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1、微生物标本的采集与运送微生物标本的采集与运送检验科检验科2017.9.52017.9.5 在临床微生物检验工作中,标本的正确选择、采集和运送是保证检验质量的重要环节,是实验室工作准确和有效的基本前提。早期、无菌、合格早期、无菌、合格标本本规范化采集范化采集不符合要求不符合要求污染的染的标本本提供重要提供重要临床床感染信息感染信息结果无意果无意义误导临床床常见标本的分类常见标本的分类无菌无菌标本本有菌有菌标本本血液痰液脑脊液咽拭子关节腔积液尿液胸腹水、胆汁粪便其他类别其他类别 一、血液标本的采集一、血液标本的采集1、不明原因的发热(大于不明原因的发热(大于3838或低于或低于3636)2、寒战、
2、休克、僵直3、严重的局部感染(脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等)4、白细胞增多白细胞增多(特别是核左移,未成熟或杆状核)5、粒细胞减少、血小板减少6、皮肤粘膜出血、多器官衰竭等7、CRPCRP、PCTPCT升高升高(一)采集指征(一)采集指征 1、抗生素治疗之前 若已使用抗生素者,应在下次用药前或血药浓度最低时采集标本。2、患者寒战时 3、发热初期或高峰时 超过发热峰值后,病原菌会逐渐被机体免疫系统清除,从而减低检出率。(二)采集时间:(二)采集时间:发热要做血培养,双侧双瓶少漏网;何时采血要记清,寒战前后菌量深;采集前非常关键的一步:非常关键的一步:皮肤和瓶子的消毒特特别提示
3、:提示:1、需氧瓶+厌氧瓶 为 一套 注意:每一套血培养应当从身体的不同部位采集 2、成人:810ml/瓶 儿童:35ml/瓶 婴幼儿:12ml/瓶 注意:采集静脉血 (三)采集血量:(三)采集血量:1、急性感染:分别从两臂采血,每臂采1套。2、急性心内膜炎:在抗生素治疗前1-2h内,于3个不同部位采集3套 3、亚急性心内膜炎,第1天24h内,相隔1h分3个不同部位,连续采集3套血培养标本,若24-48h全部阴性,再采集2-3套血培养标本(四)采集频率(四)采集频率通常通常情况情况 4、对于已进行抗生素治疗的心内膜炎患者,每日采集2套血液标本,连续3天 5、不明原因发热,于发热期内多次采血,如
4、果24h培养为阴性结果,应继续采集2-3套或更多套血培养标本。血循环中的细菌有“暂时性”、“持续性”一过性的菌血症,细菌仅在外周血中持续数秒共生菌、复数菌提高检出率、减少漏检、判断病原为何要多次采血为何要多次采血?采血套数与检出率 J C lin Microbiol.2007;45:3546-3548 标本不够时,先满足需氧瓶(五)采集顺序:(五)采集顺序:需氧瓶厌氧瓶采血试管 1、已采集的血培养标本必须立即送检,2、如不能立即送检,可室温放置,但不超过2小时,不可放冰箱。(六)运送要求:(六)运送要求:取后不能及取后不能及时送,送,常温放置忌冰常温放置忌冰冻。二、尿液标本的采集 1、中段尿
5、2、导管尿(不能取尿袋内的尿液)3、膀胱穿刺尿 常用:中段尿(常用:中段尿(晨尿晨尿或在膀胱内停留或在膀胱内停留4h以上以上的尿液)的尿液)(一)尿标本种类:(一)尿标本种类:1、采集:采样前,应先清洁外阴及尿道口周围,自然排尿,不间停,截留中段尿,置于无菌尿杯中,一般留取10ml左右 2、运送:常温下2小时内送达微生物室,4保存不超过24h (二)中段尿的留取:(二)中段尿的留取:尿液培养要尿液培养要计算,算,清洗外阴留中段;清洗外阴留中段;培养培养长出多种菌,出多种菌,辨清辨清污染重新送。染重新送。三、粪便标本的采集 1、腹泄、大便3次,粪便性状异常,如稀便、水样便、脓血便、血便,可伴恶心
6、、呕吐、食欲不振、发热、腹痛及全身不适等。尽量在用药前采集 2、伤寒患者于发病2周后采集粪便 3、怀疑霍乱时立即采集粪便送检。4、粪便涂片镜检WBC 5个/HP(一)采集指征(一)采集指征 1、自然排便法:自然排便后,挑取脓血、黏液便2-3g作常规性病原菌培养;液状粪便取絮状物2-3ml,直接放入无菌杯内送检。2、直肠拭子法 难以获得粪便、排便困难者及幼儿用此法 (二)采集方法与送检:(二)采集方法与送检:直肠拭子法:将无菌拭子用无菌生理盐水湿润后插入肛门2-4cm,柔和地旋转拭子采集粪便标本。一般不推荐使用拭子做腹泻病菌的培养。3、送检:1小时内送达,志贺菌30分钟内送达 怀疑弧菌,立即送检
7、。大便要取大便要取脓血血处,志志贺沙沙门需关注。需关注。四、呼吸道标本的采集 1、咽拭子采样:患者先用清水漱口,将患者的舌头向外轻拉,用无菌拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧(肉眼可见的红肿或白膜部位)反复涂抹数次,拭子要避免接触到口腔和舌黏膜。2、鼻拭子采样:用无菌拭子伸入鼻腔至少深1cm在鼻内病灶边缘部分,先用力旋转拭子,停留10-15s后取出,插入无菌管中。3、口腔溃疡:先用一个拭子拭去溃疡或创面浅表分泌物,再用第二个拭子采集溃疡边缘或底部的标本。(一)上呼吸道标本:(一)上呼吸道标本:咳出痰、诱导痰、吸出痰、支气管肺泡灌洗液、支气管保护性毛刷、肺穿刺组织 下面仅介绍:咳出痰 1、抗生素
8、使用前,一般以晨痰为好。(二)下呼吸道标本(二)下呼吸道标本 2、告知患者在留痰前,先用冷开水或无菌生理盐水反复漱口,然后再用力咳出深处痰液(可轻拍背部),吐入无菌痰杯中送检。3、常规细菌培养标本两小时内送检,疑为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌时立即送检注意:标本内切勿混入唾液及鼻咽分泌物 4、合格的痰液标本:平均每低倍视野鳞状上皮细胞数 10个 对于不合格痰标本,检验科应在拒收系统中注明原因,并且打电话临床科室,重新采样痰液培养痰液培养杂菌多,菌多,清晨漱口要深咯,清晨漱口要深咯,涂片合格涂片合格继续做,做,正常致病必掌握。正常致病必掌握。(一)体液标本包括:心包液、关节液、胸水、腹水、羊膜液、后
9、穹隆等穿刺液(二)容器:可直接注入血培养瓶,以提高阳性率,可同时用需氧和厌氧瓶。(三)标本量:1ml,尽量不使用引流液(四)运送:室温,15分钟内运送至实验室五、体液标本的采集五、体液标本的采集(一)采集时间:使用抗生素前(二)采集方法:采用腰椎穿刺术无菌采集(三)采集量与容器:12ml,直接注入血培养(四)运送:常温下立即送检,一般是15min内送至实验室。若培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时,应35保温送检或床旁接种。六、脑脊液标本的采集六、脑脊液标本的采集 胸水腹水脑脊液,放入血瓶阳性多,条件限制无血瓶,接种平皿亦认可。(一)常用女性生殖道标本:阴道后穹隆、盆腔穿刺液、阴道拭子、子
10、宫颈拭子、前庭大腺吸出液(二)常用男性生殖道标本:阴囊穿刺液、前列腺按摩液、水疱液、尿道分泌物 以上标本均由专科医师采集,2小时内送检七、生殖道标本七、生殖道标本 1、结膜标本:湿拭子,滚动采集 2、眼角膜标本:在麻醉下,刮取 3、耳部拭子:外耳炎 4、穿刺液:鼓膜穿孔,穿刺抽取深部分泌物 以上标本由专科医师采集,2小时内送检,室温保存不超过24小时。八、眼耳标本八、眼耳标本(一)标本采集 1、开放性伤口:先以无菌生理盐水或75%乙醇冲洗擦去表面渗出物,用拭子采集深部伤口或溃疡基底部分泌物,或剪取深部病损边缘组织。烧伤创面,多部位取样。九、伤口、脓液及组织标本九、伤口、脓液及组织标本 2、封闭
11、性脓肿:消毒脓肿局部皮肤或黏膜表面后,用注射器穿刺抽取脓液3-10ml注入无菌试管内送检。3、组织:经穿刺或手术活检获得标本,穿刺组织可放入1.5ml无菌离心管中;4、体表伤口可接收细菌培养的条件:鳞状上皮细胞数10个/低倍视野,并有多形核白细胞存在(二)送检:立即送检,建议不超过1小时送达(一)导管头:采用无菌性技术,获取插入患者体内最远端的导管段约5cm,置于无菌容器送检;不能置于生理盐水或转运培养基中运送。但,单独导管头培养意义不大,通常送检导管头应同时送外周血培养。十、导管标本十、导管标本(二)血液标本 对怀疑导管相关血流感染,又需保留导管的患者:1份通过外周静脉采集 采集2份血液标本 1份通过导管采集。正确足量、正确足量、及时送及时送检检 小小 结细菌培养鉴定难,标本留取是关键,医护人员齐挑担,合理用药百姓赞。