《弓形虫病诊断4593.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《弓形虫病诊断4593.docx（16页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、Evaluation Warning: The document was created with Spire.Doc for .NET.应用弓形虫病诊断试剂盒对新疆部分地区牛、牦牛和马弓形虫感染的血清学调查热孜万古丽丽.阿布布都拉摘要:弓形形虫病是是一种分分布广泛泛危害严严重的人人兽共患患病,不但在在公共卫卫生上有有很重要要的意义义,对畜牧牧养殖业业也可引引起巨大大的经济济损失。目前，新疆对牛、牦牛和马弓形虫感染进行的系统研究还很少，为摸清本地区三种动物弓形虫感染情况，我们对新疆部分地区的牛、牦牛和马进行随机抽样,应用T（R）-MT“荣研”日本试剂盒采用间接血凝实验(IHA)进行血清学调查。
2、本实验对塔城沙湾县四道河子地区牛，阿勒泰地区的牛，104团乌拉斯台的牦牛和马进行检测,其感染率:塔城沙湾县区牛为53.85%(35/65), 阿勒泰地区牛为43.24%(16/37), 104团乌拉斯台牦牛为40.00%（28/70）, 104团乌拉斯台马为5%（1/20），结果表明弓形虫在这三种动物中均有相当高的感染率,应引起人们的足够重视,加强防范。关键词：新新疆部分分地区牛牛、牦牛牛和马；弓形虫虫病； 弓形虫虫病诊断断试剂盒盒；间接接血凝实实验前言弓形虫病(又名弓弓形体病病或弓浆浆虫病)是一种种人兽共共患寄生生性原虫虫病，在在国内最最早由于于恩庶（1955年）在猫、兔体内检获虫体1，谢天
3、华（1964年）在江西报道了人体内病例。1977年上海农科院报道了猪的群发病例2。目前已知二百多种动物可受感染，在肉用畜禽中，猪、牛、羊、鸡均可感染。弓形虫病不仅对人类造成严重危害，也对畜牧业的发展造成很大的影响。弓形虫病的的病原 100 存存在形式式包括以以下几种种形式: 速殖殖子、包包囊、裂裂殖体、配配子体、卵卵囊。速速殖子呈呈弓形、月月牙形或或香蕉形形，一端端尖，一一端钝，大大小为117umm24umm，主要要见于急急性病例例；包囊囊也称组组织囊，见见于慢性性病例的的多种组组织，呈呈圆形，有有较厚的的囊膜，直直径50069uum，可可在感染染动物体体内长期期存在。囊囊内虫体体称慢殖殖子，
4、包包囊形成成是机体体免疫力力作用虫虫体的结结果，若若免疫力力消失，慢慢殖子从从包囊中中释放出出来，可可以侵入入新的细细胞，再再度引起起发病；速殖子子、包囊囊可出现现于中间间宿主的的多种细细胞中。裂裂殖体呈呈圆形，游游离的裂裂殖子大大小为7710uum2.553.55um,前端尖尖，后端端钝圆；配子体体见于终终末宿主主,大小配配子结合合形成合合子，合合子形成成卵囊；卵囊呈呈球形，孢孢子化后后为亚球球形，大大小11114uum911uum。裂裂殖体和和有性生生殖阶段段虫体可可出现于于猫和其其他猫科科动物小小肠绒毛毛上皮细细胞内。 弓形形虫生活活史可分分为肠内内阶段和和肠外阶阶段。肠肠内阶段段只出现
5、现于终末末宿主体体内，肠肠外阶段段可出现现于终末末宿主和和中间宿宿主体内内。其中中，中间间宿主的的种类很很多，已已报到的的有2000多种种，包括括肉食兽兽、食虫虫动物、啮啮齿动物物、猪、草草食兽、灵灵长类、人人、其他他哺乳动动物和鸟鸟类。终终末宿主主为食肉肉动物，已已证明的的有猫和和其他一一些猫科科动物。中中间宿主主通过摄摄入被弓弓形虫卵卵囊污染染的食物物或饮水水或通过过摄食含含包囊或或速殖（滋滋养体）的的其它动动物而感感染。猫猫（以及及其他猫猫科动物物）是终终末宿主主，在弓弓形虫传传播中起起重要作作用。包包囊主要要存在于于被感染染动物的的组织中中，内有有以缓慢慢方式进进行增殖殖的缓殖殖子。被
6、被摄入的的卵囊或或缓殖子子一旦进进入肠道道，子孢孢子或缓缓殖子进进入快速速增殖阶阶段速殖子子阶段。速速殖子在在肠道的的固有层层增殖，并并最终传传播到全全身，速速殖子可可引起全全身组织织损伤，并并最终发发育为缓缓殖子、形形成包囊囊。如果果宿主在在怀孕期期间被感感染，母母体血液液中的速速殖子可可通过胎胎盘进入入胎儿。目前，新疆疆对牛、牦牦牛和马马的弓形形虫感染染进行系系统研究究很少，为为摸清本本地区家家畜弓形形虫感染染情况，我我们对塔塔城沙湾湾县四道道河子地地区牛、阿阿勒泰地地区的牛牛、1004团乌乌拉斯台台的牦牛牛和马进进行弓形形虫感染染的抽样样调查，由由于毕业业实习时时间比较较短,收集血血清工
7、作作比较繁繁琐及试试验条件件的限制制等原因因，本次次试验我我们应用用T（RR）-MMT“荣研”日本试试剂盒采采用间接接血凝试试验（IIHA）对对采样进进行弓形形虫感染染的血清清学调查查。 本人结合合毕业进进行了本本次试验验研究，现将应用T（R）-MT“荣研”日本试剂盒检测新疆牛，牦牛和马自然感染弓形虫的血清结果报告如下。 1 实验材材料与方方法1.1 供供试三种种动物（牛牛、牦牛牛、马）血血清 按随机抽样样方法，2006年35月分批抽取了塔城沙湾县四道河子地区65头牛血，阿勒泰地区37头牛血，104团乌拉斯台地区70头牦牛血和20头马血作为调查标本，对所有血液进行血清分离。所有待检血清均保存于
8、-25冰箱中。1.2 诊诊断试剂剂T（R）-MT“荣研”日本试试剂盒内内匹配的的弓形虫虫诊断用用缓冲液液（规格格：500ml/瓶），凝凝集乳液液（规格格：122ml/瓶），均均是日本本荣研化化学株式式会社生生产的动动物用医医药品。本本诊断用用试剂盒盒由日本本与动医医学院合合作课题题经费所所购买，由由日方提提供。以以上试剂剂于210冰箱中中冷藏保保存。1.3 实实验仪器器96孔VV型一一次性血血凝板；微量移移液器枪枪头、枪枪头盒,以上仪仪器购自自新疆化化玻公司司；2000ull、1000ul、20uul微量量移液器器、标号号笔等,由指导导老师提提供。1.4 检检测方法法本次试验的的方法原原理是弓
9、弓形虫的的微量间间接血凝凝实验（IHA）。其步骤如图1-1所示:图1-1 弓形虫虫正向间间接凝集集实验术术式表及及步骤流流程图孔号 1 2 3 4 5 66最终血清稀稀释度 1:88 1:116 1:332 1:664 1:1288 11:2556缓冲液(uul) 433.7 225 25 25 255 255被检血清（ul） 6.3 25 25 25 25 25 弃25抗原（ull） - - 25 25 255 255将反应板置置于桌面面上水平平震荡，充充分混合合盖上一块与与反应板板大小相相等的玻玻璃板以以防灰尘尘落入，室室温下静静置一夜夜（12224hh）判定图1-2判判定标准准参考图图判
10、定标准判定标准以以抗体滴滴度11:322为阴性性；=11:322为疑阳阳性；=1:64为为阳性。如如图1-2所示示。3：孔底有有抗原抗抗体较大大的凝集集块，但但周围凝凝集不规规则。2：孔底有有抗原抗抗体较大大的凝集集块，且且凝集均均匀。1：凝集团团块中等等大小 。05：标标准阴性性对照。0：孔底有有非常明明显的小小的圆形形沉淀物物 。2 实验结结果2.1 新新疆三种种动物弓弓形体感感染调查查结果塔城沙湾县县四道河河子地区区检查牛牛65头头，检出出阳性335头，感感染率为为53.85%；阿勒勒泰地区区检查牛牛37头头，检出出阳性116头，感感染率为为43.24%，1004团乌乌拉斯台台检查牦牦牛
11、700头，检检出阳性性28头头，感染染率为440%，1104团团乌拉斯斯台检查查马200头，检检出阳性性1头，感感染率为为5%。抽抽样调查查各畜类类的阳性性率详见见表2-1。2-1 新疆三种种畜类弓形形体感染染调查结结果家畜调查地区检测头数阳性数阳性率牛塔城沙湾县县四道河河子地区区653553.855%阿勒泰地区区371643.244%牦牛104团乌乌拉斯台台702840.000%马104团乌乌拉斯台台2015%合计三个地区1928041.677%2.2 不不同地理理条件阳阳性分布布情况 下图图所示，对对塔城沙沙湾县四四道河子子地区检检查牛的的阳性率率和阿勒勒泰地区区检查牛牛的阳性性率相比比较
12、，塔塔城沙湾湾县四道道河子地地感染率率高于110%。1104团团乌拉斯斯台检查查牦牛感感染率较较高，而而1044团乌拉拉斯台马马的感染染率较底底。2.3 三种不不同动物物阳性率率对比 三种种家畜中中弓形体体感染率率最高是是牛，如如45%，第二二个是牦牦牛为440%，最最底的是是马，其其感染率率为5%。详见见图表22-3。3 分析与与讨论3.1 通过对对表2-1的统统计分析析，笔者者发现塔塔城沙湾湾县四道道河子地地区以及及阿勒泰泰地区牛牛弓形虫虫平均感感染率为为45% ，1104团团乌拉斯斯台的牦牦牛弓形形虫平均均感染率率为400%，1104团团乌拉斯斯台的马马弓形虫虫平均感感染率为为5%。我我
13、国对牛牛的弓形形虫检测测阳性率率为黄牛牛为111.299%、水水牛8.56%、奶牛牛23.112%。张张德林等等对天祝祝县牦牛牛检测的的阳性率率高达667.44%44；王王虎、韩韩秀敏等等青海省省弓形虫虫病的研研究指出出青海省省门源县县牦牛感感染率高高达711.433%和59.31%5；叶玉玉美、魏魏德琼等等对云南南省弓形形虫感染染调查结结果为牛牛的感染染率分别别为8.4%和和6.22%66；摧摧君兆（执执笔）的的对144个省（市市）344种蓄、禽禽弓形体体病调查查为新疆疆马的感感染率为为7.443%7。与与上述结结果相比比，笔者者发现本本次调查查的牛、牦牦牛和马马的阳性性率属于于中间范范围。
14、但但结果表表明弓形形虫病在在新疆某某些地区区的不同同家畜中中呈现一一定的流流行趋势势，应引引起有关关部门的的重视。3.2 由于抽抽检的样样品中，不不同地理理条件弓弓形体的的感染率率不同,对塔城城沙湾县县四道河河子地区区检查牛牛的阳性性率高于于阿勒泰泰地区（约约10%），1104团团乌拉斯斯台牦牛牛感染率率较高，而而1044团乌拉拉斯台马马的感染染率较底底，如图图2-22 所示示。所以以笔者推推测弓形形虫的感感染应当当与地理理条件有有关系；在对农农户的饲饲养管理理条件的的观察中中发现，个个别农户户家圈舍舍的卫生生条件较较差,饲饲料保存存不当,仓库简简易,致致使不少少老鼠光光顾和猫猫的经常常光临,
15、导致有有弓形虫虫卵囊的的粪便污污染环境境、饲料料及饮水水,当家家畜食用用后造成成感染。老老鼠在农农户家里里普便存存在,是是弓形虫虫常见的的中间宿宿主,猫猫是弓形形虫唯一一的终末末宿主, 两者者在弓形形虫传播播中均起起重要作作用。因因此,农农户家内内应尽量量不养猫猫或对猫猫严格管管理,禁禁止其四四处乱跑跑,并注注意加强强灭鼠,以减少少家畜对对弓形虫虫的感染染。通过过分析发发现, 饲养管管理条件件好的感感染率低低，饲养养管理条条件差的的感染率率较高，因因此笔者者有理由由推测家家畜弓形形虫的感感染与环环境因素素影响关关系比较较大。3.3 许多动动物对弓弓形虫都都有一定定的免疫疫力，故故感染后后多不表
16、表现临床床症状，在在组织内内形成包包囊后转转为隐性性感染。包包囊是弓弓形虫在在中间宿宿主体内内的最终终形式，可可存活数数月甚至至终生。故故某些场场内家畜畜弓形虫虫感染的的阳性率率虽然高高，但急急性发病病却很少少。所以以说,尽管牛牛场及农农户家的的牛，牦牦牛和马马并没有有弓形虫虫病史，仍仍然不可可忽视对对该病的的防治工工作。3.4 本实验验调查牛牛，牦牛牛和马弓弓形虫感感染率采采用的的的是T（RR）-MMT“荣研”日本试试剂盒，该该试剂盒盒为商品品化动物物专用试试剂盒，在亚太地区许多发达国家和发展中国家被广泛应用,并经反复实验验证，特异性好，检出率高。本实验严格按照操作说明书进行，按照既定判断标
17、准进行判定。3.5 目目前对弓弓形虫感感染的实实验室检检查可以以采用血血清学、病病原学、分分子生物物学等方方法。病病原学方方法虽较较为简单单，但敏敏感性差差、耗时时太长、容容易漏诊诊；以PPCR为为代表的的分子生生物学诊诊断方法法已广泛泛应用于于寄生虫虫DNAA的检测测，其结结果虽然然检出结结果准确确，外界界因素影影响小，非非特异性性反应较较少，比比较适合合弓形虫虫的检测测，但是是由于成成本比较较高，现现在在基基层难以以推广。血血清学检检测，即即一般采采用直接接凝集实实验(DDHT)、 间接血血凝试验验（IHHA）、酶酶联免疫疫吸附试试验（EELISSA）等等方法检检测弓形形虫抗原原或循环环抗
18、原。IHA已有商品化的诊断试剂盒,对仪器的要求不如ELISA那么复杂、精密,比较起来更为简单、易行,而且结果也比较可靠,所以本次实验便选择了此种方法。3.6 新疆是是少数民民族聚居居的地区区，广大大农牧民民有喜食食烤肉的的风俗，但但是在烤烤肉的加加工过程程中原始始的加工工方法不不易杀死死弓形虫虫的包囊囊和速殖殖子等感感染原，这这样一来来，人们们很容易易在食用用不完全全烤熟的的肉类以以及内脏脏时感染染弓形虫虫；而且且怀孕女女性更易易感染，怀怀孕期间间被感染染，母体体血液中中的速殖殖子可通通过胎盘盘进入胎胎儿，所所以有许许多少数数民族妇妇女生下下先天有有缺陷，智智力障碍碍的孩子子的临床床报道，严严
19、重者甚甚至发生生流产9。所所以应加加强对家家畜弓形形虫的检检测，以以便早期期发现流流行态势势并进行行控制，不不仅可以以减轻畜畜牧养殖殖业的经经济损失失，而且且对于维维护人们们的健康康有着极极其重大大的意义义。3.7 笔者认认为广大大养殖户户应当做做好弓形形虫病的的预防工工作，建建议预防防措施有有如下几几条：圈舍保保持清洁洁，定期期消毒；加强猫猫的饲养养管理，防防止猫及及其排泄泄物污染染畜舍，饲饲料，饮饮水；消灭老老鼠；家畜流流产的胎胎儿及其其排泄物物，以及及死于本本病的可可疑病尸尸应严格格处理等等。弓形形虫病的的根本防防制手段段是研制制行之有有效使用用方便的的疫苗，但但弓形虫虫生活史史复杂，感
20、感染途径径多，且且可形成成包囊逃逃避宿主主的免疫疫攻击，因因此研制制弓形虫虫疫苗较较为困难难。现阶阶段还没没有较完完善的商商品化的的弓形虫虫疫苗可可供使用用，一切切还处于于研究阶阶段。4 结论4.1 经经本试验验研究，了了解到在在试验区区牛、牦牦牛、马马等三种种动均不不同程度度感染弓弓形虫病病，其感感染率: 塔城城沙湾县县区牛为为53.85%(355/655), 阿勒泰泰地区牛牛为433.244(166/377), 1044团乌拉斯斯台牦牛牛为400.000%,1044团乌拉斯斯台马为5%，这这三种动动物中相相当高的的感染率率应引起起人们的的足够重重视，加加强防范范。4.2 本本实验首首次采用
21、用专门用用于检测测动物弓弓形虫感感染的商商品化试试剂盒(日本制制造)对对新疆牛牛、牦牛牛和马进进行弓形形虫的血血清学调调查,通通过试验验表明，该该试剂盒盒拥有反反应灵敏敏、快捷捷、检出出率高的的特点，和和部分专专家采用用间接血血凝实验验对国内内其他地地区的家家畜进行行的血清清学调查查相比, 此方方法调查查得动物物的弓形形虫发病病率与国国内其他他专家的的调查结结果44基本本相符。谢 辞在写作这篇篇论文的的过程中中，我阅阅读了大大量资料料，包括括图书馆馆藏书，各各种相关关期刊、杂杂志和学学报，还还在上网网搜索了了许多相相关信息息与材料料。在此此，对引引用的资资料的出出版社及及原作者者表示感感谢。这
22、篇论文的的顺利完完成也得得到了我我的实习习单位新新疆农业业大学动动医学院院（寄生生虫教研研室）的的吾其尔尔，巴音音查汗等等老师的的大力支支持，他他们为我我采样和和做实验验提供各各种便利利条件。最最重要的的是我的的指导教教师吾其其尔、巴巴音查汗汗老师对对论文的的写作做做了及时时而恰当当的指导导，并提提出了许许多宝贵贵的建议议和修改改意见，他他们多次次帮助我我修改论论文,才才使这篇篇论文去去粗取精精,布局局也更合合理,更更严谨,再次向向他们表表示最诚诚挚的谢谢意！最后感谢所所有在我我完成论论文过程程中提供供帮助的的老师,同学和和朋友们们。还要要感谢我我的家人人,是他他们四年年来支持持我完成成学业,
23、给予我我现今的的一切.参考文献：1于恩恩庶.弓形虫虫病学M.福州:福建科科学技术术出版社社,19992,3-6.2 叶扣贯,范范锋,崔洪平平等.无锡地地区商品品屠宰弓弓形虫感感染血清清学调查查.畜禽业业,20004,5：43.3 杨树男,尤尤曙峰,徐智慧慧等.119966-19999年年无锡市市服务人人员弓形形虫抗体体血清学学调查.实用预预防医学学,20004,11(3):5066-5077.4 李晓卉.青青海牦牛牛弓形体体病的血血清学调调查.中国草草食动物物J,20004,24(4):30-31.5 王虎,韩秀秀敏.青海省省弓形虫虫病研究究概况.中国寄寄生虫病病防治杂杂志JJ,220022,
24、155(3):1886,1191.6 叶玉美,魏魏德琼,涂育发发.云南省省动物弓弓形虫感感染调查查.中国寄寄生虫学学与寄生生虫病杂杂志JJ,220022,200(4):2555.7摧君君兆（执执笔）.对144个省（市市）344种蓄、禽禽弓形体体病调查查.中国国兽医杂杂志JJ,119888,144(6):266-299.8许慧慧,倪安平平.弓形虫虫的检测测.国外医医学寄生生虫病分分册,220044,311(5):20042077.9欧阳阳小梅，邓邓锡栋.乌鲁木木齐市育育龄妇女女和新生生儿弓形形虫感染染调查J. 中国国寄生虫虫学与寄寄生虫病病杂志,19999，17（5）：3117.10汪汪明.兽医
25、寄寄生虫学学M.北京京:中国农农业出版版社,220044,1(3):7273,27772788.11谢谢德华,翁亚彪彪,朱兴全全.我国猪猪弓形虫虫病的研研究概况况.中国兽兽医寄生生虫学,20004,112(22):33335.新疆农业大大学毕业论文 课 题题:应用弓形虫虫病诊断断试剂盒盒对新疆疆部分地地区牛、牦牦牛和马马弓形虫虫感染的的血清学学调查 姓 名名:热孜万古丽丽.阿布布都拉 学 院院:动物医学学学院 专 业业:临床医学 班 级级:015班 学 号号:01363315441 指导教师:吾其尔、巴巴音查汗汗 职职称: 副教授授2006年年6月114日目 录摘要1关键词1前言221 实验材材料与方方法2 1.1供试试三种动动物（牛牛、牦牛牛、马）血血清21.2诊断断试剂21.3实验验仪器31.4 检检测方法法32 实验结结果43 分析与与讨论54 结论6谢辞7参考文献8