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1、实验室常常用染料料性能介介绍及常常用药品品试剂和和培养基基的配制制一、生物物标本常常用染料料性能简简介(一)天天然染料料1、苏木木精 苏苏木精是是从南美美的苏木木(热带带豆科植植物)干干枝中用用乙醚浸浸制出来来的一种种色素,是是最常用用的染料料之一。苏苏木精不不能直接接染色,必必须暴露露在通气气的地方方,使他他变成氧氧化苏木木精(又又叫苏木木素)后后才能使使用,这这叫做“成熟”。苏木木精的“成熟”过程需需时较长长,配置置后时间间愈久,染染色力愈愈强。被被染材料料必须经经金属盐盐作媒剂剂作用后后才有着着色力。所所以在配配制苏木木精染剂剂时都要要用媒染染剂。常常用的媒媒染剂有有硫酸铝铝按、钾钾明矾
2、和和铁明矾矾等。苏木精是是淡黄色色到锈紫紫色的结结晶体,易易溶于酒酒精,微微溶于水水和甘油油,是染染细胞核核的优良良材料,他他能把细细胞中不不同的结结构分化化出各种种不同的的颜色。分分化时组组织所染染的颜色色因处理理的情况况而异,用用酸性溶溶液(如如盐酸酒精)分分化后呈呈红色,水水洗后仍仍恢复青青蓝色,用用碱性溶溶液(如如氨水)分分化后呈呈蓝色,水水洗后呈呈蓝黑色色。2、洋红红 洋红红又叫胭胭脂红或或卡红。一一种热带带产的雌雌性胭脂脂虫干燥燥后,磨磨成粉末末,提取取出虫红红,再用用明矾处处理,除除去其中中杂质,就就制成洋洋红。单单纯的洋洋红不能能染色,要要经酸性性或碱性性溶液溶溶解后才才能染色
3、色。常用用的酸性性溶液有有冰醋酸酸或苦味味酸,碱碱性溶液液有氨水水、硼砂砂等。洋红使细细胞核的的优良染染料,染染色的标标本不易易褪色。用用作切片片或组织织块染都都适宜,尤尤其适宜宜于小型型材料的的整体染染色。用用洋红配配成的溶溶液染色色后能保保持几年年。洋红红溶液出出现浑浊浊时要过过滤后再再用。(二)人人工染料料人工染料料,即苯苯胺染料料或煤焦焦油染料料,种类类很多,应应用极广广。它的的缺点是是经日光光照射容容易褪色色,苯胺胺蓝、亮亮绿、甲甲基绿等等更易褪褪色。在在制片中中注意掌掌握酸碱碱度,并并避免日日光直射射,也能能经几年年不褪色色。1、酸性性品红 酸性品品红是酸酸性染料料,呈红红色粉末末
4、状,能能容于水水,略溶溶于酒精精(0.3%)。他他是良好好的细胞胞制染色色剂,在在动物制制片上应应用很广广,在植植物制片片上用来来染皮层层、髓部部等薄壁壁细胞和和纤维素素壁。他他跟甲基基绿同染染,能显显示线粒粒体。组织切片片在染色色前先浸浸在带酸酸性的水水中,可可增强它它的染色色力。酸酸性品红红容易跟跟碱起作作用,所所以染色色过度,易易在自来来水中褪褪色。2、刚果果红 刚刚果红是是酸性染染料,呈呈枣红色色粉末状状,能溶溶于水喝喝酒精,遇遇酸呈蓝蓝色。他他能作染染料,也也用作指指示剂。他他在植物物制片中中常作为为苏木精精或其他他细胞染染料的衬衬垫剂。他他用来染染细胞质质时,能能把胶制制或纤维维素
5、染成成红色。在在动物组组织制片片中用来来染神经经轴、弹弹性纤维维、胚胎胎材料等等。刚果果红可以以跟苏木木静作二二重染色色,也可可用作类类淀粉染染色,由由于他能能溶于水水和酒精精,所以以洗涤和和脱水处处理要迅迅速。3、甲基基蓝 甲甲基蓝是是弱酸性性染料,能能溶于水水和酒精精。甲基基蓝在动动植物的的制片技技术方面面应用极极广。他他跟伊红红合用能能染神经经细胞,也也是细菌菌制片中中不可缺缺少的染染料。它它的水溶溶液是原原生动物物的活体体染色剂剂。甲基基蓝极易易氧化,因因此用他他染色后后不能长长久保存存。4、固绿绿 固绿绿是酸性性染料,能能溶于水水(溶解解度为44%)和和酒精(溶溶解度为为9%)。固固
6、绿是一一种染含含有浆质质的纤维维素细胞胞组织的的染色剂剂,在染染细胞和和植物组组织上应应用极广广。他和和苏木精精、番红红并列为为植物组组织学上上三中最最常用的的染料。5、苏丹丹 苏丹丹是弱酸酸性染料料,呈红红色粉末末状,易易溶于脂脂肪和酒酒精(溶溶解度为为0.115%)。苏苏丹是脂肪肪染色剂剂。 6、伊红红 这类类染料种种类很多多。常用用的伊红红Y,是是酸性染染料,呈呈红色带带蓝的小小结晶或或棕色粉粉末状,溶溶于水(115摄氏氏度是溶溶解度达达44%)和酒酒精(溶溶于无水水酒精的的溶解度度为2%)。伊伊红在动动物制片片中广泛泛应用,是是很好的的细胞质质染料,常常用作苏苏木精的的衬染剂剂。 7、
7、碱性性品(复复)红 碱性品品红是碱碱性染料料,呈暗暗红色粉粉末或结结晶状,能能溶于水水(溶解解度1%)和酒酒精(溶溶解度88%)。碱碱性品红红在生物物学制片片中用途途很广,可可用来染染色胶原原纤维、弹弹性纤维维、嗜复复红性颗颗粒和中中枢神经经组织的的核质。在在生物学学制片中中用来染染维管束束植物的的木质化化壁,又又作为原原球藻、轮轮藻的整整体染色色。在细细菌学制制片中,长长用来鉴鉴别结核核杆菌。在在 尔根根氏反应应中用作作组织化化学试剂剂,已核核查脱氧氧核糖核核酸。 8、结晶晶紫 结结晶紫是是碱性染染料,能能溶于水水(溶解解度9%)和酒酒精(溶溶解度88.755%)。结结晶紫在在细胞学学、组织
8、织学和细细菌学等等方面应应用极广广,是一一种优良良的染色色剂。他他是细胞胞核染色色常用的的,用来来显示染染色体的的中心体体,并可可染淀粉粉、纤维维蛋白、神神经胶质质等。凡凡是用番番红和苏苏木精或或其他染染料染细细胞核不不能成功功时,用用它能得得到良好好的结果果。用番番红和结结晶紫作作染色体体的二重重染色,染染色体染染成红色色,纺锤锤丝染成成紫色,所所以也是是一种显显示细胞胞分裂的的优良染染色剂。用用结晶紫紫染纤毛毛,效果果也很好好。用结结晶紫染染色的切切片,缺缺点是不不易长久久保存。 9、龙胆胆紫 龙龙胆紫是是混合的的碱性染染料,主主要是结结晶紫和和甲基紫紫的混合合物。在在必要是是,龙胆胆紫能
9、跟跟结晶紫紫互相替替用。医医药上用用的紫药药水,主主要成分分是甲基基紫,需需要时能能代替龙龙胆紫和和结晶紫紫。 10、中中性红 中性红红是弱碱碱性染料料,呈红红色粉末末状,能能溶于水水(溶解解度4%)和酒酒精(溶溶解度11.8%)。它它的碱性性溶液中中呈现黄黄色,在在强碱性性溶液中中呈蓝色色,而在在弱酸性性溶液中中呈红色色,所以以能用作作指示剂剂。中性性红无毒毒,常做做活体染染色的染染料,用用来染原原生动物物和显示示动植物物组织中中活细胞胞的内含含物等。陈陈久的中中性红水水溶液,用用作显示示尼尔体体的常用用染料。 11、番番红 番番红是碱碱性染料料,能溶溶于水和和酒精。番番红是细细胞学和和动植
10、物物组织学学生常用用的染料料,能染染细胞核核、染色色体和植植物蛋白白质,示示维管束束植物木木质化、木木栓化和和角质化化的组织织,还能能染孢子子囊。 12、亚亚甲蓝或或美蓝 亚甲蓝蓝或美蓝蓝是碱性性染料,呈呈蓝色粉粉末状,能能溶于水水(溶解解度9.5%)和和酒精(溶溶解度66%)。亚亚甲蓝是是动物学学和细胞胞学染色色上十分分重要的的细胞核核染料,其其优点是是染色不不会过深深。 13、甲甲基绿 甲基绿绿是碱性性染料。它它是绿色色粉末状状,能溶溶于水(溶溶解度88%)和和酒精(溶溶解度33%)。甲甲基绿是是最有价价值的细细胞和染染色剂,细细胞学上上常用来来染染色色质,跟跟酸性品品红一起起可作植植物木
11、质质部的染染色。 二、常用用药品试试剂和培培养基的的配制(一)反反应剂1、检查查葡萄糖糖试剂配方一本尼迪迪克(BBeneedicct)溶溶液(1) 在4000毫升蒸蒸馏水中中溶解885克柠柠檬酸钠钠和500克无水水碳酸钠钠。(2) 在50毫毫升加热热的蒸馏馏水中溶溶解8.5克硫硫酸铜。把硫酸铜铜溶液缓缓缓倒入入柠檬酸酸钠-碳碳酸钠溶溶液中,边边加边搅搅拌,如如果产生生沉淀,要要过滤。本本尼迪克克溶液配配制后能能长期使使用(存存放时间间较久而而产生沉沉淀是,取取上层清清液使用用,不必必重新配配制)。 本尼迪克克溶液用用来测试试食物、血血液和尿尿中的葡葡萄糖,可可测出00.155 00.200%的
12、葡葡萄糖。这这种溶液液跟未知知物同加加热时,如如果未知知物中有有葡萄糖糖,会形形成红色色的氧化化亚铜沉沉淀物。 配方二 裴林(FFehllingg)溶液液 (1)把把34.5克硫硫酸铜溶溶于5000毫升升蒸馏水水中。 (2)把把1255克氢氧氧化钾(钠钠)和1173克克酒石酸酸钾钠溶溶解在5500毫毫升蒸馏馏水中。 上述两种种溶液应应分别保保存。在在检测葡葡萄糖时时,使他他们等量量的混合合,加入入待测物物的试管管内,加加热到沸沸腾。如如果有葡葡萄糖,会会形成红红色的氧氧化亚铜铜沉淀物物。 2、检查查淀粉的的试剂 鲁哥氏(LLugools)溶溶液(碘碘液) 取6克碘碘化钾溶溶于200毫升蒸蒸馏水
13、中中,搅拌拌到溶解解后,加加入4克克碘,等等碘充分分溶解,在在加入880毫升升蒸馏水水,贮存存在棕色色试剂瓶瓶内。 碘液用来来测试食食物样品品或叶片片中的淀淀粉,也也用作染染色剂,例例如可染染色鞭毛毛、纤毛毛和细胞胞核等。 3、检查查蛋白质质的试剂剂 配方一 米伦(MMilllon)试试剂 在60毫毫升浓硝硝酸(比比重1.42)中中溶解440克汞汞(水浴浴加温可可助溶),溶溶解后加加入两倍倍体积的的蒸馏水水稀释,静静置澄清清后,取取它上层层的清液液备用。这这种试剂剂可长期期保存。 在待测物物中加入入少量米米伦试剂剂,加热热,如果果有蛋白白质,会会出现红红色。这这种试剂剂不能用用来测定定尿中的的
14、蛋白质质。 配方二 双缩尿尿试剂 分别配制制10%氢氧化化钠溶液液和1%硫酸铜铜溶液。 在3毫升升待测物物中加入入1毫升升10%氢氧化化钠溶液液和1滴滴1%硫硫酸铜溶溶液。如如果有蛋蛋白质,会会出现紫紫色反应应。 4、检查查脂肪的的试剂 苏丹()酒精精饱和溶溶液 取0.22克苏丹丹(或苏苏丹),放放入纯酒酒精中,加加热,使使它充分分溶解,成成为饱和和酒精溶溶液,过过滤后密密闭在试试剂瓶内内保存备备用。 5、酸碱碱指示剂剂 配方一 酚酞试试剂和试试纸 酚酞试剂剂 取11克酚酞酞,溶解解在1000毫升升60%的酒精精溶液里里,装在在试剂瓶瓶内密闭闭保存。 酚态试纸纸 取11克酚酞酞,溶解解在100
15、0毫升升95%酒精溶溶液里,加加入000毫升蒸蒸馏水。把把绿纸条条放入酚酚酞溶液液中浸湿湿后,取取出,放放在无氨氨气影响响处晾干干。 酚泰试剂剂(试纸纸) ppH值变变色范围围8.22100,在酸酸性和中中性溶液液中都无无色,再再碱性溶溶液中呈呈深红色色。 配方二 红蓝石石蕊试纸纸 取市售石石蕊1克克,放在在80毫毫升100%酒精精溶液中中搅拌,使使它溶解解,然后后过滤。把把滤液分分成两份份。1份份滴入稀稀磷酸或或稀硫酸酸,到出出现红色色为止。另另1份滴滴入稀氢氢氧化钠钠溶液,到到出现蓝蓝色为止止。在上上述制备备的溶液液中分别别浸湿滤滤纸条,随随后取出出滤纸条条,放在在蔽光处处、无酸酸碱性气气
16、体影响响的地方方晾干,即即的红、蓝蓝两种石石蕊试纸纸。 红石蕊试试纸在碱碱性溶液液中变蓝蓝,蓝石石蕊试纸纸在酸性性溶液中中变红。 6、检查查二氧化化碳的试试剂 检查二氧氧化碳的的试剂,可可用溴代代麝香草草酚蓝溶溶液和石石灰水。 配方一 溴代麝麝香草酚酚蓝溶液液 取0.11克溴代代麝香草草酚蓝,溶溶解在1100毫毫升蒸馏馏水里,滴滴入少量量0.11%氢氧氧化钾溶溶液,使使它成为为弱碱性性溶液而而呈蓝色色。 溴代麝香香草酚蓝蓝溶液ppH值变变色范围围是6.0(黄黄)77.6(蓝蓝)。待待测物中中如果有有二氧化化碳,会会形成碳碳酸而使使溶液变变成黄色色。 配方二 石灰水水 在蒸馏水水中加入入生石灰灰
17、(氧化化钙),变变加边搅搅拌,直直到加入入的生石石灰不再再溶解,呈呈饱和状状态时为为止。在在石灰水水澄清后后,倾出出上层清清液,用用滤纸过过滤,放放在密闭闭瓶内保保存。 如果测定定的物质质中有二二氧化碳碳,会生生成碳酸酸钙,使使石灰水水变浑浊浊。 7、检查查细胞生生活力的的试剂 检查细胞胞有无生生活力,可可用中性性红甲基基蓝试剂剂。配制制的方法法是先分分别配制制1%中中性红溶溶液和11%甲基基蓝溶液液,这两两种溶液液各取11份混合合,用来来鉴定细细胞的死死活。该该试剂使使活细胞胞的液泡泡染上红红色,而而使死细细胞全部部染成蓝蓝色。(二)分分离液 1、肌细细胞分离离液 配方一 马克凯凯郎(MMa
18、cccalllum)液液 取1份浓浓硝酸、22份甘油油、3份份水,混混合后就就得到马马克凯郎郎液。 把新鲜的的肌肉组组织小块块(横纹纹肌、心心肌和平平滑肌)投投入这种种溶液里里浸渍,分分离时间间需13日。这这种溶液液尤其适适于分离离横纹肌肌核心肌肌细胞。 配方二 氢氧化化钾溶液液 取35克克氢氧化化钾,放放在1000毫升升蒸馏水水中,加加热,使使它完全全溶解后后,在室室温下冷冷却。 把新鲜的的肌肉组组织块投投入氢氧氧化钾溶溶液中,浸浸泡155300分钟后后,肌细细胞便可可分离。 2、上皮皮细胞分分离液 配方一 福尔马马林氯化钾钾溶液 称取588.444克氯化化钠,用用蒸馏水水溶解,再再稀释到到
19、10000毫升升,加入入2毫升升福尔马马林。 这种溶液液是很好好的上皮皮细胞分分离液,分分离很迅迅速,而而且能保保护纤细细的上皮皮细胞纤纤毛。小小肠和气气管的上上皮组织织小块,放放在此溶溶液里22小时即即可分离离,口腔腔和皮肤肤上皮组组织小块块的细胞胞分离一一般需33日左右右。 配方二 水和氯氯醛溶液液 称取5克克水和氯氯醛,用用蒸馏水水溶解,再再稀释到到1000毫升,就就得到55%水合合氯醛溶溶液。 从洗净的的动物胃胃、肠和和口腔内内壁上取取下上皮皮组织一一小块,投投入以上上溶液中中,浸泡泡2448小小时。 3、神经经细胞分分离液 配方一 可以用用上皮细细胞分离离液配方方一福尔尔马林氯化钠钠
20、溶液来来分离神神经细胞胞(见22)。 配方二 硼酸生生理盐水水溶液 在生理盐盐水溶液液内加入入一些硼硼酸,搅搅拌到不不再溶解解时为止止,使成成为饱和和溶液。 把脊椎灰灰质和脑脑皮质部部位的神神经组织织一小块块投入这这种溶液液中分离离。 4、植物物茎细胞胞分离液液杰弗里氏氏(Jeeffrreys)液液 取等量的的10%铬酸溶溶液和110%硝硝酸溶液液混合,成成铬酸硝酸溶溶液。 这种溶液液用来分分离木本本植物茎茎部的导导管、管管胞、筛筛管、伴伴胞和韧韧皮纤维维等。把把材料切切成小块块放在水水里,加加热煮沸沸,冷却却后再加加热煮沸沸。这样样重复几几次,到到材料全全部沉于于水底后后,投入入分离液液内,
21、分分离时间间是244488小时。 5、植物物根尖细细胞分离离液 配方一 盐酸酒精溶溶液 在1份995%酒酒精中慢慢慢的加加入1份份浓盐酸酸,即成成盐酸酒精溶溶液,装装瓶密闭闭保存。 把植物根根尖部位位截下一一小段,投投入以上上溶液中中分离。 配方二 4%盐盐酸溶液液 配制4%盐酸溶溶液。 截下植物物根尖部部位,投投入盛有有4%盐盐酸溶液液的小烧烧杯内,在在60摄摄氏度温温水中隔隔水温热热122分钟,使使根尖软软而不酥酥,这时时分离效效果最好好。 6、植物物纤维分分离液 取10克克氢氧化化钠(或或氢氧化化钾),溶溶解在990毫升升水里,制制成100%氢氧氧化钠(或或氢氧化化钾)溶溶液,放放在瓶里
22、里密闭保保存。 把植物茎茎纵切成成细条,剪剪成小段段后,投投入分离离液内。 7、植物物细胞质质壁分离离液 配方一 30%蔗糖溶溶液 取30克克蔗糖,溶溶解在770毫升升蒸馏水水里,装装瓶备用用。 配方二 5%氯氯化钠溶溶液 取5克食食盐,溶溶解在995毫升升蒸馏水水里,装装瓶备用用。 配方三 5%硝硝酸钾溶溶液 取5克硝硝酸钾,溶溶解在995毫升升蒸馏水水里,装装瓶备用用。 (三)生生理盐水水 配方一 各种动动物需用用的生理理盐水 哺乳类 需用生生理盐水水浓度是是0.99%。称称取0.9克氯氯化钠,溶溶解在少少量蒸馏馏水中,稀稀释到1100毫毫升。 鸟类 需需用的生生理盐水水浓度是是0.775
23、%。称称取0.75克克氯化钠钠,溶解解后用蒸蒸馏水稀稀释到1100毫毫升。 两栖类 需用的的生理盐盐水浓度度是0.65%。称取取0.665克氯氯化钠,溶溶解后用用蒸馏水水稀释到到1000毫升。 配方二 任氏(RRinggers)生生理盐水水 氯化钠 6.55克 碳碳酸氢钠钠 0.2克氯化钾 0.114克 磷酸二二氢钠 0.001克氯化钙 0.112克先把氯化化钠、氯氯化钾、碳碳酸氢钠钠、磷酸酸二氢钠钠分别溶溶解在少少量蒸馏馏水中,混混合后用用蒸馏水水稀释到到9800毫升。然然后取氯氯化钙溶溶解在220毫升升蒸馏水水中,把把氯化钙钙溶液逐逐滴加入入到上述述溶液内内,边滴滴、边搅搅拌,以以免产生生
24、不溶解解的磷酸酸钙沉淀淀。 此溶液用用于变温温动物,尤尤其常用用于两栖栖类。 配方三 乐氏(LLockkes)生生理盐水水 氯化钠 9.00克 碳碳酸氢钠钠 0.100.3克克氯化钾 0.442克 氯化钙钙 0.24克克把氯化钠钠、氯化化钾、碳碳酸氢钠钠分别用用少量蒸蒸馏水溶溶解,混混合后加加蒸馏水水到9880毫升升。把氯氯化钙溶溶解在220毫升升蒸馏水水里,逐逐滴加入入上述溶溶液中。 以上溶液液用于恒恒温动物物,尤其其常用于于哺乳类类。 (四)培培养液 1、人造造海水 配方一 氯化钠224.772克 氯化钾钾 0.67克克 氯化化钙1.36克克 氯化化镁4.66克克 硫酸酸镁 66.299克
25、 碳碳酸氢钠钠 0.18克克 蒸馏馏水 加加到1升升把上述各各种盐溶溶解在少少量蒸馏馏水中,再再加入碳碳酸氢钠钠,最后后用蒸馏馏水稀释释到10000毫毫升。 配方二 氯化钠 45.0克 硫酸镁镁 0.1克氯化镁 5.00克 氯氯化铁(11%溶液液) 11滴 先把硫酸酸镁、磷磷酸一氢氢钾、氯氯化铁用用少量蒸蒸馏水溶溶解,加加蒸馏水水到9880毫升升。随后后取硝酸酸钙溶解解在200毫升蒸蒸馏水里里,把此此溶液逐逐滴加到到上述溶溶液内,装装瓶保存存。 配方二 克诺普普氏(KKnopps)溶溶液 硝酸钾 1克 硫硫酸镁 1克磷酸二氢氢钾 11克 硝硝酸钙 3克先把硝酸酸钾、硫硫酸镁、磷磷酸二氢氢钾用少
26、少量蒸馏馏水溶解解,加蒸蒸馏水到到9800毫升。随随后取硝硝酸钙,用用20毫毫升蒸馏馏水溶解解,加入入到上述述溶液内内。溶液液灰形成成白色沉沉淀,在在使用是是必须摇摇动。 在以上溶溶液中加加入蔗糖糖溶液(114%),能能刺激某某些藻类类形成游游动孢子子。该液液用于培培养绿藻藻。 3、植物物无土培培养液 配方 霍霍格伦德德(Hooagllandd)和斯斯纳德(SSnydder)液液 硝酸钙 0.8821克克 硝酸酸钾 00.5006克磷酸二氢氢钾 00.1336克 硫酸镁镁 0.1200克酒石酸铁铁 0.0055克把上述盐盐类溶解解在少量量蒸馏水水里,然然后稀释释到10000毫毫升。 (五)培培
27、养基 1、细菌菌培养基基 配方一 牛肉膏膏琼脂培培养基 牛肉膏 0.33克 蛋蛋白胨 1.00克氯化钠 0.55克 琼琼脂 11.5克克水 10000毫毫升 在烧杯内内加水1100毫毫升,放放入牛肉肉膏、蛋蛋白胨和和氯化钠钠,用蜡蜡笔在烧烧杯外作作上记号号后,放放在火上上加热。待待烧杯内内各组分分溶解后后,加入入琼脂,不不断搅拌拌以免粘粘底。等等琼脂完完全溶解解后补足足失水,用用10%盐酸或或10%的氢氧氧化钠调调整pHH值到77.27.66,分装装在各个个试管里里,加棉棉花塞,用用高压蒸蒸汽灭菌菌30分分钟。 配方二 马铃薯薯培养基基 取新鲜牛牛心(除除去脂肪肪和血管管)2550克,用用刀细
28、细细剁成肉肉末后,加加入5000毫升升蒸馏水水和5克克蛋白胨胨。在烧烧杯上做做好记号号,煮沸沸,转用用文火炖炖2小时时。过滤滤,滤出出的肉末末干燥处处理,滤滤液pHH值调到到7.55左右。每每支试管管内加入入10毫毫升肉汤汤和少量量碎末状状的干牛牛心,灭灭菌,备备用。 配方四 根瘤菌菌培养基基 葡萄糖 10克克 磷酸酸氢二钾钾 0.5克碳酸钙 3克 硫硫酸镁( ) 00.2克克酵母粉 0.44克 琼琼脂 220克水 10000毫毫升 11%结晶晶紫溶液液 1毫毫升 先把琼脂脂加水煮煮沸溶解解,然后后分别加加入其他他组分,搅搅拌使溶溶解后,分分装,灭灭菌,备备用。 2、放线线菌培养养基 配方一
29、淀粉琼琼脂培养养基(高高氏培养养基) 可溶性淀淀粉 22克 硝硝酸钾 0.11克磷酸氢二二钾 00.055克 氯氯化钠 0.005克硫酸镁 0.005克 硫酸亚亚铁 00.0001克琼脂 22克 水水 10000毫毫升 先把淀粉粉放在烧烧杯里,用用5毫升升水调成成糊状后后,倒入入95毫毫升水,搅搅匀后加加入其他他药品,使使它溶解解。在烧烧杯外做做好记号号,加热热到煮沸沸时加入入琼脂,不不停搅拌拌,待琼琼脂完全全溶解后后,补足足失水。调调整pHH值到77.27.44,分装装后灭菌菌,备用用。 配方二 面粉琼琼脂培养养基 面粉 660克 琼脂 20克克水 10000毫毫升 把面粉用用水调成成糊状,
30、加加水到5500毫毫升,放放在文火火上煮330分钟钟。另取取5000毫升水水,放入入琼脂,加加热煮沸沸到溶解解后,把把两液调调匀,补补充水分分,调整整pH值值到7.4,分分装,灭灭菌,备备用。 3、真菌菌培养基基 配方一 萨市(SSaboouraauds)培培养基 蛋白胨 10克克 琼脂脂 200克麦芽糖 40克克 水 10000毫升升 先把蛋白白胨、琼琼脂加水水后,加加热,不不断搅拌拌,待琼琼脂溶解解后,加加入400克麦芽芽糖(或或葡萄糖糖),搅搅拌,使使它溶解解,然后后分装,灭灭菌,备备用。 本培养菌菌是培养养许多种种类真菌菌所常用用的。 配方二 马铃薯薯糖琼脂脂培养基基 把马铃薯薯洗净去
31、去皮,取取2000克切成成小块,加加水10000毫毫升,煮煮沸半小小时后,补补足水分分。在滤滤液中加加入100克琼脂脂,煮沸沸溶解后后加糖220克(用用于培养养霉菌的的加入蔗蔗糖,用用于培养养酵母菌菌的加入入葡萄糖糖),补补足水分分,分装装,灭菌菌,备用用。 把这培养养基的ppH值调调到7.277.4,配配方中的的糖,如如用葡萄萄糖还可可用来培培养放线线菌和芽芽孢杆菌菌。 配方三 黄豆芽芽汁培养养基 黄豆芽 1000克 琼琼脂 115克葡萄糖 20克克 水 10000毫升升 洗净黄豆豆芽,加加水煮沸沸30分分钟。用用纱布过过滤,滤滤液中加加入琼脂脂,加热热溶解后后放入糖糖,搅拌拌使它溶溶解,补
32、补足水分分到10000毫毫升,分分装,灭灭菌,备备用。 把这培养养基的ppH值调调到7.277.4,可可用来培培养细菌菌和放线线菌。 配方四 豌豆琼琼脂培养养基 豌豆 880粒 琼脂 5克水 2000毫升升 取80粒粒干豌豆豆加水,煮煮沸1小小时,用用纱布过过滤后,在在滤液中中加入琼琼脂,煮煮沸到溶溶解,分分装,灭灭菌,备备用。 4、食用用菌菌种种培养基基 配方一 马铃薯薯蔗糖-琼脂脂培养基基 20%马马铃薯煮煮汁 110000毫升 蔗糖 220克 琼脂 18克克把马铃薯薯洗净去去皮后,切切成小块块。称取取马铃薯薯小块2200克克,加水水10000毫升升,煮沸沸20分分钟后,过过滤。在在滤汁中
33、中补足水水分到110000毫升,即即成200%马铃铃薯煮汁汁。在马马铃薯煮煮汁中加加入琼脂脂和蔗糖糖,煮沸沸,使它它溶解后后,补足足水分,分分装,灭灭菌,备备用。使使用该培培养基对对pH值值要求不不严格,可可以不测测定。 配方二 综合马马铃薯培培养基 20%马马铃薯煮煮汁 110000毫升 磷酸二氢氢钾 33克 硫硫酸镁 1.55克葡萄糖 20克克 维生生素 110毫克克 琼脂 118克先配制220%马马铃薯煮煮汁,方方法同上上。在煮煮汁中加加入上述述各种组组分,加加热溶解解后补足足水分,调调整pHH值到66。分装装,灭菌菌,备用用。 该培养基基用于培培养和保保存灵芝芝、平菇菇、香菇菇等食用用
34、菌菌种种。 (六)染染色剂 1、细菌菌染色剂剂 配方一 齐氏(ZZiehhl)石石炭酸品品红染液液 甲液 取取石炭酸酸5克,溶溶解在995毫升升蒸馏水水中。 乙液 取取0.33克碱性性品红,放放入研钵钵中研磨磨,逐渐渐加入110毫升升95%酒精,继继续淹没没,使它它溶解。 将甲液和和乙液混混合后,摇摇匀,过过滤,装装瓶,备备用。 配方二 罗氏(LLoefffleers)美美蓝染液液 甲液 取取5克美蓝蓝,溶于于1000毫升995%酒酒精中,制制成美蓝蓝酒精饱饱和液。乙液 取取氢氧化化钾0.01克克(或11%氢氧氧化钾溶溶液1毫毫升),溶溶液也可可用于放放线菌染染色,00.1%浓度可可用于酵酵母
35、菌染染色。 配方三 革兰氏氏(Grrams)染染液 用此液染染色因先先用甲液液染色,再再加乙液液固定,用用丙液处处理,最最后用丁丁液复染染。四种种液体的的配方如如下: 甲液(结结晶紫液液) (1)结结晶紫 2克 995%酒酒精 220毫升升 (2)草草酸铵 0.88克 蒸蒸馏水 80毫毫升 使用钱江江(1)、(22)液相相混,静静置488小时后后使用。 乙液(碘碘液) 碘 1克克 碘化化钾 22克 蒸蒸馏水 3000毫升 将碘化钾钾溶于少少量蒸馏馏水中,然然后加入入碘,待待碘全部部溶解后后,加水水稀释至至3000毫升。 丙液 995%酒酒精溶液液 丁液(番番红花红红液) 2.5%番红花花红酒精
36、精溶液 10毫毫升 蒸蒸馏水 1000毫升 2、细菌菌特殊染染色剂 配方一 芽孢染染液 用用此配方方染色是是用甲液液染色后后,用乙乙液复染染。 甲液 取取5克孔雀雀绿,加加入少量量蒸馏水水,使它它溶解后后,用蒸蒸馏水稀稀释到1100毫毫升,即即成孔雀雀绿染液液。 乙液 取取番红花花红0.5克,加加入少量量蒸馏水水,使它它溶解后后,用蒸蒸馏水稀稀释到1100毫毫升,集集成番红红花红复复染液。 配方二 荚膜染染液 此此配方先先用甲液液染色,后后用乙液液复染。 甲液 取取结晶紫紫0.11克,溶溶于少量量蒸馏水水后,加加水稀释释到1000毫升升,再加加入0.25毫毫升冰醋醋酸一结结晶紫染染液。 乙液
37、取取硫酸铜铜( )31.3克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。 配方三 鞭毛染染液 甲液 饱和明矾矾溶液 2毫升升 5%石炭酸酸溶液 5毫升升 20%丹丹宁酸溶溶液 22毫升 乙液 碱性品红红 111克 995%酒酒精 1100毫毫升 使用前取取甲液99毫升和和乙液11毫升相相混,过过滤即可可。 3、植物物细胞壁壁染色剂剂 配方一 纤维素素细胞壁壁染液() 取固绿00.1克克,溶于于1000毫升995%酒酒精中,即即成0.1%固固绿酒精溶溶液。该液能染染色纤维维素细胞胞壁,还还用于动动植物中中作浆质质染色剂剂。 配方二 纤维素素细胞壁壁染液() 氯化锌 20克克
38、 碘化化钾 66.5克克碘 1.5克 蒸馏水水加至1100毫毫升 先把氯化化锌溶于于少量蒸蒸馏水中中,再加加入6.5克碘碘化钾,在在碘完全全溶解后后,用蒸蒸馏水稀稀释到1100毫毫升,即即成碘氯化锌锌溶液。 该染液能能把细胞胞壁染成成紫色,胞胞质染成成淡黄色色,胞核核染成棕棕色。 配方一 纤维素素细胞壁壁染液() 甲液 取取1克碘和和1.55克碘化化钾,溶溶于1000毫升升蒸馏水水中,即即成1%碘液。 乙液 取取7份硫硫酸和33份蒸馏馏水相混混,即成成66.5%硫硫酸溶液液。 染色时,在在材料上上滴加甲甲液,再再加一滴滴乙液,纤纤维素细细胞壁就就染成黄黄色。 配方四 木质化化细胞壁壁染液()
39、硫酸化苯苯胺(或或盐酸话话本安) 1份 蒸馏水 70份份 955%酒精精 300份 硫酸 330份 将上述各各组分相相混,将将细胞材材料放入入混合液液里染色色,可是是木质化化细胞壁壁呈鲜黄黄或姜黄黄色。 配方五 木质化化细胞壁壁染液() 取间苯三三酚45克,溶溶于1000毫升升95%酒精中中,即成成间苯三三酚酒精液液。 先在材料料上滴上上1滴浓浓盐酸,然然后滴上上间苯三三酚酒精液液1滴,木木质化的的细胞壁壁就染上上樱红或或紫红色色。 配方六 木质化化细胞壁壁染液() 取1克番番红,溶溶于999毫升蒸蒸馏水中中,即成成1%番番红溶液液。4、细胞胞质染色色剂 配方一 伊红染染液 伊红染液液一般配配
40、用水溶溶液和酒酒精溶液液两种。 (1)取取1克伊红红,溶于于99毫毫升蒸馏馏水中,即即成1%伊红水水溶液(市市售红墨墨水内含含伊红成成分,可可以用红红墨水稀稀释液来来代替本本溶液)。 (2)取取1克伊红红,溶于于99毫毫升700%酒精精中,即即成1%伊红酒精溶溶液。 配方二 甲基蓝蓝染液 取1克甲甲基蓝,溶溶于299毫升770%酒酒精中,加加入700毫升蒸蒸馏水,即即成1%甲基蓝蓝染液。 配方三 亮绿染染液 取0.55克亮绿绿,溶解解在1000毫升升蒸馏水水中,即即成0.5%亮亮绿溶液液。 5、细胞胞核染色色剂 配方一 甲基绿绿染液 取1克甲甲基绿,溶溶于999毫升蒸蒸馏水中中,加入入1毫升升
41、冰醋酸酸。本染染液能染染细胞核核,还用用来染木木质化细细胞壁。 配方二 龙胆紫紫染液 取1克龙龙胆紫,溶溶于少量量2%醋醋酸溶液液中,加加2%醋醋酸溶液液,直到到溶液不不呈深紫紫色止。 配方三 美蓝(亚亚甲基蓝蓝)染液液 取0.55克美蓝蓝,溶于于30毫毫升955%酒精精中,加加1000毫升00.011%氢氧氧化钾溶溶液,保保存在棕棕色瓶内内 。 此溶液能能染细胞胞核,还还用来染染细菌、血血和神经经组织等等。 配方四 硼砂洋红染染液 取4克硼硼砂,溶溶于966毫升蒸蒸馏水中中。再加加入2克克洋红,加加热溶解解后煮沸沸30分分钟,静静置3日日,用1100毫毫升700%酒精精冲淡,放放置244小时
42、后后过滤。 此染液能能染细胞胞核,还还用来染染糊粉粒粒和一般般动物、植植物的整整体染色色,如水水螅、血血吸虫等等整体标标本。 配方五 德氏(DDelaafieelds)苏苏木精染染液 甲液 取取1苏木木精,溶溶于6毫毫升无水水酒精中中,即成成苏木精精酒精溶溶液。 乙液 取取10克克铵矾溶溶于900毫升蒸蒸馏水中中,即成成10%铵矾水水溶液。 取甲液逐逐滴加入入到乙液液中,用用纸遮盖盖,放在在阳光明明亮处,使使它充分分氧化。334天天后将溶溶液过滤滤,在滤滤液中加加入255毫升甘甘油和225毫升升甲醇,保保存在密密闭玻璃璃瓶内。静静置12个月月,待该该液颜色色变深时时过滤,可可长久保保存。 本染
43、液是是染色体体的优良良染色剂剂,除能能染细胞胞核外,还还用来染染纤维素素、细胞胞壁和动动植物组组织。 配方六 席夫(SSchiiffs)试试剂 称取0.5克碱碱性品红红,加到到1000毫升煮煮沸的蒸蒸馏水中中,再微微微加热热5分钟钟,不断断搅拌,使使它溶解解。在溶溶液冷却却到500摄氏度度时过滤滤,滤液液中加入入10毫毫升1NN盐酸。再再冷却到到25摄摄氏度时时加入00.5克克偏重亚亚硫酸钠钠( )或或无水亚亚硫酸氢氢钠( )。把把溶液装装入棕色色试剂瓶瓶内,摇摇荡后,塞塞紧瓶塞塞,放在在黑暗中中24小小时。在在溶液颜颜色退到到淡黄色色时,加加入0.5克活活性炭,用用力摇荡荡1分钟钟,过滤滤后
44、把滤滤液贮在在棕色试试剂瓶内内,塞紧紧瓶塞,滤滤液应该该是无色色的。在在使用时时勿让溶溶液长时时间暴露露在空气气中和见见光(瓶瓶外用黑黑纸或暗暗盒遮光光)。如如溶液变变成红色色,即失失去染色色能力。 碱性品红红是较强强的核染染色剂,在在孚尔根根氏(FFeullgenns)反反应中作作为组织织化学试试剂,以以检查DDNA。 6、染色色体染色色剂 配方一 醋酸洋红染染液 取45毫毫升冰醋醋酸,加加蒸馏水水55毫毫升,煮煮沸后徐徐徐加入入洋红11克,搅搅拌均匀匀后加入入1颗铁铁锈钉,煮煮沸100分钟,冷冷却后过过滤,贮贮存在棕棕色瓶内内。 配方二 醋酸地衣红红染液 取45毫毫升醋酸酸,跟555毫升升
45、蒸馏水水相混,加加热,徐徐徐加入入地衣红红粉末112克克,搅拌拌溶解后后,缓缓缓煮沸22小时。冷冷却后过过滤,贮贮存在棕棕色瓶里里。 配方三 龙胆紫紫染液 取1克龙龙胆紫,用用少量蒸蒸馏水溶溶解后,加加蒸馏水水,稀释释到1000毫升升,保存存在棕色色瓶内。 配方四 甲苯胺胺蓝染液液 取0.55克甲苯苯胺蓝,溶溶解在1100毫毫升蒸馏馏水中,即即成0.5%甲甲苯胺蓝蓝水溶液液。 7、线粒粒体染色色剂 配方一 詹钠斯斯绿B(Jannus ggreeen 酒酒精饱和和溶液 取1255毫升詹詹钠斯绿绿B,加加入到662.55毫升无无水酒精精中,搅搅拌,即即成烟鲁鲁绿B酒酒精饱和和染液。 (1)取取詹钠
46、斯斯绿酒精精饱和染染液按11:3000000比例加加蒸馏水水稀释,用用来染原原生动物物线粒体体。 (2)取取詹钠斯斯绿酒精精饱和液液,按11:1000000比例加加蒸馏水水稀释,用用来染新新鲜蛙血血线粒体体。 配方二 詹钠斯斯绿B中中性红染染液 先配制詹詹钠斯绿绿B和中中性红酒酒精饱和和液。詹詹钠斯绿绿酒精饱饱和液见见配方一一。中性性红酒精精饱和液液配制方方法:取取1255毫升中中性红,加加入到550毫升升无水酒酒精中,搅搅拌。 在10毫毫升生理理盐水(两两栖类生生理盐水水浓度为为0.665%;哺乳类类生理盐盐水浓度度为0.9%)中中,加入入詹钠斯斯绿B酒酒精饱和和液0.711毫升,中中性红酒酒精饱和和液2毫毫升,混混合。 詹钠斯绿绿B稀释释液是活活体染液液。 8、脂肪肪染色剂剂 苏丹染染液 取0.11克苏丹丹,溶于于20毫毫升955%酒精精中,即即成0.5%苏苏丹染液。 这染液能能染脂肪肪,还能能染木栓栓、角质质层。 9、血液液染色剂剂 配方一 瑞氏(WWrigghts)染染液 取瑞氏染染料粉末末0.11克和甲甲醇6