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1、_归纳总结汇总_ - - - - - - - - - 专题 1 基因工程（1）启动子：是一段有特别结构的DNA片段 ,位于基因的 首端 ,是 RNA聚合酶 识别和结合的部位,能驱动基因转录出 mRNA,最终基因工程的概念基因工程是指根据人们的愿望,进行严格的设计,通过 体外 DNA重组和转基因技术,给予生物以 新的遗传特性 ,制造出 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做 DNA重组技术 ；获得所需的 蛋白质 ；（2）终止子： 也是一段有特别结构的 DNA片段 ,位于基因的 尾端 ；（3）标记基因的作用： 是为了鉴定受体细胞中 是否含有目
2、的基因,（一）基因工程的基本工具从而将 含有目的基因的细胞挑选出来；常用的标记基因是 抗生素基1. “ 分子手术刀” 限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从 原核生物 中分别纯化出来的；（2）功能：第三步： 将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念：能够识别双链 DNA分子的某种 特定 的核苷酸序列, 并且使每一条链中 特定 部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开,因此具有 专一性 ；是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维护稳固和 表达的过程；（3）结果：2.常用的转化方法：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 黏性末端将目的基因导入植物细胞： 采纳最多的方法是农杆菌
3、转化法 ,和平末端 ；其次仍有基因枪法 和 花粉管通道法 等；2. “ 分子缝合针” DNA连接酶1 两种 DNA连接酶（E coliDNA 连接酶和 T4-DNA连接酶） 的比较：将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术 ；此方相同点：都缝合 磷酸二酯 键；区分：EcoliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体 ,只能将双链 DNA片段互补的 黏性末端 之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA连接酶能缝合法的受体细胞多是 受精卵 ；将目的基因导入微生物细胞：ca+处理法3. 重组细胞导入受体细胞后, 挑选含有基因表达载体受体细胞的依两种末端 ,但连接平末端的之间的效率较低 ；据是标记基
4、因是否表达 ；第四步： 目的基因的检测和表达2 与 DNA聚合酶作用的异同DNA聚合酶只能将 单个核苷酸 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键；DNA连接酶是连接两个 DNA片段 的末端,形成磷酸二酯键；1. 第一要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,3. “ 分子运输车” 载体（1）载体具备的条件：方法是采纳 DNA分子杂交技术 ；能在受体细胞中复制并稳固储存；2. 其次仍要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采纳 用标记具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入 ；具有标记基因,供重组DNA的鉴定和挑选 ；的目的基因作探针与 mRNA杂交 ；（2）最常用的载体
5、是 质粒 ,它是一种 暴露的、结构简洁的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制才能的双链环状DNA分子 ；3. 最终检测 目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒； 二 基因工程的基本操作程序 第一步： 目的基因的猎取取蛋白质 ,用相应的 抗体 进行 抗原抗体杂交 ；4. 有时仍需进行 个体生物学水平 的鉴定；如 转基因抗虫植物是否 显现抗虫性状 ；1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因；2. 原核基因实行 直接分别 获得,真核基因是 人工合成 ；人工合成目（三）基因工程的应用的基因的常用方法有反转录法 _和化学合成法 _；1. 植物基因工
6、程： 抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改 良植物的品质；2. 动物基因工程： 提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动 物生产药物；3. 基因治疗： 把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产 物发挥作用；3.PCR技术扩增目的基因（1）原理： DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至9095DNA解链 ；其次步：冷却到55 60,引物结合到互补DNA链 ；第三步：加热至70 75,热稳固 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 ；其次步： 基因表达载体的构建1. 目的：使目的基因在受体细胞中 稳固存在 ,并且可以 遗传至下一代,使目的基因能够 表达和发挥作用 ；（四）蛋白质工程的概念
7、 蛋白质工程是指以 蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关2. 组成： 目的基因 启动子 终止子 标记基因系作为基础,通过 基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造 ,或制造一种 新的蛋白质 ,以满意人类的生产和生活的需求；（基因工程在原就上只能生产自然界已存在 的蛋白质）专题 2 细胞工程_精品资料_ - - - - - - -第 1 页,共 4 页_归纳总结汇总_ - - - - - - - - - 细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细细胞膜的流淌性去除细胞壁后诱导离心、电刺激、克服了远缘杂交的胞杂交细胞膜的流淌性原生质体融合振动,聚乙二醇不亲和性,获得杂等试剂诱导种植株动物细胞
8、使细胞分散后诱导除应用植物细胞制备单克隆抗体的融合细胞融合杂交手段外再加技术之一灭活的病毒诱导温度 ：相宜温度：哺乳动物 多是 36.5 0.5 ；pH：7.2 7.4 ；气体环境 ：95%空气 5%CO 2；O2是细胞代 谢所必需的,CO 2的主要作用是 维 持培育液的 pH；（5）动物细胞培育技术的应 用：制备病毒疫苗、制备单克（一）植物细胞工程隆抗体、检测有毒物质、培育 医学讨论的各种细胞；1. 理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵生殖细胞干细胞体细 胞；植物细胞动物细胞2. 植物组织培育技术（1）过程： 离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织 试管苗植物体（2）用途：微
9、型繁衍、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产 物的工厂化生产 ；（3）位置：是培育 转基因植物 、植物体细胞杂交 培育植物新品种的最终 一道工序；2. 动物体细胞核移植技术和克 隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为 胚胎细胞 核移植（比较简洁）和体细胞 核移植（比较难）；3. 植物体细胞杂交技术（1）过程：等；化学（2）选用去核 卵 母 细胞 的缘由：（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激卵 母 细胞比较法一般是用 聚乙二醇（ PEG） 作为诱导剂；大,简洁操作 ；卵 母 细胞 细胞质（3）意义： 克服了远缘杂交不亲和的障碍；多,养分丰富 ；（3）体细胞核移（二）动物细胞工程
10、植技术的应用：1. 动物细胞培育（1）概念：动物细胞培育就是从动物机体中取出相关的 组织 ,将它分散成单个细胞 ,然后放在相宜的 培育基 中,让这些细胞 生长和繁衍 ；（2）动物细胞培育的流程：取动物组织块 （动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎加速家畜遗传改良进 程,促 进良畜抗原注入小鼠体内 分别用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成 单个细胞 制成 细胞悬液 群繁B 淋巴细胞骨髓瘤细胞转入培育瓶中进行原代 培育贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞连续传代培育；育； 细胞融合（3）细胞贴壁和接触抑制：爱护濒悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上 ,称为 细胞贴壁 ；细胞杂交瘤细
11、胞数目不断增多, 当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制 时,细胞就会危物停止分裂增殖 ,这种现象称为 细胞的接触抑制 ；细胞培育（4）动物细胞培育需要满意以下条件：种,增挑选培育细胞大存活无菌、无毒的环境：培育液应进行 无菌 处理；通常仍要在培育液中添加肯定量的抗注入小鼠培育基生素 ,以防培育过程中的污染；此外,应定期更换培育液,防止 代数量；谢产物积存对细胞自身造成危害；体内培育体外培育生产养分 ：从腹水提取从培育液提取合成培育基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元宝贵的素等；通常需加入血清、血浆 等自然成分；单克隆抗体_精品资料_ 第 2 页,共 4 页- - - - - - -_归纳
12、总结汇总_ - - - - - - - - - 医用蛋白；作为异种移植的供体；2、具有 胚胎细胞 的特性,在形状上表现为体积小,细胞核大,核用于组织器官的移植等；仁明显 ；在功能上,具有 发育的全能性 ,可分化为成年动物体（4）体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着 健康 问题、表现出 遗传和生理 缺陷等；3. 动物细胞融合内任何一种组织细胞；另外,在体外培育的条件下,可以增殖而不发生 分化,可进行 冷冻 储存,也可进行 遗传改造 ；3、胚胎干细胞的主要用途是：动物细胞融合也称细胞杂交 ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程； 融合后形成的具有原先两个或多个 细胞遗传信可用于讨论哺
13、乳动物个体发生和发育规律；是在体外条件下讨论细胞分化 的抱负材料,在培育液中加入 分化息的单核细胞,称为杂交细胞 ；动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激 等；动物细胞融合的意义： 克服了 远缘杂交的不亲和性,成为讨论诱导因子 ,如牛黄酸等化学物质时,就可以诱导 ES细胞向不同类型的组织细胞分化, 这为揭示 细胞分化和细胞凋亡 的机理供应细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段；了有效的手段；可以用于治疗 人类的某些顽疾 ,如帕金森综合症、 少年糖尿病等；4. 单克隆抗体抗体：一个
14、 B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 ；从血清中分别利用可以被诱导分化形成新的组织细胞 的特性,移植ES细胞可出的抗体 产量低、纯度低、特异性差；杂交瘤细胞的特点：既能大量繁衍 ,又能产生 专一的抗体 ；使坏死或退化 的部位得以修复并复原正常功能；单克隆抗体的优点：特异性强,灵敏度高,并能大量制备；随着组织工程技术的进展,通过ES细胞 体外诱导分化 ,定向培单克隆抗体的作用：育出 人造组织器官 ,用于 器官移植 ,解决供体器官不足和器官移 植后 免疫排斥 的问题；（三）胚胎工程的应用 1. 体外受精和胚胎的早期培育 1 卵母细胞的采集和培育： 作为诊断试剂 ：精确识别各种 抗原 物质的微小差异,
15、并跟肯定抗原 发生特异性结合,具有精确、高效、简易、快速的优点； 用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗 癌症治疗 ,可制成“生物导弹 ” ,也有少量用于治疗其它疾病；专题 3 胚胎工程（一）动物胚胎发育的基本过程1、胚胎工程是指对动物 早期胚胎或配子 所进行的多种显微操作和处理技术,如 胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞主要方法：用 促性腺激素 处理,使其排出更多的卵子,然后,从输卵管 中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精；其次种方法：从刚 屠宰母畜的卵巢 中采集卵母细胞； 第三种方法是借助超声波探 测仪、腹腔镜等直接从 活体动物的卵巢 中吸取卵母细胞； 采集的卵 母细胞,都要在体外经
16、 人工培育成熟 后,才能与 获能的精子 受精；获能处理；2 精子的采集和获能：在体外受精前,要对精子进行 3 受精：获能的精子和培育成熟的卵细胞在 获能溶液或专用的受精 溶液中培育 等技术；经过处理后获得的胚胎,仍需移植到 雌性动物体内 生完成受精过程；4 胚胎的早期培育：产后代,以满意人类的各种需求；2、动物胚胎发育的基本过程精子与卵子在体外受精后, 应将受精卵移入 发育培育液 中连续培育,以检查 受精状况和受精卵的发育才能；培育液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,仍需添加 维生素、 激素、 氨基酸、 核苷（1）受精场所是母体的输卵管上段 ；酸等养分成分, 以及血清 等物质； 当胚胎发育到
17、相宜的阶段时,可将其取出向 受体移植或冷冻储存；不同动物胚胎移植的时间不同；（2）卵裂期：特点：细胞 有丝 分裂,细胞数量不断增加, 但胚胎的总体体积 牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚 阶段才能进行移植,小鼠、家兔等试验动物可在更早的阶段 移植,人的体外受精胚胎可在816个细胞 阶段移植； 2. 胚胎移植 1 胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其 它方式得到的胚胎, 移植到 同种的、 生理状态相同的 其它雌性动物并不增加,或略有减小；（3）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32 个左右时,胚胎形成致密的细胞的体内,使之连续发育为新个体的技术；其中供应胚胎的个体称为团,形似桑椹；是全
18、能细胞 ；“ 供体”,接受胚胎的个体称为“ 受体”；（供体为 优良 品种,作（4）囊胚：为受体的雌性动物应为常见或存量大 的品种；）位置：如转基因、 核移植, 或体外受精 等任何一项胚胎工程技 术所生产的胚胎, 都必需经过 胚胎移植技术 才能获得后代, 是 胚胎特点：细胞开头显现分化 （该时期细胞的 全能性仍比较高 ）；集合在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团 ,将来发育成胎儿的工程的最终一道“ 工序”；2 胚胎移植的意义： 大大缩短了 供体本身的繁衍周期,充分发挥各种组织；中间的空腔称为囊胚腔 ；雌性优良个体的繁衍才能；（5）原肠胚：特点：有了三胚层 的分化,具有 囊胚腔 和原肠腔 ；3 生
19、理学基础：动物发情排卵后, 同种动物的供、 受体生殖器官的 生理变化是相（二）胚胎干细胞同的 ；这就为供体的胚胎移入受体供应了 相同的生理环境；早期胚胎在肯定时间内处于 游离 状态；这就为 胚胎的收集供应了1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或 EK细胞,来源于 早期胚胎或可能 ；免疫排斥反应 ；这为胚胎在受从原始性腺 中分别出来；受体对移入子宫的外来胚胎不发生体的存活供应了可能；第 3 页,共 4 页_精品资料_ - - - - - - -_归纳总结汇总_ - - - - - - - - - 供体胚胎可与受体子宫建立正常的 生理和组织 联系,但供体胚胎的遗传特性 在孕育过程中不受影响；4 基本程
20、序主要包括：对供、受体的挑选和处理；挑选 遗传特性和生产性能 优秀的供体,有健康的体质和正常繁衍才能 的受体,供体和受体是 同一 物种；注用盐腌制时,留意盐都用量；盐的浓度过低,不足以抑制 微生物生长,可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高,会影响腐 乳的口味； 卤汤酒精含量掌握在 12左右为宜；注酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系；并用激素进行 同期发情处理 ,用促性腺激素 对供体母牛做 超数排卵酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长；处理；酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍；配种或人工授精 ；快,豆腐易腐败,难以成块；对胚胎的收集、 检查、
21、培育或储存 ；配种或输精后第7 天,用特三、留意事项制的 冲卵 装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来 也叫冲卵 ；对胚胎进行 质量检查,此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚 阶段；直接1. 酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发向受体移植或放入196的液氮 中储存；酵；前期发酵所发生的主要变化是毛霉在豆腐（白坯）上的生长对 胚胎 进行移植；发酵的温度为15 18 ,此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的移植后的检查；对受体母牛进行是否妊娠 的检查；生长,而适于毛霉渐渐生长；毛霉生长大约5 d 后使白坯变成毛3. 胚胎分割1 概念：是指采纳机械方法将早期胚胎 切割 2 等份、 4 等份等,坯；
22、前期发酵的作用,一是使豆腐表面有一层菌膜包住,形成腐经移植获得 同卵双胎或多胎 的技术；2 意义：来自同一胚胎的后代具有 相同 的遗传物质,属于 无性 繁 殖；3 材料：发育良好,形状正常的 桑椹胚或囊胚 ；（桑椹胚至囊胚 的发育过程中, 细胞开头分化, 但其全能性仍很高 ,也可用于胚胎 分割；）乳的“ 体”； 二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶,有利于豆腐所含有的蛋白质水解为各种氨基酸；后期发酵主要是 酶与微生物协同参加生化反应的过程；通过腌制并配入各种辅料 （红曲、面曲、酒酿）,使蛋白酶作用缓慢, 促进其他生化反应, 生成腐乳的香气；4 操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时, 要将 内细胞团均等
23、 分割,否就会影响 分割后胚胎的复原和进一步发育；选修 1 课题 1 果酒和果醋的制作一、试验原理1酵母菌的细胞呼吸 酵母菌进行有氧呼吸大量繁衍,表达式为：酶 C 6H 12 O6 +O2CO 2+H2O+ 能量酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,表 达式为：C 6H 12O 6C2H 5OH+CO 2+能量 酶2酵母菌发酵的正确环境 :8 25, pH 最好是弱酸性；3醋酸菌好氧性细菌, 当缺少糖源时和有氧条件下,可将乙醇（酒酶 精）氧化成醋酸；表达式为：C2 H5OHCH3COOH+H 2O；当氧气、糖源都充分时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的正确温度是在 30 35三、留
24、意事项请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用；为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？结合果酒、果醋的制作原理,你认为应当如何使用这个发酵装置？答：充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出 C 的；出料口是用来取样的；排气口要通过一个 长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是 防止空气中微生物的污染；使用该装置制酒时, 应当关闭充气口； 制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气；课题 2 腐乳的制作一、试验原理1参加豆腐发酵的微生物有 青霉、 酵母、曲霉、 毛霉 等多种,其中起主要作用的是 毛霉 ；3. 毛酶等微生物产生的 蛋白酶 能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶 可将脂肪分解成甘油和脂肪酸；二、试验步骤1. 所用豆腐的含水量为70左右,水分过多就腐乳不易成形；第 4 页,共 4 页3. 将平盘放入温度保持在1518 的地方；毛霉逐步生长_精品资料_ - - - - - - -