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1、实验一 原生动物：变形虫、草履虫、眼虫 的采集、培养与观察引言引言原生动物在形态上是单细胞，但生理上具有维持生命和延续后代所需的一切功能，如运动、营养、呼吸、排泄和生殖等，这些功能由细胞内特化的细胞器来完成的。因此，原生动物是一个复杂的、高度集中的生命单位，是一个独立完整的有机体。一、实验目的一、实验目的(一)以变形虫、草履虫和眼虫为代表，了解肉足纲、纤毛虫纲和鞭毛纲的一般形态特征及生活情况。(二)通过对常见种的识别，了解原生动物在形态上的多样性。二、实验用具显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子。0.5氯化钠。核染色剂：碘液或1醋酸或中性红或1%乙酸甲基绿溶液。刺丝泡刺激剂：蓝墨水。三、实验材料
2、三、实验材料(一)实验材料：培养的变形虫、草履虫、眼虫和玻片标本。(二)示范材料：草履虫的生殖、棘尾虫、喇叭虫、钟形虫的制片或活体标本。四、实验步骤与观察（一）变形虫、草履虫、眼虫的 采集与培养1 变形虫的采集与培养1.1 采集变形虫常常生活在较为洁净、缓流的小河或池塘的静水中，通常集中在水底泥渣烂叶中或水生植物水下部分的茎叶上，主要取食硅藻等藻类，也取食腐败的水生植物叶片等。采集时可捞取水底物质如呈黄褐色的碎屑（硅藻较多），或剪下水生植物水下部分带有粘稠物的茎叶带回实验室。还可在水边或潮湿处挖取带根的禾本科植物（不要去除根上的土）带回实验室。1.2培养选用池塘水过滤、煮沸，放入数粒小麦粒，室
3、温放置12天，使细菌繁殖起来。接种变形虫时，将含有变形虫的池塘水滴加在载玻片上，并滴加凉水1滴，放置12min，使变形虫贴附于玻片上。倾斜玻片使水流掉，并用凉水缓缓冲洗玻片，尽量去除其他微小动物。将该玻片放人培养液，约两周后，可有大量的变形虫出现。亦可将根上带土的禾本科植物直接浸入培养液中培养。2 草履虫的采集与培养几乎在各处的淡水中都能找到草履虫，通常在污水沟中较容易找到它。2.1 采集草履虫多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水沟中，以细菌、藻类和其他腐败的有机物为食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮状物、有机物质丰富的水中，有大量草履虫生活。采集方法是将广口瓶系上绳，沉人水底连同沉渣一
4、块捞起。2.2 培养取新鲜稻草，选择近根部的几节剪成46厘米长，浸在玻璃器皿的水中，盖上玻璃，放在温暖、明亮的地方，约十来天，肉眼可以看到有许多小白点在迅速移动着，这就是草履虫。可在培养液中加少量玉米粉等促进草履虫的繁殖。3 绿眼虫的采集与培养3.1 采集眼虫生活在池沼或和缓的流水中。在不流动的、腐殖质较多或排有生活污水的小河沟、池塘或临时积有污水的水坑中，尤其是带有臭味、发绿色的水中常可采到眼虫。眼虫在春夏大量繁殖，而使它们所栖息的水呈绿色。采集时把绿色池水用玻璃瓶带回，从中可以找到眼虫。3.2 培养将富含腐殖质的泥土少许置于三角瓶中，加水至瓶容积的2/3处，以棉花轻轻塞住瓶口，煮沸5min
5、，室温放置24h。由于多数情况下采到的水样混杂有其他动物，因此接种时应在解剖镜下用微吸管将眼虫吸出，反复多次。再将眼虫接种到三角瓶中，置于向光处（避免阳光直射）纯培养，一周后眼虫大量繁殖。（二）变形虫、草履虫、眼虫的观察A变形虫(Amoeba)吸一滴变形虫培养液，置于载玻片上，加盖玻片，先在低倍镜下寻找，此时，可将光线调暗些，如发现天蓝色的透明体，而体形又缓缓改变的，即确定为变形虫。1质膜(P1asmamembrane)：为虫体外表极薄的一层膜，由细胞质形成。2细胞质(cytoplasm)：可分为两层(1)外质(ectoplasma)：质膜周围的一层，薄而透明，较致密。(2)内质(endopl
6、asma)：位于外质的里面，色较暗，含有许多颗粒。3伪足(pseudopodium)：为细胞质突起部分，可以向任何一个方向伸出，数目不定，在运动时，可清楚见到细胞质流动，伪足形状视种而异，有指状、针状、丝状等，如能见到摄食，则可观察它是如何捕捉食物的。4食物泡(foodvacuoles)：为内质里大小不等的圆形泡，泡内含有各种食物颗粒，可注意观察其位置是否固定。5伸缩泡(contractilevacuole)：为一透明的圆形液泡，生活时不断伸缩。6细胞核(nucleus)：较透明，位于内质中央，略呈椭圆形，如分辨不清，可以在盖玻片边缘加一滴碘液或1醋酸或中性红均能明显可见。B大草履虫(Para
7、mecium caudatum)1运动情况的观察吸草履虫培养液一小滴于载玻片上，加盖玻片后，移至显微镜下。用低倍镜观察虫体正常运动和遇到障碍物以后的运动情况，如虫体运动太快，可用吸水纸从盖玻片边缘吸去一些水(注意不要吸干)，即可稍减弱虫体的运动。2外部形态和内部结构的观察：滴一滴稀糊状的甲基纤维素(将粉状的甲基纤维素少许置于50ml的广口瓶中，加水，用玻棒调成稀糊状)于载玻片上，再加上一小滴草履虫培养液于稀糊状的甲基纤维素上，盖上盖玻片，此时，虫体就不甚活动。先在低倍镜下观察外形，再换至中倍镜或高倍镜，依次观察下列各部。草履虫外型(1)表膜(pellicle)：为虫体最外一层坚韧而略具弹性的保
8、护薄膜。(2)纤毛(cilium)：将光圈缩小后，可见虫体周围有许多不断摆动的纤毛，注意纤毛是否等长。(3)细胞质(cytoplasm)：分内质和外质，外质靠近表膜、透明而粘稠，外质里面，呈较稀颗粒状的即是内质。(4)口沟(oralgroove)：在虫体前侧面，斜伸向后，凹入体内的纵沟。(5)胞口(cytostome)：为口沟底部一个椭圆形的小孔。虫体失水后显示的表膜结构随着虫体的失水，表膜和细胞质分离，可看清纤毛从表膜小孔伸出。(6)胞咽(cytopharynx)：连接在胞口的后端，略呈弯曲的管状，背侧有许多纵列而密集的纤毛，不停的划动而呈波动膜。(7)食物泡(foodvacuole)：为充
9、满体内大小不等的圆形泡，自盖玻片边缘加一滴中国墨汁或中性红等喂草履虫，可观察到黑色或红色食物泡在虫体内形成过程和食物泡随原生质流动的情况及消化过程。(8)伸缩泡(contractilevacuole)：二个，位置靠近两端，呈透明的圆形泡，每个伸缩泡周围有611个放射管，可注意观察前后二个伸缩泡之间的关系，以及伸缩泡和放射管之间的关系。(9)胞肛(cyoproct)：位于口沟一侧的下端，只有在虫体排泄废物时，才能见到。(10)细胞核(nucleus)：大核(macronucleus)一个，位于虫体的中部，呈肾形；小核(micronucleus)一个，位于大核的凹陷处。(11)刺丝泡(tricho
10、cyst)：位于表膜周围的外质内，呈透明的棒状体，自盖玻片边缘加黑墨水或1醋酸一滴，可以很快看到许多刺丝的放射状，如乱发。草履虫受蓝墨水刺激后释放出刺丝3草履虫的趋性在载玻片上分别滴二滴培养液，其间用解剖针划一桥沟通，将其中一滴加入少量氯化钠(约0.5)，观察草履虫趋向何方。C绿眼虫取一滴绿眼虫培养液于载玻片上，盖上盖玻片，显微镜观察其形态(光线不要太强)。(1)体形：绿色，呈纺锤形，一般前端钝圆，后端较尖。体外表为表膜。(2)眼点(stigma)：体前端的红色小点。眼点有何功能？(3)储蓄泡(reservoir)、胞口和伸缩泡储蓄泡为眼点旁无色透明的泡状物；对外开口为胞口；伸缩泡是位于储蓄泡
11、周围的小泡，二者相通。(4)鞭毛(flagellum)：身体前端的一根丝状物。观察运动缓慢的眼虫，注意它的摆动。(5)细胞核：圆形，位于体中部或后端。用核染色剂染色后成淡绿色。(6)色素体(chromatoplast)和副淀粉粒(paramylumgranule)：色素体为卵圆形绿色小体。淀粉粒为散布在体内的闪光小点，如用碘液可染成蓝黑色。Fig.TypicalMastigophoranEuglena gracilis(三)示范1草履虫的生殖无性生殖：观察草履虫横分裂的装片，注意观察大小核的分裂情况。有性生殖：观察草履虫接合生殖的装片，注意观察二虫在何处接合。2.棘尾虫(Stylonychia
12、)生活于淡水或咸水中、体椭圆形，腹面平，背面凸，有许多边缘棘毛，三根尾棘毛。生活时可用棘毛在底层爬行。3喇叭虫(Stentor)生活于淡水池沼中，体形较大，能伸缩，伸展时虫体呈喇叭形，口缘小膜带的纤毛发达，伸缩泡在前端的左侧。4钟形虫(Vorticella)生活于淡水或咸水中，体形似钟，纤毛只限于口缘小膜带上，虫体其他部分无纤毛，大核呈带状，虫体的后端，有一不分枝的而能伸缩的柄，可固定在其它物体上。5.角鞭虫Ceratium sp.6.团藻Volvox sp五、作业作业(一)绘变形虫的形态结构图，并注明各部分名称。(二)绘草履虫结构图，并注明各部分名称。(三)通过草履虫及其它纤毛虫的观察，总结出纤毛纲的全部特征。