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1、实验五巨噬细胞的吞噬现象观察第1页,本讲稿共12页二、原理二、原理吞噬作用是机体内普遍存在的一种非特异性吞噬作用是机体内普遍存在的一种非特异性免疫机制。高等动物具有大小两类吞噬细胞免疫机制。高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞即巨噬细胞和嗜中性粒细胞),专司吞噬作,专司吞噬作用,为非持异免疫功能的重要组成部分。用,为非持异免疫功能的重要组成部分。外源蛋白或异物可激发机体巨噬细胞的趋化外源蛋白或异物可激发机体巨噬细胞的趋化作用,继而产生变形运动,吞噬异物,在溶作用,继而产生变形运动,吞噬异物,在溶酶体的作用下破坏分解异源蛋白。酶体的作用下破坏分解异源蛋白。第2页,本讲稿共12页
2、三、材料和试剂三、材料和试剂1.器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、器材:显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、载玻片、盖玻片、吸管等注射器、载玻片、盖玻片、吸管等2.试剂:试剂:0.85%生理盐水;生理盐水;Alsever溶液;溶液;6%淀粉肉汤(含台盼蓝)。淀粉肉汤(含台盼蓝)。3材料:材料:(1)小白鼠小白鼠(2)1%鸡红细胞悬液鸡红细胞悬液鸡血鸡血1ml4mlAlsever 溶液溶液4保存,保存,用前加用前加510倍体积倍体积0.85生理盐水混匀离心生理盐水混匀离心(1500rpm,10min)洗涤)洗涤2次,用次,用0.85生理生理盐水配成盐水配成1悬液。悬液。第3页,本讲稿共12页四实
3、验方法、步骤四实验方法、步骤1提前一天(提前一天(12-24h)给小白鼠腹腔注射)给小白鼠腹腔注射1ml含台盼蓝含台盼蓝的的6淀粉肉汤。注意注射时勿伤及小鼠肝、脾、血管,淀粉肉汤。注意注射时勿伤及小鼠肝、脾、血管,勿注入肠内。勿注入肠内。2实验时,将注射了淀粉肉汤的小鼠固定,并给其实验时,将注射了淀粉肉汤的小鼠固定,并给其腹腔注射腹腔注射1鸡红细胞液鸡红细胞液1ml(注射时进针要果断,进(注射时进针要果断,进针位置不能太深,拔针要轻缓),稍过片刻,轻按揉小鼠针位置不能太深,拔针要轻缓),稍过片刻,轻按揉小鼠腹部,使红细胞分散于腹腔。腹部,使红细胞分散于腹腔。320min后,拉断颈椎处死小白鼠;
4、剖开腹腔,用不装后,拉断颈椎处死小白鼠;剖开腹腔,用不装针头的注射器(或吸管)吸取腹腔液(大约针头的注射器(或吸管)吸取腹腔液(大约0.31ml),滴一滴在载片上,盖片观察。),滴一滴在载片上,盖片观察。第4页,本讲稿共12页五结果与讨论五结果与讨论1结果:结果:观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程和现象,观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程和现象,并将各个阶段的吞噬细胞绘图。并将各个阶段的吞噬细胞绘图。2讨论:讨论:(1)实验前注射淀粉肉汤的作用?实验前注射淀粉肉汤的作用?(2)为何巨噬细胞不吞噬小鼠红细胞?为何巨噬细胞不吞噬小鼠红细胞?第5页,本讲稿共12页第6页,本讲稿共12页第7页,本讲稿共12页第8页,本讲稿共12页第9页,本讲稿共12页第10页,本讲稿共12页第11页,本讲稿共12页第12页,本讲稿共12页