分子生物学 科大重点知识点cgqc.docx

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1、名词解释释基因geene:能够表表达和产产生蛋白白质和RRNA的的DNAA序列,是是决定遗遗传性状状的功能能单位基因组ggenoome:细胞或或生物体体的一套套完整单单倍体的的遗传物物质的总总和基因组文文库(gennomiic llibrraryy):由基因因组DNNA所制制成的基基因文库库基因文库库(Genne llibrraryy)是来自自某生物物的不同同DNAA序列的的总集这这些序列列都已被被克隆进进了载体体以便于于纯化贮贮存与分分析。cDNAA文库(cDNNA llibrraryy):用来来自表达达目的基基因的细细胞或组组织的mmRNAA作为来来源构建建的文库库。cDDNA文文库不同同

2、于基因因组文库库,被克克隆DNNA是从从cRNNA反转转录来源源的DNNA。ccDNAA组成特特点是其其中不含含有内含含子和其其他调控控序列。Sd序列列(Shiine-Dallgarrno seqquennce):原核核生物mmRNAA起始密密码子上上游8-13个个核苷酸酸处的保保守序列列,可与与核糖体体小亚基基中的116srrRNAA的3-端附近近的互补补序列配配对,称称为核糖糖体结合合位点,又又叫sdd序列。多聚核糖糖体(Pollyriibossomees):在蛋白白质合成成过程中中,同一条条mRNNA分子子能够同同多个核核糖体结结合,同同时合成成若干条条蛋白质质多肽链链,结合合在同一一条

3、mRRNA上上的核糖糖体就称称为多聚聚核糖体体。tRNAA负载(tRNNA ccharrginng): TThe amiino aciid iis jjoinnd tto tthe tRNNA bby aaminnoaccyl-tRNNA ssyntthettasees tto bbacoome chaargeed ttRNAA. TThiss prroceess is callledd tRRNA chaargiing.操纵子(Operon):是原核生物基因表达的单位,它包括被协同调节的基因和被调节基因的产物所识别的调控原件,在细菌中,为一个代谢途经所需要的几种酶的结构基因,可沿DNA直线排

4、列在一起,并受一个共同的启动基因和操纵基因的控制,把这样的启动基因、操纵基因和结构基因可以看做一个单位,称为操纵子。启动子(Promoter):DNA上的一个特定位点,RNA聚合酶在此和DNA结合,并由此开始转录过程。基因表达达(Geene exppresssioon):是指生生物基因因组中结结构基因因所携带带的遗传传信息经经过转录录、翻译译等一系系列过程程,合成成特定的的蛋白质质,进而而发挥其其特定的的生物学学功能和和生物学学效应的的全过程程。基因表达达(Geene exppresssinng):is thee prroceess froom DDNA to prooteiin ccontt

5、ainningg trransscriiptiion andd trransslattionn.冈崎片段段(okkazaaki fraagmeent):DNAA半不连连续性复复制复制制过程中中至少有有一条链链首先合合成较短短的片段段,然后后再用连连接酶连连接成大大分子DDNA。这这些片段段称冈崎崎片段。在DNA不连续复制过程中,沿着后随链的模板链合成的新DNA片段,其长度在真核与原核生物当中存在差别,真核生物冈崎片段长度约为100200核苷酸残基,而原核生物的为10002000核苷酸残基。增强子(Enhhanccerss):能从启启动子的的上游或或下游数数千个bbp处来来激活转转录的序序列原件

6、件,是通过过启动子子来增强强基因转转录的一一种远端端基因表表达调控控元件,长长约为550bpp,多为为重复序序列,具具有组织织细胞特特异性,往往往优先先或只能能在某种种类型的的细胞中中表现功功能。弱化子(Atttenuuatoor):是一种种位于ttrpEE基因之之前的前前导区的的转录终终止子。该该序列由由特殊的的RNAA发卡环环组成,发发卡环之之后还有有8个连连续的尿尿嘧啶碱碱基,mmRNAA的合成成通常就就在此处处停止。一个不依赖因子的终止子区域,能够导致色氨酸RNA合成提前终止的一段序列。回文序列列(Pallinddromme):双链链中每一一条链均均按5-到3-方向阅阅读,其其序列相相

7、同。RNA加加工(RRNA proocesssinng):对初生生转录物物进行加加工的总总称。终终止结构构:steem-lloopp和haiirpiin.全酶(HHolooenzzymee):核心酶酶加上因子所所组成的的完整的的酶。顺式作用用元件(ciss-eleemennt):对某一一个基因因起调控控决定作作用,但但是不转转录,是指那那些与结结构基因因表达调调控相关关、能够够被基因因调控蛋蛋白特异异性识别别和结合合的特异异DNAA序列。包包括启动动子、上上游启动动子元件件、增强强子、加加尾信号号和一些些反应元元件等。反式作用用元件:是指真真核细胞胞内含有有的大量量可以通通过直接接或间接接结合

8、顺顺式作用用元件而而调节基基因转录录活性的的蛋白质质因子。反式作用元件与DNA相互作用且在转录过称中起作用。上游调控控元件(UREE):位于于启动子子上游1100-2000bp范范围内,可可以极大大地提高高低水平平转录活活性的序序列。DNA克克隆(DDNA clooninng):应用酶酶学的方方法,在在体外将将各种来来源的遗遗传物质质同源源或异源源、原核核或真核核、天然然或人工工的DNNA与载载体DNNA相结结合成一一具有自自我复制制能力的的DNAA分子复制子子,继而而通过转转化或转转染宿主主细胞、筛筛选出含含有目的的基因的的转化子子细胞,再再进行扩扩增、提提取获得得大量同同一DNNA分子子,

9、即DDNA克克隆。限制性内内切酶(resstriictiion enddonuucleeasee):一种在在特殊核核甘酸序序列处水水解双链链DNAA的内切切酶。减色性/效应hhypoochrromiicitty;hyppochhrommic efffectt核酸碱碱基的消消光系数数与它所所处的环环境有关关。单一一的核苷苷酸的吸吸收值比比RNAA和单链链DNAA的吸收收值都大大单链DDNA又又比双链链DNAA大。这这种双链链DNAA相对于于单链DDNA吸吸收值减减小的现现象就称称为减色色效应。CpG甲甲基化:哺乳动动物中一一种可能能传递信信号使得得表达基基因位点点处的染染色体保保持适当当的包装装

10、水平的的重要化化学修饰饰是序列列5-CGG-3中对胞胞嘧啶CC-5的的甲基化化即通常常所称的的CpGG甲基化化。亚克隆(Subcloning):将已克隆的细胞或在载体中的DNA进行再次克隆。增色性/效应hhypeerchhrommiciity;hyppercchroomicc efffecct由于于DNAA变性引引起的光光吸收增增加称增增色效应应,也就就是变性性后 DDNA 溶液的的紫外吸吸收作用用增强的的效应。DNA变变性(dennatuurattionn) 指核核酸双螺螺旋区的的氢键断断裂,变变成单链链,不涉涉及共价价键的断断裂。DNA复复性(renaaturratiion) 变性性DNA

11、A在适当当条件下下又可以以使两条条彼此分分离开的的链重新新缔合为为双螺旋旋结构。解链温度度(melltinng ttempperaaturre):升高温温度时使使DNAA和RNNA变化化,RNNA随温温度的升升高逐渐渐变性,双双链DNNA在某某一确定定的温度度“溶解”为单链链DNAA,这一一温度为为Tm。染色质(chrromaatinn)是细胞胞核内可可以被碱碱性染料料着色的的一类非非定形物物质。染色体(chrromoosomme)是细胞胞在有丝丝(减数数分裂)时时遗传物物质存在在的特定定形式,是是间期细细胞染色色质结构构紧密组组装的结结果。着丝粒(cenntroomerre)染色体体中将两两

12、条姐妹妹染色单单体结合合起来的的区域。由无编码意义的高度重复DNA序列组成,是动粒的形成部位。端粒(tteloomerre)以线性性染色体体形式存存在的真真核基因因组DNNA末端端都有一一种特殊殊的结构构叫端粒粒。该结结构是一一段DNNA序列列和蛋白白质形成成的一种种复合体体,仅在在真核细细胞染色色体末端端存在。是染色体的末端部分,这一特殊结构区域对于线型染色体的结构和稳定起重要作用。常染色质质(eucchroomattin)中期染染色体比比较松散散的区域域,包括括无活性性的300nm纤纤丝区和和转录活活跃区。异染色质质(hetteroochrromaatinn)中期染染色质的的一部分分,结构

13、构比较紧紧密,无无转录活活性。DNasseI超超敏性(DNaaseII hyyperrsennsittiviity)染色质质活性区区,或因因结合特特异蛋白白或因进进行转录录而被松松散的330nmm纤丝的的区域,其其特征是是对DNAsseI的的高度敏敏感性。复制子(reppliccon)是DNNA复制制是从一一个DNNA复制制起点开开始,最最终由这这个起点点起始的的复制叉叉完成的的片段。DDNA 中发生生复制的的独立单单位称为为复制子子。每个个复制子子使用一一次,并并且在每每个细胞胞周期中中只有一一次。复复制子中中含有复复制需要要的控制制元件。在在复制的的起始位位点具有有原点,在在复制的的终止位

14、位点具有有终点。复制子起起点(ooriggin)是DNNA链上上具有独独特的具具有起始始DNAA复制功功能的碱碱基顺序序。复制叉(reppliccatiion forrk)DNAA复制时时在DNNA链上上通过解解旋、解解链和SSSB蛋蛋白的结结合等过过程形成成的Y字字型结构构称为复复制叉。在在复制叉叉处作为为模板的的双链DDNA解解旋,同同时合成成新的DDNA链链。编码链(coddingg sttrannd)双链DNNA中,不不能进行行转录的那那一条DDNA链链,该链链的核苷酸酸序列与与转录生生成的RRNA的的序列一一致(在在RNAA中是以以U取代代了DNNA中的的T),又又称有义义链(sse

15、nsse sstraand)。RNA聚聚合酶(RNAA poolymmeraase)以一条条DNAA链或RRNA为为模板催催化由核核苷-55-三三磷酸合合成RNNA的酶酶。是催催化以DDNA为为模板(ttempplatte)、三三磷酸核核糖核苷苷为底物物、通过过磷酸二二酯键而而聚合的的合成RRNA的的酶。因因为在细细胞内与与基因DDNA的的遗传信信息转录录为RNNA有关关,所以以也称转转录酶。转录单元元(trransscriiptiion uniit)转转录单元元是一段段以启动动子开始始至终止止子结束束的DNNA序列列。核酸(nnuclleicc accid)由核苷苷酸或脱脱氧核苷苷酸通过过3

16、,55-磷磷酸二酯酯键连接接而成的的一类生生物大分分子。具具有非常常重要的的生物功功能,主主要是贮贮存遗传传信息和和传递遗遗传信息息。包括括核糖核核酸(RRNA)和脱氧氧核糖核核酸(DDNA)两类。核酶(RRiboozymme)是具有有催化功功能的RRNA分分子,是是生物催催化剂。核核酶又称称核酸类类酶、酶酶RNAA、 核核酶类酶酶RNAA。整个个生化反反应可由由RNAA酶或核核酶催化化,这种种具有催催化功能能的RNNA可以以剪切自自身或其其他的RRNA分分子,或或者完成成连接或或自身剪剪切反应应。核酶酶可以独独自进行行催化,但但在体内内通常与与蛋白结结合在一一起工作作,这将将提高它它们的催催

17、化活力力。可以以作为基基因表达达和病毒毒复制的的抑制剂剂。RNA编编辑(RNAA edditiing)RNAA加工的的一种形形式,是是通过改改变、插插入或删删除初生生转录物物特定部部位的残残基而改改变其中中的核苷苷酸序列列。RNNA编辑辑会涉及及向导RRNA(RRNA编编辑的模模板)。核糖核酸酸酶P( RNNasee P)是一种种核糖核核蛋白, 含有有一个单单链RNNA分子子, 长长度为3375个个碱基, 结合一一个相对对分子质质量为220kDDa的多多肽(1119个个氨基酸酸残基)。RNNA具有有催化切切割tRRNA的的能力, 蛋白白质则起起间接的的作用,可能是是维持RRNA结结构的稳稳定。

18、该该酶广泛泛存在于于原核生生物和真核生生物(核仁、叶绿体体和线粒体体)中,也也参与核核糖体RRNA的的加工。遗传密码码(gennetiic ccodee)包含在在脱氧核核糖核酸酸或核糖糖核酸核核苷酸序序列中的的遗传信信息。它它决定蛋蛋白质中中的氨基基酸排列列顺序,由由3个连连续的核核苷酸组组成的密密码子所所构成,因而决决定蛋白白质的化化学构成成和生物物学功能能。核糖体结结合位点点(ribbosoome binndinng ssitee)是原核核生物mmRNAA起始密密码子上上游的一一段序列列它能够够与166SrRRNA的的3端附近近的互补补序列配配对,对对核糖体体进行定定位以便便起始蛋蛋白质的

19、的合成。核小体(nuccleoosomme)染色体体结构的的基本单单位,由由DNAA和组蛋蛋白构成成。蛋白质定定位(pprotteinn taargeetinng)蛋蛋白质中中某些短短肽序列列可决定定蛋白质质的细胞胞定位,如细胞核、线粒体或叶绿体。分泌蛋白的信号序列导致执行翻译的核糖体某些使得核糖体停泊在膜上的因子的结合,并将合成蛋白转至膜外通常信号序列随后被信号肽酶切掉。蛋白质修修饰(pprotteinn moodifficaatioon)新新生多肽肽的最常常见的加加工是被被切割及及化学修修饰。信信号肽的的切除、多多蛋白成成熟片段段的释放放、中间间肽的切切除以及及N端和和C端的的修剪均均需要

20、进进行切割割。除66种氨基基酸侧链链外,所所有氨基基酸侧链链都可以以进行多多种化学学修饰。通通常磷酸酸化调控控着蛋白白质活性性。多蛋白(pollyprroteeinss)单一一翻译产产物被切切割形成成两个或或多个独独立蛋白白,则被被称为多多蛋白,许许多病毒毒产生多多蛋白。小核RNNA(ssnRNNA):是一类类称为小小核核蛋蛋白体复复合体(snRRNP)的组成成成分,功功能是在在hnRRNA成成熟转变变为mRRNA的的过程中中,参与与RNAA的剪接接,运输输。souttherrn bblott:基因是是DNAA分子,如如果基因因拷贝数数发生变变化(增增多或减减少),但但基因序序列没有有改变,就

21、就可以根根据基因因序列合合成探针针,利用用同源互互补序列列可以退退火形成成异源双双链的原原理,探探测染色色体上能能与探针针结合的的DNAA序列。norttherrn bblott:是最最早用于于定性分分析RNNA的方方法,但但当对不不同样本本总RNNA或mmRNAA定量后后再进行行杂交反反应时,也也可以相相对定量量分析特特定RNNA。蛋白激酶酶prooteiin kkinaase:是指能能够将磷磷酸集团团从磷酸酸供体分分子转移移到底物物蛋白的的氨基酸酸受体上上的一大大类酶。蛋白磷酸酸酶protteinn phhospphattasee:是具具有催化化已经磷磷酸化的的蛋白质质分子发发生去磷磷酸化

22、反反应的一一类酶分分子,与与蛋白激激酶相对对应存在在,共同同构成了了磷酸化化和去磷磷酸化这这一重要要的蛋白白质活性性的开关关系统退火annneaalinng:指指将温度度降至引引物的TTM值左左右或以以下,引引物与DDNA摸摸板互补补区域结结合形成成杂交链链。开放阅读读框(OORF):是基因因序列的的一部分分,包含含一段可可以编码码蛋白的的碱基序序列,不不能被终终止子打打断。编编码一个个蛋白质质的外显显子连接接成为一一个连续续的ORRF。当当一个新新基因被被识别,其其DNAA序列被被解读问答填空空1. desccribbe tthe priinciiplee off PCCR.PPCR is

23、to be useed tto aamollifyy a seqquennce of DNAA ussingg a paiir oof pprimmerss eaach commpleemenntarry tto oone endd off thhe DDNA tarrgett seequeencee.Denaaturratiion: thhe ttargget DNAA iss seeparrateed iintoo twwo sstraandss byy haaetiing to 95C.Primmer annneallingg: tthe temmperratuure is redduc

24、eed tto aarouund 55C tto aalloow tthe priimerrs tto aanneeal.Polyymerrizaatioon: thee teempeeratturee iss inncreeaseed tto 772C ffor opttimaal ppolyymerrizaatioon sstepp whhichh usses up dNTTPs andd reeuirred Mg22+.2. 简述蓝白白斑筛选选机制某某些质粒粒带有大大肠杆菌菌的半乳乳糖苷酶酶基因片片段,在在半乳糖糖苷酶基基因的基基因区外外又另外外引入了了一段含含多种单单一限制制酶位点点的

25、DNNA序列列。这些些位点上上如果没没有克隆隆外源性性DNAA片段,在在质粒被被导入llac-的大肠肠杆菌后后,质粒粒携带的的半乳糖糖苷酶基基因将正正常表达达,与大大肠杆菌菌的半乳乳糖苷酶酶基因互互补,产产生有活活性的半半乳糖苷苷酶,加加入人工工底物XX-gaal和诱诱导剂IIPTGG后,出出现蓝色色的菌落落。如果果在多克克隆位点点上插入入外源DDNA片片段,将将使laac ZZ基因灭灭活,不不能生成成半乳糖糖苷酶,结结果菌落落出现白白色。由由于这种种颜色标标志,重重组克隆隆和非重重组克隆隆的区分分一目了了然。3. 简述质粒粒的特性性。(11).AAutoonommoussly repplic

26、catiing inddepeendeent of hossts ggenoome.(2).Eaasilly tto bbe iisollateed ffromm thhe hhostt ceell.(3).Seeleccttiive makkerss: SSeleectiion of cellls.(4).Coontaainss a mulltipple clooninng ssitee.(55).AAn eexprresssingg veectoor cconttainn prromooterr annd ttermminaatorr foor RRNA traansccripptioon

27、, inttactt ORRF aand RBSS arre rrequuireed ffor traansllatiion.4. 何为DNNA半保保留复制制?(ssemii-coonseervaativve rrepllicaatioon)DDNA在在复制过过程中碱碱基间的的氢键首首先断裂裂,双螺螺旋解旋旋并被分分开,每每条链分分别作为为模板合合成新链链,产生生互补的的两条链链,这样样新形成成的DNNA分子子与原来来DNAA分子的的碱基顺顺序完全全一样,因此,每个子子代分子子的一条条链来自自亲DNNA,另另一条链链则是新新合成的的,所以以这种复复制方式式被称为为DNAA的半保保留复制制.5.

28、 p1:55-GGGATCCCT ATGG ACCC CCCU CAUU AAAC GGGC GACC-3 PP2:55-CTTGCAAG TTTA CTTT GGGC AAGC TGTT ACCT AATC-36. why do DNAA orr RNNA hhas thee abbsorrbannce at 2600nm?核酸因因含有共共轭的苯苯环而吸吸收紫外外线,糖糖-磷酸酸骨架对对光吸收收的贡献献并不明明显。7. 真核生物物与原核核生物染染色体的的结构8. Pleaase desscriibe thee paackaage proocesss oof eeukaaryooticc ch

29、hrommosoome.真核生生物染色色体压缩缩过程。9. 描述真核核生物基基因组复杂性性非编码DDNA:真核生生物细胞胞的大部部分DNNA并不不编码蛋蛋白质,大大部分基基因含有有较长的的内含子子序列,基基因或基基因簇被被大段未未知功能能的序列列所分割割。复性动力力学:这这是根据据序列的的拷贝数数不同在在基因组组DNAA复性过过程中的的复性数数据不同同的原理理,来识识别不同同种类的的重复序序列DNNA的一一种技术术。单一序列列DNAA:复性性最慢的的DNAA组分就就是单一一序列DDNA,一一般由单单一拷贝贝基因或或重复仅仅数次的的基因组组成。串联基因因簇:基基因组中中串联重重复数百百次的某某些

30、基因因或基因因簇区域域构成中中度重复复DNAA区段。分散重复复DNAA:中度度重复DDNA中中的大部部分由数数百碱基基对或11-50000碱碱基对的的DNAA序列构构成,每每个序列列重复11000000多多次,并并分散于于整个基基因组中中。卫星DNNA:多多位于着着丝粒附附近,由由大量串串联重复复短序列列组成。遗传多态态性:基基因或染染色体基基因座上上的碱基基变化能能使该基基因座产产生多种种形式。10. 半保留复复制机制制(seemi-connserrvattionn)核心在于于DNAA双螺旋旋中的两两条链都都携带相相同的信信息,它它们的碱碱基序列列是互补补的。这这样的复复制中两两条亲代代链分

31、开开,分别别作为模模板指导导酶催化化的新生生互补子子链的合合成,并并遵循标标准的碱碱基配对对原则,两两条新生生双链在在细胞分分裂时分分别进入入两个子子细胞。11. 半不连续续复制机机制(ssemii-diiscoontiinuoous)由于DNNA的两两条链是是反向平平行的且且DNAA复制只只能由55-3方向进进行,因因此每一一个复制制叉中前前导链由由5-3方向合合成是连连续的,滞滞后链是是以冈崎崎片段的的形式由由5-3方向合合成,是是不连续续的,最最后再由由DNAA连接酶酶将各个个片段连连接起来来,这种种复制方方式称为为半不连连续复制制。这种机制制的存在在是因为为DNAA只能由由5-3方向合

32、合成。12. 阐述细菌菌DNAA复制模模式起始:复复制是通通过起始始的速率率来调控控的,在在E.ccolii的复制制起始点点oriic处的的起始涉涉及到在在起始蛋蛋白复合合体处的的DNAA的缠绕绕,以及及在富含含AT序序列处双双链的解解旋,然然后解旋旋酶DnnaB结结合上去去为复制制而延伸伸单链区区域,DDnaAA酶的含含量与生生长速率率相关。解旋:亲亲本链DDNA被被DNAA解旋酶酶及单链链结合蛋蛋白作用用而解旋旋,产生生的正超超螺旋被被拓扑异异构酶即即DNAA解旋酶酶所释放放,旋转转酶是抗抗生素作作用的靶靶目标。延伸:移移动着的的引发体体在随后后链上合合成多个个引物,DDNA聚聚合酶III

33、I全全酶的二二聚体延延伸前导导链及后后随链,亚基聚合DNA,亚基校正新生DNA分子,DNA聚合酶I的5-3外切核酸酶活性切去后随链上的RNA引物,聚合酶同时用DNA填补上DNA缺口中,然后DNA连接酶将后随链上的冈崎片段连成一体。终止与分分离:EE.cooli的的两个复复制叉在在与复制制起始点点成1880度的的复制终终点相遇遇,相互互连锁的的子链在在DNAA拓扑异异构酶的的作用下下相分离离。真核生物物的DNNA复制制:起始点点与起始始:在SS期的不不同时刻刻大约有有20-50个个起始点点被激活活;复制制叉:染染色质解解组装以以复制DDNA使使真核生生物复制制叉移动动减慢,并并在后随随链上产产生

34、小片片段;核核基质:由不溶溶性蛋白白纤维构构成的蛋蛋白质支支架在空空间上控控制复制制;端粒粒的复制制:13. 阐述真核核生物端端粒的复复制过程程滞后链55端的RRNA引引物被切切除后不不能填补补上DNNA,使使另一条条链的33端突出出于滞后后链的55端,因因此需要要在端粒粒酶的作作用下完完成真核核生物染染色体末末端的复复制。端端粒酶中中含有一一段DNNA分子子,其部部分序列列与3端重复复序列互互补以该该分子为为模板,通通过反复复延伸与与易位反反复地将将重复片片段加到到突出的的3端上,而而互补链链则像滞滞后链那那样复制制,最后后留下33端出端端。14. DNA复复制的忠忠实性从从哪些方方面体现现

35、出来DNA复复制的高高精度依依赖于模模板链和和进入核核苷酸在在DNAA聚合酶酶的作用用位点的的正确配配对。33-5外切核核酸酶对对拷入碱碱基的校校正。错错配修复复。15. DNA修修复机制制有哪些些?光活化作作用(pphottoreeacttivaatioon) 烷基转转移酶(AAlkyyltrranssferrasee)切割修复复(exxisiion reppairr) 错配配修复(mmismmatcch rrepaair)遗传性的的修复缺缺陷(hhereedittaryy reepaiir ddefeectss)16. 原核生物物转录过过程起始:RRNA聚聚合酶是是负责转转录的酶酶,它结结

36、合到被被称为启启动子的的特定DDNA序序列上以以起始RRNA的的合成。这这些序列列位于蛋蛋白质偏偏码区的的上游(5端)含有一些短而保守的DNA序列,在不同启动子中这些序列是相同的,RNA聚合酶结合到双链DNA的启动子序列上,引起DNA局部解旋。延伸:RRNA聚聚合酶沿沿着DNNA链移移动,顺顺次合成成RNAA链,DDNA在在移动的的聚合酶酶抵达之之前解旋旋,在其其经过之之后又恢恢复成双双螺旋。终止:RRNA聚聚合酶识识别终止止子,导导致不再再有新的的核苷酸酸插入,该该序列通通常是发发夹结构构。17. Sigmma()faactoor(因子)的的功能因子是是原核生生物RNNA聚合合酶全酶酶的一个

37、个亚基,是是聚合酶酶的别构构效应物物,帮助助聚合酶酶专一性性识别并并结合模模板链上上的启动动子,起起始基因因转录。作用:与因子的结合使RNA聚合酶由核心酶转变为全酶,因子在启动子识别中起关键作用,但对转录延伸并不需要。因子是通过将核心酶对非特异序列的亲和力降低10000倍,同时增加其对启动子的亲和力来帮助启动子识别的。1启动子识别 2热休克 3 枯草杆菌的孢子形成 噬菌体因子18. 乳酸操纵纵子(LLac.opeeronn)的结构构thee sttruccturre oof LLac opeeronn.结构:含含LaccZ、LLacYY、LaacA三三个结构构基因,LLacZZ编码-半乳乳糖苷

38、酶酶,LaacY编编码半乳乳糖苷透透性酶,LLacAA编码硫硫代半乳乳糖苷乙乙酰转移移酶,三三个结构构基因紧紧临,由由同一个个转录单单元LaacZYYA编码码,在它它们上游游有一个个启动子子Plaac;在在Plaac与LLacZZ之间有有一个调调控原件件Olaac,位位于Pllac55端的-5至221之间间,可与与乳糖阻阻抑物结结合,当当二者结结合时,转转录被抑抑制;在在Plaac上游游有一个个独立的的调节基基因LaacI,它它可编码码出乳糖糖阻抑物物;诱导导物与阻阻遏物结结合,改改变其构构象,使使之不能能与调控控元件结结合,从从而激发发LaccmRNNA的合合成。19. How aree t

39、hhe LLacZZYA gennes reggulaatedd ?调控:11.本底底水平表表达 当当缺少诱诱导物时时,乳糖糖阻抑物物结合在在OLaac上,聚聚合酶结结合在PPLacc上,阻阻抑物的的结合增增加了聚聚合酶与与PLaac的亲亲和力,但但同时阻阻碍了LLacZZYA转转录的进进行,只只有很低低的转录录水平。2.负调调控 当当乳糖存存在时,细细胞本身身所含的的少量-半乳乳糖苷酶酶使其转转化为异异乳糖作作为诱导导物,结结合到乳乳糖阻遏遏物上引引起其构构象变化化,降低低其对OOLacc的亲和和力从而而脱离,聚聚合酶开开始LaacZYYA的转转录,加加入乳糖糖或合成成诱导物物如IPPTG都

40、都可以使使转录进进行,若若将诱导导物清除除则会导导致转录录立即终终止。3.正调调控 PPlacc是一个个弱启动动子,需需特定的的激活蛋蛋白即CCRP的的活化,且且CRPP要与CCAMPP结合形形成CRRP-CCAMPP复合体体才能结结合到紧紧邻的RRNAPPol上上游的PPlacc上,CCRP结结合后引引起DNNA发生生90度度弯曲,增增强RNNAPool与启启动子结结合,使使转录提提高500倍,若若葡萄糖糖存在,会会降低CCAMPP水平,CCRP以以自身二二聚体形形态不能能与DNNA结合合,若葡葡萄糖不不存在,CCAMPP水平升升高,CCRP-CAMMP与DDNA结结合,提提高转录录水平。2

41、0. The reggulaatioon oof TTrp opeeronn ?结构:含含trppE、ttrpDD、trrpC、ttrpBB、trrpA五五个结构构基因,编编码一个个转录单单元;结结构基因因上游至至trppE的基基因依次次为启动动子Pttrp、调调控元件件Otrrp及前前导序列列trppL,PPtrpp为DNNAPool结合合位点,OOtrpp为阻抑抑物复合合体结合合位点,ttrpLL末端含含弱化子子序列,弱弱化子是是不依赖赖于p因因子的终终止子区区域;在在Ptrrp的不不相邻的的上游序序列有ttrpRR基因,RRtrpp可编码码出trrp阻抑抑物,阻阻抑物要要与trrp结合合

42、才能有有与Ottrp结结合的活活性,其其与Ottrp结结合后,RRNAPPol不不能与PPlacc结合,阻阻碍转录录发生。调控:阻阻抑物(粗粗调作用用):trppR编码码色氨酸酸阻抑物物Atrrp存在在时与阻阻抑物结结合形成成复合物物,与OOtrpp结合起起阻抑作作用,不不含trrp时,阻阻抑物不不能结合合到Ottrp上上,不起起阻抑作作用。衰衰减子(细细调作用用):ttrp高高时,核核糖体在在色氨酸酸密码处处插入ttrp,前前导肽顺顺利合成成,封闭闭了序列列2,33:4弱弱化了发发夹形成成,转录录终止,只只有1440bpp转录物物合成。Trp低时,核糖体停滞在trp密码处,2:3配对,不形成

43、3:4弱化子发夹结构,转录继续。21. 三种RNNA聚合合酶性质质及功能能RNA聚聚合酶II对-鹅鹅膏蕈碱碱不敏感感转录大部部分rRRNA的的基因存在于核核仁RNA聚聚合酶III非常敏感感转录所有有的编码码基因和和一些ssnRNNA核质RNA聚聚合酶IIII中度tRNAA、5ssrRNNA、VV6SnnRNAA核质22. 增强子的的功能及及特点功能:增增强转录录活性 特点:赋予其其相连基基因从正正确的起起始位点点的强转转录活性性;不管管位于其其连接的的基因的的上游或或下游任任一方向向上均可可激活转转录;无无论是上上游还是是下游,可可在远离离起始位位点1kkb以上上发挥作作用;优优先激活活两个串

44、串珠的启启动子中中距离最最近的有有一个。23. 转录因子子的结构构域特征征转录因子子结构域域特点:激活结结构域 DNNA结合合结构域域Bindd sppeciificcallly tto ssomee DNNA ssitees. acttivaate or reppresss ttrannscrripttionn.24. DNA binndinng ddomaain(DNAA结合性性结构域域):heliix-ttum-hellix;thee ziinc finngerr doomaiin;tthe bassic dommainn25. RNA加加工的一一般方式式核糖酶剪剪切核苷苷酸向5或或3端

45、添加加核苷酸酸对核苷酸酸碱基或或糖苷的的修饰26. 请叙述真真核生物物mRNNA加工工过程5端加加帽:3端剪剪切与加加尾:剪接:27. 真核生物物mRNNA可变变加工的的方式有有哪些Difffereent polly(AA)sittesdiffferrentt paatteernss off sppliccinggAlteernaativve ppolyy(A) siitessallterrnattivee sppliccingg 28. 简述tRRNA二二级结构构的特征征具有三叶叶草结构构模型,显显示出由由于不同同区域的的碱基配配对而形形成的四四个茎三三个环。5与33形成不不带环的的氨基酸酸

46、接受臂臂,接受受活化氨氨基酸。二氢嘧啶啶环(DD-looop):与氨甲甲酰tRRNA合合成酶的的结合有有关。反密码子子可以识识别mRRNA中中的密码码子。额外环是是分类的的指标。与核糖体体的结合合有关。29. How doees tthe amiino aciid aattaach to tRNNA ?AMP连连接到氨氨基酸的的羟基上上,形成成称为氨氨酰腺苷苷酸高能能中间体体,释放放出的焦焦磷酸水水解得到到两分子子的无机机磷酸,驱驱动反应应继续进进行。氨氨酰腺苷苷酸与适适合的空空载tRRNA作作用形成成氨酸ttRNAA和AMMP。30. 论述原核核生物蛋蛋白质合合成过程程31. 比较原核核生物

47、和和真核生生物蛋白白质合成成的异同同32. 遗传密码码子的基基本特点点Whatt iss thhe ppropperttiess off geenettic codde ?每个密码码子三联联体决定定一种氨氨基酸;两种密密码子之之间无任任何核苷苷酸或其其它成分分加以分分离,即即密码子子无逗号号;有简简并性;共644个密码码子,其其中有11个起始始密码子子核终止止密码子子;具有有互通性性,即不不论是病病毒、原原核生物物真核生生物的密密码子含含义都是是相通的的。33. 原核生物物和真核核生物翻翻译水平平的调控控34. 真核与原原核生物物的复制制相同点点与差异异之处?相同点点:复制起起始点都都含有若若干短的的重复序序列的独独特DNNA片段段;这些短短的重复复序列北北多种结结合蛋白白所识别别,这些些蛋白质质在orri位点点上的复复合物对对复制机机构的装装配起着着关键的的作用。复制起始点是富含A-T的DNA序列。有利于双螺旋DNA的解链。差异:真核生物的DNA比原核DNA分子大得多且不裸露,与组蛋白结合成核小体,以染色质结构形式存在;真核的每条染色体有多个复制起始位点,而原核只有一个起始位点;真核染色体在全部复制完成之前各个起始点上不能开始新一轮的复制,受到一种复制的调

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