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1、无菌产品生产、质量控制无菌产品生产、质量控制主要内容主要内容无菌产品的高风险分析无菌产品的高风险分析厂房设计、洁净度级别和环境控制厂房设计、洁净度级别和环境控制设备设备生产工艺生产工艺l配制配制l过滤过滤l无菌灌装无菌灌装l灭菌工艺灭菌工艺无菌检查无菌检查物料质量控制物料质量控制人员监控人员监控无菌服无菌服消毒剂消毒剂清洁消毒用具清洁消毒用具无菌产品的高风险分析无菌产品的高风险分析一般质量要求一般质量要求无菌无菌成品中不得含有任何活的微生物成品中不得含有任何活的微生物无热原无热原特别是供静脉及脊椎注射的制剂特别是供静脉及脊椎注射的制剂澄明度澄明度不得有肉眼可见的浑浊或异物不得有肉眼可见的浑浊或
2、异物安全性安全性不能引起对组织的刺激性或发生毒性反应，特别是一些非水溶剂不能引起对组织的刺激性或发生毒性反应，特别是一些非水溶剂及一些附加剂，必须经过必要的动物实验，以确保安全及一些附加剂，必须经过必要的动物实验，以确保安全（参照注射剂进行如下分析、讲解）（参照注射剂进行如下分析、讲解）一般质量要求一般质量要求渗透压渗透压与血浆的渗透压相等或接近与血浆的渗透压相等或接近pHpH要求与血液相等或接近（血液要求与血液相等或接近（血液pH7.4pH7.4）必要的物理和化学稳定性，以确保产品在储存期内安全必要的物理和化学稳定性，以确保产品在储存期内安全有效有效降压物质降压物质有些注射液，如复方氨基酸注
3、射液，其降压物质必须符合规定，有些注射液，如复方氨基酸注射液，其降压物质必须符合规定，确保安全确保安全无菌生产的风险分析无菌生产的风险分析主要影响因素主要影响因素1.厂房厂房2.设备设备3.工艺过程工艺过程4.物料质量控制物料质量控制5.人员人员 6.无菌无菌服服7.消毒剂消毒剂8.器具器具无菌生产的管理要点无菌生产的管理要点防止微生物污染防止微生物污染防止热原或细菌内毒素的污染防止热原或细菌内毒素的污染防止产品中有异物防止产品中有异物厂房设计、洁净度级别厂房设计、洁净度级别和环境监控和环境监控厂房常见缺陷厂房常见缺陷采用无菌工艺制造的洁净区内，无菌的操作区与有菌的操作区未采用无菌工艺制造的洁
4、净区内，无菌的操作区与有菌的操作区未完全分开完全分开冻干灌装区所用工器具灭菌后，经事实上的非无菌区进入无菌区，冻干灌装区所用工器具灭菌后，经事实上的非无菌区进入无菌区，带来微生物污染风险带来微生物污染风险无菌区设水池及洁具间，或设地漏无菌区设水池及洁具间，或设地漏无菌区设单独的废物区无菌区设单独的废物区洁净区压差监控不到位洁净区压差监控不到位l采用最终灭菌工艺生产的灌装间倒压差采用最终灭菌工艺生产的灌装间倒压差厂房有重大变更，不做确认和验证厂房有重大变更，不做确认和验证无菌操作区布局示例图一无菌操作区布局示例图一无菌操作区布局示例图二无菌操作区布局示例图二洁净环境监控洁净环境监控洁洁 净净 级
5、级 别别尘粒数尘粒数/立方米立方米微生物最大允许数微生物最大允许数 0.5m 5m浮游菌浮游菌CFU/立方米立方米沉降菌沉降菌CFU/皿皿(90 mm 半半 小小 时时)100 3 50005110 000 350 0002 0001003100 000 3 500 00020 00050010300 000 10 500 00060 000-15来源：来源：YY_0033-2000_YY_0033-2000_无菌医疗器具生产管理规范无菌医疗器具生产管理规范关键操作区气流方向示例一关键操作区气流方向示例一MMSCIP灭菌直接包材接触部100级10000级关键操作区气流方向示例二关键操作区气流方
6、向示例二MMSCIP灭菌灭菌直接包材直接包材接触部接触部0.4520%m/sGrade”A”Grade”B”关关键键点点操作者不能进入Grade”A”区域。厂房管理要点厂房管理要点厂房布局和建造厂房布局和建造l厂房布局的合理性（例人员进出分开，尽可能涉及观察窗监控设施，称量区域防尘要求、特殊药品布局要求以及排风尾气的处理措施等）l 厂房密封性（特别是与灭菌设备相连处）及SOP规定l 厂房表面的完好性（包括门）l 人物进出口的管理（物料气闸、传递窗等互锁延时装置、门禁）l 温湿度适合产品生产l 地漏的设置和清洁消毒l 洁净厂房材质要求（熏蒸消毒的影响）l 洁净室灯具安装要求厂房管理要点厂房管理要
7、点洁净度级别的标准洁净度级别的标准关键操作区的流型测试关键操作区的流型测试（干冰、发烟笔，录像）（干冰、发烟笔，录像）洁净区的压差洁净区的压差（绝对压差的控制、压差梯度的控制、压差报警）（绝对压差的控制、压差梯度的控制、压差报警）洁净区的清洁和消毒洁净区的清洁和消毒（消毒效果确认、周期、消毒方式等）（消毒效果确认、周期、消毒方式等）环境监控环境监控l动态的粒子数和微生物数（动态的粒子数和微生物数（在线监测装置的应用，检测时间、采样量、频率、采样在线监测装置的应用，检测时间、采样量、频率、采样位置等）位置等）HVACHVAC系统的维护和监控系统的维护和监控生产设备生产设备生产设备的常见缺陷生产设
8、备的常见缺陷储存除菌过滤后药液的高位槽呼吸口未安装呼吸器储存除菌过滤后药液的高位槽呼吸口未安装呼吸器与产品直接接触的压缩空气、惰性气体未确认是否符合生产要求与产品直接接触的压缩空气、惰性气体未确认是否符合生产要求 灭菌和冻干设备管理不到位灭菌和冻干设备管理不到位l温度探头或控制仪未校准温度探头或控制仪未校准l温度探头损坏维修不及时温度探头损坏维修不及时（干热、湿热）灭菌设备无自动记录装置（干热、湿热）灭菌设备无自动记录装置（干热、湿热）灭菌设备的自动记录未归档（干热、湿热）灭菌设备的自动记录未归档未使用联动生产线，采用单机灌封未使用联动生产线，采用单机灌封灭菌设备自动记录曲线图示例灭菌设备自动
9、记录曲线图示例生产设备管理要点生产设备管理要点适用于产品的生产、清洁、消毒或灭菌适用于产品的生产、清洁、消毒或灭菌尽可能采用密闭系统尽可能采用密闭系统合理布置和安装合理布置和安装关键参数控制和记录仪表的校准关键参数控制和记录仪表的校准设备的确认、维护和维修设备的确认、维护和维修设备的清洁、消毒或灭菌设备的清洁、消毒或灭菌l共用设备应有防止交叉污染的措施共用设备应有防止交叉污染的措施设备应在确认的范围内使用设备应在确认的范围内使用除菌过滤系统管理要点除菌过滤系统管理要点滤芯供应商选择滤芯供应商选择滤芯材质选择滤芯材质选择（与注册资料一致）（与注册资料一致）滤芯相容性试验滤芯相容性试验（包括吸附试
10、验）（包括吸附试验）滤芯微生物挑战试验滤芯微生物挑战试验滤芯完整性检测滤芯完整性检测滤器系统的在线或离线清洗灭菌、滤器系统的在线或离线清洗灭菌、安装（防止二次污染）安装（防止二次污染）过滤器安防的位置要求过滤器安防的位置要求滤芯使用次数的确认滤芯使用次数的确认（最后一级建议一次使用，除非经过验证）（最后一级建议一次使用，除非经过验证）滤芯的保存方式滤芯的保存方式滤芯的更换记录滤芯的更换记录（QA确认）确认）生产用隔离器示例一生产用隔离器示例一生产用隔离器示例二生产用隔离器示例二生产用隔离器示例三生产用隔离器示例三工艺用水系统常见问题工艺用水系统常见问题注射用水和纯化水标准不符合药典标准注射用水
11、和纯化水标准不符合药典标准l工艺用水未做微生物限度的检测注射用水和纯化水的微生物限度检查未采用薄膜过滤法注射用水和纯化水的微生物限度检查未采用薄膜过滤法注射用水循环系统温度检测点安装位置不合理，不能反映系注射用水循环系统温度检测点安装位置不合理，不能反映系统保持统保持8080以上循环以上循环未监测注射用水关键使用点的细菌内毒素未监测注射用水关键使用点的细菌内毒素工艺用水系统管理要点工艺用水系统管理要点水处理设施及其分配系统的设计、安装和维护应能确保供水达到适水处理设施及其分配系统的设计、安装和维护应能确保供水达到适当的质量标准。水系统的运行不应超越其设计能力。当的质量标准。水系统的运行不应超越
12、其设计能力。注射用水的生产、贮存和分配方式应能防止微生物生长，例如，在注射用水的生产、贮存和分配方式应能防止微生物生长，例如，在8080以上保持循环以上保持循环水源、水处理设施及水的化学和生物学污染状况应定期监测，必要水源、水处理设施及水的化学和生物学污染状况应定期监测，必要时还应监测细菌内毒素。监测结果以及所采取纠偏措施的记录应予时还应监测细菌内毒素。监测结果以及所采取纠偏措施的记录应予归档归档无菌生产工艺无菌生产工艺无菌生产关键工序无菌生产关键工序配制配制过滤过滤无菌灌装无菌灌装/灭菌灭菌无菌生产管理要点无菌生产管理要点生产加工的每个阶段（包括灭菌前的各阶段）生产加工的每个阶段（包括灭菌前
13、的各阶段）都必须采取预防措施，以尽可能降低污染都必须采取预防措施，以尽可能降低污染配制工序配制工序常见问题常见问题l提高称量配制区域的洁净度级别，使其与灌装区域一致，共提高称量配制区域的洁净度级别，使其与灌装区域一致，共用同一洁净区的更衣设施、走廊和用同一洁净区的更衣设施、走廊和HVAC系统系统l称量操作位置的正上方安装高效空气层流称量操作位置的正上方安装高效空气层流l不注意物料称量的先后顺序不注意物料称量的先后顺序l整包装的物料不称量即投料整包装的物料不称量即投料l不按照规定的处方配制不按照规定的处方配制l称量记录不完整称量记录不完整l操作区域受到活性炭污染操作区域受到活性炭污染配制区域的洁
14、净度级别配制区域的洁净度级别应单独设置，注意称量区的空气流向，防止粉尘扩散应单独设置，注意称量区的空气流向，防止粉尘扩散应根据产品的特性设定相应的洁净度级别应根据产品的特性设定相应的洁净度级别GMP附录无菌医疗器械规定：附录无菌医疗器械规定：l2.2.7 对于有要求或采用无菌操作技术加工的无菌医疗器械（包括医用材料），应当在10,000级下的局部100级洁净室（区）内进行生产。l2.2.8 洁净工作服清洗干燥间、洁具间、专用工位器具的末道清洁处理与消毒的区域的空气洁净度级别可低于生产区一个级别，但不得低于300,000级。无菌工作服的整理、灭菌后的贮存应当在10,000级洁净室（区）内。称量工
15、序称量工序必须按照注册批准的处方配料必须按照注册批准的处方配料称量中应特别注意防止交叉污染称量中应特别注意防止交叉污染l一次称量一种物料一次称量一种物料l通常先称量辅料，后称量原料药通常先称量辅料，后称量原料药l活性炭应在单独区域中称量，称量后放在水溶液中活性炭应在单独区域中称量，称量后放在水溶液中衡器衡器l使用前应检查校准使用前应检查校准称量记录称量记录l最好采用客观的记录最好采用客观的记录l如实记录衡器的读数如实记录衡器的读数l复核复核配制、称量工序管理要点配制、称量工序管理要点操作区的设置和洁净度级别操作区的设置和洁净度级别配料处方配料处方称量操作称量操作称量记录称量记录防止污染和交叉污
16、染的措施防止污染和交叉污染的措施过滤工序常见问题过滤工序常见问题l过滤器的安装位置远离灌装点过滤器的安装位置远离灌装点l采用无菌制造工艺时，除菌过滤的有菌操作区与无菌操作采用无菌制造工艺时，除菌过滤的有菌操作区与无菌操作区未分隔区未分隔l未记录所用过滤器的型号、来源、批号未记录所用过滤器的型号、来源、批号l不做过滤器的完整性试验不做过滤器的完整性试验l过滤器完整性试验的合格标准设定不正确过滤器完整性试验的合格标准设定不正确l过滤后的溶液存放在开口的容器中过滤后的溶液存放在开口的容器中除菌滤器管理要点除菌滤器管理要点除菌过滤用过滤器通常使用除菌过滤用过滤器通常使用2 2只串联方式，确保过只串联方
17、式，确保过滤的可靠性滤的可靠性可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用除菌过滤可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用除菌过滤器将所有药液，特别是大容量注射剂进行除菌过滤器将所有药液，特别是大容量注射剂进行除菌过滤采用无菌制造工艺时，除菌过滤操作区域不得设在采用无菌制造工艺时，除菌过滤操作区域不得设在无菌操作区内，可通过管道传送滤液无菌操作区内，可通过管道传送滤液过滤器完整性试验过滤器完整性试验过滤器的相关信息应具有可追溯性过滤器的相关信息应具有可追溯性完整性试验的合格标准应参照供应商的说明书设定完整性试验的合格标准应参照供应商的说明书设定应在过滤前、过滤后分别测试应在过滤前、过滤后分别测试测试方法测
18、试方法l起泡点试验起泡点试验l前进流试验前进流试验微生物挑战性试验由供应商做，以避免污染产品微生物挑战性试验由供应商做，以避免污染产品起泡点试验示意图起泡点试验示意图 压缩空气压缩空气 或氮气或氮气 压力表压力表阀门阀门压力表压力表滤芯滤芯外壳外壳 排污阀排污阀阀门阀门亲水滤器起泡点试验亲水滤器起泡点试验水剂产品以产品或水水剂产品以产品或水湿润滤膜湿润滤膜 0.2 0.2 参考压力参考压力 0.31 MPa 0.31 MPa 0.45 0.45 参考压力参考压力 0.23 MPa 0.23 MPa详见供货商说明书详见供货商说明书疏水性滤器起泡点疏水性滤器起泡点6060(v/v)v/v)异丙醇水
19、溶液异丙醇水溶液6060-70-70(v/v)v/v)乙醇水溶液乙醇水溶液前进流试验示意图前进流试验示意图 压缩空气压缩空气 或氮气或氮气 阀门阀门 压力表压力表滤芯滤芯外壳外壳阀门阀门前进流前进流测试仪测试仪 排污阀排污阀前进流试验前进流试验在在 80 起泡点压起泡点压力下进行力下进行详见供货商说明书详见供货商说明书过滤工序管理要点过滤工序管理要点过滤器的安装位置过滤器的安装位置过滤器的相关信息过滤器的相关信息过滤器完整性试验的方法过滤器完整性试验的方法过滤前后的完整性试验和记录过滤前后的完整性试验和记录过滤器的更换、消毒或灭菌过滤器的更换、消毒或灭菌发现过滤器出问题后的处理发现过滤器出问题
20、后的处理无菌灌装工序常见问题无菌灌装工序常见问题l关键操作区空气流向为乱流，而不是层流关键操作区空气流向为乱流，而不是层流l关键操作区不便于在洁净区外进行监控关键操作区不便于在洁净区外进行监控l人员的无菌操作不规范人员的无菌操作不规范l不做或未定期做培养基模拟灌装验证不做或未定期做培养基模拟灌装验证l培养模拟灌装验证的合格标准设定不正确培养模拟灌装验证的合格标准设定不正确l培养基模拟灌装未模拟最差生产条件培养基模拟灌装未模拟最差生产条件l未对培养基模拟灌装阳性样品进行调查未对培养基模拟灌装阳性样品进行调查l培养模拟灌装验证数据作假培养模拟灌装验证数据作假培养基模拟灌装验证培养基模拟灌装验证目的
21、目的l确定实际生产中（如开机前的调试、加入无菌原辅材料、确定实际生产中（如开机前的调试、加入无菌原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染的概率无菌连接、灌装和密封）产品污染的概率基本思路基本思路l应综合考虑生产线可能造成污染的各种因素，并能对工艺应综合考虑生产线可能造成污染的各种因素，并能对工艺受控的状态做出准确的评估受控的状态做出准确的评估l应尽可能模拟实际生产的无菌操作，可能时，应包括最差应尽可能模拟实际生产的无菌操作，可能时，应包括最差条件的相关活动，以挑战无菌操作条件的相关活动，以挑战无菌操作无菌灌装工序管理要点无菌灌装工序管理要点关键操作区和生产设备关键操作区和生产设备l清洁、消毒或
22、灭菌清洁、消毒或灭菌无菌灌装用各类物料、器具的准备或灭菌处理无菌灌装用各类物料、器具的准备或灭菌处理生产用气体生产用气体人员的无菌操作人员的无菌操作装量控制装量控制培养基模拟灌装验证培养基模拟灌装验证无菌检验样品的取样无菌检验样品的取样检查时应不能影响正常的生产检查时应不能影响正常的生产灭菌工艺的选择灭菌工艺的选择湿热灭菌法湿热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法除菌过滤法除菌过滤法环氧乙烷灭菌法环氧乙烷灭菌法辐射灭菌法辐射灭菌法无菌药品常用灭菌工艺的比较无菌药品常用灭菌工艺的比较类别类别Fo值值微生物存活概率微生物存活概率要点要点说说明明过过度度杀灭杀灭法法Fo1210-6热稳定性产品热稳定性产品以杀
23、灭微生物作为实现无菌的手段以杀灭微生物作为实现无菌的手段残存残存概率法概率法8Fo710-3不能加热的产品不能加热的产品不能除去病毒、支原体等微生物不能除去病毒、支原体等微生物LRV=log reduction value 过滤对数下降值一般上游为过滤对数下降值一般上游为107下下游为游为1，则，则LRV=7由于操作较多，最终产品达到的无菌保证水平远低于除菌由于操作较多，最终产品达到的无菌保证水平远低于除菌过滤的水平过滤的水平影响湿热灭菌效果的因素影响湿热灭菌效果的因素待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的装载方
24、式和装载数量待灭菌产品的装载方式和装载数量湿热灭菌工艺条件湿热灭菌工艺条件湿热灭菌设备湿热灭菌设备无菌保证水平无菌保证水平SAL无菌保证水平无菌保证水平（Sterility Assurance LevelSterility Assurance Level）l表示物品被灭菌后的无菌状态表示物品被灭菌后的无菌状态l按国际标准，湿热灭菌法的无菌保证值不得低于按国际标准，湿热灭菌法的无菌保证值不得低于10-6，即，即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一。灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一。灭菌工艺验证的必要性灭菌工艺验证的必要性灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检灭菌产品的无菌保证不
25、能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的严格的GMPGMP管理和良好的无菌保证体系管理和良好的无菌保证体系灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺经过验证后，方可正式用于生产灭菌工艺经过验证后，方可正式用于生产灭菌工艺验证常见问题灭菌工艺验证常见问题无包装规格无包装规格无装载方式无装载方式未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证无温度探头校准记录无温度探头校准记录验证的灭菌工艺与实际工艺不一致验证的灭菌工艺与实际工艺不
26、一致未验证最差灭菌条件未验证最差灭菌条件设定的验证合格标准达不到无菌保证水平（设定的验证合格标准达不到无菌保证水平（SAL）10-6生物指示剂使用不规范生物指示剂使用不规范灭菌工艺管理要点灭菌工艺管理要点生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数量研究和监控生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数量研究和监控待灭菌产品的包装形式、装载方式和装载数量待灭菌产品的包装形式、装载方式和装载数量灭菌工艺条件灭菌工艺条件灭菌设备灭菌设备l关键控制参数的控制和记录仪表的校准关键控制参数的控制和记录仪表的校准l设备维护和维修设备维护和维修灭菌的记录灭菌的记录灭菌工艺的验证灭菌工艺的验证l选用的生物指示剂选
27、用的生物指示剂l热分布试验，找出最冷点位置热分布试验，找出最冷点位置无菌检验样品的取样无菌检验样品的取样设备清洗、验证管理要点设备清洗、验证管理要点清洗验证清洗验证（清洗的程度根据是否有同品种连续的批次进（清洗的程度根据是否有同品种连续的批次进 行行生产或是生产不同的产品生产或是生产不同的产品,确定最难清洗物、取样点、取样方确定最难清洗物、取样点、取样方式、接受残留标准、检测方法式、接受残留标准、检测方法)清洗清洗SOP要详细描述（离线或在线、压力控制、时间）要详细描述（离线或在线、压力控制、时间）如果可能，单独使用热水进行清洗（例口服制剂）如果可能，单独使用热水进行清洗（例口服制剂）最终尽可
28、能使用纯化水或注射用水进行漂洗最终尽可能使用纯化水或注射用水进行漂洗 清洗效果的评估（产品残留、清洁或消毒剂残留、微清洗效果的评估（产品残留、清洁或消毒剂残留、微生物和内毒素残留）生物和内毒素残留）无菌检查无菌检查无菌检查常见问题无菌检查常见问题未对无菌检验方法进行验证未对无菌检验方法进行验证未测试培养基的灵敏度未测试培养基的灵敏度未对每柜灭菌产品进行取样并进行无菌检验未对每柜灭菌产品进行取样并进行无菌检验未考虑产品本身的抑菌作用未考虑产品本身的抑菌作用无菌种分离鉴别的条件无菌种分离鉴别的条件出现阳性结果时的调查不完整出现阳性结果时的调查不完整无菌检查的局限性无菌检查的局限性无菌的定义无菌的定
29、义l理论上：无菌没有任何活的微生物理论上：无菌没有任何活的微生物l实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在无法对整批产品进行无法对整批产品进行100%100%检验检验l无菌检验的结果只是一个基于无菌检验的结果只是一个基于“可能性可能性”的判断的判断无菌检验用培养基有其局限性无菌检验用培养基有其局限性l只进行细菌和真菌的检验只进行细菌和真菌的检验l对实验结果的判定是基于对实验结果的判定是基于“是否在培养基中生长是否在培养基中生长”l培养条件（如温度和时间）是有限的培养条件（如温度和时间）是有限的我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态我们的工作环境及操作
30、是在相对无菌的状态美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果试验目的：不合格的可能性试验目的：不合格的可能性(%)试验批量：试验批量：60,000支支试验方法：按美国药典无菌测试方法试验方法：按美国药典无菌测试方法真实的不合格率真实的不合格率测试测试20支样品支样品不合格的可能性不合格的可能性测试测试40支样品支样品不合格的可能性不合格的可能性118.2%33.1%564.2%87.2%1596.1%99.8%3099.9%100.0%上述无菌测试结果的启示上述无菌测试结果的启示含有少量微生物污染产品的批次含有少量微生物污染产品的批次也有可能也有可能“通过通过”无
31、菌检验无菌检验一批产品的染菌率越低，根据无一批产品的染菌率越低，根据无菌检验的结果来判定整批产品菌检验的结果来判定整批产品的无菌，其风险就越大的无菌，其风险就越大如何用无菌检验来证明整批产品无菌如何用无菌检验来证明整批产品无菌？要求有一个取样计划来涵盖整个批号要求有一个取样计划来涵盖整个批号有足够的取样量和检验量有足够的取样量和检验量选择适用的培养基选择适用的培养基采用经验证的无菌检验方法采用经验证的无菌检验方法良好的环境监控良好的环境监控无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划何时取何时取?如何取如何取?何处取？何处取？l无菌灌装产品无菌灌装产品批开始、结束及重大故障和调整后批开始、结束及重大故
32、障和调整后最多最多2424小时为一批小时为一批 USP USP 每天灌装的产品应分别做无菌检验每天灌装的产品应分别做无菌检验l最终灭菌产品最终灭菌产品从灭菌柜中最冷点取样从灭菌柜中最冷点取样对经不同灭菌柜灭菌的产品应分别进行无菌检验对经不同灭菌柜灭菌的产品应分别进行无菌检验无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划取多少样品（检验数量）？取多少样品（检验数量）？l取决于产品的批量取决于产品的批量 CP2015CP2015年版大于500500：取2%2%或2020支支（取少），用于每个培养基检验小于等于100100：取10%10%或4 4个（取多），用于每个培养基检验l取决于产品的数量取决于产品的数量
33、CP2015CP2015年版剂量小于1毫升，就要取4040支l同时要考虑检验耗损和复试的需要同时要考虑检验耗损和复试的需要无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划每个样品测试多少数量（检验量）？每个样品测试多少数量（检验量）？l药典上规定了每次检验的供试品总量药典上规定了每次检验的供试品总量装量小于装量小于 1ml1mlCP2015CP2015年版年版 每支样接入每个培养基为全量每支样接入每个培养基为全量装量大于等于装量大于等于 1ml1mlPh.Eur Ph.Eur 半量，但不超过半量，但不超过 20ml 20ml CP2015CP2015年版年版 半量，半量，2-500ml2-500ml无菌检
34、验用培养基无菌检验用培养基培养基的种类培养基的种类l用于真菌培养的用于真菌培养的TSBTSB培养基，培养温度培养基，培养温度20-2520-25l用于厌氧和需氧细菌培养的硫乙醇酸盐流体培养基，培养温度用于厌氧和需氧细菌培养的硫乙醇酸盐流体培养基，培养温度30-3530-35培养基的适用性检查培养基的适用性检查l要有足够的灵敏度要有足够的灵敏度l能够支持代表性菌种的生长能够支持代表性菌种的生长培养基的储存和控制培养基的储存和控制l储存条件和有效期储存条件和有效期无菌检验方法无菌检验方法主要有两种方法主要有两种方法l直接接种法直接接种法l薄膜过滤法薄膜过滤法注意事项注意事项l采用直接接种法时应考采
35、用直接接种法时应考虑产品是否有抑菌性虑产品是否有抑菌性无菌检验的环境控制无菌检验的环境控制应在无菌环境下进行应在无菌环境下进行洁净度（尘粒和微生物）应与无菌生产厂房一致洁净度（尘粒和微生物）应与无菌生产厂房一致控制要求与生产区域一致，如：空调、更衣、清洁、缓冲、控制要求与生产区域一致，如：空调、更衣、清洁、缓冲、定期验证定期验证应有环境监控程序并根据实际情况设定纠偏限度应有环境监控程序并根据实际情况设定纠偏限度无菌检查隔离器无菌检查隔离器样品表面的消毒处理样品表面的消毒处理在样品进入无菌区前应进行消毒处理在样品进入无菌区前应进行消毒处理在进行样品外表面消毒时，应确保样品的完整性在进行样品外表面
36、消毒时，应确保样品的完整性 考虑所用消毒液渗透过样品容器的可能性，如：透过塑料容器考虑所用消毒液渗透过样品容器的可能性，如：透过塑料容器消毒液应无菌消毒液应无菌阳性检验结果的调查和处理阳性检验结果的调查和处理无菌检验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查无菌检验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法要求法要求回顾无菌检验过程，发现有可能引起微生物污染的因素回顾无菌检验过程，发现有可能引起微生物污染的因素阴性对照有菌生长阴性对照有菌生长供试品中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所用的供试品中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所用的物品和（或）无菌操作技术不当引起物品
37、和（或）无菌操作技术不当引起要有调查程序和记录要有调查程序和记录无菌检查管理要点无菌检查管理要点取样计划取样计划取样量和检验量取样量和检验量培养基和菌种管理培养基和菌种管理无菌检验方法无菌检验方法环境监控环境监控样品表面消毒处理样品表面消毒处理阳性检验结果的调查和处理阳性检验结果的调查和处理物料质量控制物料质量控制“齐二药齐二药”事件事件事件回顾事件回顾l20062006年年4 4月月l齐齐哈尔第二制药有限公司齐齐哈尔第二制药有限公司l亮菌甲素注射液亮菌甲素注射液l将工业用二甘醇（乙二醇）作为将工业用二甘醇（乙二醇）作为药用丙二醇投入注射剂的生产药用丙二醇投入注射剂的生产l造成造成1111人严
38、重肾衰竭，人严重肾衰竭，4 4人死亡人死亡“齐二药齐二药”事件事件事件发生的原因事件发生的原因l企业改制，有实际工作经验的员工严重流失企业改制，有实际工作经验的员工严重流失l检验人员未经培训，鉴别试验出错检验人员未经培训，鉴别试验出错l物料供应商审计流于形式、疏于管理物料供应商审计流于形式、疏于管理假丙二醇是由江苏省中国地质矿业公司泰兴化工总厂生产假丙二醇是由江苏省中国地质矿业公司泰兴化工总厂生产 事件的教训事件的教训l不合格的物料会威胁到用户或病人的安全（严重伤害、严重疾不合格的物料会威胁到用户或病人的安全（严重伤害、严重疾病或死亡）病或死亡）物料质量控制常见问题物料质量控制常见问题未根据产
39、品特性、用途、工艺设定质量标准未根据产品特性、用途、工艺设定质量标准物料质量标准缺少鉴别和安全性指标物料质量标准缺少鉴别和安全性指标l砷盐、重金属、细菌内毒素砷盐、重金属、细菌内毒素重成品检验，轻物料检验重成品检验，轻物料检验l未经取样的物料贴有取样证未经取样的物料贴有取样证l取样方法不规范取样方法不规范l含量等检验未做平行试验含量等检验未做平行试验供应商审计流于形式，随意变更供应商供应商审计流于形式，随意变更供应商无经质量部门批准的合格供应商清单无经质量部门批准的合格供应商清单物料质量控制物料质量控制应根据产品的特性、用途和工艺设定物料的质量标准应根据产品的特性、用途和工艺设定物料的质量标准
40、l用于无菌药品的物料应特别考虑安全性的指标用于无菌药品的物料应特别考虑安全性的指标任何物料的质量标准中一定要有鉴别任何物料的质量标准中一定要有鉴别lWHO的的GMP中要求对每一包装的物料进行鉴别试验中要求对每一包装的物料进行鉴别试验物料的质量标准和（或）来源应符合注册批准的要求物料的质量标准和（或）来源应符合注册批准的要求物料的取样应有代表性物料的取样应有代表性物料的检验应严谨、规范物料的检验应严谨、规范物料供应商管理物料供应商管理对供应商进行识别、评估、验证、确认和管理是供应链管理对供应商进行识别、评估、验证、确认和管理是供应链管理中最关键的任务中最关键的任务是最基本的质量工作之一是最基本的
41、质量工作之一应重点管理物料的生产商应重点管理物料的生产商物料供应商管理物料供应商管理批准供应商清单批准供应商清单业绩评估业绩评估供应商批准流程供应商批准流程供应商选择供应商选择供应商嘉奖供应商嘉奖供应商需求供应商需求供应商分类供应商分类成品成品服务服务物料物料确定风险等级确定风险等级确定批准条件确定批准条件发给供应商问询表和供应商质量要求发给供应商问询表和供应商质量要求现场审核（如有要求）现场审核（如有要求）评估是否批准评估是否批准否决否决批准批准加入批准供应商清单加入批准供应商清单文件存档文件存档确定批准分级确定批准分级供应商批准流程示例供应商批准流程示例供应商变更供应商变更物料供应商应保持
42、相对稳定物料供应商应保持相对稳定改变原料药的生产商应补充申报，经药监部门批准改变原料药的生产商应补充申报，经药监部门批准不同物料的生产商可能采用不同的生产工艺，导致物料不同物料的生产商可能采用不同的生产工艺，导致物料的质量标准不完全相同的质量标准不完全相同应评估对产品质量的影响应评估对产品质量的影响l至少检验三批样品至少检验三批样品l必要时，还应进行小试和产品稳定性考察必要时，还应进行小试和产品稳定性考察应按供应商批准的流程执行应按供应商批准的流程执行l及时变更合格供应商清单及时变更合格供应商清单车间物料管理车间物料管理进入洁净区物料的控制：消毒或灭菌进入洁净区物料的控制：消毒或灭菌洁净区物料
43、：数量的控制、物料的转移（密封、层洁净区物料：数量的控制、物料的转移（密封、层流）、物料的存放位置、效期规定等流）、物料的存放位置、效期规定等清洗灭菌（清洗灭菌效果、处理参数、灭菌装载清洗灭菌（清洗灭菌效果、处理参数、灭菌装载 方式等）方式等）剩余物料的处理（胶塞等）剩余物料的处理（胶塞等）进入洁净室人员管理进入洁净室人员管理人员的监控常见问题人员的监控常见问题l无菌工作服穿着不规范无菌工作服穿着不规范l未对无菌更衣进行监控未对无菌更衣进行监控l无菌操作不规范无菌操作不规范人是最大的污染源人是最大的污染源坐着不动能产生坐着不动能产生100,000100,000个颗粒个颗粒.人是最大的污染源人是
44、最大的污染源走能产生走能产生5,000,000个颗粒个颗粒人是最大的污染源人是最大的污染源跑能产生跑能产生15,000,00015,000,000个颗粒个颗粒人是最大的污染源人是最大的污染源人体内外表面人体内外表面广泛存在微生物广泛存在微生物人是最大的污染源人是最大的污染源人体携带的微生物人体携带的微生物根据卫生情况不同根据卫生情况不同因人而异因人而异人是最大的污染源人是最大的污染源难以觉察的难以觉察的口腔微滴口腔微滴洁净区员工应身体健康洁净区员工应身体健康有下列情况之一者应采取措施有下列情况之一者应采取措施l发烧发烧l鼻炎鼻炎l咳嗽咳嗽l传染病传染病l创伤创伤洁净区更衣洁净区更衣头发应完全包
45、在帽子内头发应完全包在帽子内洁净区更衣洁净区更衣工作服的纽扣应完全扣上工作服的纽扣应完全扣上洁净区更衣洁净区更衣鞋套不能有破损鞋套不能有破损洁净区更衣洁净区更衣不能配戴手表、首饰不能配戴手表、首饰无菌工作服的穿着无菌工作服的穿着穿着的顺序穿着的顺序l由上而下由上而下穿着要领穿着要领l尽可能不要直接接尽可能不要直接接触无菌服的外表面触无菌服的外表面无菌工作服的穿着无菌工作服的穿着面罩敞开面罩敞开无菌工作服的穿着无菌工作服的穿着手套尺寸不对戴法不正确手套尺寸不对戴法不正确无菌工作服的穿着无菌工作服的穿着手套破损手套破损无菌工作服的穿着无菌工作服的穿着鞋套穿戴不正确鞋套穿戴不正确无菌工作服的微生物控
46、制无菌工作服的微生物控制污染产品风险大处需取样污染产品风险大处需取样衣服袖管取样示意衣服袖管取样示意衣服胸部取样示意衣服胸部取样示意背部不需要取样背部不需要取样无菌工作服的微生物控制无菌工作服的微生物控制手指接触碟试验手指接触碟试验无菌操作无菌操作不要在更衣室交谈不要在更衣室交谈无菌操作无菌操作不操作时，应将前臂和双手放在前面，不操作时，应将前臂和双手放在前面，身体不能斜靠身体不能斜靠无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作定时或在任何关键操作前，应消毒手套定时或在任何关键操作前，应消毒手套无菌操作无菌操作填写批记录后，手套应消毒填写批记录后，手套应消毒无菌操作无菌操作关键操作过程中关键操作过程中不要
47、拣地上的东西不要拣地上的东西无菌操作无菌操作层流下的操作台应始终保持干净整洁层流下的操作台应始终保持干净整洁洁净室人员管理要点洁净室人员管理要点人员的培训人员的培训（微生物、无菌操作、特殊防护知识、卫生等）（微生物、无菌操作、特殊防护知识、卫生等）进入洁净区人员资质的确认进入洁净区人员资质的确认（关键人员必须参加模拟灌装）（关键人员必须参加模拟灌装）人员的卫生习惯人员的卫生习惯体检档案和汇总体检档案和汇总洁净区内人员的工作服洁净区内人员的工作服无菌操作无菌操作进入洁净区人员数量的控制进入洁净区人员数量的控制（经验证）（经验证）外来人员控制外来人员控制（官方或客户审计人员、严禁设备厂家检修人员和
48、参观人员进入）（官方或客户审计人员、严禁设备厂家检修人员和参观人员进入）人 员洁净区洁净区数量数量卫生卫生监测监测培训培训无菌操作无菌操作进入洁净区人员更衣确认进入洁净区人员更衣确认取样点如下：取样点如下：1.头部头部2.眼罩眼罩3.胸部胸部4.肘部肘部5.腰部腰部6.双手十指双手十指7.膝部膝部 1356247频率：频率：1.1.初次进入者必须经过初次进入者必须经过3 3次确认合格才可以进入无次确认合格才可以进入无菌区菌区2.2.试验不合格者，需重复试验不合格者，需重复培训后再试验培训后再试验3.3.每天对无菌服、手套进每天对无菌服、手套进行抽检行抽检无菌服管理要点无菌服管理要点清洗、灭菌清
49、洗、灭菌SOP规定规定 贮存贮存（效期、保存方式等）材质要求材质要求（防静电、不脱落纤维等）清洗灭菌次数清洗灭菌次数（经过专业部门的验证确认，建议不超过100次，最好不超过60次）清洗效果的确认清洗效果的确认（微粒、内毒素）清洗用水的要求清洗用水的要求（微粒控制检测）清洗剂的使用要求清洗剂的使用要求（固定清洗剂的类型）洁净服检查洁净服检查（异物、完好性等）消毒剂管理要点消毒剂管理要点 消毒剂灭菌、保存方式（除菌过滤系统、密闭、层流）消毒剂灭菌、保存方式（除菌过滤系统、密闭、层流）消毒剂消毒效果的验证消毒剂消毒效果的验证 消毒剂的相容性消毒剂的相容性 使用消毒剂（轮换、使用后残留处理）使用消毒剂
50、（轮换、使用后残留处理）消毒剂配制的消毒剂配制的SOPs 消毒剂使用频率消毒剂使用频率 消毒剂检测频率消毒剂检测频率 消毒程序的培训（包括人员手部消毒）消毒程序的培训（包括人员手部消毒）消毒剂供应商的评估消毒剂供应商的评估 消毒剂的种类消毒剂的种类把环境分离菌列入周期性的挑战性试验的范畴把环境分离菌列入周期性的挑战性试验的范畴消毒剂管理要点消毒剂管理要点醇类：醇类：75%乙醇，乙醇，70%异丙醇异丙醇 过氧化物类：过氧化物类：0.3%双氧水，双氧水，3%双氧水，过氧乙酸溶液，双氧水，过氧乙酸溶液，杀孢子剂杀孢子剂 季铵盐类：季铵盐类：0.2%新洁尔灭溶液，新洁尔灭溶液，3%-5%新洁尔新洁尔