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1、多糖铁复合物胶囊禁忌_正交实验法优选当归多糖的提取工艺 摘要 目的：优选并确立当归多糖的最佳提取工艺。方法：以当归多糖得率为指标，采纳正交试验法对提取过程中水用量(A)，提取时间(B)，提取次数(C)及醇沉浓度(D)4因素进行优选探讨。结果：对多糖得率有影响的因素是提取时间与提取次数。结论：以多糖得率为考察指标的最优提取工艺为A2B3C2D1。 关键词 当归多糖 提取工艺 正交试验法 中药探讨 当归为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根，味甘、辛，性温。归肝、心、脾经。为中医传统常用补血药，具有补血活血、调经止痛、润肠通便等功效。当归中含有内酯类、生
2、物碱类、有机酸类、中性油类、多糖等多种成分。现代探讨表明当归多糖对机体免疫系统、血液系统有明显作用，可以促进小鼠淋巴细胞增殖，提高荷瘤小鼠巨噬细胞细胞吞噬实力，增加外周血细胞、白细胞、血红蛋白及骨髓有核细胞数，并且有抗肿瘤、抗辐射损伤及镇痛的良好功效。 本文以当归粗多糖得率为考察指标，采纳L9(34)正交试验法对提取过程中水用量，提取时间，提取次数，醇沉浓度4因素进行了优选探讨。 1、仪器与试剂材料 1.1仪器：AG285电子天平(瑞典METTLER公司)；V800旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)；TU-1800S紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有假公司)。 1.2 材料：葡萄糖(上海化学
3、试剂公司，批号030318)；苯酚(重蒸)；其余试剂均为国产分析纯。当归药材购于北京同仁堂杭州药店有限公司，经鉴定为当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根。 2、试验方法 2.1 影响提取效果主要因素的选择：选取水用量，提取时间，提取次数，醇沉浓度，作为考察因素，每个因素拟定3个水平(见表1)，选用L9(34)正交表。 2.2 正交试验设计：取当归饮片9份，每份20g，85乙醇热回流2次(3h，2h)，每次100ml，除去含单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分后，药渣按正交方案提取，水提液浓缩至每毫升含生药量为0.5g，按正交方案醇沉，沉淀分别用适量无水乙醇，乙醚，丙
4、酮依次洗涤，50烘干。 2.3 供试液的制备：取粗多糖约12.5mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，即得。 2.4 试验样品指标的测定：分述如下。 2.4.1 总糖含量标准曲线的绘制：称取105干燥至恒重的葡萄糖约50mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解，并稀释至刻度，即得。精密吸取比照品溶液0.0ml，1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，7.0ml，分别置于25ml容量瓶中，加蒸馏水定容。精密移取上述溶液各2ml，分别加入5苯酚1ml，摇匀后快速加入7ml浓硫酸，混匀，12min后于沸水液中加热30min，取出放人冰水浴中冷却1
5、5min，取出于485nm波特长测定吸光度，以汲取度A对应浓度Y回来，得：回来方程：Y=0.0959A+0.0001(r=0.9995)，线性范围：0.02019mg/ml-0.1413mg/ml。 2.4.2精密度试验：精密移取比照品溶液2ml，共5份，按标准曲线项下方法操作测得平均吸光度为0.5706，RSD为0.096，结果表明精密度符合要求。 2.4.3稳定性试验：精密移取样品液2ml，按标准曲线项下方法操作，每10分钟测一次吸光度，到1小时后改为30分钟测一次，测得平均吸光度为0.0634，RSD为2.38，测定值在120分钟内保持稳定。以下吸光度的测定均在120分钟内完成。 2.4
6、.4 沉淀得率测定：得到的沉淀离心15分钟(3000r/min)分别，用无水乙醇，乙醚，丙酮依次洗涤，50烘至恒重，精密称定得沉淀重。 2.4.5供试液中总糖含量的测定：精密量取供试液2ml，按“总糖含量标准曲线”项下操作，测定A值并代入回来方程计算多糖含量，多糖得率()=沉淀重多糖含量取样量100。结果见表2。 3、结果 3.1 正交试验结果：见表3。 从方差分析的结果表明：以粗多糖得率为指标，提取时间和提取次数对多糖得率有肯定影响，直观分析对当归多糖得率影响因素的依次为BCDA，综合多糖得率及节约能源等因素考虑，确定最优工艺为A2B3C2D1，即加8倍量水提2次，每次3小时，加无水乙醇至乙醇浓度为70。 3.2 优选工艺的验证试验：按优选的工艺进行验证试验，测得多糖得率平均值为6.40，RSD为1.26，结果表明该工艺稳定可行。 4、探讨 虽然加水量对当归多糖的得率在统计学意义上没有影响，采纳6倍量水更能节约能源，但当归药用部位属根，其质地较为坚硬，热回流过程中会被吸去一部分的水量，所以最终确定为8倍量水提。近年对植物多糖的探讨许多，但对当归多糖提取工艺的探讨较少，本试验优选出的工艺操作简洁，经济可行，为当归多糖水提醇沉工艺的选择供应了肯定的参考。