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1、高三生物二轮克隆技术试题班级：姓名：1 .以下关于利用细胞融合技术生产单克隆抗体的表达，错误的选项是A.注射特定的抗原后，从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞8. B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能够融合依赖于细胞膜具有流动性C.使用聚乙二醇促进细胞融合时，聚乙二醇的浓度及处理时间会影响融合效果D.利用特定的选择培养基可以筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞.以下关于细胞工程的表达中，正确的选项是A.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒苗B.动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体C.动物细胞培养和植物组织培养中所用培养基的营养成分完全相同D.动物细胞培养中只进行过一次用胰蛋白酶进行处理试管苗
2、试管苗多个细胞 胚状体QU2 .别离的胡萝卜根细胞分化成植株过程示意图如下，以下表达正确的选项是单个根细胞A.过程a中的细胞均具有相同的染色体数B.过程b的细胞遗传物质会发生改变C.过程c中会出现细胞分化和凋亡D.上述过程中的细胞会出现同源体染色体别离.以下关于动物克隆技术的表达，正确的选项是A.在动物细胞培养过程中不存在细胞的衰老B.克隆培养法培养出的细胞系具有异质性C.动物组织培养过程中不存在细胞的分化现象D,为提高克隆形成率，在培养基中需加入胰岛素以促进糖的利用.如图是利用烟草叶片别离原生质体的过程。以下表达错误的选项是及口蟠如鼻一震牛肛H表皮已消毒的叶片酶溶液及渗透压稳定原生质体沉于剂
3、，叶段漂浮其上以适当的密度重新悬浮于培养基中培养皿底取少量样品用血原生质体悬浮于一 清洗培养基管 心重新悬浮于蔗糖清洗培养基谒Bnr r疆细胞计数板计数11 ftr口重新悬浮于培养基原生质体细胞碎片A.假设叶片取自离体培养的无菌苗，可无需消毒且别离的原生质体再生细胞壁能力较强 B.应将叶片去除下表皮的一面朝下，置于含有纤维素酶和果胶酶的等渗或低渗溶液中 C.将酶解装置改为锥形瓶，置于低速摇床上轻轻震荡，有利于原生质体从组织中释放 D.用血细胞计数板检测原生质体的密度，初始培养密度过高会影响细胞的分裂3 .利用B淋巴细胞和癌细胞的融合，培育单克隆抗体，导致了细胞免疫学领域的一次革命性变化。 以下
4、关于单克隆抗体制备的表达，正确的选项是A.为防止病毒感染，需用聚乙二静诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合B.先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中别离出B淋巴细胞C.体外培养杂交瘤细胞一般需要在培养液中添加动物血清和一些抗生素D.单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材一消毒一愈伤组织培养一出芽 一生根一移栽二以下有关表达，错误的选项是A.消毒的原那么是既杀死材料外表的微生物，乂减少消毒剂对细胞的伤害4 .在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C.出芽是细胞再分化的的结果，受基因选择性表达的
5、调控D.生根时，培养基通常应含Q-泰乙酸等植物生长调节剂.红豆杉是世界上公认濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物，它的细胞提取物紫杉醇是重要的抗癌药物之 一。红豆杉可通过播种的方法进行繁殖，但其生长速度缓慢，再生能力差，因而植物组织培养技术 是实现其大规模培养的途径之一。以下有关表达正确的选项是A.培养红豆杉的愈伤组织可用于紫杉醇的工业化生产B.红豆杉不同部位的细胞经植物组织培养获得的愈伤组织基因型相同C.培养基需要用高压蒸汽灭菌，外植体需要用50%乙醇、5%次氯酸钠消毒处理D.培养过程中采用的US培养基中的微量元素和有机成分均可先配制成一定倍数的母液，用时 稀释，而大量元素不需要配制母液.以下关于动物
6、细胞培养的表达，正确的选项是A.胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分，获得细胞悬液B.细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间C.培养基中添加胎牛血清有助于提高动物细胞克隆形成率D.动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养.以下关于杂交瘤细胞制备单克隆抗体过程的表达，正确的选项是A.可在低压直流电场中击穿质膜脂双层来导致胞质融通B.可通过比拟细胞中染色体的数目和形态来筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞C.杂交瘤细胞制备过程中利用了细胞膜流动性和基因重组等原理D.单抗细胞株可以应用克隆培养法建立.如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病 机理带来光
7、明前景。以下表达正确的选项是体外培养 纤维细胞华华A.过程将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，表达细胞膜的选择透性B.过程在培养基中加入的动物血清含有激发成纤维细胞核全能性表达的物质C.过程进行同步发情处理，可降低代孕母猴对“中中”“华华”的免疫排斥反响D.与模型小鼠相比，模型猴更适合于研究人类疾病的发病机理、研发诊治药物.植物组织培养技术通过与常规育种、转基因技术等相结合，应用于植物生产的多个领域。在下 列技术中，不涉及植物组织培养技术的是A.利用花药离体培养得到单倍体植株B.利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株C.利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株D.用秋水仙素处理幼苗，得到多倍体植株
8、.西瓜花叶病毒（WMV）主要侵害西瓜、甜瓜等各种瓜类作物，造成瓜类发病或减产。科研人员利 用单克隆技术制备出抗WMV的特异性单抗，并以其为核心建立能快速有效地检测mW的方法，可用 于田间西瓜花叶病毒病的诊断和检测。问答以下问题。（1）以提纯的WV病毒作为抗原，对小鼠进行免疫，常用化学诱导剂将小鼠的和骨髓瘤细胞进行细胞融合。（2）可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选，需要淘汰的融合细胞为（假设均为两两融合）。随后将选出的细胞多倍稀释，接种在特定细胞培养板上，使这些单细胞克隆 生长，最终选出能稳定分泌 的杂交瘤细胞。（3）将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水，一段时间后收集并纯化腹水，进行
9、抗体效价 和类型的测定，也可对克隆的杂交瘤细胞进行，更能持久地得到单一的抗体。单 抗比一般抗血清优越得多，原因是 0（4）抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针，利用 方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物，进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因，该目的基因能否在其 它植物体内稳定存在并遗传的关键是。13 .烟草是重要的经济作物，实验室将具有不同优良性状的不同来源的烟草品种，通过体细胞杂交 技术获得了具有双亲优良性状的杂种植株，请回答以下问题：（1）获得原生质体时常用的酹是。通常用叶片的细胞制备原生质体，制备时要 将叶片剪成小片后，再放入酶解液中，其目的是 o（2）传统的有性杂交也能
10、实现双亲遗传物质的转移和重组，与有性杂交相比，体细胞杂交最突出的 优点是。用于体细胞杂交的亲本中不同来源的烟草品种 （填“可以”或“不可以”）是不同物种。（3）向叶绿体中导入外源基因也是改良烟草品质的有效途径，与将外源基因导入到核基因相比，该 途径能防止。叶绿体DNA中含有基因区和基因间隔区，外源基因插入 的位置是 （填“基因区”或“基因间隔区”），原因是 o.玉米A具有高产、抗病等优良性状，为使其获得抗除草剂性状，操作流程如以下图，其中人为整合 上去的报告基因可在筛选检测目的基因是否导入起作用。报告幕因（只在真核细胞表达）抗生素抗性基因除草剂抗性祛因G（1） Ti质粒上的报告基因在农杆菌内不
11、能获得相应的蛋白质产物，在受体植物细胞中那么可以，可 能的原因是 o步骤中为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原那么质粒内，每种限制酹只有一个切割位点酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同A.B.C. D,（2）农杆菌感染愈伤组织时，T-DNA携带的G基因易转移到受体细胞 上，然后除尽农杆菌，再使用含的培养基得到植株及整个过程中影响玉米愈伤组织能否成功再生植株的原因除了环境因素和培养基的成分之外，还可能有（答出两点即可）。（3）上图操作流程的玉米幼胚到植株B的过程中，不同培养
12、基的区别主要在于植物生长调节剂的浓 度不同，过程分别选择、 （填下表中的培养基类型甲或乙），写出表中“”处的信息 o养基成分 培於、 基类型6-BANAA 甲(2000ml)0.38mg+乙(400ml)1.5mg0.02mg4-16.如图为灭活新冠疫苗生产的一般流程，某国产疫苗生产中用广培养的细胞是非洲绿猴肾细胞 （Vero细胞），和著名的Hela细胞系一样是常用的连续细胞系。抗生素处理、接种 嬷 图初代毒株次代毒株不同代次毒株（1）非洲绿猴肾细胞（Ver。细胞）获取通常是从动物体中取出样品，经胰蛋白酶酶解，获得单个的 细胞悬浮液，转入特殊培养液中进行，并经连续 培养形成发生了转化的细胞系，
13、此时Vero细胞通常为 核型。（2）为提高Ver。细胞的克隆形成率，通常采取的措施除了选择适宜的培养液，还需往培养液中添加 、,并用 支持生长，将细胞培养瓶放在ca恒温培养箱中培养。（3）将新冠病毒接种于Vero细胞培养得到大量病毒株，并经B -丙内酯处理得到灭活疫苗，推测B - 丙内酯灭活的成分是,疫苗的有效成分是。1. DACDB 6. CBACD 11. DD(1)聚乙二醇(或PEG) 脾脏细胞(B淋巴细胞)(2)融合的脾细胞一脾细胞、融合的瘤细胞一瘤细胞抗WMV单克隆抗体(3)传代培养(体外培养)纯度高、灵敏度高、识别抗原部位专一(4)抗原-抗体杂交目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA13. (1)纤维素酶和果胶酶增大与酶的接触面积，促进细胞壁的水解(2)能克服远缘杂交不亲和障碍可以(3)能防止外源基因随花粉扩散，造成基因污染基因间隔区因为如果插入基因区会破坏烟草本身的基因结构，可能导致某些 基因不能表达(1)报告基因转录后在农杆菌内无法加工，从而无法合成相应 蛋白质 B(2)DNA/染色体除草剂玉米的基因型、愈伤组织继代培养的次数乙甲.MS培养基、蔗糖、琼脂、水(需要写出MS培养基、蔗糖、琼脂)16. (1)原代培养、传代血清激素异倍体滋养细胞(3)病毒RNA病毒蛋白质