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1、临床实验室生物安全培训 第1页，本讲稿共25页一、术语和定义（1）.气溶胶：悬浮于气体介质中的粒径一般为0.0011000um的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。（2）.生物安全柜：具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。第2页，本讲稿共25页二.实验室生物安全防护水平分级 将实验室生物安全防护水平分为一级、二级、三级和四级，一级防护水平最低，四级防护水平最高：A.生物安全防护水平为一级的实验室适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物B.生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，一般情况下
2、对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物C.生物安全防护水平为三级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物D.生物安全防护水平为四级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物第3页，本讲稿共25页三、临床实验室生物安全管理A.生物安全柜应安放在实验室中的什么地方比较合适：1.远离人员活动，物品流动以及可能会扰乱气流的地方，避免放在离门口很近的地方。2.进入生物安全柜的低速率的定向气流，极易受到干
3、扰，包括人员走进生物安全柜所形成的气流、打开窗户、送风系统调整以及开关门等都可能造成影响。第4页，本讲稿共25页 B.生物安全柜性能检测 1.个体防护能力 2.样品保护能力 3.交叉污染防护能力第5页，本讲稿共25页 C.个体防护装备 包括：眼镜、口罩、帽子、防护衣、手套、鞋套、听力保护器。第6页，本讲稿共25页D.微生物危害评估：1.当建设使用传染性或有潜在传染性材料的实验室前，必须进行微生物危害评估。2.确定对象微生物应在那一级的生物安全防护实验室中进行操作。3.制定相应的操作规程，实验室管理制度和紧急事故处理方法，必须形成书面文件并严格遵守执行。第7页，本讲稿共25页四、各类紧急情况处理
4、A.手部清洗消毒 1.推荐使用肘动式或者自动式洗手开关 2.流动水冲洗手部多次，然后用液体皂滴在手上，反复撮手，在用水彻底冲洗 3.清洗完毕再用干净的纸巾或手巾擦干 4.可用75%的酒精擦手来清除双手的轻度污染 5.在没有洗手池的地方，可以使用含酒精的“免洗”手部清洁产品代替第8页，本讲稿共25页B.刺伤、切割伤或擦伤应急处理：1.保持镇静，立即停止实验，脱掉手套。2.用清水或肥皂水清洗伤口。3.尽量挤出伤口处的血液，取出急救箱，用碘酒或75%的酒 精擦洗伤口适当的包扎。4.及时就医，告知医生受伤原因及可能的微生物污染，必要 时要进行医学处理。5.向实验室安全员报告，进行事故记录。第9页，本讲
5、稿共25页C.生物安全柜内益处处理 1.处理益撒物时不要将头伸入安全柜内，也不要将脸直接面对前操作口，而应处于前视面板的后方。2.选择消毒剂时需要考虑消毒剂对生物安全柜的腐蚀性。3.如果溢洒的量不足1ml时，可直接用消毒剂浸湿的纸巾擦拭。4.如溢洒量大或容器破碎，按操作规程消毒。5.如果溢洒物流入生物安全柜内部，则视情况，如需要可队生物安全柜进行熏蒸。第10页，本讲稿共25页D.衣物污染：1.尽快脱掉最外层防护衣，并注意防止感染物质进一步扩散。2.将已污染的防护服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌 3.脱掉手套，到污染区出口洗手 4.更换防护服和手套 5.必要时对发生污染及托防护服的地方进行消毒处理
6、 6.如果内衣被污染，应立即脱掉易污染的衣物，消毒处理第11页，本讲稿共25页E.皮肤粘膜被污染 1.感染性液体外溢到皮肤 （1）立即停止工作，脱掉手套 （2）用75%的酒精进行皮肤消毒 （2）再用大量水冲洗 2.感染性液体溅入眼睛 （1）立即停止工，脱掉手套 (2)迅速到缓冲区用洗眼器冲洗 （3）用生理盐水冲洗 3.两种情况都应做适当的预防治疗和医学观察，并报告实验室安全员进行事故记录第12页，本讲稿共25页五、离心机内有感染性物质破裂的处理A.非封闭离心机内带有感染性物质离心管发生破裂：1.离心机正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭电源，密闭30分钟使气溶胶沉淀，离心机停止后发生破裂，
7、应立即盖上盖子密闭30分钟。2.带结实的手套或口罩（避免吸入气溶胶）3.使用镊子清理玻璃碎片，或用镊子夹着的棉花来清理。4.破碎的离心管及离心筒、转轴或转子都应放在屋腐蚀性的、对相关微生物具有杀灭作用的消毒剂内浸泡60分钟以上。第13页，本讲稿共25页 B.在可封闭的离心筒内离心管发生破裂：1.如果怀疑封闭的离心筒内有管子破裂，应在生物安全柜内打开离心筒盖子查看。2.确有破裂时，松开离心筒盖子，但不要打开，放入黄色垃圾袋，直接高压灭菌。3.或者采用化学消毒法：将离心筒及内容物放到对该种微生物有效的无腐蚀性消毒剂里浸泡60分钟以上 4.离心杯在使用消毒剂浸泡后 5.应再用清水洗净后干燥 6.向实
8、验室安全员报告 7.进行事故记录第14页，本讲稿共25页C.运输途中发生泄漏的应急操作：1.现将污染区域隔离，物管人员撤离 2.穿好防护装备 3.可以用土、沙或其他不燃性物质吸收漏出物质，同事避免直接接触 4.用吸收材料覆盖遗洒物质，从外围向中性倾倒适当量的消毒剂，使消毒剂与溢洒物混合并作用30-60分钟 5.将污染材料置于防漏、防穿透的废弃物溶剂中密封 6.对溢出区域再次清洁并消毒，并消毒手套和防护衣 7.所有处理材料和防护服都放入废弃物溶器中密封 8.向主管部门报告溢出情况和消除污染情况。出现严重泄漏时要向当地疾病预防疾控中心报告。第15页，本讲稿共25页六、微生物实验室的消毒要求 1.实
9、验室如果发现微生物污染了实验环境应立即停下实验，用实验前备好的消毒剂进行消毒处理。2.如实验室被空气和气溶胶传播的微生物污染，应立即关闭实验室进行消毒处理。3.盛装污染微生物实验耗材的容器应有足量的消毒剂，用过的耗材立即侵泡在消毒剂中。4.实验结束后应立即对实验环境进行消毒处理，擦洗、消毒工作台面、地面，开启紫外线灯等照射1小时以上。生物安全3级和4级实验室、层流实验室应在实验结束后继续开启空气循环系统30分钟以上。第16页，本讲稿共25页5.实验废弃物应立即进行灭菌或消毒灯无害化处理。6.实验人员在实验结束后应立即清洗消毒双手，必要时应洗澡，更衣。7.对需消毒的物品应采取彻底的消毒措施，不留
10、死角。8.用消毒剂浸泡消毒时要保证消毒物品全部浸没在消毒剂中。9.用消毒剂擦拭消毒时要 保证所有需要消毒的表面都被均匀的擦拭到10.所有消毒方法均应保证消毒时间第17页，本讲稿共25页11.要根据消毒对象和微生物的种类选择合适的消毒和灭菌方法：（1）对受到细菌芽孢、真菌孢子和枝杆菌污染的物品，选用高水平消毒法或灭菌法。（2）对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体和病毒微生物污染的物品，选用中水平以上的消毒方法（3）对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品，可选用低水平或中水平消毒法（4）对从在较多较多有机物的物品消毒时，应加大 消毒剂的使用剂量或延长消毒作用时间。（5）消毒物品上微生物污染特
11、比严重时，应加大消毒药剂的使用剂量和延长消毒作用时间。（6）选择表面消毒方法，应考虑表面性质，光滑表面可选择紫外线消毒器近距照射，或体液消毒剂擦拭；多孔材料表面可采用喷雾消毒法第18页，本讲稿共25页八、常用消毒方法A.实验室内空气的消毒：1.一般可加强开窗通风，自让通风换气，条件许可时采用排气扇人工机械通风，做到每小时换气10-15次。2.紫外线灯管适用于室内空气，无疑表面的消毒。常用的室内悬吊式紫外线灯对室内空气消毒时安装的数量为平均1.5W每立方米，照射时间不少于30分钟。3.使用循环风紫外线空气消毒器连续开机器达到使用说明书规定的时间即可起到空气消毒作用。第19页，本讲稿共25页B.实
12、验室地面物体表面消毒：实验室、办公室等场所地面要湿式拖扫，禁止 干拖干扫。可用0.1%过氧乙酸拖地或0.2%-0.5%过氧乙酸喷洒或拖地消毒剂的用量不少于100ml每立方米，拖把应专用，污染区和清洁区不得混用。第20页，本讲稿共25页C.物体表面的消毒：1.实验台面、桌子、椅子、凳子、床头柜、门把手、实 验记录夹等可用0.2%0.5%的过氧乙酸喷洒或有效氯为 1.0g/L2.0mg/L的含氯消毒剂喷洒、擦拭，消毒作用1015min。2.若实验室台面等明显被传染性标本污染，应立即用0.2%0.5%的过氧乙酸喷洒或有效氯为1.0g/L2.0g/L的汗氯消毒剂喷洒于污染表面，保持3060min。第2
13、1页，本讲稿共25页D.一般实验器材的消毒：1.凡直接或间接接触临床标本或实验微生物的器材均应视为有传染性，均应作消毒处理。金属器材、玻璃器皿可用压力蒸汽和干燥灭菌的方法使用于耐高温、高湿的医用器械和物品的灭菌。2.玻璃器材使用过的玻璃吸管、试管、离心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等应立即浸入有效氯为2.0g/L的含氯消毒剂中1小时以上，消毒后用超声波清洗的方法洗净沥干，使用前再进行高压灭菌处理。第22页，本讲稿共25页E.污染冰箱和冰柜的消毒处理：1.将可能污染的冰箱冰柜外表面用0.2%的过氧乙酸擦拭，作用30min。2.将冰箱冰柜放置在特制的PVC板制成的大托盘上，托盘面积大于冰箱冰柜底面积，边沿高度为10cm，托盘内放入适量的含氯消毒粉剂，是消毒粉和化冻水混合后有效氯的含量大于1.0g/L。第23页，本讲稿共25页F.实验室终末消毒处理：1.实验室的终末消毒处理及对不耐热、不耐湿的贵重仪器设备如显微镜、离心机等的处理。可用甲醛熏蒸的方法进行消毒处理，将需要消毒的实验室内柜门，抽屉打开，污染的贵重仪器集中于1个房间内，封闭门窗。2.电磁炉加热福尔马林20ml每立方米，加入熏蒸12小时，福尔马林40ml每立方米加高锰酸钾30g每立方米，混合后熏蒸12小时。第24页，本讲稿共25页谢谢大家！第25页，本讲稿共25页