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1、胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响二、实验原理二、实验原理v人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。原分解而增高血糖。v 人和动物体内，血糖浓度受各种激素人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节而
2、维持恒定。胰岛素能降低血糖；其调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激素则具有升高血糖的作用，其中他很多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛索以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛索促进肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖促进肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低血糖；肾上腺素促的氧化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。进糖原分解而增高血糖。三、实验材料三、实验材料v1、家兔。家兔。v2、722N型分光光度计。型分光光度计。v3、试剂。、试剂。v（1）草酸钠。）草酸钠。v（2）葡萄糖。）葡萄糖。v（3）肾上腺素）肾上腺素l mg/ml。v（
3、4）胰岛素。）胰岛素。四、实验方法四、实验方法v 1动物准备：取正常家兔一只，实验前预先饥动物准备：取正常家兔一只，实验前预先饥饿饿16 h，称体重，称体重(一般为一般为23 kg)。v 2取血：心脏采血，取血：心脏采血，放入含抗凝剂的试管放入含抗凝剂的试管中，约需中，约需5ml，混匀。（抗凝血，混匀。（抗凝血1）v 3注射激素后取血：取饿兔血后，其中一组在注射激素后取血：取饿兔血后，其中一组在兔皮下注射胰岛素，剂量按兔皮下注射胰岛素，剂量按1 U/kg体重计算，并记体重计算，并记录注射时间。录注射时间。30分钟后再取血。分钟后再取血。另一组在兔皮另一组在兔皮下注射肾上腺素，剂量按下注射肾上腺
4、素，剂量按0.4 mg/kg体重计算。并体重计算。并记录注射时间。记录注射时间。15分钟后再取血分钟后再取血。（抗凝血（抗凝血2)制备无蛋白血滤液制备无蛋白血滤液v3.5ml蒸馏水蒸馏水+0.5ml抗凝血抗凝血+0.5ml1/3mol/L硫酸硫酸+0.5ml 10%钨酸钠钨酸钠 v 混匀后离心五分钟，三档（混匀后离心五分钟，三档（1500转转/分），分），将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。即为无蛋白血滤液即为无蛋白血滤液 血糖管血糖管试剂试剂ml空白管标准管测定管1测定管2无蛋白血滤液无蛋白血滤液 一 一1ml1ml标准葡萄糖应用液标准葡萄糖应用液 一
5、一1ml一一蒸馏水蒸馏水2ml1ml1ml1ml碱性铜试剂碱性铜试剂2ml2ml2ml2ml混匀，置沸水浴中煮混匀，置沸水浴中煮8min。取出用自来水冷却（切勿摇动）。取出用自来水冷却（切勿摇动）磷钼酸试剂磷钼酸试剂2ml2ml2ml2ml混匀后放置混匀后放置2min，临比色前加水至，临比色前加水至25ml比色测定将各管颠倒混匀后，用空白管调零，在将各管颠倒混匀后，用空白管调零，在620nm处测定吸光值。处测定吸光值。操作注意操作注意v1、等水沸腾后，才能放入血糖管。加热要准、等水沸腾后，才能放入血糖管。加热要准确确8分钟。分钟。v2、冷却时切不可摇动血糖管，以免还原的氧、冷却时切不可摇动血糖
6、管，以免还原的氧化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果。化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果。v3、加入磷钼酸后迅速比色。、加入磷钼酸后迅速比色。v4、分光光度计的使用。、分光光度计的使用。分光光度计的使用分光光度计的使用1、接通电源，打开比色皿盖，预热、接通电源，打开比色皿盖，预热20-30分钟后，调分钟后，调节波长至所需波长。节波长至所需波长。2、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格，其、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格，其余放测定溶液。将比色皿盖盖上，此时空白溶液在光余放测定溶液。将比色皿盖盖上，此时空白溶液在光路上。将光点调到路上。将光点调到“T”，调节，调节 T为为10
7、0%。3、将光点调到、将光点调到“A”，轻轻拉动比色架固定拉杆，使，轻轻拉动比色架固定拉杆，使第二个比色皿溶液处在光路中，此时读数即为该溶液第二个比色皿溶液处在光路中，此时读数即为该溶液的吸收度。的吸收度。4、依次拉出第三、第四个比色皿，分别读取吸收度。、依次拉出第三、第四个比色皿，分别读取吸收度。5、测定完毕，先打开比色皿盖，再断电源。、测定完毕，先打开比色皿盖，再断电源。结果计算测定管吸收度测定管吸收度标准管吸收度标准管吸收度0.10.5551/=1L血液中的血糖血液中的血糖mmol数数此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢