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1、细胞形态学在急性白血病的诊断符合率【摘要】目的探究细胞形态学对急性白血病诊断符合率的影响。方法选取2022年2月至2022年2月我院急性白血病患者132例，分析细胞形态学分型、免疫学分型、细胞遗传学分型、分子生物学分型及联合分型诊断符合率。结果细胞形态学分型：M13例，M225例，M328例，M46例，M516例，急性髓细胞白血病AML未分型12例，急性淋巴细胞白血病ALL36例，急性白血病AL6例，诊断符合率分别为80.3%106/132；免疫学分型：M01例，M13例，M233例，M328例，M44例，M55例，AML未分型14例，ALL37例，AL6例，急性混合细胞白血病MAL1例，诊断
2、符合率82.6%109/132；细胞遗传学分型：M327例，M42例，AML未分型4例，AL7例，其他异样染色体核型17例，正常核型75例56.8%，诊断符合率24.2%32/132；分子生物学分型：M328例，M43例，AML未分型5例，AL9例，其他相关融合基因10例，融合基因阴性77例，诊断符合率25.8%34/132；MICM形态学、免疫学、细胞遗传学和分子学综合诊断符合率97.7%129/132，高于各分型单纯诊断P0.05；形态学分型诊断符合率高于细胞遗传学分型、分子生物学分型P0.05；形态学、免疫学分型诊断符合率差异无统计学意义P0.05。结论细胞形态学是急性白血病诊断基础，与
3、免疫学分型诊断价值相当，应给予充分重视，而MICM综合诊断可提高最终诊断率。【关键词】细胞形态学；细胞遗传学；免疫学；分子生物学；诊断急性白血病acuteleukemia，AL是最常见血液系统恶性疾病，发病快速，且病程通常较短，平均生存期仅3个月左右1，2。AL精确分型对指导临床治疗和预后预报具有重大意义。随流式细胞术进展及世界卫生组织WHO白血病分型的提出，免疫分型临床应用日益广泛3。现阶段，细胞形态学morphology、免疫学immunology、细胞遗传学cytogenetics和分子生物学molecularbiology分型即MICM分型已得到临床高度认可，但许多基层医院及部分三级医
4、院受仪器、试剂等的限制而应用受阻，尤其分子生物学、细胞遗传学分型4，5。基于形态学的法、美、英分型系统French-American-Britishclassificationsystems，FAB分型法是传统分型方法，操作简便，在急性白血病的诊断中仍具有较高诊断价值及不行替代作用6。近年来，关于形态学、免疫学分型的对比讨论主要探讨免疫学的诊断价值，对形态学诊断价值的讨论较少。基于此，本讨论选取我院AL患者132例，探究细胞形态学对AL诊断符合率的影响，现报告如下。1资料与方法1.1临床资料：选取2022年2月至2022年2月我院AL患者132例，均符合白血病诊断标准7，其中急性髓细胞白血病A
5、ML：M01例0.8%，M14例3.0%，M241例31.1%，M328例21.2%，M46例4.6%，M511例8.3%，未分型3例2.3%，急性淋巴细胞白血病ALL37例28.0%，急性混合细胞白血病MAL1例0.8%。男性73例，女性59例，年龄1878岁，平均4710岁。1.2方法：仪器与试剂：珠海贝索生物技术有限公司瑞氏-姬姆萨染色液试剂盒；广东西陇化工股份有限公司醋酸萘酚酯酶NAE、过碘酸-雪夫反应PAS、过氧化物酶POX染色试剂；美国BectonDickinson公司FACSCanto型流式细胞仪、溶血素、破膜剂及单克隆抗体；天津瑞爱金生物科技有限公司秋水仙胺、细胞染色体培育液；
6、美国Life公司ABI7500型聚合酶链反应PCR仪；法国Lourmat公司Vilber凝胶分析系统；金砂广播仪器厂DY-600型中压电泳仪；上海博迅实业有限公司医疗设备厂SSW-420-2S型电热恒温水浴箱；华美生物工程公司淋巴细胞分别液；上海源奇生物医药科技有限公司白血病相关融合基因检测试剂盒。细胞形态学：取骨髓涂片进行瑞氏-姬姆萨染色骨髓小粒多、涂片好，油镜下分类计数200个有核细胞并行细胞化学染色，包括PAS、POX、NAE+氟化钠抑制NaF，计数阳性率并观看酶型，按FAB标准分型。免疫学分型：取肝素抗凝骨髓液12mL，用流式细胞仪测定，分出稚嫩与成熟细胞群CD45/SSC设门，进行免
7、疫表型及抗原表达分析，阳性：膜抗原20%，CD34和胞质内抗原10%，类型推断根据欧洲白血病免疫学分类协作组EGIL积分标准。染色体核型：取肝素抗凝骨髓液25mL，接种于细胞染色体培育液2106/mL细胞，终止培育前1h加入秋水仙胺0.05L/mL，离心收获细胞，固定液固定，滴片，行核型分析R显带法。分子生物学：取23mL抗凝骨髓液，0.9%氯化钠注射液稀释等体积，分别单个核细胞并裂解，提取总RNA，逆转录得到cDNA，行多重巢式PCR反应，反应产物电泳1.5%琼脂糖凝胶，观看分析结果。1.3观看指标：细胞形态学分型；免疫学分型；细胞遗传学分型；分子生物学分型；4种分型与联合分型诊断符合率。1
8、.4统计学处理：运用SPSS21.0分析，计数资料以例数和百分比%表示，行2检验，以P0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1细胞形态学分型：132例AL中，M13例2.3%，M225例18.9%，M328例21.2%，M46例4.6%，M516例12.1%，AML未分型12例9.1%，ALL36例27.3%，AL6例4.6%。2.2免疫学分型：132例AL经流式细胞仪诊断为M01例0.8%，M13例2.3%，M233例25.0%，M328例21.2%，M44例3.0%，M55例3.8%，AML未分型14例10.6%，ALL37例28.0%，AL6例4.6%，MAL1例0.8%。2.3细胞遗
9、传学分型：M327例20.4%，t15；17q22；q21；M42例1.5%，inv16q13；q22；AML未分型4例3.0%，t8；21q22；q22；AL7例5.3%，t9；22q34；q11；其他异样染色体核型17例12.9%；正常核型75例56.8%。2.4分子生物学分型：M328例21.2%，PMLRARa融合基因；M43例2.3%，AML未分型5例3.8%，AL9例6.8%，其他相关融合基因10例7.6%，融合基因阴性77例58.3%。2.54种分型与联合分型诊断符合率：形态学分型80.3%106/132、免疫学分型82.6%109/132、细胞遗传学分型24.2%32/132、
10、分子生物学分型25.8%34/132、联合分型诊断符合率97.7%129/132。联合分型与形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学分分型诊断符合率差异有统计学意义2=267.799，P0.01；形态学分型诊断符合率高于细胞遗传学分型、分子生物学分型21=83.142，P10.01；2=78.835，P20.01；形态学、免疫学分型诊断符合率差异无统计学意义2=0.226，P=0.635，见表1。3商量目前，形态学分型仍是白血病诊断基础，其结合细胞形态学和化学染色特征进行白血病亚型诊断8，9。卢兴国10指出，基于外周血细胞形态学检验是全部白血病的诊断起点，所得信息具有重要临床价值。本讨论显示，M
11、3、M4EO等AL类型有典型形态学特征，可依靠形态学明确诊断，也可依靠分子生物学或细胞遗传学直接诊断，但后者受试剂、仪器等的限制而应用受阻，且检测时间较长。细胞形态学具有免疫分型等不行替代的优势，包括以下几个方面：外周血检验可马上发觉血细胞计数低的白血病，如AML-M3，且具有典型形态学特征，明确诊断，为患者救治争取时间；操作简便、快捷、分析直观、分型标准明确；流式细胞术对原始细胞的计数受操作、稀释等因素影响，故原始细胞百分比较免疫表型更为精确；流式细胞术检测免疫分型时，以形态学为根据选择单克隆抗体；骨髓细胞形态学可直观明确淋巴瘤患者临床分期，利于早期诊断；流式细胞术对粒、单白血病分型存在肯定
12、困难，而细胞形态学观看化学染色表现，尤其酯酶染色，具有诊断价值11。本讨论数据显示，形态学分型诊断符合率80.3%高于细胞遗传学分型24.2%、分子生物学分型25.8%P0.05，且接近免疫学分型诊断符合率82.6%P0.05，提示细胞形态学与免疫学分型诊断价值相当，与既往文献12讨论一致。MICM综合诊断符合率97.7%129/132，高于各分型单纯诊断P0.05，提示MICM综合诊断可提高最终诊断率，对AL临床治疗具有肯定指导价值。综上可知，细胞形态学是AL诊断基础，与免疫学分型诊断价值相当，应给予充分重视，而MICM综合诊断可提高最终诊断率。参考文献1ShapiroRM，KimDDH.N
13、ext-generationsequencing-basedminimalresidualdiseasemonitoringinpatientsreceivingallo-geneichematopoieticstemcelltransplantationforacutemyeloidleukemiaormyelodysplasticsyndromeJ.CurrOpinHematol，2022，256：425-432.2张斌，蔡艳霞，张素贞，等.颗粒性急性B淋巴细胞白血病形态学及流式散点图特点J.检验医学，2022，322：118-121.3赵莉，高吉照，李艳，等.50例儿童急性淋巴细胞白血病
14、免疫分型、染色体核型及融合基因与预后分析J.中国小儿血液与肿瘤杂志，2022，242：95-99.4秦亚溱.白血病诊治中的分子学检测及其临床意义J.中国生物工程杂志，2022，399：98-102.5刘倩，莫霖，黄先巧，等.某医院810例儿童白血病流行病学特征分析J.重庆医科大学学报，2022，4510：1442- 田霞本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！第9页 共9页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页第 9 页 共 9 页