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1、分子生物学实验实验教学大纲分子生物学实验实验教学大纲 课程名称：分子生物学实验 课程类别：专业选修课 考核方式：考查 适用专业：园艺专业 所属实验室：分子生物学实验 实验学时、学分：32 学时 1 学分 一、实验教学目的 分子生物学是在分子水平上研究生命规律、揭示生命本质的科学。分子生物学实验是生物科学、生物技术专业的必修基础课程之一。分子生物学实验技术，特别是基因克隆重组技术已经成为现代生物技术的核心，已经渗透到生命科学的各个领域，并促进了一批新学科的兴起和发展。本实验课程在本专业人才培养中具有重要的作用，它是培养学生将来从事教学、科研及技术开发工作能力的不可缺少的实验教学环节。本课程以分子
2、生物学基础实验技术为主，开设验证、综合和设计三个类型实验项目。通过本实验课程，使学生掌握分子生物学基础实验技术的基本原理和操作，培养学生观察、思考、分析p 问题和解决问题的能力，以及实事求是、严肃认真的科学态度，为今后的学习和工作奠定基础。二、实验教学要求 开设分子生物学实验，旨在使学生掌握分子生物学实验的基本知识、原理、常用技术和操作技能。培养学生分析p 问题、解决问题的能力和实事求是、严肃认真的科学态度，为今后的学习深造或开展相关的研究、教学等工作奠定基础。三、对学生的指导和要求 （一）在实验教学过程中，要求学生实验前认真预习实验讲义 （二）实验中亲自动手操作，善于观察，作好实验记录 （三
3、）实验结束后详细整理、统计、分析p 实验结果，写出规范的实验报告 四、实验考核方式 考查 70平时（包括习惯、结果、操作、实验报告）+20笔试+10开放实验室。五、实验教学内容 实验项目(一) 分子生物学预备实验（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 验证性 √ 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过介绍实验室规则，规范学生在实验室的行为； 讲解个相关仪器的名称，用途，简单原理和使用方法，让学生学会对它们的操作方法。 实验内容 学习实验室规则； 学习离心机的使用方法； 学习 PCR 仪的使用方法； 学习电泳仪的使用方
4、法； 学习紫外透射仪的使用方法； 学习微量加样器的使用方法； 学习紫外分光光度计的使用方法； 学习恒温摇床的使用方法； 学习电子天平的使用方法； 学习凝胶成像分析p 系统的使用方法。(4) 主要仪器：离心机、PCR 仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像分析p 系统、微量加样器、紫外分光光度计、电子天平、制冰机、烧杯、量筒、容量瓶、三角瓶、试剂瓶、高压灭菌锅。实验项目(二) 基因组 DNA 提取（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 √ 验证性 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过本实验了解并掌握提取基因组 DNA 的原
5、理和步骤，以及相对分子量较大的 DNA 的琼脂糖凝胶电泳技术。 实验内容 匀浆； 酶解细胞过夜。酚/氯仿/异戊醇抽提； 无水乙醇抽提 冷乙醇洗涤； 缓冲液溶解； 电泳； 观察分析p DNA。(4) 主要仪器：玻璃匀浆器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、低温冰箱普通冰箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。实验项目(二) 聚合酶链式反应扩增（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 验证性 √ 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 学会 PCR 反应的基本原理与实验技术。 实验内容 配制反应体系及设置 PCR 仪
6、的各项参数； 利用特定引物，扩增目的 DNA 片段（MTHFR 667 位点）； 琼脂糖凝胶电泳检测分析p 。(4) 主要仪器：超净工作台（间）、高压灭菌锅、PCR 仪、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。说明：1.以上项目为基本实验项目，实际授课过程中选做其中30 学时。2.有些实验在下表分配的学时内可能不能完成，需酌情而定。3.因学科的发展或其他原因，实际所上内容必定有所变动。实验项目(三) 质粒 DNA 的提取（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 验证性 √ 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过本
7、实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。 实验内容 提取质粒； 溶解保存； 酶切； 电泳、染色、检测质粒 DNA。(4) 主要仪器：台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。实验项目(五) 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 √ 验证性 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的方法和技术。 实验内容 胶板的制备； 加样； 电泳； 观察分析p DNA。(4) 主要仪器：琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪、
8、微量加样器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。实验项目(六) 重组质粒的构建（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 √ 验证性 设计性 综合性 (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过实验掌握重组 DNA 连接的方法。 实验内容 制备重组 DNA； (4) 主要仪器：台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。实验项目(七)大肠杆菌的遗传转化及筛选（4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2
9、) 项目性质：演示性 验证性 设计性 综合性 √ (3) 项目主要目的要求： 实验要求 通过实验掌握遗传转化及筛选重组子的方法。 实验内容 重组质粒的转化 (4) 主要仪器：台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。实验项目(八) 生物大分子遗传信息分析p （4 学时）：(1) 项目类别：必做 √ 选做 (2) 项目性质：演示性 验证性 设计性 综合性 √ 六、实验学时分配 序号 实验项目 课时 1 分子生物学预备实验 4 2 基因组 DNA 的提取 4 3 聚合酶链式反应扩增 4 4 质粒 DNA 的提取 4 5 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 4 6 重组质粒的构建 4 7 大肠杆菌的遗传转化及筛选 4 8 生物大分子遗传信息分析p 4 合计 32 七、推荐教材与辅助教学资料 1 分子生物学实验指导（第 3 版），魏群主编，高等教育出版社，20_年。2 精编分子生物学实验指导（第 1 版），刘维全主编，化学工业出版，2021年。3 分子生物学实验（第 1 版），李钧敏主编，浙江大学出版社，2021 年。第 5 页 共 5 页