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1、高效液相色谱简介第一页,本课件共有16页论文内容色谱分析方法发展概述分类基本原理流出曲线及有关术语高效液相色谱简介第二页,本课件共有16页v1903年 Tswett创立色谱法(在碳酸钙上分离了叶绿素)v20世纪四五十年代 出现了纸色谱(PC)和薄层色谱法(TLC)v1952年 James和Martin提出了气相色谱法(GC)v20世纪60年代后期 液相色谱法得到了快速发展 论文内容第三页,本课件共有16页第四页,本课件共有16页第五页,本课件共有16页v 分配系数 K和分配比k K=(溶质在固定相中的浓度)/(溶质在流动相中的浓度)=Cs/Cm K为每一溶质的特征值,仅为固定相和温度有关,与两
2、相体积论文内容、柱管特性及仪器无关。k=(组分在固定相中的质量)/(组分在流动相中的质量)=Ms/Mmv两峰间的距离由组分在两相间的分配系数决定;峰宽由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定。v两个理论(塔板理论和 速率理论)论文内容第六页,本课件共有16页色谱流出曲线示意图第七页,本课件共有16页有关术语 1)色谱流出曲线和色谱峰 2)基线 3)峰高 4)保留值(死时间、保留时间、调整保留时 间、死体积、保留体积、调整保留体积、相对保留值)5)区域宽度(标准偏差,半峰宽W1/2,峰底宽度W)第八页,本课件共有16页 样品所含组分的最少个数;定性分析(保留值);定量分析(峰高或面积);分离效能(保留
3、值及区域宽度);两相选择的依据(峰间距离)论文内容从色谱流出曲线中可以得出许多重要信息从色谱流出曲线中可以得出许多重要信息:第九页,本课件共有16页高效液相色谱(HPLC)流程示意图第十页,本课件共有16页HPLC组成图第十一页,本课件共有16页HPLC组成示例第十二页,本课件共有16页 高效液相色谱法的特点高压:一般可以达到150300kg/cm2高速:一般可以达到110mL/min高效:一般可以达到60000理论塔板/米高灵敏度:微升数量级的就可以进行全分析第十三页,本课件共有16页分类:液液分配色谱 液固分配色谱 离子交换色谱 排斥色谱 选择:样品的分子量范围 溶解度 分子结构第十四页,本课件共有16页高效液相色谱的应用 高效液相色谱,特别适用于分离沸点高和热稳定性差的物质,目前已广泛应用于化工、食品、医药、生化、卫生、环境保护和高能化合物等生产和科研工作中。第十五页,本课件共有16页THE END THANK YOU 第十六页,本课件共有16页