乳品检验员培训包 高级.docx

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1、天津市“职业培训包”乳品检验员培训包标准包一初级(2018年1月第1版)开发单位:天津职业大学主管单位:天津市人力资源和社会保障局2-2-4掌握结果判定和报告方法与技能2-2.6掌握结果的分析、评价方法2-3 (1)金黄色 葡萄球菌检验 (行业模块)第 一法金黄色葡 萄球菌定性检验2-3-1掌握试剂、培养基的准备及环境的灭菌方法 与技能2-3-1理解GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验(第一法)的全部 内容2-3-2掌握培养基的准备及环境的灭菌知识2-3-2掌握样品的处理、增菌、别离培养技能2-3-3掌握样品制备原理与方法2-3-4掌握金黄色葡萄球菌的别离、鉴定原理、标准检验方法和

2、生化特征2-3-3掌握金黄色葡萄球菌定性检验技能2-3-5掌握金黄色葡萄球菌的菌体形态、菌洛特征、致病性2-3-4掌握结果判定和报告方法与技能2-2-6掌握结果的分析、评价方法2-3 (2)金黄色 葡萄球菌检验 (行业模块)第 二法金黄色葡萄 球菌Baird-Parker 平 板计数2-3-1掌握试剂、培养基的准备及环境的灭菌方法 与技能2-3-1理解GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验(第一法)的全部 内容2-3-2掌握培养基的准备及环境的灭菌知识23-2掌握样品的稀释、接种、别离培养技能2-3-3掌握样品制备原理与方法2-3-4掌握金黄色葡萄球菌的别离、鉴定原理、标准检验方法和

3、生化特征2-3-3掌握典型菌落计数和确认技能2-3-5掌握金黄色葡萄球菌的Baird-Parker平板计数知识2-3-4掌握结果判定和报告方法与技能2-2-6掌握结果的分析、评价方法2-4 (1)阪崎肠 杆菌检验(扩展 模块)第一法 阪崎肠杆菌的检 验2-4-1掌握试剂、培养基的准备及环境的灭菌方法 与技能2-4-1理解GB 4789.40-2010阪崎肠杆菌检验(第一法)的全部内容2-4-2掌握培养基的准备及环境的灭菌知识2-4-2掌握样品样品的增菌、别离培养技能2-4-3掌握样品制备原理与方法2-4-4掌握阪崎肠杆菌的别离、鉴定原理、标准检验方法和生化特征2-4-3掌握阪崎肠杆菌检验技能2

4、-4-5掌握阪崎肠杆菌的生化鉴定知识2-4-4掌握结果判定和报告方法与技能24-6掌握结果的分析、评价方法2-4 (2)阪崎肠 杆菌检验(扩展2-4-1掌握试剂、培养基的准备及环境的灭菌方法 与技能2-4-1理解GB 4789.40-2010阪崎肠杆菌检验(第二法)的全部内容2-4-2掌握培养基的准备及环境的灭菌知识模块)第二法 阪崎肠杆菌的计 数2-4-2掌握样品样品的增菌、别离培养技能2-4-3掌握样品制备原理与方法2-4-4掌握样品的增菌、别离培养方法2-4-3掌握阪崎肠杆菌的计数技能2-4-5掌握阪崎肠杆菌的计数方法2-4-4掌握结果判定和报告方法与技能2-4-6掌握结果的分析、评价方

5、法基本要求职业道 德1-1职业道德基本知识1-1-1道德是调整人与人之间及个人与团体之间关系的行为规范。1-1-2社会主义职业道德基本内容:热爱本职工作,坚定为社会作贡献的信念、刻苦钻研专业知识,增强技能,提高自身素质,遵守国家法律 法规等。1-1-3职业道德的社会作用:调节职业交往中从业人员内部以及从业人员与服务对象间的关系;有助于维护和提高本行业的信誉;促进本行业 的开展;有助于提高全社会道德水平。1-1-4我国职业道德基本规范:爱岗敬业、忠于职守;遵纪守法、老实守信;和陛相处、团结协作;服务群众、奉献社会;勇于竞争、不断创 新。1-2乳品检验工职业守那么:科学求实、公正公平、严守秘密;秉

6、公执法、工作认真、程序规范;遵章守纪、忠于职守、爱岗敬业。1-3相关法律知识(1)食品卫生法;(2)产品质量法;(3)计量法;(4)标准化法。基础知 识2-1实验室平安知识(1)实验室平安操作知识;(2)电工基础知识;(3)实验室用电常识;2-2计量基础知识(1) 法定计量单位的要领和常用量的法定计量单位;(2)测量误差和数据处理2-3乳品检验员高级基本知识(详见上表)2培训标准2.1乳品检验员高级资格单元要素和实作指标适用范围汇总表乳品检验员(TJB6260108)高级资格(3) .I培训包培训标准能力单元要素和实作指标适用范围汇总表职业功能 (模块)工作内容 (能力单元)适用范围实作对象工

7、作标准工具材料场所环境1理化工程 检验1-1 (1)乳品中亚硝酸盐、硝酸盐的测 定(基础模块) 第一法离子色谱法乳制品GB 5009.33-2010食品中亚硝酸盐与硝酸 盐的测定离子色谱仪、天平(感量0.1 mg和1 mg)、净化柱(包 括C18柱、Ag柱和Na柱 或等效柱)、注射器(1.0 mL 和2.5 mL)等普通乳品分 析实验室1-1(2)乳品中亚硝酸盐、硝酸盐的测 定(基础模块)第二法分光光度法乳制品GB 5009.33-2010食品中亚硝酸盐与硝酸 盐的测定分光光度计、天平(感量0.1 mg和1 mg)、分析天平、 恒温干燥箱等普通乳品分 析实验室1-2磷的测定乳制品GB/T 54

8、13.22-2010婴幼儿食品和乳品中磷的测定分析天平、电热板、分光 光度计。普通乳品分 析实验室1-3(1)乳品中氯的测定(扩展模块)乳制品GB/T 5413.24-2010婴幼儿食品和乳品中pH计、电磁搅拌器、滴定普通乳品分第一法电位滴定法氯的测定管、天平(感量0.1 mg和1 mg)等析实验室1-3 (2)乳品中氯的测定(扩展模块) 第二法沉淀滴定法乳制品GB/T 5413.24-2010婴幼儿食品和乳品中 氯的测定天平(感量0.1 mg)、容量 瓶(100 mL)、棕色滴定 管(10 mL)等1-4 (1)乳品中钙、铁、锌、钠、钾、 镁、铜和镒的测定的测定(基础模块) 第一法火焰原子吸

9、收分光光度法乳制品GB/T 5413.21-2010婴幼儿食品和乳品中钙、铁、锌、钠、钾、镁、铜和钵的测定原子吸收分光光度计、空心 阴极灯(钙、铁、锌、钠、 钾、镁、铜、镐)、分析用 钢瓶乙焕气、空气压缩机、 石英地期或瓷母烟、马弗 炉、天平(感量0.1 mg)普通乳品分 析实验室1-4 (2)乳品中钙、铁、锌、钠、钾、 镁、铜和镒的测定的测定(基础模块) 第二法电感耦合等离子体原子发射光 谱法GB/T 5413.21-2010婴幼儿食品和乳品中钙、铁、锌、钠、钾、 镁、铜和镒的测定电感耦合等离子体原子发 射光谱仪、瓷甜摒、马弗炉、 电炉、天平(感量().1 mg)1-5碘的测定(扩展模块)乳

10、制品GB/T 5413.23-2010婴幼儿食品和乳品中 碘的测定天平(感量0.1 mg)、气相 色谱仪(带电子捕获检测 器)普通乳品分 析实验室1-6乳品中3-胡萝卜素的测定(基础模 块)乳制品GB 5413.352010婴幼儿食品和乳品中B-胡萝卜素的测定高效液相色谱仪(带紫外检 测器)、旋转蒸发器、恒温 磁力搅拌器(20 80 )、离心机(转速2 5000转/分钟)、天平(感普通乳品分 析实验室量0.1 mg)、氮吹仪、培养 箱(60 2 )2微生物检 验2-1乳酸菌检验(基础模块)乳制品GB 4789.35-2010乳酸菌检验试管、天平(感量0.1 mg)、 培养基、超净台、恒温培养

11、箱、高压灭菌器、烘箱、显 微镜、移液管普通乳品分 析实验室2-2沙门氏菌检验(基础模块)乳制品GB 4789.4-2010沙门氏菌检验试管、天平(感量0.1 mg)、 培养基、超净台、恒温培养 箱、高压灭菌器、烘箱、显 微镜、移液管、pH计或精 密pH试纸、全自动微生物 生化鉴定系统普通乳品分 析实验室2-3 (1)金黄色葡萄球菌检验(行业模 块)第一法金黄色葡萄球菌定性检验乳制品GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验第 一法恒温培养箱、恒温水浴箱、 天平(感量().1 mg)、培养 基、超净台、高压灭菌器、 烘箱、显微镜、移液管普通乳品分 析实验室2-3 (2)金黄色葡萄球菌检验(

12、行业模 块)第二法金黄色葡萄球菌Baird-Parker 平板计数乳制品GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验恒温培养箱、恒温水浴箱、 天平(感量().1 mg)、培养 基、超净台、高压灭菌器、 烘箱、显微镜、移液管普通乳品分 析实验室2-4(1)阪崎肠杆菌检验(扩展模块)第 一法阪崎肠杆菌的检验乳制品GB 4789.402010阪崎肠杆菌检验恒温培养箱、恒温水浴箱、 天平(感量0.1 mg)、培养普通乳品分 析实验室基、超净台、高压灭菌器、 烘箱、显微镜、移液管、pH 计或精密pH试纸、全自动 微生物生化鉴定系统2-4 (2)阪崎肠杆菌检验(扩展模块)第 二法阪崎肠杆菌的计数乳制品

13、GB 4789.402010阪崎肠杆菌检验恒温培养箱、恒温水浴箱、 天平(感量0.1 mg)、培养 基、超净台、高压灭菌器、 烘箱、显微镜、移液管、川 计或精密pH试纸、全自动 微生物生化鉴定系统普通乳品分 析实验室2. 2高级资格能力单元要素和实作指标细目乳品检验员(TJB6260108)高级资格(3) . I培训标准乳品检验员能力单元要素和实作指标细目职业功能 (模块)工作内容(能力单元)能力单元要素(阐述能力单元基本学习 目标包括职业知识、职业 技能、职业道德)实作指标(确定能力要素的技术水平)1理化工程 检验1-1 (1)乳品中亚 硝酸盐、硝酸盐的 测定(基础模块) 第一法离子色谱 法

14、1-1-1乳品试样的制备1-1-1按GB5009.33-2010要求称取乳制品试样、处理成相应溶液。溶液经滤纸过滤,取上 清液备用。1-1-1-2取上清液约15 mL,通过0.22 pm水性滤膜针头滤器、C18柱,弃去前面3 mL,收 集后面洗脱液待测。1-1-2乳品试样中亚硝酸 盐、硝酸盐的测定1-1-2-1按GB5009.33-2010要求选择合适的参考色谱条件。1/-2-2移取亚硝酸盐和硝酸盐混合标准使用液,加水稀释,制成系列标准溶液。1-1-2-3从低到高浓度依次进样,得到各浓度标准溶液的色谱图。1-1-2-4以亚硝酸根离子或硝酸根离子的浓度为横坐标,以峰高或峰面积为纵坐标,绘制 标准

15、曲线或计算线性回归方程。1-1-2-5分别吸取空白和试样溶液50rL,在相同工作条件下,依次注入离子色谱仪中,记录 色谱图。根据保存时间定性,分别测量空白和样品的峰高(gS)或峰面积。1-1-3测定结果的处理与分 析1-1-3-1以氢氧化钾溶液为淋洗液,阴离子交换柱别离,电导检测器检测。以保存时间定性, 外标法定量。1-1-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存两位有效数 字。1-1-3-3在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值差不得超过算术平均值的10 %。1-1 (2)乳品中亚 硝酸盐、硝酸盐的 测定(基础模块) 第二法分光光度 法1-1-1乳品试样的制

16、备按GB5009.33-2010要求称取乳制品试样、制成匀浆。1-1-1-2提取液经滤纸过滤,弃去局部初滤液,滤液备用。1-1-2乳品试样中亚硝酸 盐、硝酸盐的测定亚硝酸盐的测定:吸取40.0mL上述滤液于50mL带塞比色管中,另吸取0.00mL、 0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、 LOO mL、1.50mL、2.00 mL、2.50 mL 亚硝酸钠标 准使用液,分别置于50mL带塞比色管中。1-1-2-2于标准管与试样管中分别加入2 mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3 min5 min后各加入1mL盐酸蔡乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15 min,1-1-2

17、-3用2 cm比色杯,以零管调节零点,于波长538 nm处测吸光度,绘制标准曲线比 较。同时做试剂空白。1-1-2-4硝酸盐的测定:按GB5009.33-2010要求镉柱还原1-1-2-5将全部收集液再经镉柱还原一次,第二次流出液收集于100 mL容量瓶中,继以水 流经镉柱洗涤三次,每次20 mL,洗液一并收集于同一容量瓶中,加水至刻度,混匀。1-1-2-6亚硝酸钠总量的测定吸取10 mL20 mL还原后的样液于50 mL比色管中。重复亚硝酸盐的测定操作。1-1-3测定结果的处理与分 析1-1-3-1外标法测得亚硝酸盐含量。采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐,测得亚硝酸盐总量, 由此总量减去亚硝酸

18、盐含量,即得试样中硝酸盐含量。1-1-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存两位有效数 字。1-1-3-3在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值差不得超过算术平均值的10 %。1-2乳品中磷的测 定(扩展模块)1-2-1乳品试样的制备固体试样称取0.5 g,液体试样称取2.5 g (精确至0.1 mg),于125 mL三角瓶中,放 入几粒玻璃球,加10mL硝酸,然后放在电热板上加热。1-2-1-2待剧烈反响结束后取下,稍冷却,再加入10 mL高氯酸,重新放于电热板上加热。假设消化液变黑,需取下再加入5 mL硝酸继续消化,直到消化液变成无色或淡黄色,且冒出 白

19、烟,在消化液剩下3mL5mL时取下,冷却,转入50mL容量瓶中,定容。同时做空白 试验。1-2-2乳品试样中磷的测定1-2-2-1分别吸取磷的标准贮备液0 mL, 2.5 mL, 5 mL, 7.5 mL, 1() mL, 15 mL,分别放入 50mL容量瓶中。1-1-2-2加入1()0() mL锐铝酸钱试剂,用水定容至刻度。该系列标准溶液中磷的浓度分别为0|ig/mL, 2.5 pg/mL, 5)ig/mL, 7.5 pg/mL, 10 gg/mL, 15 |xg/mL 在25 30 下显色15 min。1-2-2-3用1 cm光径比色皿,于波长440nm处测定吸光值。1-2-2-4以吸光

20、值为纵坐标,以磷的浓度为横坐标,绘制标准曲线。1-2-2-5试样测定吸取试样试液10 mL于50 mL容量瓶中,加少量水后,力口2滴二硝基酚指示剂,先用氢氧 化钠溶液调至黄色,再用硝酸溶液调至无色,最后用氢氧化钠溶液调至微黄色。重复1-1-2-2 和步骤。从标准曲线上查得试样溶液中磷的浓度。1-2-3测定结果的处理与分 析1-2-3-1用分光光度计在波长440nm处测定吸光度,从标准曲线上查得试样溶液中磷的浓 度。1-2-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存三位有效数 字。1-2-3-3在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5 %。1

21、-3 (1)乳品中氯 的测定(扩展模块) 第一法电位滴定 法1-3-1乳品试样的制备1-3-1-1称取约20g (精确至0.001g)试样,于250mL锥形瓶中,加入100mL70 热水沸 腾后保持15 min,并不断摇动。1-3/-2取出,冷却至室温,依次加入4 mL亚铁氟化钾(沉淀剂I )和4 mL乙酸锌(沉 淀剂H)。每次加入后充分摇匀,在室温静置30 min。将锥形瓶中的内容物全部转移到200 mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。用滤纸过滤,弃去最初局部滤液1-3-2乳品试样中氯的测定1-3-2-1取10mL上述试液,于50mL烧杯中,加入5 mL硝酸溶液(1+3)及25 mL丙酮。1

22、-3-2-2标定(二级微商法):吸取10.00 mL氯化钠基准溶液于50 mL烧杯中,加入().2 mL 硝酸及25 mL丙酮。将玻璃电极和银电极浸入溶液中,启动电磁搅拌器。1-3-2-3从滴定管滴入V毫升硝酸银标准滴定溶液(所需量的9() %),测量溶液电位值(E)。 继续滴入硝酸银标准滴定溶液,每滴加1 mL立即测量溶液电位值(E)。接近终点和终点过后,每滴加0.1 mL测量溶液电位值(E)。继续滴入硝酸银标准滴定溶液,直至溶液电 位数值不再明显改变。1-3-2-4记录每次滴入硝酸银标准滴定溶液的体积数值和电位数值。1-3-2-5计算滴定到终点时消耗硝酸银标准滴定溶液的体积数值(V2)。1

23、-3-3测定结果的处理与分 析1-3-3-1按硝酸银标准滴定溶液的消耗量,计算试样中氯的含量。1-332以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存三位有效数 字。1-3-3-3在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值差不得超过算术平均值的5 %01-3 (2)乳品中氯 的测定(扩展模块) 第二法沉淀滴定 法1-3-1乳品试样的制备1-3-1-1称取混合均匀的试样10g (精确至0.0001 g)于小烧杯中,加50mL水溶解后移入100 mL容量瓶中,加三氯乙酸溶液10 mL混匀定容,静置约1 min后过滤。1 -3-2乳品试样中氯的测定1-3-2-1吸取淀液10 mL于

24、125 mL三角瓶中,加三滴酚酸指示剂,用氢氧化钠溶液(0.1 mol/L)调节至微红色。用硝酸溶液(0.1 mol/L)回调至红色刚好退去。1-3-2-2再加10滴铝酸钾溶液(50g/L)后用硝酸银溶液(0.05 mol/L)滴定至桔红色1 min 内不褪色,即为终点。同时做空白试验。1-3-3测定结果的处理与分 析1-3-3-1由硝酸银溶液的消耗量计算试样中的氯含量。1-3-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存两位有效数 字。1-3-3-3在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值的5 %。1-4(1)乳品中钙、 铁、锌、钠、钾、 镁、铜

25、和锦的测定 的测定(基础模块)1-4-1乳品试样的制备141-1称取混合均匀的固体试样约5 g或液体试样约15 g (精确到0.0001g)于地埸中,在 电炉上微火炭化至不再冒烟,再移入马弗炉中,490 5 C灰化约5 h。1-4-1-2冷却至室温后取出,加入5 mL盐酸(20%),在电炉上加热使灰烬充分溶解。冷 却至室温后,移入5()mL容量瓶中,用水定容,同时处理至少两个空白试样。天津市“职业培训包”乳品检验员培训包标准包一初级(2018年1月第1版)开发单位:天津市职业大学合作开发单位:天津香飘飘食品工业 主管单位:天津市人力资源和社会保障局第一法火焰原子 吸收分光光度法1-4-1-3钙

26、、铁、锌、钠、钾、镁、铜和镭待测液的制备从50 mL的试液中准确吸取1.0 mL至”00mL容量瓶中,按GB 5413.21-2010要求制备钙、 铁、锌、钠、钾、镁、铜和锦待测液,同样方法处理空白试液。1-4-2乳品试样中钙、铁、 锌、钠、钾、镁、铜和镐 的测定1-4-2-1标准系列使用液的配制分别准确吸取各元素的标准储藏液于100mL容量瓶中,配制铁、锌、钠、钾、锦、铜使 用液,用盐酸(2%)定容。钙镁使用液,在准确吸取标准储藏液的同时吸取2.0mL锢溶 液(50g/L)于各容量瓶,用水定容。1-4-2-2标准曲线的绘制按照仪器说明书将仪器工作条件调整到测定各元素的最正确状态,选用灵敏吸收

27、线,将仪器 调整好预热后,测定铁、锌、钠、钾、铜、钵时用毛细管吸喷盐酸(2%)调零。测定钙 镁时先吸取锢溶液(50g/L) 2.0 mL,用水定容到100 mL,并用毛细管吸喷该溶液调零。分别测定各元素标准工作液。的吸光度。以标准系列使用液浓度为横坐标,对应的吸光度 为纵坐标绘制标准曲线1-4-2-3试样待测液的测定调整好仪器最正确状态,测铁、锌、钠、钾、铜、镭用盐酸A (2%)调零,测钙、镁先时, 先吸取偶溶液(50g/L) 2.0 mL,用水定容到100 mL,并用该溶液调零。分别吸喷试样待 测液的吸光度及空白试液的吸光度。查标准曲线得对应的质量浓度。1-4-3测定结果的处理与分 析1-4

28、-3-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,钙、镁、钠、钾、镐、 铜、铁、锌结果保存三位有效数字。1-4-3-2在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值,钙、镁、钠、钾、铁、锌不 得超过算术平均值的10 %;铜和镒不得超过算术平均值的15 %01-4 (2)乳品中钙、 铁、锌、钠、钾、1-4-1乳品试样的制备141-1试样制备试样为粉末状样品,分析前应将试样充分混匀;试样为较大颗粒样品,应分取适量样品粉镁、铜和镭的测定 的测定(基础模块) 第二法电感耦合 等离子体原子发射 光谱法碎后测定。1-4-1-2试样处理称取5 g试样(精确至0.001g)于瓷用堪中,在电炉上微火炭

29、化至不冒烟,移入马弗炉中 550 c加热2 h,如有黑色炭粒,冷却后加少许硝酸溶液(50%)湿润,小火蒸干后再移入 马弗炉中550 加热半小时,取出冷却,加盐酸(40%) 5mL,在电炉上小心加热使灰分 充分溶解,冷却后转移至25 mL容量瓶中,用水定容至刻度,假设有沉淀需过滤。待测。1-4-2乳品试样中钙、铁、 锌、钠、钾、镁、铜和钵 的测定1-4-2-1混合标准溶液的配制由8种元素储藏液用盐酸(4%)逐级稀释配成浓度系列的混合标准溶液。1-4-2-2按照仪器参考操作条件对仪器进行优化后,依次测定标准溶液、空白溶液和试样溶 液。假设试样溶液中某元素浓度超出工作曲线范围,可用盐酸(4%)对试样

30、溶液进行适当 稀释后再测定。1-4-3测定结果的处理与分 析1-4-3-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存三位有效数 字。1-4-3-2在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%o1-5乳品中碘的测 定(扩展模块)1-5-1乳品试样的制备试样处理1、不含淀粉的试样:称取混合均匀的固体试样5g,液体试样20g (精确至0.0001g)于150 mL三角瓶中,固体试样用25 mL约40 c的热水溶解。2、含淀粉的试样:称取混合均匀的固体试样5g,液体试样2()g (精确至0.0001 g),于15() mL三角瓶中,加入0.2g高峰氏淀粉酶

31、,固体试样用25 mL约40的热水充分溶解,置于 50 6() 恒温箱中酶解30 min,取出冷却。试样测定液的制备1、沉淀:将上述处理过的试样溶液转入1()() mL容量瓶中,加入5 mL亚铁氟化钾溶液和 5mL乙酸锌溶液后,用水定容至刻度,充分振摇后静止10 min。淀纸过滤后吸取滤液10 mL于100 mL分液漏斗中,加10 mL水。2、衍生与提取:向分液漏斗中加入0.7 mL硫酸,0.5 mL 丁酮,2.0 mL双氧水,充分混 匀,室温下保持20 min后加入20 mL正己烷振荡萃取2 min。静止分层后,将水相移入另 一分液漏斗中,再进行第二次萃取。合并有机相,用水洗涤两到三次。通过

32、无水硫酸钠过 滤脱水后移入50mL容量瓶中用正己烷定容,此为试样测定液。1-5-1-3碘标准测定液的制备分别吸取1.0 mL, 2.0 mL, 4.0 mL, 8.0 mL, 12.0 mL碘标准工作液,相当于1.0座、2.04.0 |ig、8.0 jig、12.0卜唱的碘,同1-5-1-2步骤经沉淀、衍生与提取,制得碘标准测定液。1-5-2乳品试样中碘的测定I-5-2-1按GB 5413.23-2010要求选择合适的参考色谱条件。1-5-2-2标准曲线的制作将碘标准测定液分别注入到气相色谱仪中得到标准测定液的峰面积(或峰高)。以标准测 定液的峰面积(或峰高)为纵坐标,以碘标准工作液中碘的质量

33、为横坐标制作标准曲线。 1-5-2-3试样溶液的测定将试样测定液(注入到气相色谱仪中得到峰面积(或峰高),从标准曲线中获得试样中碘 的含量(jig) o进样量:LOrL。15-3测定结果的处理与分 析1-5-3-1试样中的碘在硫酸条件下与丁酮反响生成丁酮与碘的衍生物,经气相色谱别离,电 子捕获检测器检测,外标法定量。1-5-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存至小数点后 一位。1-5-3-3在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。1-6乳品中0.胡萝 卜素的测定(基础 模块)1-6-1乳品试样的制备161/试样处理1、淀粉类试样

34、:称取混合均匀的固体试样约5 g或液体试样约50 g (均精确至O.OOOlg)于 250 mL三角瓶中,加入1.0g抗坏血酸(,固体试样需用50mL4550的水溶解并混合均匀。加入1g a-淀粉酶,向三角瓶中充氮后盖上瓶塞,置602培养箱内酶解301。2、非淀粉类试样:称取混合均匀的固体试样约10 g或液体试样约50 g (均精确至0.0001 g), 置于250 mL三角瓶中,加入1.0g抗坏血酸,固体试样需用50 mL4550的水溶解并混 合均匀。161-2待测液的制备1、皂化:将100 mL 95%乙醇加入到上述试样溶液中,混匀并加入25 mL氢氧化钾溶液混 匀,放入磁力棒,充入氮气排

35、出空气,盖上胶塞。将1000 mL的烧杯中加入约300 mL的 水,将烧杯放在恒温磁力搅拌器上,当水温控制在53c2C时,将三角瓶放入烧杯中,磁 力搅拌皂化约45 min后,取出立刻冷却到室温。2、提取:将皂化液全部转入500 mL分液漏斗中,加入100 mL石油酸,轻轻摇动,排气, 盖好瓶塞,室温下振荡10 min后静置分层,将水相转入另一分液漏斗中按上述方法进行第 二次提取。3、合并有机相,用水洗至近中性。有机相通过无水硫酸钠过滤脱水。滤液收入500 mL烧 瓶中,于旋转蒸发器上在402的充氮条件下蒸至近干(绝不允许蒸干)。用石油酸(4.4) 溶解残渣并转移至10 mL容量瓶中定容。4、从

36、上述容量瓶中准确移取2.0 mL石油酸溶液于10 mL螺盖试管中,在402氮吹仪上 吹干。向试管中加1.0mL正己烷,振荡溶解残渣。再将试管以不低于5000转/分钟的速度 离心10 min,取出静置至室温后待测。1-6-2乳品试样中p-胡萝卜 素的测定1-6-2-1按GB 5435.-2010要求选择合适的参考色谱条件。1-6-2-2标准曲线的绘制分别将8 -胡萝卜素标准工作液注入液相色谱仪中,得到峰面积。以峰面积为纵坐标,以 B-胡萝卜素标准工作液浓度为横坐标绘制标准曲线。1-6-2-3试样测定将待测液(1-6-I-2)注入液相色谱仪中,得到峰面积,根据标准曲线得到待测液中胡 萝卜素的浓度。

37、1-6-3测定结果的处理与分 析1-6-3-1试样经皂化后,使供胡萝卜素完全变为游离态。用石油醛萃取后,反相色谱法别离, 外标法定量。1-6-3-2以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保存三位有效 数字。1-6-3-3在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %0培训后到达水平经过培训,能够依据国家标准独立完成对样品进行理化工程(亚硝酸盐、硝酸盐、磷、氯、碘、钙、铁、锌、钠、钾、镁、铜、镒、。-胡萝 卜素的)的检验,熟练掌握各项指标检验所需方法及仪器操作。并能指导初、中级乳品检验工的检测工作,进行新知识、新技术的培训。水平综述乳品高级检验工除

38、了具备初、中级乳品检验工的知识体系和实际操作技能,还应掌握乳品的化学分析、仪器分析、物理参数等 理化检验实际操作的技术、技巧,掌握一些实验室管理知识和对初、中级乳品检验工管理、培训和指导知识职业道德职业道德基本知识、乳品检验员职业守那么、相关法律知识学习水平(培训对象获得学习成果)能力水平(培训对象展示以下能力)依据国家标准独立完成对理化工程(亚硝酸盐、 硝酸盐、磷、氯、碘、钙、铁、锌、钠、钾、镁、 铜、锦、B-胡萝卜素)的检验,熟练掌握各项 指标检验所需方法及仪器操作能够熟练掌握理化工程检测,从而为产品质量评价提供可靠依据备注职业功能 (模块课 程)工作内容 (能力单元)能力单元要素(阐述能

39、力单元基本学习 目标包括职业知识、职业 技能、职业道德)实作指标(确定能力要素的技术水平)2微生物指 标检验2-1乳酸菌检验(基 础模块)2-1-1试剂、培养基的准备 及环境的灭菌2-1-1-1按GB 4789.35-2010要求准备培养基及试剂2-1-1-2按照标准操作规程进行高压灭菌仪器的使用2-1-1-3能正确对检验室、无菌操作台等检验环境进行灭菌212样品制备、稀释和分 离2-1-2-1样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。2-1-2-2冷冻样品可先使其在2c5条件下解冻,时间不超过18h,也可在温度不超过45 的条件解冻,时间不超过15 min。2-1-2-3固体和半固体食品:以无

40、菌操作称取25 g样品,置于装有225 mL生理盐水的无菌 均质杯内,于8000r/min10000r/min均质1 min2min,制成1:10样品匀液;或置于225 mL生理盐水的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min2 min制成1:10的样品匀液。2-1-2-4液体样品:液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25 mL放入装有225 mL生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分振摇,制成1:10的 样品匀液。2-1-2-5用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于装有9 mL 生理盐水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及稀释液

41、),振摇试管或换用1支无菌吸管 反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。2-1-2-6另取1mL无菌吸管或微量移液器吸头,按上述操作顺序,做10倍递增样品匀液, 每递增稀释一次,即换用1次1mL灭菌吸管或吸头。2-1-3乳酸菌计数2-1-3-1乳酸菌计数(乳酸菌总数、双歧杆菌、嗜热链球菌、乳杆菌计数)按GB 4789.35-2010要求,选择2个3个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取0.1 mL样 品匀液分别置于各自培养基,使用L形棒进行外表涂布。361,厌氧培养48 h土2 h后 计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成。2-1-3-2菌落计数可用肉眼观察,必

42、要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计 数以菌落形成单位(colony-fonning units, CFU)表示。1、选取菌落数在30 CFU300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数 应采用两个平板的平均数。2、其中一个平板有较大片状菌落生长时,那么不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作 为该稀释度的菌落数;假设片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即 可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。3、当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,那么将

43、每条单链作为一个菌落计数。2-1-4结果判定和报告2-1-4-1结果的表述1、假设只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值, 再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g (mL)中菌落总数结果。2、假设有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按公式进行计算3、假设所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU,那么对稀释度最高的平板进行计数,其他 平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。4、假设所有稀释度的平板菌落数均小于30 CFU,那么应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释 倍数计算。5、假设所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,那

44、么以小于1乘以最低稀释倍 数计算。6、假设所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU300 CFU之间,其中一局部小于30 CFU或 大于300CFU时,那么以最接近30CFU或300 CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。2-1-4-2菌落数的报告1、菌落数小于100CFU时,按“四舍五入”原那么修约,以整数报告。2、菌落数大于或等于100 CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原那么修约后,取前2位数 字,后面用0代替位数;也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原那么修约后,采用两 位有效数字。3、称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。2-1-4-3结果与报告根据

45、菌落计数结果出具报告,报告单位以CFU/g (mL)表示。2-2沙门氏菌检验 (基础模块)2-2-1试剂、培养基的准备 及环境的灭菌2-2-1-1按GB 4789.34-2010要求准备培养基及试剂2-2-1-2按照标准操作规程进行高压灭菌仪器的使用2-2-1-3能正确对检验室、无菌操作台灯检验环境进行灭菌2-2-2样品制备与样品别离2-2-2-1前增菌称取25 g (mL)样品放入盛有225 mL BPW的无菌均质杯中,以8 000 r/min10 000 r/min 均质1 min2 min,或置于盛有225 mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min2min。假设样品为液态

46、,不需要均质,振荡混匀。如需测定pH值,用1 mol/mL无菌 NaOH或HC1调pH至6.80.2。无菌操作将样品转至500 mL锥形瓶中,如使用均质袋, 可直接进行培养,于361培养8 h18h。如为冷冻产品,应在45 以下不超过15 min, 或2c5c不超过18 h解冻。22-2-2增菌轻轻摇动培养过的样品混合物,移取1 mL,转种于10 mL TTB内,于42 C 土1 培养18h24ho同时,另取1mL,转种于lOmLSC内,于361 培养18 h24 h。2-2-2-3 别离分别用接种环取增菌液1环,划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板(或 HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板)。于361分别培养18 h24 h (XLD琼 脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40 h48 h (BS琼脂平板), 观察各个平板上生长的菌落及特征。2-2-3生化试验及血清学鉴 定2-2-3-1能正确地判断别离可疑菌落特征2-2-3-2能选用合适的生理生化培养基,正确进行菌液的生理生化实验2-2-3-3能正确了解生理生化特征,作出判

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