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1、一、组织学实习方法(一)如何正确使用显微镜观察组织标本1.对照图片,结合实物,熟悉显微镜的构件,掌握显微镜光学局部和机械局部的正确使用方法。2.将显微镜轻轻地移至观察者的前方,使镜座的前缘距实验台边缘大约510公分。3.旋开显微镜电源开关(显微镜座左后侧转轮),光线亮度适当。4.旋转物镜转换器,将10倍物镜旋至镜筒下方,对准载物台中央的孔。5.翻开聚光镜孔径光栏,可见光线经集光镜聚光镜孔径光栏聚光镜载物台中央的孔10倍物镜目镜。6.注意身体坐姿,睁开双眼,把观察注意力集中于显微镜的视场内,可见两个不完全重合的视场光斑,双手推移两目镜,使两光斑合二为一。7.按照实习指导和切片标本目录,从标本盒内
2、取出要观察的标本,进行肉眼观察,初步了解该标本的大小、形状和染色等。8.将载玻片放在载物台上,盖玻片朝上,标签位右侧,用弹夹夹好。旋转弹夹移动旋钮,将载玻片上的组织标本移至物镜下方。调节镜座左侧的转轮(即电源开关),将视野亮度调至适中。在右手旋转弹夹移动旋钮,移动切片的同时,左手慢慢地旋转镜臂下部的大、小手轮聚焦(先旋大手轮后旋小手轮)。做到左、右手配合,双目观察标本。9.显微观察标本常规是从低倍放大开始,这样视场大,有利于对标本进行全面观察。使用低倍物镜(X10)时,观察者左手转动大手轮,使载物台缓慢上升或下降,同时,观察者用双眼从目镜中观察视场,当见到组织标本像轮廓时,转动小手轮直至组织标
3、本像清晰。10.当要进一步放大观察时,那么直接旋转物镜转换器,将40倍物镜旋至镜筒下方。此时,只需转动小手轮调焦(必要时升降聚光器或调节聚光镜光栏的孔径),便可获得更清晰的进一步放大的标本像。在不同切片和不同放大倍数下观察时,应注意随时调节亮度,使之最适宜。11.移动切片观察时,要注意片中组织标本与镜像方位完全相反。二维标本像与其多维的关系,详见切片物像的理解及图示。12.观察完一张切片后,应回忆总结一下在该片中识别了几种细胞、组织、结构或该器官的特征性结构,每片如此积累,可以大大提高阅片能力和学习效率。(二)组织切片制作的一般过程目的要求 了解石蜡切片HE染色法的根本过程。 通过了解切片制作
4、,加深对局部与整体,平面与立体关系的理解。常用的教学标本是石蜡切片,苏木精(hematoxylin,以H代表)和伊红(eosin,以E代表)染色,即HE染色。现将其制作方法简述于下:1.取材与固定取材愈新鲜愈好,材料大小以0.5cm3为宜,放入固定剂内,固定624小时。固定的目的是使细胞内的蛋白质凝固,以便保持组织原来的结构和成分。但是,经固定后组织的结构与生活状态下的结构仍有很大差异,可能造成“人工假象。常用的固定剂有多种,兹例举两种如下。(1)10%福尔马林(formalin) 取3740%甲醛水溶液10毫升,参加水90毫升,即配成10%福尔马林。多用于大块组织的固定,如外科手术取的材料。
5、组织块大小与固定剂体积之比,一般为120。(2)Bouin液是一种混合固定剂,取饱和苦味酸水溶液75毫升、3740%甲醛水溶液25毫升和冰乙酸5毫升,三者混合均匀并过滤。临用前配成。 以含苦味酸的固定剂固定的组织标本,需经70%酒精充分洗涤,尽量除去苦味酸对组织的黄染。2.脱水组织标本需包埋在硬的石蜡内才能切成薄片,但是,经固定后的组织内含有水,石蜡不能透入,故需脱水。常用的脱水剂是酒精。为防止组织突然进入无水酒精内产生强烈收缩,需采用升梯度酒精(70%80%90%95%100%100%),在不同浓度酒精内的时间长短,那么视组织块大小而定。3.透明组织标本经酒精脱水后,其内含有酒精,酒精与石蜡
6、仍互不相溶,故组织标本还需进行透明处理。透明是用既能与酒精又能与石蜡溶合的透明剂(常用二甲苯)渗入组织内,完全渗透后,组织呈透明状,即可将组织浸泡在预温、溶化的石蜡内,即浸蜡。4.包埋组织标本依次在(60的温箱内)软蜡和硬蜡中各浸泡12小时。待石蜡充分渗入组织后,将浸有组织的蜡碟从温箱中拿出,等蜡冷却凝固后,即可修块,准备切片。5.切片用切片机将包埋有组织的蜡块切成薄片,一般切片厚度为47m。6.贴片用适当温度的温水,先将组织片展平,再将它捞在预先涂有粘片剂的载玻片上,放在烤箱内(3745)烤干(24h)。7.染色在进入染色液之前,组织切片需先用二甲苯脱蜡两次,然后,用纯酒精去除去二甲苯。由于
7、染色液是水溶液,需经下降梯度酒精(100%95%85%80%70%),再进入蒸馏水中稍洗 方可入染色液中染色。苏木精碱性染料将细胞核内的染色质和胞质内的核蛋白体等物质染成紫兰色,这种染色特性,称嗜碱性(basophil)。入苏木精液染数分钟后,用自来水流洗;0.51%盐酸酒精分色数秒至几十秒钟,经自来水洗后入伊红染液中染色。伊红是酸性染料,能将细胞内的普通蛋白质和细胞外的一些结构染成红色,这种染色特性,称嗜酸性(acidophil)。8.脱水、透明和封片用升梯度酒精(70%80%90%95%100%100%)脱水;二甲苯透明;中性树脂封片,晾干保存。(三)如何观察和理解切片物像观察切片的步骤应
8、养成由肉眼到低倍,再到高倍,系统观察标本的习惯。先要了解标本的取材部位、制片方法、切片方位和染色方法,再从宏观到微观,由浅入深逐步观察组织、细胞的微细结构。在掌握组织、细胞光镜结构的根底上,可结合观察某些细胞或结构的电镜照片,并联系机能融会贯穿深入理解。正确理解切片的立体形象 人体结构极为复杂,就同一个器官或细胞来说,所切的部位不同或者所切的方向不同,那么切片所显示的物像就不相同。我们将一个煮熟的鸡蛋示意为一个细胞,通过不同方向和部位所作的各种切面,那么可得到不同的物像,如图1所示。假设对呈辐射状排列的细胞群体作各种切面,其各种物像如图2所示。假设对呈管状的器官作各种切面,其形状如图3、4所示
9、;假设对呈束状的器官作各种切面,其形状如图5所示。切片中的人为现象 在切片中出现的一些人为假象,并非组织结构,应予鉴别。刀痕 因切片刀锋有缺口造成组织标本纵行刀痕。裂纹 组织透明、浸蜡的时间过长,组织脆硬,切片时可引起组织裂开,呈不规那么裂纹。在制片过程中,由于组织或细胞各局部结构的收缩不一致,或贴片时水温过高,也可导致某些人为裂隙。皱褶 贴片时组织未充分展平。气泡 封片时将少许空气封入切片树胶中。异留物 如染色时残留的染料沉渣等。(刘德明)图1 鸡蛋的各种断面图2 辐射状排列的细胞群的各种断面图3 弓形管状结构的各种断面图4 管状器官的各种断面图5 束形器官的各种断面上皮组织 (Epithe
10、lial Tissue)目的要求:1.掌握上皮组织的一般特点和分类。2.掌握各种被覆上皮的结构特点。3.了解腺的分类,两种外分泌腺细胞的结构特点。4.熟悉微绒毛和纤毛的超微结构特点和功能。5.掌握各种细胞连接的超微结构特点和功能。6.熟悉基膜的位置、光镜结构、超微结构和功能。单层扁平上皮(simple squamous epithelium) 6号 大网膜(铺片) 镀银法?组织学彩色图谱?图01-01取动物大网膜经硝酸银溶液浸染,剪成小块平铺于载玻片上而制成。用其观察单层扁平上皮(simple squamous epithelium)的外表形态结构。4倍物镜选择大网膜铺成单层而背景较清楚的局部
11、观察。10倍物镜上皮细胞呈不规那么形或多边形,相邻细胞之间有棕黑色的硝酸银颗粒沉积,并绘出细胞的轮廓。细胞核被苏木素染液染成蓝色。40倍物镜细胞之间的硝酸银颗粒较大且多,故着色深;胞质内的硝酸银颗粒细小而分散。细胞核呈椭圆形,着蓝色。细胞内椭圆形空白区,是该细胞核已脱落所遗留的间隙。单层扁平上皮(simple squamous epithelium) 46号 空肠 HE?组织学彩色图谱?图01-024倍物镜这是空肠的纵切面组织标本,平坦的一边是空肠的外外表,被覆单层扁平上皮。有大小突起的一边是空肠的腔面,小突起外表被覆单层柱状上皮。择标本平坦的一侧,换成10倍物镜观察单层扁平上皮。10倍物镜在
12、标本平坦边上,有一些虚线样的紫蓝色的点状结构,此即单层扁平上皮细胞核。有的部位细胞核排列成曲线,有的部位细胞核排列成直线,换40倍物镜进一步观察。 40倍物镜单层扁平上皮细胞核的侧面观,呈扁椭圆形或卵圆形,胞核的长轴与上皮的外表平行。上皮细胞呈薄片状,可见胞核周围少量的嗜酸性胞质。单层柱状上皮(simple columnar epithelium) 46号 空肠 HE?组织学彩色图谱?图01-034倍物镜找到空肠有大小突起的一边,小突起外表被覆单层柱状上皮。10倍物镜指状突起外表所被覆的组织是单层柱状上皮(simple columnar epithelium),细胞核呈长椭圆形或杆状,众多的细
13、胞核紧密排列成一层。有些部位的上皮细胞核聚集成堆或排成多层,因该处众多的上皮细胞被斜切所致。少数细胞核上部的胞质呈圆形空泡状,该细胞是杯状细胞(goblet cell)。选择细胞核排列成单层的部位,换40倍物镜观察。40倍物镜小肠单层柱状上皮的游离面有条红色的带状结构,称纹状缘(striated border)(它与微绒毛有何关系?)。柱状的上皮细胞紧密排列成一层,细胞间的界限不清楚。但是,可根据细胞核呈长椭圆形或长杆状,并排列为一排,即可推断该上皮是由单层的柱状细胞组成(一般而论,细胞核的形态是与该细胞的形状相适应的)。细胞核的长轴与细胞的长轴一致,偏居细胞的基底部。在柱状的上皮细胞间可见杯
14、状细胞,其外形似高脚酒杯,细胞核上部的胞质内有个圆形或椭圆形的空泡区(此处胞质内的粘原颗粒在制片过程中不易保存,致使分泌颗粒所在区着色很浅);细胞游离面的纹状缘中断;细胞核常呈三角形或杆状,着色深蓝色,位于细胞基底部。假复层纤毛柱状上皮(pseudostratified ciliated columnar epithelium) 54号 气管 HE?组织学彩色图谱?图01-044倍物镜气管横切面的组织标本,呈环形,凹面(即气管腔面)被覆假复层纤毛柱状上皮。标本中间着蓝色的宽环带为透明软骨(以后实习观察之)。10倍物镜观察气管腔面被覆的假复层纤毛柱状上皮(pseudostratified cil
15、iated columnar epithelium),细胞核紧密排列成数层,染成蓝色。选择层次结构较清晰的部位,换成40倍物镜观察。40倍物镜上皮游离面有呈簇状或成排的红色细丝,即纤毛(cilia)。纤毛所在的细胞,是纤毛细胞(ciliated cell)。细胞上半部呈柱状,下半部纤细。纤毛细胞核呈椭圆形,位于多层上皮细胞核的浅层。柱状的纤毛细胞间夹有杯状细胞。深层的细胞核多呈圆形,着色较浅,胞质很少且不清楚,此即锥体形细胞。其他的细胞多数是梭形细胞,细胞核圆形,位于多层胞核的中间层。侵入上皮内的小淋巴细胞,胞核小而圆,着色很深。上皮的基膜,着淡红色,很薄,呈细线状。未角化复层扁平上皮(non
16、keratinized stratified squamous epithelium) (复层鳞状上皮) 43号 食管 HE?组织学彩色图谱?图01-054倍物镜这是食管横切面组织标本,管腔不规那么,近腔面紫红色的弯曲环带即为未角化复层扁平上皮。10倍物镜食管腔面的未角化复层扁平上皮(nonkeratinized stratified squamous epithelium),细胞层次多,各处厚薄不一。基底层的细胞质呈强嗜碱性,趋向上皮浅表层,细胞质呈嗜酸性。上皮的基部起伏不平,在其深部,染浅红色的结缔组织呈指状或乳头状凸向上皮。(这种构型有什么重要作用?)40倍物镜浅层的上皮细胞呈扁平状或鳞
17、片状,胞质着淡红色,胞核小,呈扁卵圆形,与上皮外表平行。中间层的上皮细胞呈多边形,细胞界限较清楚。丰富的胞质呈嗜酸性,胞核呈圆形或卵圆形。基底层细胞呈矮柱状,胞核呈椭圆形,细胞质少,强嗜碱性。上皮的基部,有薄层的嗜酸性基膜。角化的复层扁平上皮(keratinized stratified squamous epithelia) 56号 手指皮 HE?组织学彩色图谱?图01-064倍物镜该标本为人末节手指掌侧面的皮肤及皮下组织的横切面,弧形面被覆角化的复层扁平上皮。10倍物镜角化的复层扁平上皮(keratinized stratified squamous epithelium),由深至表分为五
18、层:基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。角化的复层扁平上皮与未角化复层扁平上皮之间的最主要不同点,是前种上皮的浅表层细胞界限模糊,细胞核消失,胞质嗜酸性,即已角化。其次不同点,颗粒层内含嗜硷性颗粒。40倍物镜详见实习指导第11章“手指皮的表皮局部。变移上皮(transitional epithelium)60号 (空虚状态)膀腔 HE?组织学彩色图谱?图01-074倍物镜染色深的一边是膀胱的腔面,即与尿液接触面,被覆变移上皮。10倍物镜变移上皮(transitional epithelium) 较厚,上皮细胞层次多,表层的细胞体积大。上皮与结缔组织交界面较平坦。40倍物镜自上皮的表层向基底层
19、方向顺次观察。表层的细胞体积大,呈立方形或长方形,细胞核呈圆形或椭圆形,有的细胞含两个细胞核。细胞质丰富,嗜酸性,染色较红。中间层的细胞呈倒置的梨形,细胞核呈圆形。基底层的细胞核呈卵圆形或圆形。变移上皮与结缔组织之间隔有基膜。当膀胱充盈时,变移上皮的厚度和构型将会发生什么的变化? 见膀胱 59 号 HE 和?组织学彩色图谱?图01-08腺上皮(glandular epithelium)40号 下颌下腺 HE?组织学彩色图谱?图13-02颌下腺可被视为消化系和呼吸系的局部外分泌腺(浆液性腺、粘液性腺和混合性腺)的代表。4倍物镜可见组织标本中有许多的上皮细胞团,称腺泡(acinus)。染成红色、数
20、量较多的腺泡,是浆液性腺泡;染色浅、数量较少的腺泡,是粘液性腺泡。由单层立方和单层柱状上皮围成的红色小管是腺的导管(duct)40倍物镜根据腺细胞胞质的颜色深浅、细胞核的形态和位置识别三种腺泡。浆液性腺泡 由浆液性细胞(serous cell)围成。浆液性细胞呈锥体形,细胞核呈圆形,位于细胞中央或略偏居基底部,基底胞质强嗜碱性,细胞顶部胞质有许多嗜酸性的分泌颗粒。粘液性腺泡 由粘液性细胞(mucous cell)围成。粘液性细胞呈柱状,细胞质染色很浅,呈泡沫或空泡状。细胞核呈椭圆形,位于细胞基底部,细胞核长轴与细胞的长轴垂直。混合性腺泡 由浆液性细胞和粘液性细胞围成,大局部混合性腺以粘液性细胞
21、为主要成分,少量浆液性细胞形成半月状,附在混合性腺泡的一侧,称浆半月(serous demilune)。电镜照片:微绒毛 纤毛 上皮细胞侧面的细胞连接 基膜及半桥粒。 ( 唐立华 )结缔组织 (Connective Tissue)目的要求:1.了解结缔组织的特点和分类。2.掌握疏松结缔组织各种成分的结构和功能。3.了解致密结缔组织、脂肪组织和网状组织的根本结构特点。疏松结缔组织(loose connective tissue)12号 活体染色 铺片?组织学彩色图谱?图02-01给动物注射消毒过的苔盼蓝染料,让其存活数天。在麻醉状态下,取其皮下的疏松结缔组织铺于载玻片上,经固定和醛复红-伊红染色
22、等制片程序而制本钱片。10倍物镜选择细胞和纤维均较疏散且清楚的部位观察。细胞质内含较多蓝色颗粒的细胞,是巨噬细胞(macrophage)。染色深的细丝,是弹性纤维(elastic fiber)。染成粉红色的条带,是胶原纤维(collagen fibers)。胶原纤维有分支。胶原纤维和弹性纤维互相交织成疏网状。40倍镜巨噬细胞胞质内有较多的蓝色染料颗粒(为什么?)。细胞形态不规那么,细胞核呈圆形或卵圆形,染成深红色(并非细胞核呈嗜酸性)。弹性纤维细而直,与同头发丝,着紫红色。有的弹性纤维末端呈卷曲状。胶原纤维较粗,染成粉红色,有的呈分支状。适当地调暗光亮度,胶原纤维的可见度会有所增加。疏松结缔组
23、织(loose connective tissue) 43号 食管 HE?组织学彩色图谱?图02-024倍物镜食管壁由内向外分四大层,即粘膜、粘膜下层、肌层和外膜。粘膜肌层和肌层均被染成深红色,在两层之间的较宽环形区域,其结构疏松,着浅红色的的组织,即疏松结缔组织,或称蜂窝组织(areolar tissue)。其中含血管和少量脂肪组织等。10倍物镜疏松结缔组织排列疏松,着浅粉红色。纤维粗细不等,其长短不一,排列方向不定,互相交织成疏网状。形状不同的蓝色小点,是疏松结缔组织中的细胞核。纤维和细胞间的空白处,即为基质所在部位。在疏松结缔组织内有大小不等的管状结构,主要是血管。偶见食管腺的导管和腺泡
24、(属什么组织?腺泡是什么性质的?)。40倍镜在切片中所见的纤维主要是胶原纤维(为什么?),着粉红色。疏松结缔组织的细胞种类虽多,但本片常见的细胞是纤维细胞(fibrocyte),细胞核较小,呈长椭圆形,着色较深,细胞质甚少。假设有胶原纤维与其紧邻,那么纤维细胞和纤维之间无明显的界限。有些细胞核较大,扁卵圆形,着色浅,可见核仁,胞质较多,此即成纤维细胞(fibroblast)。浆细胞(plasma cell)与成纤维细胞(fibroblast) 13号 肉芽组织 HE?组织学彩色图谱?图02-030410倍物镜对照彩色图谱,寻找细胞数量较多的部位观察之。细胞呈卵圆形、体积较大、细胞质着紫红色、胞
25、核偏居一端的细胞,即浆细胞(plasma cell)。40倍物镜浆细胞多数三五成群分布。浆细胞体积较大,但大不小不一。细胞呈卵圆形或圆形,细胞质丰富,呈强嗜碱性,着紫红色。细胞核较小,圆形,多位于细胞的一端。异染色质呈块状,多数沿核膜内侧面排列。在细胞核的一侧,丰富的细胞质内常有一染色较浅的区域(电镜下,可见什么细胞器?)。对照彩色图谱02-04寻找成纤维细胞。成纤维细胞(fibroblast),体积大,有突起,呈扁平状,胞质丰富,弱嗜碱性。胞核大,呈卵圆形或扁卵圆形,着色浅,核仁清楚。肥大细胞(mast cell)12-A 疏松结缔组织 铺片 甲苯胺蓝染色?组织学彩色图谱?图02-054倍物
26、镜 寻找浅蓝色或浅绿色的组织片,置于10倍物镜下观察。10倍物镜 仔细地寻找胞质内充满紫蓝色颗粒的细胞,胞核未着色,此即肥大细胞(mast cell)。40倍物镜肥大细胞多呈卵圆形,胞质内充满着紫蓝色的分泌颗粒;胞核较小而圆,未着色,多位于中央。少数肥大细胞膜破裂,其分泌颗粒外逸于细胞附近。有的标本中可见一些小管相互吻合成网,即毛细血管网。附近有肥大细胞分布。 网状纤维(reticular fiber) 37-B 脾 浸银法?组织学彩色图谱?图02-0610倍物镜标本内部可见着深棕色或黑色的不规那么的疏网结构,其由短而细的丝构成,即网状纤维(reticular fiber),也称嗜银纤维arg
27、yrophil fiber。40倍物镜进一步观察网状纤维。黄色脂肪组织(yellow adipose tissue) 14号 HE?组织学彩色图谱?图02-074倍物镜 染成浅红色的呈网格状的组织,即是黄色脂肪组织(yellow adipose tissue)。10倍物镜脂肪组织呈红色网格状,其中有许多大的空泡,每个空泡即一个大脂滴所在处,周围有染成粉红色的窄环,即脂肪细胞的胞质,内含着蓝色长椭圆形的胞核。40倍物镜脂肪细胞因排列紧密,多数被挤压成多边形。细胞内脂滴在制片过程中被脂溶剂所提取,故其所在处呈空泡状。细胞质内其他成分和胞核被脂滴挤至细胞的一侧。有的胞核未切着。脂肪细胞间可见非常细小
28、的血管毛细血管。黄色脂肪组织(示脂滴) 14-A 锇酸染色10倍物镜本片组织与14号片的是同一种脂肪组织,由于四氧化锇在固定脂肪组织时被复原成二氧化锇,变成黑色,沉积于脂肪所在处,故使大脂滴呈黑球状,胞核和胞质的其他成分均未显示。电镜照片: 浆细胞 肥大细胞 巨噬细胞 胶原纤维。 ( 刘 能保 ) 血液和血细胞发生 (Blood and Hematopoiesis)目的要求:1.掌握血液有形成分的结构和功能。熟悉血液有形成分的正常值。2.熟悉血细胞发生过程的形态演变。血涂片 9号 Wright或Giemsa染色?组织学彩色图谱?图03-010210倍物镜可见绝大多数血细胞着红色,细胞呈双凹圆盘
29、状,无细胞核,此即红细胞。极少数血细胞有胞核,细胞体积较大,此即白细胞,其散在分布于红细胞之间。40倍物镜红细胞(erythrocyte) 胞质着红色,其中央部较周边部着色浅(为什么?)。中性粒细胞(neutrophilic granulocyte) 是最容易见到的一种白细胞,细胞体积较红细胞的大,胞质着浅粉红色,其中含有细小、均匀分布、着淡紫红色颗粒。胞核为25叶,叶间有细丝相连。有少数的中性粒细胞核呈杆状。嗜酸性粒细胞(eosinophilic granulocyte) 略较中性粒细胞大,细胞核多为2叶。胞质内充满粗大的桔红色颗粒,这是该细胞最主要的结构特征。嗜碱性粒细胞(basophil
30、ic granulocyte) 数目极少极少,不必寻找(其形态特点,见讲义及有关图谱)。淋巴细胞(lymphocyte) 也是比拟容易见到的一种白细胞,细胞体积有大有小,多数淋巴细胞的大小与红细胞相近,即小淋巴细胞。细胞核呈圆形,胞核染色质致密,着深蓝色;细胞质很少,呈天蓝色,环绕细胞核周围。通常只见小淋巴细胞核,而不易看见细胞质。中淋巴细胞比小淋巴细胞稍大,细胞质稍多,圆形细胞核一侧有明显凹陷,着色较小淋巴细胞核的稍浅。单核细胞(monocyte) 是白细胞中体积最大的细胞,细胞核多呈肾形或马蹄铁形,着色较浅。细胞质较多,染成灰兰色。血小板(blood platelet) 是形态不规那么的紫
31、蓝色的小片胞质,中央局部着色深而周边局部着色浅。单个或成群分布在血细胞之间。网织红细胞(reticulocyte) 9-A 煌焦油蓝染色在Wright-Giemsa染色的血涂片中,网织红细胞不能与成熟红细胞区分,但用煌焦油蓝染色那么能区分。10倍镜寻找胞质内含有着深色的细网或颗粒的红细胞,此即网织红细胞(reticulocyte)。换40倍物镜观察之。骨髓涂片 10号 Wright & Giemsa联合染色除原始阶段的血细胞外,在高倍镜下,可根据以下原那么识别出骨髓内造红细胞系和粒细胞系:1.凡胞核为肾形、马蹄铁形、杆形、带形,均属造粒细胞系的细胞。2.凡胞质中显有特殊颗粒者,均属有颗粒白细胞
32、系的细胞。3.凡细胞核小而圆、着色较深者,多属造红细胞系的细胞(淋巴细胞例外)。4.凡胞质着红色者,属造红细胞系的细胞。5.凡胞核大、染色质较疏松,而且其中具有核仁者,一般属原始阶段的白细胞或红细胞。本次实习,仅识别下述细胞:1.晚幼红细胞(late erythroblast) 仅稍大于成熟的红细胞,为幼稚阶段红细胞中最小者,直径约912m。细胞核小、圆形、着色极深。胞质着红色。2.中幼红细胞(intermediate erythroblast) 其大小相当于一个成熟的中性粒细胞的大小,约1014m。细胞核较晚幼红细胞核大,圆形,着色稍浅,染色质呈块状。胞质着紫红色或一边蓝、一边红色。3.中幼
33、粒细胞(myelocyte)直径约1116m。胞核呈圆形或卵圆形,多偏居细胞的一侧,核约占细胞体积的1/2。无核仁。胞核着色比上述两种幼红细胞的淡。胞质中有特殊颗粒。根据颗粒的嗜色性,可区分出:中性中幼粒细胞,颗粒细小,多不明显。嗜酸中幼粒细胞,颗粒粗大,呈红色。嗜碱中幼粒细胞,颗粒大小不等,呈蓝色。4.晚幼粒细胞(metamyelocyte) 其形态根本上和中幼粒细胞相似,体积稍小点,约1015m,胞核肾形,胞质内特殊颗粒明显,易分出中性、嗜酸性和嗜碱性三种粒细胞。电镜照片:1.中性粒细胞 2嗜酸性粒细胞 3.嗜硷性粒细胞 4.小淋巴细胞 5.单核细胞 6.血小板( 刘胜洪 )软骨与骨 (C
34、artilage and Bone)目的要求:1.掌握透明软骨的结构,了解弹性软骨与纤维软骨的特点。2.掌握骨组织的结构。透明软骨(hyaline cartilage) 54号 气管 HE?组织学彩色图谱?图04-01024倍物镜本片为气管的横切面。管壁中层呈蓝色半环带结构,即透明软骨。10倍物镜蓝色或紫蓝色的带状结构,即透明软骨(hyaline cartilage),其内埋着许多深蓝色的圆点,即软骨细胞核。软骨的外表被覆有着粉红色的软骨膜(什么组织?)。透明软骨基质,呈嗜碱性,着紫蓝色,深浅不均。软骨边缘部的基质着色较中间部的浅(为什么?)。40倍物镜基质中的胶原原纤维未能显示。基质中呈圆形
35、或椭圆形的空穴,即软骨陷窝(cartilage lacuna)。软骨陷窝周围一层基质,称软骨囊(cartilage capsule),强嗜碱性。软骨细胞(chondrocyte)位于其陷窝内,被软骨囊包裹。在制片过程中软骨细胞与基质收缩程度不一等,故在软骨细胞与软骨囊内壁之间出现明显的间隙。浅层的软骨细胞呈扁平形,体积小,与软骨长轴平行排列;软骨中间的软骨细胞,体积较大,呈圆形或椭圆形,常三、五成群分布,即同源细胞群(isogenous group),软骨囊明显。软骨膜为致密结缔组织,紧贴软骨外表。软骨膜内层中的梭形细胞为骨祖细胞(骨原细胞)。弹性软骨(elastic cartilage)16
36、号 耳廓 地依红染色?组织学彩色图谱?图04-034倍物镜组织切片两边是皮肤及皮下组织,中央局部的长条状结构为弹性软骨。10倍物镜弹性软骨(elastic cartilage)的结构与透明软骨的相似(即有软骨膜、软骨细胞、软骨陷窝和软骨囊)。但是,该软骨的特点是,基质中可见大量交错排列的弹性纤维,着紫红色。40倍物镜多数同源细胞群由两个软骨细胞组成,少数有三个软骨细胞。弹性纤维多分布于软骨囊的附近纤维软骨(fibrous cartilage) 93号 椎间盘 HE10倍物镜纤维软骨(fibrous cartilage)的结构特征介于软骨和致密结缔组织之间,其胶原纤维多,平行密集地排列呈束,相邻
37、胶原纤维束的方向一致或不一致。软骨细胞相对体积小而数量少,单个或数个成行排列于胶原纤维束之间,软骨细胞位于陷窝内,陷窝周围有由少量的基质构成的软骨囊,但后者不如透明软骨和弹性软骨的明显。纤维软骨外表无软骨膜。长骨干横切面(显示骨密质) 17号 骨磨片?组织学彩色图谱?图04-0406将尸骨干横向锯短,手工磨成半透明薄片,(用大理紫染色),封片而成。10倍物镜大小不等的圆筒形结构是骨单位(osteon),其中央的管称中央管(central canal)或哈弗管。环绕中央管呈同心圆排列的板层结构,是骨板(哈弗骨板)。骨单位之间呈扇形或不规那么形的数层骨板,是间骨板(interstitial lam
38、ella),无中央管。相邻骨单位中央管之间的横行管,为穿通管(perforating canal)或volkman管,此管周围无向心性排列的骨板。骨髓腔侧可见内环骨板,其较薄,呈波浪形排列。内环骨板的内侧有时可见骨小梁,呈针状,或不规那么形,或吻合成网,由多层骨板组成。外环骨板较厚,弯曲度小。由于曾将大的骨磨片改成小块,故有的标本中可能看不到内环或外环行骨板。选结构清晰的骨单位,置于40倍物镜观察。40倍物镜骨板内或骨板间有骨陷窝(bone lacuna)和骨小管。骨陷窝为扁卵圆形的小坑,从骨陷窝发出与同细线样的骨小管,以中央管为中心,呈幅射状排列,相邻骨板内的骨小管连通。相邻骨板呈明暗相间,
39、系骨板内纤维排列的方向不同所致。脱钙骨 18号 Weigert氏 铁苏木精法骨干标本,经酸液浸泡脱去骨盐、切片和染色而制成。10倍物镜可见大小不等、成熟程度不一的骨单位。多数的骨单位的中央管大,其周围哈弗骨板层数少;局部骨单位的中央管小,而其周围的哈弗骨板层数多。骨单位之间可见间骨板。内环骨板和外环骨板均不明显。骨髓腔侧的骨小梁交织成网,其间含骨髓。选择一个大的骨单位(其中央管小、哈弗骨板层数多),置于40倍物镜下观察。40倍物镜骨单位的中央管壁上,衬有薄层骨内膜,其内含有骨祖细胞(骨被覆细胞),多数细胞的界限不清。中央管周围的哈弗骨板呈环行纹理,着红色,深浅不一,相间排列。骨细胞体呈卵圆形或
40、圆形,位于骨陷窝内。陷窝周围是脱钙的骨基质。胞体发出丝状的突起,以中央管为中心呈幅射状排列,相邻的骨细胞突起之间彼此相连。骨单位外周可见一条着色稍深的均质细带,无骨细胞突起伸入其内,此即粘合线(cement line)。骨发生 19号 HE?组织学彩色图谱?图04-07084倍物镜该标本是幼年小动物指骨的纵切面,膨大的一端为骨骺,与其相连的杆部为骨干。骨骺与骨干间着紫蓝色的区段,为骺板(生长板)。骨干外表有一些红色的条索状结构,为骨骼肌束。10倍物镜从骺板的一侧(软骨细胞小而分散)处开始,往骨干方向依次观察骺板的四个区:1.软骨储藏区软骨细胞较小,呈圆形或椭圆形,分散存在,胞核呈圆形,软骨基质
41、呈弱嗜碱性。2.软骨增生区软骨细胞呈椭圆形,体积逐渐增大,同源细胞群的软骨细胞叠加排列成纵行,与长骨长轴平行。软骨基质强嗜碱性。3.软骨钙化区软骨细胞及软骨囊显著增大。近增生区,软骨细胞肥大,着粉红色,呈空泡状,胞核固缩或消失;近成骨区,可见退化的软骨细胞留下大陷窝。陷窝周围的软骨基质呈网状,强嗜碱性。4.成骨区可见以钙化软骨基质为中轴(着深蓝色)、外表为骨组织(着红色)的过渡型骨小梁,呈不规那么的纵条状。小梁之间的初级骨髓腔内有很多幼稚的血细胞(不必仔细观察)。移动切片,从骨髓腔往外表寻找骨领和骨膜。骨领是骨髓腔的外侧壁,着深红色,由长条形的骨组织构成。 骨外膜位于骨领的外表,由致密结缔组织
42、形成。40倍物镜骨细胞(osteocyte)位于过渡型骨小梁及骨领内。细胞呈扁卵圆形,假设其收缩变小,那么骨陷窝明显。成骨细胞(osteoblast) 位于过渡型骨小梁的外表,或紧邻骨干的骨外膜的深层,细胞常排列成一层,很像上皮组织。成骨细胞呈立方形或矮柱状或不规那么形,细胞外表有一些胞质突起,胞质呈强嗜碱性,着紫蓝色。胞核呈圆形或卵圆形,位于细胞偏骨小梁外表的一端。破骨细胞(osteoclast) 数量少,细胞体积大,胞质丰富,强嗜酸性,含多个胞核。破骨细胞常位于过渡型骨小梁边绿的凹陷内。电镜照片:软骨细胞 成骨细胞 破骨细胞 ( 刘 少 纯 ) 肌组织 (Muscle Tissue)目的要
43、求:1.掌握三种肌组织的光镜结构及功能特点。2.掌握骨骼肌与心肌的超微结构的异同点。3.了解平滑肌超微结构特点。平滑肌(smooth muscle) 20号 HE ?组织学彩色图谱?图05-0708 10倍物镜平滑肌(smooth muscle)由着红色的平滑肌纤维组成。红色长方形小块,即平滑肌的纵切面局部;密集的红色小方块,即平滑肌的横切面局部。40倍物镜在纵切面局部,平滑肌纤维呈长梭形,无横纹。平滑肌的一般排列方式,是一个平滑肌纤维粗的局部与相邻的平滑肌纤维细的局部彼此对应排列。平滑肌纤维的胞核呈椭圆形或杆状(当平滑肌纤维收缩时,胞核常扭曲呈螺旋状),位于细胞的中央,着色较浅。在横切面局部
44、,由于切到不同平滑肌纤维的不同部位,故它们的横径大小不等。横径大的,呈圆形或不规那么形,中央含有细胞核;横径小的,呈小圆形、不规那么形或小红点状。骨骼肌(skeletal muscle) 21号 HE?组织学彩色图谱?图05-010310倍物镜在纵切面, 骨骼肌细胞(skeletal muscle cell) 呈长短不等的红色带状,即每条带状结构就是一条骨骼肌纤维。每条骨骼肌纤维有许多的胞核,均位于肌膜的下方(假设恰好切至在骨骼肌纤维的表浅层,正面观时,胞核似乎位于肌纤维的深部)。在横切面,骨骼肌纤维呈圆形或不规那么块状,其直径大小不一。在一条骨骼肌纤维的横断面上,有多个细胞核 (与平滑肌的相比,其核的数目和位置有什么不同?)40倍物镜在骨骼肌纤维的纵切面上,可见其横纹和肌原纤维。与骨骼肌纤维长轴垂直的染色深浅相间的横线,即横纹。深红色的横线,是暗带(亦称A带);浅色的横线,是明带(亦称I带),两带交替排列。肌纤维内,与骨骼肌纤维平行排列的红色细线条,即肌原纤维(myofibril)。多个染色浅呈扁椭圆形的细胞核,紧贴肌膜(sarcolemma)内侧,与肌纤维的长轴平行排列。在骨骼肌纤维的横切面上,肌原纤维呈红点状。胞核