医学微生物学螺旋体.ppt

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1、第第2121章章 螺旋体螺旋体 (spirochetespirochete)l一类细长、柔软、弯曲呈一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状螺旋状、运动活泼运动活泼的原核细胞型微生物的原核细胞型微生物l l介于细菌与原虫之间介于细菌与原虫之间，其基本特征同细菌，其基本特征同细菌p198 名称名称名称名称 螺旋数螺旋数螺旋数螺旋数 螺旋特点螺旋特点螺旋特点螺旋特点 举例举例举例举例致病螺旋体的螺旋特点致病螺旋体的螺旋特点 密密密密螺螺螺螺旋旋旋旋体体体体 8 8 1414 细细细细密密密密，规规规规则；则；则；则；两端尖直两端尖直两端尖直两端尖直疏螺旋体疏螺旋体疏螺旋体疏螺旋体 3 3 10 10 不规则不

2、规则不规则不规则苍苍苍苍白白白白密密密密螺螺螺螺旋旋旋旋体体体体苍苍苍苍白亚种白亚种白亚种白亚种钩端螺旋体钩端螺旋体钩端螺旋体钩端螺旋体 数十个数十个数十个数十个 规则，更细密；规则，更细密；规则，更细密；规则，更细密；一端一端一端一端/两端呈钩状两端呈钩状两端呈钩状两端呈钩状问问问问号号号号状状状状钩钩钩钩端端端端螺螺螺螺旋旋旋旋体体体体回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体第一节第一节 钩端螺旋体属钩端螺旋体属 LeptospiraLeptospira 问号状钩端螺旋体问号状钩端螺旋体(L.interrogansL.int

3、errogans)钩端螺旋体病钩端螺旋体病 双曲钩端螺旋体双曲钩端螺旋体(L.biflexaL.biflexa)螺旋体目钩端螺旋体科钩端螺旋体属螺旋体目钩端螺旋体科钩端螺旋体属u螺旋细密、规则，一端或两端呈钩状，故名，螺旋细密、规则，一端或两端呈钩状，故名，简称钩体。运动活泼，常呈简称钩体。运动活泼，常呈C C、S S或或8 8字型字型uu暗视野显微镜，暗视野显微镜，形似细小珍珠排列的细链形似细小珍珠排列的细链uG G-，不易着染，不易着染，FontanaFontana镀银染色法镀银染色法棕褐棕褐色色1.1.形态与染色形态与染色生物学性状生物学性状螺旋体基本结构螺旋体基本结构外膜、外膜、内鞭毛

4、内鞭毛、细胞壁、肽聚糖、细胞、细胞壁、肽聚糖、细胞膜（内膜）、原生质柱体（细胞质、原膜（内膜）、原生质柱体（细胞质、原始核质）始核质）u营营养养要要求求复复杂杂，常常用用含含1010兔兔血血清清的的柯柯索索夫夫（KorthofKorthof）培养基培养基u需需氧氧或或微微需需氧氧，适适宜宜生生长长温温度度为为28302830，pH7.27.6pH7.27.6，u生长缓慢（生长缓慢（8h8h一代）一代），1 12 2周后周后 液体培养基：半透明云雾状液体培养基：半透明云雾状 固体培养基：透明，不规则的扁平菌落固体培养基：透明，不规则的扁平菌落2.2.培养特性培养特性u属属特异性抗原特异性抗原:糖

5、蛋白或脂蛋白糖蛋白或脂蛋白u群群特异性抗原特异性抗原:菌体内部，类脂多糖复合物菌体内部，类脂多糖复合物u型型特异性抗原特异性抗原:表面抗原，多糖蛋白复合物表面抗原，多糖蛋白复合物 应用应用显微镜凝集试验（显微镜凝集试验（microscopic microscopic agglutination test agglutination test，MATMAT）和和凝集素吸凝集素吸收试验收试验(agglutination absorption test(agglutination absorption test，AAT)AAT)来分来分血清群和血清型血清群和血清型。我国至少发。我国至少发现有问号状螺

6、旋体参考株有现有问号状螺旋体参考株有1919血清群血清群7575血血清型清型3.3.抗原与分类抗原与分类4.4.抵抗力抵抗力弱弱u不耐热，不耐热，6016010 0分钟即死亡分钟即死亡u对常用消毒剂敏感对常用消毒剂敏感uu夏季在湿土或中性水中可存活数月夏季在湿土或中性水中可存活数月u对对青霉素青霉素敏感敏感致病性致病性致病物质致病物质-类似细菌内毒素与外毒素类似细菌内毒素与外毒素u内毒素样物质内毒素样物质(ELS)ELS)：毒性：毒性低低，引起发热，引起发热，炎症与组织坏死炎症与组织坏死 u黏附素：黏附素：u溶血毒素：鞘磷脂酶溶血毒素：鞘磷脂酶C C，引起红细胞破坏，引起红细胞破坏u胶原酶：胶

7、原酶：传播方式传播方式鼠、猪（储存宿主）鼠、猪（储存宿主）传染源传染源肾脏繁殖（隐性感染）肾脏繁殖（隐性感染）尿排菌尿排菌污染水源、土壤污染水源、土壤人的皮肤、黏膜、消化道、垂直接触而感染人的皮肤、黏膜、消化道、垂直接触而感染所致疾病所致疾病钩端螺旋体病（钩体病）钩端螺旋体病（钩体病）人畜共患传染病人畜共患传染病 致病性致病性l钩体穿透钩体穿透侵入皮肤粘膜侵入皮肤粘膜，在局部繁殖后，在局部繁殖后入血入血，引起引起钩体血症钩体血症，产生致病物质，产生致病物质，损伤全身毛损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、细血管内皮细胞及肝、肾肾、肺心及中枢神经，、肺心及中枢神经，引起引起钩端螺旋体病，钩端螺旋体病，出

8、现休克、出现休克、DICDIC、黄疸、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。出血、心肾功能不全、脑膜炎等。l临床上根据脏器损伤的不同可分为流感伤寒型、临床上根据脏器损伤的不同可分为流感伤寒型、肺出血型、黄疸出血型、肾衰竭型等肺出血型、黄疸出血型、肾衰竭型等临床特点临床特点 起起病病急急，高高热热、乏乏力力、全全身身酸酸痛痛、结结膜膜充充血血、腓腓肠肠肌肌压压痛痛、表表浅浅淋淋巴巴结结肿肿大大；三大症状：三大症状：发热、头痛、一身乏发热、头痛、一身乏 三大体征：三大体征：眼红、腿疼、淋巴大眼红、腿疼、淋巴大免疫性免疫性 体体液液免免疫疫为为主主，病病后后获获得得对对同同型型钩钩体体的的持持久久免免

9、疫疫力力。但但抗抗体体对对肾肾脏脏中中钩钩端端螺螺旋旋体吴无作用体吴无作用微生物学检查法微生物学检查法1.1.病原体检测病原体检测l标本标本:发病一周内取发病一周内取血液血液;第二周后取第二周后取尿液尿液;有脑膜刺激者取有脑膜刺激者取脑脊液脑脊液l直接镜检：直接镜检：暗视野或镀银染色暗视野或镀银染色l分离培养与鉴定分离培养与鉴定:KorthofKorthof培养基培养基培养，培养，MATMAT和和AAT AAT l动物接种：动物接种：幼龄豚鼠或金地鼠腹腔幼龄豚鼠或金地鼠腹腔l分子生物学方法：分子生物学方法：PCR PCR 2.2.血清学检测血清学检测l病初和发病后病初和发病后2323周各采血清

10、一次周各采血清一次 方法方法:显微镜凝集试验显微镜凝集试验(MAT)MAT)间接凝集试验间接凝集试验 防治原则防治原则u非特异性预防：非特异性预防：防防鼠鼠、灭灭鼠鼠，加加强强对对带带菌菌家家畜畜的的管管理理，保保护护水源水源u特异性预防：特异性预防：接接 种种 多多 价价 钩钩 端端 螺螺 旋旋 体体 死死 疫疫 苗苗（包包 含当地流行株）含当地流行株）u治疗治疗:首选首选青霉素青霉素，注意赫氏反应。注意赫氏反应。第二节第二节 密螺旋体属密螺旋体属 (TreponemaTreponema)苍白亚种：人类梅毒苍白亚种：人类梅毒(syphilis)(syphilis)地方亚种：地方性梅毒地方亚种

11、：地方性梅毒极细亚种：雅司病极细亚种：雅司病苍白密螺旋体苍白密螺旋体品他密螺旋体品他密螺旋体品他病品他病分为致病与非致病两大类，对人致病的有：分为致病与非致病两大类，对人致病的有：梅毒螺旋体梅毒螺旋体 （Treponema pallidumTreponema pallidum，TPTP)l螺旋体细长，形似细密的弹簧，螺旋弯曲而规螺旋体细长，形似细密的弹簧，螺旋弯曲而规则，则，814814个，两端尖直，运动活泼个，两端尖直，运动活泼lG G-，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体，因其透明，不易着色，故又称苍白螺旋体 Fontana Fontana镀银染色法镀银染色法染成棕褐色染成棕褐色 生物学

12、性状生物学性状 形态与染色形态与染色l l目前目前在在人工培养人工培养基上尚不能培养基上尚不能培养。l l接接种种兔兔睾睾丸丸或或眼眼前前房房，兔兔睾睾丸丸活活体体，家家兔兔上上皮细胞培养皮细胞培养，但生长缓慢，约但生长缓慢，约3030h h分裂一次。分裂一次。两种菌株：用作梅毒血清学的诊断两种菌株：用作梅毒血清学的诊断抗原抗原 NicholsNichols株株(Nichols strain):(Nichols strain):有毒力，有毒力，在家兔睾丸或眼前房内接种可获得在家兔睾丸或眼前房内接种可获得 ReiterReiter株株(Reiter strain):(Reiter strain)

13、:失去致病力，失去致病力，转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片，转种于含有多种氨基酸的兔睾丸碎片，培养特性培养特性抵抗力抵抗力极弱极弱u对温度和干燥特别敏感对温度和干燥特别敏感u在血液中在血液中4 4C C经经3d3d死亡死亡u对常用化学消毒剂亦敏感，对常用化学消毒剂亦敏感，1%2%1%2%石炭酸石炭酸内数分钟就死亡内数分钟就死亡u对对青霉素青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感、四环素、红霉素或砷剂均敏感致病性致病性致病因素致病因素 目前尚不清楚，有较强的目前尚不清楚，有较强的侵袭力侵袭力：荚膜样物：荚膜样物质，黏附因子，透明质酸酶质，黏附因子，透明质酸酶 所致疾病所致疾病梅毒梅毒 梅毒只感染人类梅

14、毒只感染人类 先天梅毒先天梅毒 母体母体胎盘胎盘胎儿胎儿 后天梅毒后天梅毒 95%95%是是性接触传播，性接触传播，少数通过输血少数通过输血 等间接途径感染。等间接途径感染。先天梅毒（胎传梅毒）先天梅毒（胎传梅毒）u梅毒孕妇通过胎盘传给胎儿，梅毒孕妇通过胎盘传给胎儿，引起胎儿的全身性感染，导致流引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎产、早产或死胎u出生后为梅毒儿出生后为梅毒儿，呈现马鞍鼻、，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征性耳聋等特殊体征 后天梅毒（获得性梅毒）后天梅毒（获得性梅毒）分三期分三期 I I期梅毒：期梅毒：多见外生殖器，出现无

15、痛性、多见外生殖器，出现无痛性、直径约直径约1cm1cm的的硬性下疳硬性下疳，含有含有大量梅毒螺旋体。大量梅毒螺旋体。4 48 8周后，下疳自然愈合。周后，下疳自然愈合。经经2 23 3个月无症状潜伏期后个月无症状潜伏期后进入第进入第 IIII 期期特点：传染性极强，破坏性小特点：传染性极强，破坏性小IIII期梅毒期梅毒全身皮肤黏膜出现全身皮肤黏膜出现梅毒疹梅毒疹，周身周身淋巴结肿大淋巴结肿大。梅毒疹、梅毒疹、淋巴结肿大内有大量梅毒淋巴结肿大内有大量梅毒螺旋体。螺旋体。不经治疗一般在不经治疗一般在1 13 3个月后症状自然消退个月后症状自然消退而痊愈，但常复发。经而痊愈，但常复发。经2 24

16、4年，又可被激活进入第年，又可被激活进入第期。期。特点：感染性强，破坏性小。特点：感染性强，破坏性小。期（晚期）梅毒期（晚期）梅毒感染梅毒感染梅毒2 2年（亦可达年（亦可达10101515年）后，可侵犯年）后，可侵犯全身组织和器官，全身组织和器官，出现出现慢性肉芽肿慢性肉芽肿病变。病变。以以心血管梅毒和神经心血管梅毒和神经梅毒常见梅毒常见，出现梅毒瘤、，出现梅毒瘤、动脉瘤、脊髓痨。动脉瘤、脊髓痨。特点：感染性小，破坏性大特点：感染性小，破坏性大免疫性免疫性u属有菌免疫，传染性免疫；属有菌免疫，传染性免疫；u细胞免疫为主，体液免疫为辅；细胞免疫为主，体液免疫为辅；u梅毒患者的血清中出现两种抗体：

17、梅毒患者的血清中出现两种抗体：1.1.抗螺旋体抗体抗螺旋体抗体：2.2.心脂质抗体：心脂质抗体：又称又称反应素（反应素（reaginreagin）能与生物组织中的类脂抗原（如牛心肌）能与生物组织中的类脂抗原（如牛心肌）发生非特异性结合反应，可利用其进行血发生非特异性结合反应，可利用其进行血清学诊断清学诊断。微生物学检查法微生物学检查法1.1.标本标本l期梅毒期梅毒-硬下疳渗出液硬下疳渗出液l期梅毒期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液l 血清血清2.2.显微镜检查：显微镜检查：暗视野、镀银染色、荧光染色暗视野、镀银染色、荧光染色3.3.血清学诊断血清学诊断 非密螺

18、旋体抗原试验：非密螺旋体抗原试验：测非特异性抗体测非特异性抗体用正常牛心肌的用正常牛心肌的心脂质心脂质(抗原抗原)检测患者血清中的反应素检测患者血清中的反应素方法方法:RPRRPR试验试验（r rapid apid p plasma lasma r reagineagin,快速血浆反应素）快速血浆反应素）TRUSTTRUST试验试验(t tolulized olulized r red ed u unheated nheated s serum erum t testest甲苯胺红未加热血清学试验甲苯胺红未加热血清学试验)VDRLVDRL试验试验（v venereal enereal d di

19、sease isease r research esearch laboratorylaboratory，性病研究实验室）性病研究实验室）意义：适用于意义：适用于梅毒的梅毒的初筛试验初筛试验注意排除假阳性：回归热、结核、红斑狼疮等注意排除假阳性：回归热、结核、红斑狼疮等3.3.血清学诊断血清学诊断密螺旋体抗原试验密螺旋体抗原试验 Nichols Nichols株螺旋体（抗原）株螺旋体（抗原）螺旋体特异抗体螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作优点：特异性强，可用作梅毒确诊试验梅毒确诊试验 常用方法：常用方法：梅毒螺旋体明胶凝集试验（梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPATPPA）荧光密螺旋体抗体吸收

20、试验（荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABSFTA-ABS）、）、梅毒螺旋体血凝试验（梅毒螺旋体血凝试验（TPHATPHA）、）、梅毒螺旋体微量血凝试验（梅毒螺旋体微量血凝试验（MHA-TPMHA-TP）ELISAELISA 免疫印迹法免疫印迹法防治原则防治原则l加强性卫生教育和严格社会管理加强性卫生教育和严格社会管理l尚无疫苗预防尚无疫苗预防l治疗用治疗用青霉素青霉素等药物，以血清中抗体转阴等药物，以血清中抗体转阴为治愈指标为治愈指标第三节第三节 疏螺旋体属疏螺旋体属（BorreliaBorrelia）伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体(B.burgdorferiB.burgdorferi)回归热疏

21、螺旋体（回归热疏螺旋体（B.recurrentisB.recurrentis)对人致病的有：对人致病的有：伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体 (B.burgdorferiB.burgdorferi)莱姆病莱姆病（LymeLyme）的病原体的病原体 （一）形态染色（一）形态染色 螺螺旋旋稀稀疏疏两两端端稍稍尖尖，3838个个螺螺旋旋，运运动动活活泼，运动活跃。泼，运动活跃。GiemsaGiemsa或或WrightWright染色均佳染色均佳一、生物学性状一、生物学性状WrightWright染色染色染色染色（二）培养特性（二）培养特性营营养养要要求求高高微微需需氧氧，5 51010COCO2 2促促进进生

22、生长长，可用可用BSKBSK培养基培养培养基培养。生长缓慢，生长缓慢，121218h18h繁殖一代。繁殖一代。培养培养2 23 3周，长出细小而边缘整齐的小菌落。周，长出细小而边缘整齐的小菌落。（三）抗原：（三）抗原：外外膜膜表表面面蛋蛋白白（outer outer surface surface proteinprotein，OspOsp），具有高度免疫原性，种特异性），具有高度免疫原性，种特异性所致疾病：莱姆病所致疾病：莱姆病 u自然疫源性传染病自然疫源性传染病u储存宿主：野生和驯养的哺乳动物储存宿主：野生和驯养的哺乳动物u传播媒介：硬蜱，传播媒介：硬蜱，我国北方林区主要是全沟硬蜱我国北方

23、林区主要是全沟硬蜱我国北方林区主要是全沟硬蜱我国北方林区主要是全沟硬蜱u叮咬部位可出现一个或数个叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑慢性移行性红斑(ECM)ECM)，伴有，伴有乏力、头痛、发热、颈硬及关节乏力、头痛、发热、颈硬及关节炎等。炎等。晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常系统或皮肤异常 硬蜱硬蜱硬蜱硬蜱慢性移行性红斑慢性移行性红斑(ECM)ECM)以血清学试验和分子生物学方法来检测以血清学试验和分子生物学方法来检测1 1）血清学试验：取血清，）血清学试验：取血清，ELISAELISA和和IFAIFA2 2）分子生物学：取皮损、血液等，）分

24、子生物学：取皮损、血液等，PCRPCR三、微生物学检查法三、微生物学检查法预防：预防：1 1 1 1）疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。）疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。）疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。）疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。2 2 2 2）灭灭灭灭活活活活疫疫疫疫苗苗苗苗于于于于1992199219921992年年年年获获获获准准准准在在在在美美美美国国国国家家家家犬犬犬犬中中中中使使使使用用用用。人人人人用重组蛋白疫苗（用重组蛋白疫苗（用重组蛋白疫苗（用重组蛋白疫苗（OspAOspAOspAOspA、OspCOspCOspCOspC）正在临床试验中）正在临

25、床试验中）正在临床试验中）正在临床试验中治疗：治疗：1 1 1 1）早早早早期期期期莱莱莱莱姆姆姆姆病病病病可可可可口口口口服服服服四四四四环环环环素素素素、强强强强力力力力霉霉霉霉素素素素、羟羟羟羟氨氨氨氨苄苄苄苄青霉素及红霉素等。青霉素及红霉素等。青霉素及红霉素等。青霉素及红霉素等。2 2 2 2）晚晚晚晚期期期期莱莱莱莱姆姆姆姆病病病病由由由由于于于于多多多多种种种种深深深深部部部部组组组组织织织织损损损损害害害害，故故故故一一一一般般般般用用用用青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。四、防治原则四、防治原

26、则uu引起人类引起人类回归热回归热的病原体。的病原体。uu根据回归热传播媒介不同，分为两类：根据回归热传播媒介不同，分为两类：1 1）虱虱传传回回归归热热，或或称称流流行行性性回回归归热热，其其病原体为回归热疏螺旋体；病原体为回归热疏螺旋体；2 2）蜱蜱传传回回归归热热，又又称称地地方方性性回回归归热热，其其病原体病原体多至多至1515种，如种，如赫姆赫姆疏螺旋体。疏螺旋体。uu我国流行的回归热主要是虱传型。我国流行的回归热主要是虱传型。二、回归热疏螺旋体二、回归热疏螺旋体 致病性致病性致病过程：致病过程：经经310310天天潜潜伏伏期期，病病人人突突发发高高热热，持持续续3 3天天退退热热；

27、由由于于螺螺旋旋体体外外膜膜蛋蛋白白易易变变异异，约约一一周周后后有有出出现现高高热热，如如此此反反复复发发作作3 31010次次左右。左右。微生物检查微生物检查1 1）取取发发热热期期外外周周血血1滴滴，加加盖盖玻玻片片用用暗暗视视野野显显微微镜镜观观察察，可可见见运运动动活泼螺旋体。活泼螺旋体。2 2）取取发发热热期期外外周周血血1滴滴，直直 接接 涂涂 片片 后后 进进 行行GiemsaGiemsa或或WrightWright染染色色，光光镜镜下下见见为为红红细细胞胞直直径径的的24倍倍，螺螺旋旋稀稀疏疏不不规规则则，呈呈波波状状的的螺旋体螺旋体WrightWright染色染色染色染色致

28、病螺旋体的分类致病螺旋体的分类属和代表菌属和代表菌 引起人类疾病引起人类疾病 传播方式或媒介传播方式或媒介密螺旋体属（密螺旋体属（TreponemaTreponema）苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒梅毒 性传播性传播 苍白密螺旋体地方亚种苍白密螺旋体地方亚种 地方性梅毒地方性梅毒 黏膜损伤黏膜损伤 苍白密螺旋体极细亚种苍白密螺旋体极细亚种 雅司病雅司病 皮肤损伤皮肤损伤 品他密螺旋体品他密螺旋体 品他病品他病 皮肤损伤皮肤损伤疏螺旋体属（疏螺旋体属（BorreliaBorrelia）伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体 莱姆病莱姆病 硬蜱硬蜱 回归热疏螺旋体回归热疏螺旋体 流行性回归热流行

29、性回归热 体虱体虱 杜通疏螺旋体杜通疏螺旋体 地方性回归热地方性回归热 软蜱软蜱 奋森疏螺旋体奋森疏螺旋体 咽峡炎、牙龈炎咽峡炎、牙龈炎 条件致病条件致病钩端螺旋体属（钩端螺旋体属（LeptospiraLeptospira）问号状钩端螺旋体问号状钩端螺旋体 钩端螺旋体病钩端螺旋体病 接触疫水接触疫水 分分3 3个科个科1313个属个属思考题思考题1.1.能引起人致病的螺旋体有哪些属及代表能引起人致病的螺旋体有哪些属及代表种？种？2.2.简述钩端螺旋体的生物学性状（形态染简述钩端螺旋体的生物学性状（形态染色、培养、抗原分类）及致病性。色、培养、抗原分类）及致病性。3.3.简述梅毒螺旋体的致病性、

30、免疫性及微简述梅毒螺旋体的致病性、免疫性及微生物检查法生物检查法 。4.4.名词解释：螺旋体（名词解释：螺旋体（spirochetespirochete）病例分析病例分析 男性患者，男性患者，2626岁，畏寒，发热，有明显头痛、岁，畏寒，发热，有明显头痛、肌肉痛。尤以腓肠肌压痛明显，肢体无力。肌肉痛。尤以腓肠肌压痛明显，肢体无力。结膜充血，浅表淋巴结肿大伴疼痛。有疫水结膜充血，浅表淋巴结肿大伴疼痛。有疫水接触史。接触史。从以上情况分析，怀疑是何种病原体感染？从以上情况分析，怀疑是何种病原体感染？实验室检查如何确诊？实验室检查如何确诊？病例分析病例分析 某患者有过不洁性交史，某患者有过不洁性交史，1 1个月后因外生殖器个月后因外生殖器出现丘疹状硬结就诊，检查发现其硬结呈圆出现丘疹状硬结就诊，检查发现其硬结呈圆形，基底清晰，边缘隆起，质硬，有无痛性形，基底清晰，边缘隆起，质硬，有无痛性溃疡。溃疡。初步怀疑是什么感染？属于哪一期？初步怀疑是什么感染？属于哪一期？做直接显微镜检查最适宜的标本是什么？做直接显微镜检查最适宜的标本是什么？属于梅毒确证试验的梅毒血清学方法有哪些？属于梅毒确证试验的梅毒血清学方法有哪些？