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1、重庆市自自然科学学基金计计划项目目立 项 申 请请 书项目名称称：柑桔桔皮渣发发酵高蛋蛋白饲料料新工艺艺研究 所属专项项： 其 它它 申请者： 殷钟意意 申报单位位： 重庆工工商大学学（签章章）联系电话话： 6277696652 申请日期期： 220066年3月月 重庆市科科学技术术委员会会二五五年四月月制填 写 说 明明1、凡申申报重庆庆市自然然科学基基金计划划的项目目须填写写此立项项申请书书。2、立项项申请书书由项目目的主承承担者填填写，经经项目主主承担者者工作单单位审查查同意后后，一般般项目一一式三份份、重点点项目一一式七份份并附申申报软盘盘一张报报送重庆庆市科委委。3、填写写申请书书前
2、，请请先查阅阅重庆庆市自然然科学基基金计划划项目管管理办法法及有有关规定定，其中中重点项项目应围围绕当年年“项目指指南”内容撰撰写。4、立项项申请书书所列内内容都要要据实填填写，表表达应明明确、完完整、严严谨、扼扼要（外外文名词词要同时时用中文文表达）。5、项目目组主要要成员本本人应在在申请书书上亲自自签名以以示同意意合作。6、立项项申请书书一律要要求用AA4纸张张打印，否否则不予予受理。7、所有有申报材材料恕不不退还，请请注意留留底。一、基本本信息项目名称称柑桔皮渣渣发酵高高蛋白饲饲料新工工艺研究究所属专项项其 它它承担单位位重庆工商商大学组织部门门科研处单位地址址南岸区学学府大道道5公里里
3、邮编4000067单位性质质11.高等等院校22.科研研院所33.企业业4.其其它工商注册册登记类类型11.国有有2.集集体3.股份合合作4.联营企企业5.有限责责任公司司6.股股份有限限公司77.私营营企业88.港澳澳台商投投资企业业9.外外资企业业10.其它企企业单位法定定代表姓名王崇举联系电话6276693662手机6677766881单位传真6276695115项目负责责人姓名殷钟意联系电话6276696552手机13633799976113E-maailCr_cchemmn项目主要要合作单单位计划类别别11.自然然科学基基金2.院士专专项项目主要要服务行行业11.农业业 22.制造业
4、业3.电子信信息 4.医药化化工 5.交通、能能源6.建筑建建材7.冶金8.轻工纺纺织 9.社会事事业 10. 其它它项目所属属技术领领域31.电子子信息 2.生物医药药 33.现代农农业 44.环境保保护 55.新材料料 6.光机电电 7.交通 8.能能源资源源 9.社会事事业 110.其它项目研究究所属主主要学科科一级学科科代码及及名称二级学科科代码及及名称三级学科科代码及及名称代码：1180名称：生生物学代码：1180.71名称：生生物技术术代码：1180.71550名称：微微生物工工程起止时间间20066.9-20007.112总投资6万元申请资助助4万元主要研究究内容(限1000字)
5、以柑桔皮皮渣为碳碳源，以以高氮农农业副产产品为氮氮源，筛筛选高产产蛋白质质饲料的的菌株，构构建高效效复合菌菌群，并并确定最最佳配比比；优化化原料粉粉碎脱水水、发酵酵及其产产物灭菌菌干燥工工艺，为为推广应应用打下下基础。预期成果果形式或或达到的的目标(限1000字)开发一种种既能高高产蛋白白质饲料料及氨基基酸，又又能缩短短发酵时时间的优优势复合合菌群及及最优工工艺，使使其蛋白白质含量量达300以上上，其他他指标达达到家禽禽配合饲饲料国标标；申请请国家发发明专利利1项，发发表核心心期刊论论文23篇。注：此简简表的选选择项均均为单选选项。学学科代码码及名称称按国家家标准（可可在市科科委网站站上查询询
6、）至少少填至二二级学科科。二、项目目组主要要成员（含项目目负责人人）编号姓名出生年月月学历专业技术术职称工作单位位联系电话话从事专业业项目中的分工每年工作作时间(月月)签字1殷钟意19666.3本科高级实验验师重庆工商商大学6276696552化学主持，负负责全部部研究方方案的试试验102郑旭煦19644.100博士教授重庆工商商大学6276680112生物医学学工程项目策划划,研究究方案和和试验方方案设计计53彭洪光19444.6本科副教授西南大学学（校外外聘研究究人员）6825529660微生物工工程发酵菌株株筛选与与工艺优优化技术术指导54王星敏19766.8研究生讲师重庆工商商大学62
7、76697887应用化学学辅料氮源源的选定定75彭 荣荣19788.100硕士讲师重庆工商商大学6276697885应用微生生物高产蛋白白质饲料料的菌株株筛选86崔 榕榕19688.9本科实验师重庆工商商大学6276697885化学菌株筛选选与人工工诱变87王 颖颖19788.111研究生重庆工商商大学6276636446环境工程程发酵菌株株筛选与与工艺优优化试验验研究108吕 靖靖19800.044研究生重庆工商商大学13077234460995环境工程程原料脱水水、产物物灭菌干干燥工艺艺试验研研究10910三、经费费预算（单单位:万万元）经费来源源预算经费支出出预算科目预算数科目预算数其中
8、市科科技计划拨款款部分1、市科科技计划划拨款4.01、小型型仪器设设备费1.01.02、国家家部委拨拨款02、能源源材料费费2.02.03、行业业主管部部门拨款款03、试验验外协费费2.00.54、区县县科委拨拨款04、科研研业务费费1.00.55、单位位自筹2.05、管理理费6、其他他资金06、其他他费用来源预算算合计6.0支出预算算合计6.04.0市科技计计划预算算拨款年度20077年20088年20099年合计经费4.0004.0注：1、市市科技计计划资助助强度为为：一般般项目22-4万万元，重重点项目目20-40万万元。 2、一一般项目目不得提提取管理理费。四、申请请书正文文参照以下下
9、提纲撰撰写，要要求内容容翔实、清清晰，层层次分明明，主题题突出。（一）立立项依据据与研究究内容1、项目目的立项项依据（重点项项目须附附主要参参考文献献详细目目录）1.1 目的意意义柑桔是全全球的第第一大水水果，年年产量达达到1亿多吨吨。在柑柑桔生产产方面，中中国柑桔桔类年产产量世界界第一，据据农业部部统计，我我国柑桔桔总产量量已连续续三年稳稳定在110000万吨以以上，并并预计到到20100年将达达到12200万万吨以上上。随着着我国经经济的快快速发展展，人民民生活水水平也随随之提高高，对高高品质的的柑桔加加工产品品的需求求也将会会迅速增增加。一一些柑桔桔加工公公司在湖湖南、江江西、重重庆等地
10、地建立了了大面积积的种植植基地，例例如，在在重庆市市万州区区就已建建立了与与年产柑柑桔浓缩缩汁5万万吨相配配套的原原料基地地，预计计在未来来的几年年中重庆庆市的忠忠县、江江津、奉奉节、巫巫山、长长寿等产产业基地地将不断断扩大，并并建成220万亩亩柑桔现现代化生生产技术术示范基基地和年年加工处处理能力力20吨吨以上的的橙汁加加工生产产线。但但是，随随着柑桔桔原汁产产量的不不断增加加，柑桔桔加工的的副产品品柑桔皮皮渣的量量也随之之赠加，柑桔鲜食和加工下脚料的桔皮数量约占柑桔产量的50%。国外对桔桔皮渣的的处理主主要采用用先进设设备提取取其中的的香精油油、-11-8-萜二烯烯、黄酮酮苷、果果胶等物物
11、质，剩剩余部分分经烘干干后作为为饲料的的添加成成分或者者加入工工程菌发发酵生产产乙醇。我国柑桔生产基地产量大，目前尚无配套的大型设备将柑桔皮渣综合利用，基本上都作为废弃物处置（需上交60元/吨的垃圾处置费），造成柑桔皮渣的大量堆积。这既是有效资源的极大浪费，又对环境造成极大的污染，影响生态平衡。采用微生生物发酵酵方法将将柑桔皮皮渣发酵酵成高蛋蛋白动物物饲料，是是一种解解决大量量柑桔皮皮渣利用用的有效效途径，既既可以将将废弃物物资源化化，费用用低，无无二次污污染，又又能为生生产商创创造经济济效益，市市场潜力力大，必必将得到到广泛的的应用。1.2 柑桔皮皮渣发酵酵研究现现状及存存在的主主要问题题目
12、前国内内已有柑柑桔研究究所对柑柑桔皮渣渣进行了了微生物物发酵生生产高蛋蛋白饲料料研究，建建立了以以黑曲霉霉(22281)、康宁宁木霉(130016)、产朊朊假丝酵酵母(118077)为出出发菌株株的复合合菌系和和相应的的工艺，但但没有包包括扣囊囊复膜孢孢酵母、白白地霉等等一些产产较高蛋蛋白质的的菌种，其其液态发发酵的固固体产品品粗蛋白白含量接接近100；而而且发酵酵过程中中呈现胶胶糊状状状态，影影响微生生物的自自由生长长，不利利于后期期发酵产产品的烘烘干。其其它有关关柑桔皮皮渣发酵酵菌株的的筛选等等方面的的报道甚甚少。柑桔皮含含有丰富富的营养养物质，其其中糖类类含量555665%,粗蛋白白含量
13、66.48.11%，粗粗脂肪的的含量为为2.332.6%，粗粗纤维的的含量为为9.55100.6%，钙0.670.774%，磷磷0.22700.299%，赖赖氨酸00.266%,精精氨酸00.633%，亮亮氨酸00.377%；桔桔皮的微微量元素素和维生生素含量量也很丰丰富，约约含锰88.677 mgg/Kgg，铁677.577 mgg/Kgg，铜2.43 mg/Kg，胡胡萝卜素素24.4 mmg/KKg，VE61.7 mmg/KKg。即即柑桔皮皮渣可提提供微生生物生长长所需要要的各种种碳源，但但其蛋白白质和氨氨氮量都都很低，在在以往的的研究中中虽可用用发酵方方法将蛋蛋白质含含量提高高5110倍
14、，但但其蛋白白总含量量仍不能能超过118%。若若要大幅幅度提高高发酵饲饲料的蛋蛋白质含含量，就就必须在在柑桔皮皮渣中加加入一些些含氮量量较高的的物质，比比如：麸麸皮、秸秸秆、豆豆饼粕等等作为辅辅助氮源源，并通通过微生生物的转转化从根根本上提提高其蛋蛋白质的的含量。1.3 柑桔皮皮渣发酵酵的前期期试验研研究针对柑桔桔皮渣发发酵实际际运行中中存在的的问题，课课题组进进行了以以下实验验研究：（1）在在采用果果汁厂产产生的柑柑桔皮渣渣作原料料时，由由于柑桔桔皮渣中中的水分分只是部部分榨出出，尚有有小部分水分分与柑桔桔皮渣一一同排出出，致使使柑桔皮皮渣呈现现胶糊状状状态，本本课题组组初步实实验研究究表明
15、，这这种胶糊糊状物是是柑桔皮皮渣中的的水分混混溶柑桔桔皮中含含量为220330%的的果胶造造成的。若若用这种种胶糊状状的柑桔桔皮渣发发酵，不不仅影响响微生物物的自由由生长、对对发酵产产生负面面影响，而而且不利利于后期期发酵产产品的烘烘干。果果胶是一一种亲水水性植物物胶，基基本化学学结构是是D-吡吡喃半乳乳糖醛酸酸1,4-糖糖苷键连连接成的的高分子子化合物物，其分子子由许多多-半半乳糖醛醛酸的11-C和和4-CC经由氧氧桥连而而成链状状。果胶胶分子量量1040万万u，属属直链多多糖；且且植物果果胶对生生物体有有较好的的药用作作用，如如：排毒作作用可排除除生物体体内的铅铅、汞离离子，降糖、降降低胆
16、固固醇以及及防癌的的作用，由由此，柑柑桔皮渣渣在发酵酵过程中中还应保保留果胶胶成分。经经过一段段时间的的实验证证明，采采用固态态发酵前前若将桔桔皮渣脱脱除水分分并充分分粉碎，在在发酵过过程中再再加入既既具有吸吸水隔离离作用、又又含氮量量较高的的干性农农副产品品作为添添加辅料料（例如如，麦麸麸和稻草草），柑柑桔皮渣渣胶糊状状态明显显减少，发发酵产品品的粗蛋蛋白含量量可接近近30%。所以以采用脱脱水-粉粉碎-外外加含氮氮辅料的的固态发发酵方法法不仅可可以解决决柑桔皮皮渣胶糊糊状问题题，而且且能为微微生物提提供可吸吸收的氮氮源。因因此本项项目解决决柑桔皮皮渣脱水水粉碎碎及辅料料的筛选选等工艺艺。（2
17、）课课题组同同时试验验了半液液态发酵酵法（即即固态物物质加水水稀释成成粘稠流流质物体体），通通过对最最终流质质产物的的溶解、超超声细胞胞破碎，测测定其上上清液中中可溶性性蛋白含含量约为为1.004mgg/g，其其残渣中中粗蛋白白含量接接近200%。因因此，我我们认为为，若发发酵液中中氨基酸酸含量较较高并符符合健康康饮品的的标准，可可进一步步研究半半液态发发酵工艺艺及发酵酵液的分分离与纯纯化，为为开发健健康饮料料打下基基础。此此法不仅仅可得到到粗蛋白白含量较较高的蛋蛋白饲料料，而且且又可能能开发出出一种新新型的健健康饮料料，既循循环利用用了资源源，又创创造了更更高附加加值更高高的产品品。所以，本
18、本课题拟拟对已有有的发酵酵工艺及及菌种进进行改进进，构建建高效复复合发酵酵菌群，考考察固液液两种发发酵方法法，优化化整个发发酵工艺艺。2、项目目的研究究内容、研研究目标标、以及及拟解决决的关键键问题2.1 研究内内容本课题首首先以柑柑桔皮渣渣作碳源源，其它它含氮量量较高的的物质作作氮源（比比如麸皮皮、秸秆秆、豆饼饼粕等），通通过多个个单一菌菌种对柑柑桔皮渣渣发酵，筛筛选出优优势固氮氮菌种，并并构建高高效复合合发酵菌菌群，使使粗蛋白白产量增增加；同同时，考考察固液液两种发发酵方法法的产蛋蛋白情况况及液态态发酵液液中的氨氨基酸含含量；其其次，对对整个发发酵工艺艺进行研研究，确确定最优优工艺流流程，
19、包包括柑桔桔皮渣的的含水率率、接种种量、pH、溶溶氧（DDO）、C:N、无机机盐添加加量、温温度、发发酵时间间等；最最后，对对发酵液液的分离离提纯和和发酵固固体产品品的灭菌菌干燥工工艺进行行研究，通通过对成成品中霉霉菌含量量及营养养物质的的测定，确确定一套套最优灭灭菌干燥燥工艺。2.1.1 高高效发酵酵菌群的的构建（1）生生产高蛋蛋白饲料料的菌株株筛选。对对米曲霉霉（Assperrgillluss orryzaae）、黑黑曲霉（Aspergillus ficuun）、扣囊复膜孢酵母(Endomycopsis fibuligera)、啤酒酵母、酿酒酵母等进行单一菌株以及混合菌株的发酵试验，分别确
20、定适合液态和固态发酵的最佳菌群。（2）将将已筛选选出的菌菌种以不不同的比比例混合合，得到到最佳的的混合比比，并以以此比例例培养发发酵种子子液。（3）通通过使用用固态及及液态发发酵两种种方法，比比较此种种子液的的发酵产产物的蛋蛋白质及及氨基酸酸含量，同同时测定定各菌种种的酶活活力情况况。2.1.2 柑柑桔皮渣渣发酵工工艺研究究（1）原原料粉碎碎脱水。以以柑桔果果汁厂榨榨汁后的的废料为为原料，拟拟采用螺螺旋式压压榨机将将原料粉粉碎并脱脱水，得得到适宜宜粒径和和含水率率的柑桔桔皮渣。（2）发发酵辅料料的筛选选。由于于柑桔皮皮渣本身身含氮量量很低，需需借助外外加氮源源。选择择氮源辅辅料，包包括麸皮皮、
21、秸秆秆、米糠糠、豆饼饼粕、玉玉米芯等等农业副副产品，最最终得到到柑桔皮皮渣与辅辅料的最最佳配比比。（3）固固态发酵酵工艺参参数优化化。将已已培养好好的种子子液，接接种到配配制好的的原料中中，在不不灭菌的的条件下下发酵，通通过单因因素试验验及SAAS软件件的分析析，确定定发酵最最优工艺艺（包括括菌株接接种量、培培养基含含水率、pH、DO、温度、发酵时间、发酵深度等参数）。 （4）液液态发酵酵工艺优优化。将将已培养养好的种种子液，接接种到配配制好的的已稀释释的原料料中在不不灭菌的的条件下下发酵，主主要考察察发酵液液中氨基基酸的含含量及固固态残渣渣中的粗粗蛋白含含量，并并通过SSAS的的RSRREG
22、（响响应面回回归）过过程进行行数据分分析，建建立二次次响应面面回归模模型，进进而寻求求最优相相应因子子水平，从从而对发发酵工艺艺进行优优化。（5）发发酵液的的分离及及纯化。借借鉴酿酒酒加工的的工艺流流程，使使发酵液液与固体体残渣充充分分离离，并对对发酵液液脱色、纯纯化，以以达到饮饮用标准准。（6）灭灭菌干燥燥工艺研研究。发发酵固体体产品的的最后一一道工艺艺是灭菌菌和干燥燥，为了了节约投投资、减减小能耗耗，拟将将上述两两个步骤骤合二为为一。由由于一般般灭菌法法的温度度较高，可可能影响响饲料中中的热敏敏性营养养物质的的品质，因因此，需需通过进进一步试试验研究究，确定定一套有有效的灭灭菌干燥燥工艺。
23、2.2 研究目目标本实验的的研究目目标是，开开发出一一种具有有既能高高产蛋白白质及氨氨基酸，又又能够缩缩短发酵酵时间的的优势复复合菌群群；并对对整个发发酵工艺艺优化，获获得生产产高蛋白白饲料及及发酵饮饮料所需需的最优优工艺条条件（包包括柑桔桔皮渣的的粒径和和含水率率、菌株株接种量量、pHH、DO、C:N、温度度、发酵酵时间、发发酵深度度及烘干干过程中中的参数数），最最终确定定一套柑柑桔皮渣渣发酵的的最优工工艺，达达到无二二次污染染、节能能、提高高经济效效益的目目的。2.3 拟解决决的关键键问题 （11）用于提提高蛋白白质含量量的菌群群含有黑黑曲霉、绿色木霉等其孢子颜色较深的菌种，在发酵过程中，
24、发酵底物可能会出现黑色或绿色，这将严重影响发酵产物的品质及外观。调节各菌种的混合比例及发酵参数,得到品质佳、外观好的发酵产物。 （22）因为为在构建建复合微微生物菌菌群时，各各种菌种种之间存存在着交交互作用用，例如如某些菌菌种可能能产生一一些抑制制性的代代谢产物物，例如如乙酸或或其他物物质，这这将严重重抑制复复合菌系系的生长长。菌种种之间的的这种作作用将会会严重影影响其发发酵结果果，所以以在培养养种子液液时一定定要采用用科学的的手段确确定菌种种的最佳佳混合比比例，并并严格控控制发酵酵参数。如如其结果果还是不不尽如人人意，可可采用人人工诱变变的方法法得到变变异菌种种，但要要对变异异菌种所所产生的
25、的中间产产物进行行测定及及对其稳稳定遗传传的菌株株进行生生化检测测，确保保不产生生有毒物物质。（4）为为提高产产品的粗粗蛋白量量，需添添加一些些天然的的含氮量量较高的的干性辅辅料，如如豆饼粕粕、麸皮皮、米糠糠类天然然食品废废渣。但但在添加加过程中中，可能能出现辅辅料含有有毒性物物质，需需要对拟拟添加的的辅料作作除毒预预处理。 （5）寻寻找一套套既经济济、又有有效的固固液分离离方案，使使固液完完全分离离，减少少后续液液体产品品的纯化化工艺步步骤。3、拟采采取的研研究方案案及可行行性分析析3.1拟拟采取的的研究方方案（1）选选定米曲曲霉、黑黑曲霉、扣扣囊复膜膜孢酵母母、啤酒酒酵母、酿酿酒酵母母等菌
26、种种。在相相同外界界条件下下进行单单一菌株株和混合合菌群的的对比发发酵试验验，采用用凯氏定定氮法（GB550099-19885）、考马马斯亮兰兰分光光光度法测测定发酵酵产物的的粗蛋白白、可溶溶性蛋白白含量，确确定产蛋蛋白质最最高的菌菌株或混混合菌群群，以此此作为研研究发酵酵工艺的的出发菌菌群。（2）根根据大多多数文献献及已有有的实验验经验，最最佳的发发酵菌群群应该是是多菌混混合的复复合菌液液，由于于各菌种种之间的的交互影影响，需需对菌群群中各菌菌种的比比例进行行优化，通通过多组组菌种比比例的混混合实验验得到一一种最好好的比例例，以此此种比例例为基准准，采用用中心组组合设计计法，经经SASS的R
27、SRREG（响响应面回回归）过过程进行行数据分分析，建建立二次次响应面面回归模模型，进进而寻求求最优相相应因子子水平，得到科学的最佳混合比例及响应值。并以此比例的混合菌液作为发酵种子液培养，此后需对混和菌群的蛋白酶和纤维素酶的活性测定（蛋白酶活力的测定采用福林-酚比色法，纤维素酶活力的测定采用3，5二硝基水杨酸比色法），以明确混合菌群中的各个菌株之间的相互抑制作用最小。（3）若若各种比比例的混混合菌的的发酵效效果均不不佳，则则需确定定一种自自身蛋白白质较高高的菌株株进行诱诱变。方方法如下下，将此此菌株接接种到无无菌液体体培养基基中，在在恒温摇摇床中培培养488h（扩扩大培养养）；然后将将扩大培
28、培养后的的菌株在在不同功功率的UUV光下下照射不同同时间，进进行人工工诱变；接接着继续续在LBB培养基基中接种种培养三三代以上上，获得得较稳定定的遗传传子，最最后将此此诱变菌菌种保存存并鉴定定。（4）辅辅料的确确定。拟拟采用55种重庆庆地区较较丰富的的农作物物废料即即豆饼粕粕、米糠糠、麸皮皮、玉米米皮、玉玉米心等等作辅料料。将55种辅料料分别以以不同的的比例与与柑桔皮皮渣混合合，在相相同外界界环境下下（包括括温度、ppH、接接种量、含含水率、时时间、发发酵层深深度）接接入种子子液发酵酵，根据据测定的的粗蛋白白质含量量高低确确定所用用含氮辅辅料。（5）发发酵工艺艺参数优优化。采采取单因因素试验验
29、及SAAS软件件的RSSREGG分析数数据，确确定柑桔桔皮渣的的粒径、含含水率、菌菌种接种种量、ppH、C:N、DOO、温度度、发酵酵时间、发发酵层厚厚度等参参数，以以达到优优化整个个发酵工工艺的目目的。 （6）对对液态发发酵的发发酵液进进行成分分分析，包包括：220种常常见基本本氨基酸酸，可溶溶性蛋白白质及一一些长链链大分子子物质，并并对其进进行脱色色，纯化化处理。为为中试打打下基础础。（7）用用实际饮饮料厂的的柑桔皮皮渣进行行发酵试试验，确确定螺旋旋式压榨榨机工艺艺参数。考考察不同同功率、不不同螺旋旋轴齿距距对柑桔桔皮渣粒粒径、含含水率的的影响。（8）灭灭菌干燥燥工艺参参数确定定。采取取不
30、同温温度烘干干和不同同温度及及风速风风干发酵酵产物，通通过对干干燥成品品中的粗粗蛋白、可可溶性蛋蛋白、纤纤维素的的检测、霉菌含量及经济评价，确定最佳干燥方法。同时，确定使营养成分保留最完整的、灭菌效果最佳的灭菌方法及工艺。整个工艺艺流程如如下：蛋白质高产混合菌复合菌群液体，二级种子液柑桔皮渣压榨脱水调节pH调节C:N接 种发 酵灭菌干燥成 品过 滤纯 化成品灭菌干燥固态发酵粉 碎成 品粉 碎滤渣滤液液态发酵 3.22 可行行性分析析我国柑桔桔研究所所获得过过柑桔皮皮渣发酵酵生产高高蛋白饲饲料的研研究成果果，他们们的开创创性工作作为本课课题的研研究打下下了基础础。本课课题主要要是针对对柑桔研研究
31、目前前的阶段段性成果果中存在在的不足足所作的的必要改改进，因因此本课课题拟选选取的研研究方案案可行，拟拟采取技技术路线线合理。课题组成成员专业业技术覆覆盖面广广，技术术研究力力量强，聘聘请了重重庆市微微生物发发酵技术术方面的的资深专专家，在在发酵方方面积累累了丰富富的研究究和实践践经验。填填写本申申报书之之前，我我们已对对此领域域的国内内外研究究进展和和应用现现状进行行了深入入调研，并并且着手手开展了了前期的的基础性性实验（如如高蛋白白复合菌菌群筛选选及其发发酵工艺艺研究），为为今后课课题的全全面开展展奠定了了基础。此此外，重重庆工商商大学环环境与生生物工程程学院、药药物化学学与化学学生物学学
32、研究中中心拥有有先进的的实验仪仪器和分分析仪器器，能为为我们的的试验研研究提供供良好的的技术平平台。所所以我们们能够圆圆满地完完成本课课题的研研究任务务。4、本项项目的特特色与创创新之处处（1）本本项目的的首要研研究内容容是筛选选能高产产蛋白质质的单一一菌种或或复合菌菌群，并并针对柑柑桔皮渣渣本身氮氮源不足足的缺陷陷，辅以以高氮食食品废渣渣作氮源源，从发发酵菌种种和原料料两个方方面保证证了发酵酵饲料的的高蛋白白品质。（2）采采用螺旋旋式压榨榨机脱水水，降低低和控制制发酵原原料的含含水率，解解决胶糊糊状柑桔桔皮渣引引起微生生物不能能自由繁繁殖以及及含水率率高不易易烘干等等问题；（3）继继固态发发
33、酵法后后，又研研究半液液态发酵酵方法，同同时获得得较好品品质的发发酵饮料料和蛋白白饲料，将将柑桔皮皮渣充分分利用，一一次性开开发出两两种经济济效应较较好的产产品。（4）对对整个发发酵工艺艺流程及及运行参参数进行行优化，为为中试研研究打下下基础。5、预期期研究成成果及项项目的考考核内容容与指标标（1、主主要技术术指标：包括形形成的新新技术、新新工艺、新新装置、新新产品、专专利、标标准（技技术标准准、企业业标准）、论论文专著著数量及及其水平平等；22、经济济考核指指标；33、项目目实施中中形成的的实验室室、研究究室等；4、人人才培养养指标。）5.1 主要技技术指标标获得生产产高蛋白白饲料的的复合发
34、发酵菌群群，优化化整个工工艺流程程和参数数。使发发酵产品品蛋白质质含量提提高到330%以以上，复复合发酵酵菌群的的发酵时时间缩短短到25530小时时；达到到GBTT59115-993仔猪猪、生长长肥育猪猪配合饲饲料、GB889611-888奶牛精精料补充充料等中华人人民共和和国国家家标准或或行业标标准。申请国家家发明专专利1项项，在核核心期刊刊上发表表论文223篇篇。5.2经经济指标标将柑桔皮皮渣资源源化，不不仅可节节省废渣渣的处理理处置费费用（660元/吨），而而且可以以601000元/吨吨的价格格出售饲饲料，提提高厂家家的经济济效益。5.3 人才培培养（1）通通过本项项目研究究，使112名
35、名教师晋晋升高一一级职称称；（2）培培养环境境工程专专业硕士士研究生生122人；化化学工程程与工艺艺、生物物工程专专业34名本本科生以以本项目目相关研研究为题题完成毕毕业设计计（论文文）。6、年度度研究计计划及年年度考核核指标20077.01220077.06 复合菌菌群的筛筛选，得得到蛋白白质高产产菌株的的最佳配配比；同同时，筛筛选辅料料，确定定最佳CC:N比比。20077.06620007.12 发酵工工艺与参参数优化化研究，发发酵液的的纯化技技术的研研究，发发酵产物物灭菌干干燥工艺艺研究。20088.01120008.07 整整理资料料，申请请专利，发发表论文文，项目目结题验验收。（二）
36、研研究基础础与工作作条件1、工作作基础 （1）根根据相关关文献选选定黑曲曲霉、米米曲霉、扣扣囊复膜膜孢酵母母三种菌菌株作为为出发菌菌株，并并作了复复合菌群群的优化化，通过过不同菌菌种的混混合实验验，确定定了三菌菌混合的的发酵样样品中的的粗蛋白白含量最最高。（2）已已初步确确定了三三菌混合合的最佳佳比例，并并得到了了30%的左右右的粗蛋蛋白含量量的发酵酵样品。（3）探探讨了在在混菌比比例为11：1：1情况况下的工工艺条件件，其中中包括菌菌液接种种量、时时间、温温度、ppH等，为为进一步步的研究究打下基基础。（4）建建立了柑柑桔皮渣渣发酵饲饲料蛋白白质及有有关营养养成分的的分析方方法。这这些实验验
37、研究为为本项目目的开展展奠定了了坚实的的基础。2、工作作条件（1）重重庆工商商大学环环境工程程学院、药药物化学学与化学学生物学学研究中中心有先先进的实实验仪器器和分析析仪器，能能为本课课题研究究提供良良好的技技术平台台。（2）课课题组成成员专业业技术覆覆盖面广广，技术术研究力力量强。聘聘请了重重庆市微微生物发发酵技术术方面的的资深专专家，在在发酵方方面积累累了丰富富的研究究和实践践经验。（3）课课题组对对微生物物发酵等等技术已已有较好好的前期期研究基基础。3、申请请人简历历项目申请请人殷钟钟意于119900年毕业业于渝州州大学化化学系化化学教育育专业，220022年获本本科，220044年评为
38、为高级实实验师，主主要从事事实验教教学和科科研工作作，主要要研究方方向是应应用化学学、环保保技术。近5年发发表的主主要论文文有：（1）固固定相络络合萃取取剂处理理水中苯苯酚的性性能研究究，重庆庆环境科科学，220022.244（5） （2）聚聚丙烯型型大孔树树脂对水水中油脂脂的吸附附性能研研究，西西南师范范大学学学报（自自），220044.299（3）工工业含铬铬废水的的络合萃萃取处理理工艺研研究，化化学研究究与应用用，20004.16（44）（4）聚聚丙烯加加热改性性制备大大孔吸附附树脂工工艺及应应用研究究，化学学研究与与应用，220033.155（6）（5）膜膜厚综合合法确定定磷化液液，西
39、南南师范大大学学报报（自），220044.299（4）（6）聚聚丙烯型型大孔树树脂的结结构、性性能和应应用研究究，塑料料工业，220044.322（6）（7）固固定相络络合萃取取剂处理理水中六六价铬性性能研究究与应用用，表面面技术，220044.333（4）（8）铬铬盐生产产区土壤壤和农作作物中铬铬含量状状况调查查分析，重重庆工商商大学学学报(自自)，220033.200(4)（9）从从橙皮中中提取香香精油的的工艺条条件研究究，天然然产物研研究与开开发，220033.155（6）(10)重庆市市郊土壤壤中锌的的调查分分析，重重庆工商商大学学学报（自自），220044.211（3）(11)包含络
40、络合萃取取剂的大大孔树脂脂处理水水中六价价铬研究究，会议议论文，220044.44、承担担或完成成重庆市市科委资资助科研研项目情情况(1)高高浓度难难降解工工业废水水固定床床络合萃萃取技术术研究，重重庆市科科委（攻攻关），220033-20005 ,成果果登记号号：955020006YY00667； (2)新新型吸附附光催化化复合材材料治理理难降解解染料废废水技术术研究,重庆市市科委(攻关), 220033-20005，成果登记号：9502006Y0068；(3)活活性炭纤纤维负载载TiOO2光催催化降解解焦化废废水研究究，重庆庆市科委委（应用用基础），220033-20005；(4)光光催化
41、SBRR处理有有机磷农农药废水水的研究究(合同号号：CSSTC220044 BBB70779),重庆市市科委（应应用基础础）,20004.110-220066.122；(5)阿阿尔茨海海默病天天然活性性药物的的筛选与与物质基基础研究究，重庆庆市科委委重点自自然科学学基金，220044.9-20006.112。（三）查查新报告告（重点点项目需需附查新新报告）五、申请请者承诺诺我保证上上述填报报内容的的真实性性。如果果获得资资助，我我与本项项目组成成成员将将严格遵遵守重重庆市自自然科学学基金计计划项目目管理办办法的的有关规规定，切切实保证证研究工工作时间间，按计计划认真真开展研研究工作作，按时时报
42、送有有关材料料，按要要求做好好结题工工作。申请者（签签字）：年 月 日日 六、申请请者所在在单位及及合作单单位的审审查与保保证1. 申请者所所在单位位学术委委员会的的审查意意见（包包括：对对项目的的意义、特特色和创创新之处处及申请请者的研研究水平平与治学学态度等等签署具具体意见见）：该项目在在国内同同行研究究基础上上，对发发酵菌种种及工艺艺进行了了进一步步的优化化，其产产品的粗粗蛋白含含量有了了显著的的提高，有有一定创创新性，采采用微生生物发酵酵的方法法使废弃弃物资源源化，不不仅解决决了废弃弃物的处处理问题题，还可可创造经经济价值值，对现现代环保保和社会会经济发发展都具具有推动动作用。申申请者
43、治治学严谨谨并有一一定的科科研能力力，曾多多次参与与科研项项目，可可承担此此项目。 学术术委员会会主任（签签章）年月日2. 申申请者所所在单位位审查意意见与保保证已按重重庆市自自然科学学基金计计划项目目管理办办法的的有关规规定对申申请人进进行了资资格审查查，对申申请书内内容进行行了审核核，同意意学术委委员会的的审查意意见，并并保证在在项目获获得资助助后做到到以下几几点：（1）保保证对研研究计划划实施所所需的人人力、物物力和工工作时间间等条件件给予支支持。（2）严严格遵守守重庆市市科委有有关资助助项目管管理、财财务等各各项规定定。（3）督督促项目目负责人人和本单单位项目目管理部部门按重重庆市科科委的规规定及时时报送有有关报表表和材料料并按期期结题。 （44）如项项目获批批准资助助，本单单位将保保证对该该项目实实施中经经费不足足部分给给予配套套。需要说明明的其它它问题：单位负责责人（签签章）单单位（签签章）年年月日3. 合合作单位位的审查查意见与与保证同意参加加合作研研究，保保证对参参加合作作研究人人员时间间及工作作条件的的支持、督督促其按按计划完完成所承承担的任任务。合作单位位1（签章章）合作作单位22（签章章）七、审查查意见市科委业业务处审审查意见见：（签章） 年 月月 日