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1、真菌药用 真菌药用_固体发酵_上游工程建设基本研究方法 中国食用菌，（）：， 真菌药用“固体发酵上游工程建设基本研究方法 庄 毅， （南京中医药大学，南京；江西中医学院菌物药研究中心，江苏南昌） 摘要：真茵药用“固体发酵”是中药传统范畴内仅有的，也是历史上诞生最早的一类生物制药技术，并已发展走向“固体发酵系列工程”。固体发酵的上游工程建设，特别是发酵组合的优选、发酵工艺的制定等，对决定所产“茵质”的性效有重要影响。据研发槐耳、槐芪、灵雷种“茵质”的经验、体会。提出几项基本研究方法，供业内各方参用、改进，以使达规范化。 关键词：固体发酵；真茵药物；回选试验；比较茵质；目标茵质 中图分类号：￥文献
2、标识码：文章编号：鼬（伽眵）由 现代生物制药内涵丰富，如细胞工程、基因工程、发酵工程等都有重要作用。但生物制药技术在有几千年历史的中医药传统范畴内。曾被应用、发展的唯有真菌药用的“固体发酵工程”一项（液体发酵属近代引进工艺）。它在中国古代可统称为“制曲工艺”。是用各种植物性材料在适宜条件下经自然或引导真菌等生长、发酵后产品供药用，唐药性论记“神曲”，由北魏时期已开始制作，用麦麸、赤小豆、杏仁（去皮）、面粉等碎粉与鲜辣蓼、青蒿、苍耳等浆汁碎屑混合后经酵母菌等多菌种自然发酵而成，味甘辛、性温、归脾胃经，功能清食消积健脾胃沿用至今已余年历史应是历史上最早的生物制药，其后较长时期内又曾制作了“红曲”
3、（元）、酱 制成真菌药物，将成为“菌物药”的重要支柱。 任何“固体发酵”上游工程，都由发酵菌种与发酵基质共同构成“发酵组合”，在一定环境条件下进行发酵的工程，除尚在探索的特困发酵外，其它固体发酵的发酵条件通常是适宜的温度、光照等，大多属于真菌生态的常规需要，其中有生命活动的发酵菌种常占主导。不同性质与配比的发酵基质是影响菌质性效的重要基础，因此，优选合理、有效的发酵组合是研发目标菌质的工作前提。 当发酵组合与发酵条件被确定后还要研究能阐明发酵周期（时间）与正确判断其发酵终点的方法，这都需要进行多项预备性试验研究。与引进工艺“液体发酵”相比较，“固体发酵”除采用固态基质外，目前仍应用分散的发酵瓶
4、内发酵的生产方式，它有发酵速度较慢、周期较长等特点，研究工作有一定困难。为此探索试验了有关建设其上游工程的几种常用研究方法。被试用于研发槐芪菌质昂嘲与是雷菌质日等，取得较佳效果，应继续完善，以使规范化。 （梁）、酒酿（清）等品种，其发酵菌种与材料渐趋于单一。延伸至近代，由上世纪五十年代末进入“固体培养”时期。将一种特定真菌接种在发酵瓶内即已经过灭菌处理的由农副产品组成的培养基（料）上，经培养生长大量菌丝体称为“培养物”一般被认为它与同种子实体有相同的药效作用。其生产工艺已有明显改进并已有初步的下游工程，产品如猴头菌片等。 发展到上世纪九十年代初，进入“固体发酵时期。初期是真菌在由农副产品组成的
5、“营养基质”上进行“普通发酵”产生“药用菌质”它较适用于研发新品种的真菌药物。曾研发了槐耳菌质与槐耳颗粒（抗癌）闭。此后又为研制真菌类药材新资源开创了“双向发酵”在发酵基质中应用或掺用具有活性成分的中药材为“药性基质”。发酵后产生“药性菌质”，如槐芪菌质（抗病毒）、灵雷菌质（免疫抑制等）等。世纪又开始探索“多菌发酵”、“特因发酵”等，应用不同生产工艺产生各类“菌质”研 发酵组合三层优选法（优选法） 研制槐苠菌质：以槐耳为发酵菌种，作为药性基质的初选药材多达种，而“灵雷菌质”的发酵基质已定为雷公藤其供初选的发酵菌种也有种，应用“发酵组合层优选法”能较迅速、正确的选定有效发酵组合。第一层初选 以组
6、合的发酵性状为指标由供选菌种或基质。与已确定的另一方所构成的不同组合。在适宜条件下进行试验，如能正常发酵，并在适当时间内产生合格“菌质”，即双方能相互适应，此发酵组合即通过初选，否则即被淘 作者简介：庄毅，研究员，现任中国药学会天然药物分会药用真菌专业组顾问、中国菌物学会药用真菌专业委员会顾问等。收稿日期： 万方数据 真菌药用_固体发酵_上游工程建设基本研究方法 第卷第期庄毅：真菌药用“固体发酵”上游工程建设基本研究方法 汰。应注意观察纪录，如各试验组菌种和基质的种类、来源、生长年限与性状、品质等各种基本资料在生长发酵后菌丝体色泽、生长速度、长势、生长达到半瓶期及全瓶期时所需的天数及日期等，以
7、资比较。研发槐芪菌质初选汰除率达，灵雷菌质达即还有种菌种的菌质进入复选，其菌丝体生长的全瓶期最短一。旺盛度；最长加，旺盛度，平均。由本项试验看来。大多数情况下菌丝体生长速度与旺盛度呈正相关趋势，如号、号菌种的全瓶期都是，菌丝体旺盛度。对入选组合的菌质要计算、记录它们由基质发酵成为菌质的转化率、消耗率及干燥处理后的折干率等。 第二层复选 主要根据各种有关成分的分析试验方法，分析比较各参选菌质的化学成分如采用薄层色谱法等对各组菌质提取物进行分析比较根据所显示的斑点、色泽、位置及厂值等的异同情况对各组菌质进行分型归类。 雷公藤除号一号共组复选菌质外又增设对照组。（雷公藤药材）：分析结果表明，色谱显示个斑点，只有号菌质色谱与，相似，可能与其发酵 性状最差有关。其它种按其斑点色泽、位置及值等 与，比较后，可基本归纳出、种类型。每种类型都包含了个一个试样。 根据各种真菌的作用及发酵性状等从种类型中各 选一种为代表。即号、一号、号、号，第 6 页 共 6 页