、均可
18、增高，良性卵巢肿瘤、子宫肌瘤也可增高。第四十八页，本课件共有106页前列腺特异性抗原（PSA):存在于前列腺导管上皮细胞中。可分为复合PSA（C-PSA）和游离PSA（F-PSA）参考值T-PSA40ug/l，F-PSA0.25临床意义有器官特异性，无肿瘤特异性前列腺癌的筛选：T-PSA增高,F-PSA/T-PSA10%前列腺炎、单纯前列腺肥大可轻度升高。第四十九页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查自身免疫性疾病自身免疫性疾病（AID）：某些原因削弱或破坏健康人）：某些原因削弱或破坏健康人的自身免疫耐受，免疫系统对自身组织或成分产生免疫的自身免疫耐受，免疫系统对自身组织或成分产生免疫
19、应答，称自身免疫。由于自身免疫而产生的疾病称自身应答，称自身免疫。由于自身免疫而产生的疾病称自身免疫病。免疫病。AID-器官特异性和非器官特异性（抗原为细胞核或胞浆器官特异性和非器官特异性（抗原为细胞核或胞浆成分）及中间型。成分）及中间型。抗核抗体（抗核抗体（ANA）：）：是以细胞的核成分为靶抗原的自是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。间接免疫荧光检查有四种荧光图谱：身抗体的总称。间接免疫荧光检查有四种荧光图谱：均质型（抗均质型（抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体）；周边型（抗抗体和抗组蛋白抗体）；周边型（抗dsDNA抗体）；斑点型或颗粒型（抗抗体）；斑点型或颗粒型（抗U1-RNP、抗、抗S
20、m、抗抗Scl-70、抗、抗SS-B/La、抗、抗SS-A/Ro等）；核仁型（核等）；核仁型（核糖体、糖体、U3-RNP、RNA聚合酶）。聚合酶）。第五十页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查抗核抗体（抗核抗体（ANA）检查：）检查：抗各种细胞核成分抗各种细胞核成分（脱氧核糖核蛋白（脱氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗、可提取的核抗原原-ENA和和RNA等）的自身抗体的总称。等）的自身抗体的总称。参考值：参考值：IFA法阴性，血清滴度法阴性，血清滴度1：40为阳性为阳性 阳性见于阳性见于SLE（80%100%）、）、MCTD（100%）、原发性胆汁性肝硬化）、原发性胆汁性肝硬化
21、95%100%）、）、DM（30%50%）、）、RA等。等。第五十一页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查抗抗DNA抗体分为：抗体分为：抗抗ds-DNA、抗、抗ss-DNA、抗、抗z-DNA 抗抗z-DNA 对对SLE有特异性，检出率在有特异性，检出率在90%以上。以上。抗抗dsDNA抗体测定的临床意义抗体测定的临床意义 见于见于SLE活动期，阳性率活动期，阳性率70%90%。特异性教高（特异性教高（95%）敏感性较低）敏感性较低-诊断诊断与治疗监控。另外参与与治疗监控。另外参与SLE发病机制。发病机制。第五十二页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查3.可提取性抗原多肽抗体谱测
22、定可提取性抗原多肽抗体谱测定抗抗Sm抗体测定：抗体测定：为为SLE所特有，疾病特异度达所特有，疾病特异度达99%，且能反应疾，且能反应疾病活动的程度，灵敏度较低，平均为病活动的程度，灵敏度较低，平均为20%。与。与CNS、肾病、肺纤、肾病、肺纤维化及心膜炎有一定关系。维化及心膜炎有一定关系。抗组蛋白抗体（抗组蛋白抗体（AHA）测定）测定 临床意义：临床意义：50%70%的的SLE及及95%以上的药物诱导性狼疮可出现，主以上的药物诱导性狼疮可出现，主要靶抗原为要靶抗原为H2A-H2B DNA复合物，与复合物，与SLE活动有关。活动有关。抗核糖核蛋白（抗核糖核蛋白（RNP）抗体测定）抗体测定 临床
23、意义：临床意义：抗抗U1-RNP抗体主要与抗体主要与MCTD相关，在相关，在30%40%的的SLE病人中可检测到，并常与病人中可检测到，并常与Sm抗体相伴出现。常与下列临床表现有抗体相伴出现。常与下列临床表现有关，肾脏较少累及、雷诺现象、手肿胀、食管运动不良等。关，肾脏较少累及、雷诺现象、手肿胀、食管运动不良等。第五十三页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查抗抗SS-A/Ro抗体测定抗体测定 干燥综合征有三种不同的自身抗体：干燥综合征有三种不同的自身抗体：SSA、SSB、SSC（RANA），前两者仅见于原发性），前两者仅见于原发性干燥综合征，后者见于伴类风湿性关节炎的继发干燥综合征，后
24、者见于伴类风湿性关节炎的继发性干燥综合征。性干燥综合征。SS-A/Ro抗体见于干燥综合征（抗体见于干燥综合征（SjS）（灵敏度）（灵敏度88%96%），），RA（3%10%），），SLE（24%60%）。其他疾病：亚急性皮肤性狼疮）。其他疾病：亚急性皮肤性狼疮（70%90%），新生儿狼疮（），新生儿狼疮（90%），补体），补体C2/C4缺乏症（缺乏症（90%）。）。第五十四页，本课件共有106页 自身抗体检查自身抗体检查抗抗SSB抗体（抗抗体（抗 La抗体、抗抗体、抗Ha抗体）测定抗体）测定 多数情况下与多数情况下与SS-A/Ro抗体同时出现。干燥抗体同时出现。干燥综合征（综合征（71%87%
25、），新生儿狼疮综合征），新生儿狼疮综合征（75%）伴先天性心脏传导阻滞（）伴先天性心脏传导阻滞（30%40%）。）。.抗抗Scl-70抗体测定抗体测定 抗抗Scl-70抗体识别的抗原是抗体识别的抗原是DNA拓扑异构酶拓扑异构酶I，该酶参与超螺旋，该酶参与超螺旋DNA的解螺的解螺旋。旋。临床意义临床意义 特异性地出现于系统性硬化症特异性地出现于系统性硬化症（PPS）的病人，并提示预后不良。）的病人，并提示预后不良。第五十五页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查自身抗体的检测自身抗体的检测抗核抗体谱：抗核抗体谱：ANA滴度达滴度达1：80或以上者需考虑或以上者需考虑CTD的可的可能，再进一
26、步检查能，再进一步检查ds-DNA、抗组蛋白、抗、抗组蛋白、抗ENA抗体谱的检抗体谱的检查。查。结缔组织病的抗核抗体谱结缔组织病的抗核抗体谱SLE：ANA、抗（、抗（ds-DNA）、）、抗组蛋白、抗抗组蛋白、抗Sm、抗、抗SSA。pSS：抗抗SSA、抗、抗SSB。DM/PM：抗合成酶（抗合成酶（jo-1，PL-7，PL-12）、抗）、抗SRP、抗、抗Mi-2。SSc：ACA（抗着丝点）、抗（抗着丝点）、抗Scl-70、抗核仁抗体。、抗核仁抗体。MCTD：ANA、抗、抗RNP。第五十六页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（AMA）抗心肌抗体（抗心肌抗体（AHA
27、）抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）抗磷脂抗体：有抗心脂抗体、狼疮抗凝物、假阳抗磷脂抗体：有抗心脂抗体、狼疮抗凝物、假阳性梅毒反应等。主要出现在性梅毒反应等。主要出现在SLE和和pSS，并与血，并与血小板减少、狼疮脑病、血管栓塞、习惯性自发性流小板减少、狼疮脑病、血管栓塞、习惯性自发性流产有关。产有关。HLA-B27第五十七页，本课件共有106页第五十八页，本课件共有106页自身抗体检查自身抗体检查类风湿因子（类风湿因子（RF）：靶抗原为变性）：靶抗原为变性IgG的的Fc部分，有部分，有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五种类型。五
28、种类型。测定方法：速率散射法或速率比浊法。测定方法：速率散射法或速率比浊法。RIA，ELISA法法90%RA患者呈阳性，患者呈阳性，IgA-RF与骨质破与骨质破坏有关，早期升高提示病情严重，预后坏有关，早期升高提示病情严重，预后不良。不良。IgE-RF升高时已属病情晚期。升高时已属病情晚期。第五十九页，本课件共有106页感染免疫检查感染免疫检查第六十页，本课件共有106页抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素o测定测定(ASO)参考值乳胶凝集法500U 临床意义 增高：A族溶血性链球菌感染所引起的疾病:风湿热(风湿性关节炎、风湿性心肌炎),急性上呼吸道感染(扁桃体炎),急性肾小球肾炎等.第六十一页，本课
29、件共有106页伤寒和副伤寒沙门氏菌的检测 肥达氏反应(Widal)参考值 o凝集效价1:80 伤寒H凝集效价1:160,副伤寒A,B,C凝集效价1:80,H1:1602副伤寒甲:O1:80,A1:160 乙:O1:80,B1:160 丙:O1:80,C1:1603单O升高:感染早期或其他沙门氏菌与O抗原交叉反应4单H升高:预防接种或非特异性反应第六十三页，本课件共有106页结核分枝杆菌抗体和DNA测定:参考值ELISA:结核抗体阴性 PCR:结核分枝杆菌DNA阴性 临床意义阳性:结核分枝杆菌感染,阳 性率80-90%第六十四页，本课件共有106页C反应蛋白测定(C-reactive prote
30、in,CRP)参考值免疫比浊法:8.2mg/L 临床意义 1组织损伤:大手术,严重创伤,烧伤,心梗 2细菌感染,病毒感染升高不明显 3风湿热活动期 4恶性肿瘤,器官移植后排斥反应第六十五页，本课件共有106页TORCH感染免疫检测TO：toxoplasma gondii,弓形虫R：rubella virus,风疹病毒C：cytomegalovirus,巨细胞病毒H：herpes simplex virus,单纯疱疹病毒 孕妇感染后可通过胎盘传染给胎儿，导致流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍，已被作为孕期检查常规项目。第六十六页，本课件共有106页临床病原学检查第六十七页，本课件共有106页病
31、原体所致疾病的实验诊断原则：1正确、规范采集和运送标本2直接镜检病原体或检测其抗原成分3运用分子生物学方法检测病原体核酸4运用免疫学方法测定患者体内的特异性 抗体5对病原体进行分离和鉴定第六十八页，本课件共有106页标本采集和运送标本采集的时间、部位和种类采集要无菌操作，不能接触消毒剂和 抗生素厌氧培养要注意隔绝空气第六十九页，本课件共有106页血液标本 发热初期和高峰期采集，如已用抗生素则在下次用药前采 无菌法肘静脉穿刺10-20ml于血培养瓶第七十页，本课件共有106页尿液标本 采集清洁中段尿标本，最好为晨尿 105cfu/ml,为尿路感染第七十一页，本课件共有106页呼吸道标本 气管收集
32、物为理想标本，另痰、鼻咽拭子亦可第七十二页，本课件共有106页粪便标本 腹泻患者粪便取含脓、血或粘液标本，黄豆大小于运送培养基中送检第七十三页，本课件共有106页脑脊液与其他无菌体液标本 无菌采集，保温送检或床边送检 含菌量少，离心后接种第七十四页，本课件共有106页泌尿生殖道标本创伤、组织和脓肿标本第七十五页，本课件共有106页 检测方法1.直接显微镜检查 固定染色镜检 革兰氏染色 找优势菌 找革兰氏阴性双球菌 抗酸染色 墨汁染色 第七十六页，本课件共有106页悬滴法或压滴法 利用运动物体对光线的散射作用来实现对有动力的细菌如霍乱弧菌的快速检验。第七十七页，本课件共有106页2 病原体抗原检
33、测3病原体核酸检测：聚合酶链反应（PCR)变性-退火-延伸 DNA探针杂交技术优势 第七十八页，本课件共有106页优势 出报告快速 能在感染早期得到诊断 比表型检测更稳定重复性更好。局限 不能判定病原体的存活状态 不能判定机体对病原体的反应状态 不能判定病原体对药物的反应性第七十九页，本课件共有106页4 病原体分离、培养和鉴定 细菌：合适的培养基和条件 病毒、立克次体、衣原体等不能人工培养：接种于易感动物、鸡胚或细胞培养第八十页，本课件共有106页 5病原体抗体检测 优势 能反映机体对病原体感染的反 应性。局限 存在潜伏期，不能第八十一页，本课件共有106页冷凝集试验：肺炎支原体 与Rh(-
34、)的O型红细胞在4发生凝集，置于37水浴，凝集熔解。1:64外斐反应:OX19、OX2、OXK变性杆菌与某些立克次体有共同抗原，代替立克次体抗原，从而测定立克次体患者血清抗体的凝集试验。1:160第八十二页，本课件共有106页医院感染检查医院感染又称院内感染(nosocomial infection,hospital infection),或医院获得性感染：指患者在入院时既不存在，亦不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括医院内获得而在出院后发病的感染第八十三页，本课件共有106页医院感染流行学病原学 细菌最常见，以往以阳性球菌为主，近年变化趋势阴性杆菌增多，阳性球菌下降，。其中有些是在医学微
35、生物中根本不讨论的。另厌氧菌、深部真菌、病毒都可。第八十四页，本课件共有106页感染源和易感人群 人员、环境、医疗器械和血液制品 免疫力低下的住院患者是高危人群第八十五页，本课件共有106页常见的临床类型 下呼吸道感染 尿路感染 手术切口感染 胃肠道感染 血液感染 皮肤和软组织感染 第八十六页，本课件共有106页医院感染病原学检测标本采集和送检基本原则 一经发现及时采集标本 严格无菌操作 立即送检，最好床边接种 标本容器须灭菌 混有正常菌群标本作定量或半定量培养 对分离菌作药敏，提倡“分级报告”第八十七页，本课件共有106页涂片镜检 操作简便、结果快速，但不能菌种鉴定及药敏分离培养鉴定法 操作
36、简便、观察直观、特异性高，可做药敏试验指导临床用药第八十八页，本课件共有106页医院环境细菌检测和消毒灭菌效果检测医院环境污染的细菌检测方法 空气细菌污染的监测 物体表面细菌的监测 医务人员手部细菌的监测第八十九页，本课件共有106页消毒灭菌的效果监测 高压蒸汽灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌 ATCC7953 紫外线灭菌：枯草芽孢杆菌黑色变种 ATCC9372 化学消毒剂：使用中污染菌监测和效 果监测第九十页，本课件共有106页性传播疾病的检查艾滋病：获得性免疫缺陷病（AIDS）人类免疫缺陷病毒（HIV）感染 初筛试验：ELISA 确诊试验：蛋白印迹法，PCR 其他：CD4计数第九十一页，本课件共有1
37、06页梅毒：梅毒螺旋体感染 暗视野显微镜检查 血清学：初筛试验（非特异抗体）：RPR、TRUST、VDRL 确诊试验（特异性抗体）：TPHA PCR检测 第九十二页，本课件共有106页淋病：淋病奈色氏菌感染 涂片检查：培养 PCR检查第九十三页，本课件共有106页非淋菌性尿道炎：生殖器疱疹和尖锐湿疣第九十四页，本课件共有106页细菌耐药性检查第九十五页，本课件共有106页耐药菌株耐-内酰胺酶的革兰氏阴性杆菌耐超广谱-内酰胺酶(ESBL)的肺炎克雷伯大肠杆菌耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)耐万古霉素肠球菌(VER)耐青霉素肺炎克雷伯(PRSP)第九十六页，本课件共有106页耐药机制酶抑制抗生素的作用
38、 -内酰胺酶 氯霉素乙酰基转移酶 氨基糖甙类钝化酶抗生素的渗透障碍抗生素细菌结合蛋白量发生变化细菌靶结构改变产生代谢拮抗剂第九十七页，本课件共有106页体外药敏试验抗菌药物的选择 细菌 药 物 肠杆菌 氨苄西林 头孢唑林 绿脓杆菌 头孢他啶 庆大霉素 葡萄球菌 苯唑西林 青霉素 肠球菌 氨苄西林 链球菌 红霉素 氨苄西林第九十八页，本课件共有106页常用敏感性试验的方法琼脂扩散法(K-B法)操作简便、易于判断、自由选药、临床普遍选用，但不能定量、不易标准化稀释法 定量、易于标准化，但费时、用于研究E试验：结合以上两种第九十九页，本课件共有106页耐药性的监测-内酰胺酶检测 方法：碘-淀粉法 产
39、酸法 头孢哨噻吩滤纸片法（产 色头孢菌素法）第一百页，本课件共有106页意义：1流感噬血杆菌、淋球菌、卡他莫拉汉菌等预示对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药2在葡萄球菌肠球菌预示对青霉素、氨基组青霉素、尿基组青霉素耐药第一百零一页，本课件共有106页超广谱-内酰胺酶检测 方法：微生物学（双纸片法）意义：1阳性预示对头孢泊肟、头孢 他啶、头孢噻肟、头孢曲松、氨 曲南等无效 2产ESBL肺炎克雷伯和大肠杆菌药 敏即使敏感，也应视为耐药 第一百零二页，本课件共有106页耐甲氧西林葡萄球菌 含耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCoN）意义：1MRS不论体外药敏结果，所有 -内酰胺药物或抑制剂均无效 2绝大多数MRS为多重耐药，包括氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类等第一百零三页，本课件共有106页耐青霉素肺炎克雷伯（PRSP）意义：对氨苄西林、头孢克 肟、头孢唑肟低疗效第一百零四页，本课件共有106页耐万古霉素肠球菌（VRE）意义：对VER无有效治疗方法，但对青 霉素敏感的VER可用青霉素和庆大霉 素治疗，若对青霉素耐药而不是高水 平耐氨基糖苷类，可用壁霉素和庆大 霉素联合治疗第一百零五页，本课件共有106页感谢大家观看第一百零六页，本课件共有106页