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1、精品_精品资料_高中生物选修一生物技术实践学问点总结专题一 传统发酵技术的应用课题 1 果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培育来生产大量代谢产物的过程.2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式： 出芽生殖 主要孢子生殖4、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁衍.C 6H12 O6 6O26CO2 6H2O5、在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵.C6H12 O6 2C2H5OH 6CO26、 20左右最相宜酵母菌繁衍酒精发酵时一般将温度掌握在18 -25 7、在葡萄酒自然发酵的过程中, 起主要作用的是附着在葡萄皮表面
2、的野生型酵母菌. 在发酵过程中 , 随着酒精浓度的提高, 红葡萄皮的色素也进入发酵液, 使葡萄酒出现深红色. 在缺氧呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁衍,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约.8、醋酸菌是单细胞细菌 原核生物 , 代谢类型是异养需氧型, 生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充分时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸.当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸.C 2H5OH O2 CH3COOH H2O10、掌握发酵条件的作用醋酸菌对氧含量特殊敏锐,当进行深层发酵时,即使短时间中断通入氧气,也会引起醋酸菌死亡.醋酸菌最适生长温度为30 35,掌握好发酵温度,使
3、发酵时间缩短,又削减杂菌污染的机会.有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化.11、试验流程：选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生,可以用重铬酸钾来检验.在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应出现灰绿色.先在试管中加入发酵液2 L,再滴入物质的量浓度为3mol/L的 H2SO43滴,振荡混匀,最终滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3 滴,振荡试管,观看颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的.排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的.出料口是用来取样的.排气口要 通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接,其目的是防止空气中微生 物的污染.开口向下
4、的目的是有利于二氧化碳的排出.使用该装置 制酒时,应关闭充气口.制醋时,应当充气口连接气泵,输入氧气.13、应先冲洗,再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会.14、你认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？如：要先冲洗葡萄,再除去枝梗.榨汁机、发酵装置要清洗洁净,并进行酒精消毒.每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全掀开瓶盖等.课题 2 腐乳的制作1、多种微生物参加了豆腐的发酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉.毛霉是一种丝状真菌.代谢类型是异养需氧型.生殖方式是孢子生殖.营腐生生活.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_2、原理： 毛霉等微生物产生的
5、蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸.脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸.3、试验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵.前期发酵的主要作用：1. 制造条件让毛霉生长.2. 使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型.后期发酵主要是酶与微生物协同参加生化反应的过程.通过各种辅料与酶的缓解作用,生成腐乳的香气.5、将豆腐切成 3cm3cm1cm 的如干块.豆腐的含水量为70左右,水分过多就腐乳不易成形.毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼屉内,将笼屉中的掌握在15 18,并保持肯定的温度.来源： 1. 来自空气中的毛霉孢子,2.直接
6、接种优良毛霉菌种时间： 5 天加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐的摆放在瓶中,同时逐层加盐,随着层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些.加盐腌制的时间约为8 天左右.用盐腌制时,留意掌握盐的用量：盐的浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质.盐的浓度过高会影响腐乳的口味食盐的作用： 1. 抑制微生物的生长,防止腐败变质2. 析出水分,是豆腐变硬,在后期制作过程中不易酥烂 3. 调味作用,给腐乳以必要的咸味4. 浸提毛酶菌丝上的蛋白酶.配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味.卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的.卤汤中酒的含量一般掌握在12%左右.酒的作用： 1. 防止杂
7、菌污染2. 与有机酸结合形成酯, 给予腐乳风味 3. 酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系,酒精含量越高, 对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长. 酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块.香辛料的作用： 1. 调味作用 2. 杀菌防腐作用 3. 参加并促进发酵过程防止杂菌污染：用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷洁净后要用沸水消毒.装瓶时,操作要快速当心.整齐的摆放好豆腐、加入卤汤后,要用胶条将瓶口密封.封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染.6、豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝.严格的说是直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝.7、腐乳外部
8、有一层致密的“皮”. “皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝）, 对人体无害.它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形.课题 3 制作泡菜反应式为： C6H12O6酶2C3H6O3+能量制作泡菜所用微生物是乳酸菌,其代谢类型是异养厌氧型.分裂方式是二分裂.含抗生素牛奶不能生产酸奶的缘由是抗生素杀死乳酸菌.常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌.乳酸杆菌常用于生产酸奶.亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂.膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,国家规定肉制品中不超过30mg/kg ,酱腌菜中不超过20mg/kg ,婴儿奶粉中不超过2mg/kg .亚硝酸盐被吸取后随尿液排出体外
9、,但在相宜pH 、温度和肯定微生物作用下形成致癌可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_物质亚硝胺.亚硝酸盐含量一般在腌制10 天后亚硝酸盐含量开头降低,故在10 天之后食用最好*定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,与已知浓度的标准显色液目可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_发酵时间（ d）测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_专题二 微生物的培育与应用课题 1 微生物的试验室培育培育基：人们
10、依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁衍的养分基质, 是进行微生物培育的物质基础.依据物理外形 可分为 液体培育基 半固体培育基 和固体培育基 .在液体培育基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培育基.微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落.依据菌落的特点可以判定是哪一种菌.液体培育基 应用于工业或生活生产,固体培育基 应用于微生物的分别和鉴定, 半固体培育基 就常用于观看微生物的运动及菌种保藏等.依据 成分 培育基可分为 人工合成培育基和自然培育基 .合成培育基 是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分别鉴定.自然培育基 是用化学成分不明的自
11、然物质配制而成,常用于实际工业生产.依据培育基的 用途 ,可将培育基分为选择培育基 和鉴定培育基 .选择培育基 是指在培育基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长.鉴别培育基 是依据微生物的特点, 在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物.培育基的化学成分包括水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 、生长因子 等.碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质.如CO2、NaHCO3 等无机碳源.糖类、石油、花生粉饼等有机碳源.异养微生物只能利用有机碳源.单质碳不能作为碳源 .-+氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质.如 N2、NH3、NO3
12、 、NH4 （无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等. 只有固氮微生物才能利用 N2.培育基仍要满意微生物生长对 PH、特殊养分物质以及氧气的要求.例如,培育 乳酸杆菌 时需要在培育基中添加 维生素 ,培育 霉菌 时须将培育基的 pH 调至酸性 ,培育 细菌 是需要将 pH 调至中性或微碱性 ,培育 厌氧型微生物 是就需要供应 无氧 的条件 无菌技术 获得纯洁培育物的关键是防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面：对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒.将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌.为防止四周环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯火焰邻
13、近进行.试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触.无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍能有效防止操作者自身被微生物感染.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_消毒 指使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） .消毒方法常用 煮沸消毒法 ,巴氏消毒法 （对于一些不耐高温的液体）仍有化学药剂 （如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒 .灭菌 就是指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子.灭菌方法有灼烧灭菌 、干热灭菌 、高压蒸汽灭菌 .灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼
14、烧灭菌法.玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱培育基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯.制作牛肉膏蛋白胨固体培育基（ 1）方法步骤： 运算、称量、溶化、灭菌、倒平板.（ 2）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培育基的锥形瓶,左手拔出棉塞.右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过火焰.通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基.用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基（约10 20mL）倒入培育皿,左手立刻盖上培育皿的皿盖.等待平板冷却凝固, 大约需 5
15、 10min.然后, 将平板倒过来放置,使培育皿盖在下、 皿底在上.倒平板操作的争论1. 培育基灭菌后, 需要冷却到 50左右时, 才能用来倒平板. 你用什么方法来估量培育基的温度？ 可用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了.2. 平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培育基表面的水分更好的挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染.4. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿
16、盖与皿底间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物.纯化大肠杆菌（ 1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法 和稀释涂布平板法.（ 2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作.将集合的菌种 逐步稀释 分散到培育基的表面.在数次划线后培育,可以分别到由一个细胞繁衍而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.（ 3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育.分为系列稀释操作 和涂布平板操作 两步.（ 4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是： 使集合在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的
17、菌落,以便于纯化菌种.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_（ 5）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红.在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞.将试管口通过火焰.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液.将试管通过火焰,并塞上棉塞.左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖.留意不要划破培育皿.灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开头往其次区域内划线.重复以上操作,在三、四、五区域内划线.留意不要将最终一区的划线与第一区相连.将平板倒置放入培育箱中培育.平板划线操作的争论1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要
18、灼烧接种环？在划线操作终止时,仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物.每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减, 以便得到菌落.划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者.2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高,杀死菌种.3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？答：划线后,线条末端细菌的
19、数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来的菌落.（ 6）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中.取少量菌液,滴加到培育基表面.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8 10s.用涂布器将菌液匀称的涂布在培育基表面.菌种的储存（ 1）对于频繁使用的菌种,可以采纳暂时保藏 的方法.暂时保藏方法（ 2）对于需要长期储存的菌种,可以采纳甘油管藏 的方法.放在 20 的冷冻箱中储存.（ 2）确定培育基制作是否合格的方法将未接种的培育基在恒温箱中保温1 2 天,无菌落生长, 说明培育基的制备是胜利的
20、,否就需要重新制备.课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分别与计数（ 1）选择性培育基在微生物学中, 将答应特定种类的微生物生长,同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基,称作选择培育基 .（ 2）配制选择培育基的依据依据选择培育的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的.例如,培育基中不加入有机物可以选择培育自养微生物.培育基中不加入氮元素,可以选择培育能固氮的微生物.加入高浓度的食盐可选择培育金黄色葡萄球菌等.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_统计菌落数目（ 1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法 和显微镜直接计数 .（ 2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当
21、样品的稀释度足够高时,培育基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.通过统计平板上的菌落数,就能估量出样品中大约含有多少活细菌.为了保证结果精确,一般设置 3 5 个平板, 选择菌落数在 30 300 的平板进行计数, 并取平均值 .统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示.采纳此方法的留意事项：1.一般选取菌落数在30300 之间的平板进行计数 设置对比设置对比的主要目的是排除试验组中非测试因素对试验结果的影响,提高试验结果的可信度.对比试验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相同的试验,其作用是比照试验组,排除任何其他可能缘由的干扰,证明的
22、确是所测试的条件引起相应的结果.试验设计试验设计包括试验方案,所需仪器、材料、用具和药品,详细的实施步骤以准时间支配等的综合考虑和支配.（ 1）土壤取样铲去表层土,在距的表约3 8cm 的土壤层取样.（ 2）样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目.在实际操作中,通常选用肯定稀释范畴的样品液进行培育,以保证获得菌落数在30300 之间、适于计数的平板.测定土壤中细菌的数量,一般选用 104105106测定放线菌的数量,一般选用 103104105测定真菌的数量,一般选用102103104（ 3）微生物的培育与观看不同种类的微生物,往往需要不同的培育温度和培育时间.细菌 3037
23、 12 天放线菌 2528 57 天霉菌 2528 34 天课题 3 分解纤维素的微生物的分别纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖.纤维素分解菌的选择（ 1）选择方法：刚果红染色法.（ 2）原理刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当我们在含有纤维素的培育基中加入刚果红时,刚果红能与培育基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红纤维素的复合物就无法形成,培育基中会显现以纤维素分解菌为中心的透亮圈.
24、这样,我们就可以通过是否产生透亮圈来选择纤维素分解菌.分别分解纤维素的微生物的试验流程土壤取样 选择培育（此步是否需要,应依据样品中目的菌株数量的多少来确定） 梯度稀释 可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上 选择产生透亮圈的菌落（ 1）土壤采集选择富含纤维素的环境.（ 2）刚果红染色法分别纤维素分解菌的步骤倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板（ 3）刚果红染色法种类一种是先培育微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红.课题延长对分解纤维素的微生物进行了初步的选择后,只是分别纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌, 仍需要进
25、行发酵产纤维素酶的试验,纤维素酶的发酵方法有液体发酵 和固体发酵 两种.纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定.专题三植物的组织培育技术课题 1 菊花的组织培育植物组织培育的基本过程基因的选择性表达细胞全能性细胞分化：在生物个体发育过程中,细胞在外形、结构和生理功能上显现稳固性差异的过程. 离体的植物组织或细胞,在培育了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规章,是一种高度液泡化的呈无定外形态的薄壁细胞.由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化.脱分化产生的愈伤组织连续进行培育
26、,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化.再分化形成的试管苗,移栽到的里,可以发育成完整的植物体.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_使用次序试验结果先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素 细胞分裂素比值与结果比值高时 促根分化,抑芽形成比值低时 促芽分化,抑根形成比值适中 促进愈伤组织生长可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的才能,即每个生物细胞都具有全能性.但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是由于在特定的时间和
27、空间条件下,通过基因的选择性表达,构成不同组织和器官.植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的快速繁衍.培育脱毒作物.制作人工种子.培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等.影响植物组织培育的条件材料： 菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料.一般来说,简洁进行无性繁衍的植物简洁进行组织培育.选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好,简洁诱导脱分化和再分化.养分： 离体的植物组织和细胞,对养分、环境等条件的要求相对特殊,需要配制相宜的培育基.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_常用的培育基是MS 培育基,其中含有的大量元素是N 、P、S、 K、 Ca、Mg ,微
28、量元素是 Fe、Mn 、 B、Zn 、Cu、Mo 、I、 Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等.激素： 植物激素中 生长素 和细胞分裂素 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素.在生长素存在的情形下,细胞分裂素的作用出现加强趋势.在培育基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后次序、用量的比例等都影响结果.环境条件： PH、温度、光等环境条件.不同的植物对各种条件的要求往往不同.进行菊花的组织培育,一般将 pH 掌握在 5.8 左右,温度掌握在1822,并且每日用日光灯照耀12h. MS 固体培育基中各种养分物质的作用是什么？与肉汤培育基相比,MS 培育基有哪
29、些特点？ 大量元素和微量元素供应植物细胞所必需的无机盐.蔗糖供应碳源,维护细胞渗透压.甘氨酸、维生素等主要是为了满意离体植物细胞在正常代谢途径受到肯定影响后所产生的特殊养分需求.微生物培育基以 有机养分 为主, MS 固体培育基就需供应大量无机养分 .外植体的消毒外植体：用于离体培育的植物器官或组织片段.选取菊花茎段时,要取生长旺盛的嫩枝.菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min 左右.用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动 23 次,连续 67s,立刻将外植体取出,在无菌水中清洗.取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入
30、质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 12min .取出后,在无菌水中至少清洗3 次,漂洗消毒液.接种： 接种过程中插入外植体时外形学上端朝上,每个锥形瓶接种 7 8 个外植体. 外植体接种与细菌接种相像,操作步骤相同,而且都要求无菌操作.培育： 应当放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持相宜的温度（1822）和光照（ 12h） 移栽： 栽前应先打开培育瓶的封口膜,让其在培育间生长几日,然后用流水清洗根部培育基.然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时间,进行壮苗.最终进行露天栽培.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_被子植物的花粉发育专题 2 月季的花药培育可编辑资料
31、- - - 欢迎下载精品_精品资料_被子植物的雄蕊通常包含花丝 、花药 两部分.花药为 囊状结构 ,内部含有很多花粉.花粉是由花粉母细胞 经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞.被子植物花粉的发育要经受 小孢子四分体时期 、单核期 和双核期 等阶段.在小孢子四分体时期,4 个单倍体细胞连在一起,进入单核期时,四分体的4 个单倍体细胞彼此分别,形成4 个具有单细胞核的花粉粒.这时的细胞含深厚的原生质,核位于细胞的中心（单核居中期 ）.随着细胞不断长大,细胞核由中心移向细胞一侧（ 单核靠边期 ）,并分裂成 1 个生殖细胞核和 1 个花粉管细胞核,进而形成两个细胞, 一个是生殖细胞,一个
32、是养分细胞.生殖细胞将在分裂一次,形成两个精子.产生花粉植株的两种途径通过花药培育产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径 ,一种是花粉通过胚状体阶段发育为植物,另一种是花粉在诱导培育基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株.这两种可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_途径之间并没有肯定的界限,主要取决于培育基中激素的种类 及其 浓度配比 .影响花药培育的因素诱导花粉能否胜利及诱导胜利率的高低,受多种因素影响,其中材料的选择 与培育基的组成 是主要的影响因素亲本的生理状况：花粉早期是的花药比后期的更简洁产生花粉植株,选择月季的初花期 .合适的花粉发育时期：一般来说,在单核靠边期期
33、,花药培育胜利率最高花蕾：选择 完全未开放 的花蕾 亲本植株的生长条件 、材料的低温预处理 以及接种密度 等对诱导胜利率都有肯定影响材料的选取：选择花药时,一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于相宜的发育期.确定花粉发育时期的最常用的方法是醋酸洋红法 .但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采纳焙花青- 铬矾法 ,这种方法能将 花粉细胞核 染成蓝黑色材料的消毒接种和培育：灭菌后的花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立刻将花药接种到培育基上.在剥离花药时, 要尽量不损耗花药 （否就接种后简洁从受伤部位长生愈伤组织）,同时仍要 完全去除花丝 ,由于与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,通
34、常每瓶接种花药7 10 个, 培育温度掌握在25 左右, 不需要光照 . 幼小植株形成后才需要光照. 一般经过 20 30 天培育后 , 会发觉 花药开裂 , 长出愈伤组织或形成胚状体.将愈伤组织准时转移到分化培育基上,以便进一步分化出再生植株.假如花药开裂释放出胚状体,就一个花药内就会产生大量幼小植株,必需在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培育基上,否就这些植株将很难分开.仍需要对培育出来的植株做进一步的鉴定和选择.植物组织培育技术与花药培育技术的相同之处是：培育基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同.两者的不同之处在于：花药培育的选材特别重要,需事先摸索时期相宜的花蕾.花药裂
35、开后释放出的愈伤组织或胚状体也要准时更换培育基.花药培育对培育基配方的要求更为严格.这些都使花药培育的难度大为增加.专题五和蛋白质技术课题 1的粗提取与鉴定在 0.14mol/L时溶解度最小. DNA 却不能溶于酒精（特殊是95冷却酒精）,但细胞中蛋白质可溶于酒精.本试验用鸡血细胞做试验材料有两个缘由.一是由于鸡血细胞核的DNA 含量丰富, 材料易得. 二是鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作试验材料经常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长.鸡血细胞破裂以后释放出的DNA ,简洁被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了削减DNA的缺失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液.试验
36、操作制备鸡血细胞液加柠檬酸钠,静置或离心可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_破裂细胞,释放 DNA 加蒸馏水,同一方向快速通方向搅拌过滤,除去细胞壁、细胞膜等.溶解核内 DNA 加入 NaCl 至 2mol/L ,同一方向缓慢搅拌DNA析出加蒸馏水至 0.14mol/L ,过滤,在溶解到2mol/L 溶液中除去细胞质中的大部分物质.DNA初步纯化与等体积 95冷却酒精混合,析出白色丝状物除去核蛋白、 RNA、多糖等.DNA鉴定二苯胺,沸水浴,出现蓝色留意事项：在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固.鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度.使用塑料烧杯.使用尼龙布过滤.玻棒沿同一方向搅拌.玻棒搅拌要
37、缓慢（细胞破裂快速搅拌）.玻棒不要遇到烧杯壁.二苯胺试剂要现用现配等.专题六植物有效成分的提取课题 1植物芳香油的提取自然香料的来源：植物、动物不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子都可以提取芳香油.芳香油的提取方法：蒸馏、压榨、萃取等.芳香油的性质：挥发性强,成分复杂,以萜类化合物及其衍生物为主.水蒸气蒸馏法：原理：水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水油分层.方法：水中蒸馏：原料放在沸水中加热蒸馏.水上蒸馏：原料隔放在沸水上加热蒸馏. 水汽蒸馏：利用外来高温水蒸气加热蒸馏.不足：有些原料不相宜于水中蒸馏,如柑橘、柠檬等易焦糊,有效成分简洁水解.通常用压榨法（通过机械压缩
38、力将液相物从液固两相混合物中分别出来的一种简洁操作）萃取法：原理：芳香油易溶于有机溶剂,溶剂挥发后得到芳香油.如石油醚、酒精、乙醚等.方法：原料浸泡在溶剂中得到浸泡液有机溶剂挥发芳香油.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_不足：有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质蒸馏装置 包括：铁架台两个、酒精灯、石棉网、蒸馏瓶、橡胶塞、蒸馏头、温度计、直型冷凝管、接液管、锥形瓶,以及连接进水口和出水口的橡皮管.玫瑰精油的提取 0.1g/mL 氯化钠溶液：促使油水混合物（乳浊液）中油和水的分别.无水硫酸钠：吸取油层中的水分.试验步骤：采集玫瑰花：采集盛花期（5 月中上旬）的玫瑰花,清水清洗沥干.装入蒸
39、馏原料：称取50g 玫瑰花放入蒸馏瓶,添加200mL蒸馏水.安装蒸馏装置：依据从左向右、自下到上次序安装水蒸气蒸馏装置.加热蒸馏：掌握蒸馏时间和速度（1 2 滴/ 秒）,获得乳白色乳浊液.拆卸装置.分别油层：向乳浊液加入NaCl 溶液后,利用分液漏斗分别出上面的油层.除去水分：向油层中加入无水硫酸钠,24h 后过滤,得到玫瑰油.留意事项：蒸馏时间不能过短,温度不能过高.橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分：柠檬烯,主要分布在橘皮中.石灰水：防止压榨时滑脱,提高出油率,降低压榨液黏稠度,过滤不堵塞筛眼.小苏打、硫酸钠：促进油和水的分别（用量分别为橘皮质量的0.25 和 5）.试验步骤：橘皮的处理：将
40、新奇橘皮用清水清洗沥干.石灰水浸泡：用7 8石灰水浸泡橘皮24h.清水漂洗：浸泡好的橘皮用流水完全漂洗洁净,沥干.粉碎和压榨：将橘皮粉碎,加入小苏打和硫酸钠后,用压榨机压榨得到压榨液.过滤压榨液：用布袋过滤,滤液再高速离心处理,分别出上层橘皮油.静置处理：将橘皮油在5 10冰箱中静置5 7d,分别出上层澄清橘皮油.再次过滤：将下层橘皮油用滤纸过滤,滤液与上层橘皮油合并,得到橘皮精油.分析：静置处理目的：除去果蜡和水分.课题 2胡萝卜素的提取胡萝卜素性质：橘黄色结晶,化学性质比较稳固,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂.依据碳碳双键的数目划分为 、 、 三类.其中最主要的组成成分为 -
41、 胡萝卜素.作用：治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病.常用于食品色素.使癌变细胞恢复成正常细胞.提取方法主要有三种：从植物中提取从大面积养殖的岩藻中获得利用微生物的发酵生产可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_试验步骤粉碎 ：使原料与有机溶剂充分接触,增大溶解度.干燥 ：脱水温度太高,干燥时间太长会导致胡萝卜素分解.萃取、萃取剂的选择具有较高的沸点的石油醚,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶.、影响萃取的因素主要因素：萃取剂的性质和使用量次要因素：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等一般来说,原料颗粒小,萃取温度高,时间长,需要提取的物质就能够充分溶解,萃取
42、成效就好.萃取前,要将胡萝卜进行粉碎和干燥、胡萝卜素提取装置的设计：萃取过程应当防止明火加热,采纳水浴加热, 这是由于有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热简洁引起燃烧爆炸.为了防止加热时有机溶剂挥发,仍要在加热瓶口安装回流冷凝装置.萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置.在浓缩之前,仍要进行过滤,除去萃取液中的不溶物.过滤 ：除去萃取液中的不溶物浓缩 ：蒸发出有机溶剂鉴定：纸层析法基线：滤纸下端距底边2 处做一基线,在基线上取A、B、C、D 四点.点样：用最细的注射器针头（毛细吸管）吸取样品进行点样.点样应当快速细致,在基线上形成直径左右的圆点,每次点样后,可用吹风机将溶剂吹干,留意保持滤纸干燥.等滤
43、纸上的点样液自然挥发干后,将滤纸卷成圆筒状,至于装有深的石油醚的密封玻璃瓶中.等各种色素完全分开后,观看标准样品中位于绽开剂前沿的胡萝卜素层析带.选修三 细胞工程 二）动物细胞工程1.动物细胞培育（ 1）概念：动物细胞培育就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在相宜的培育基中,让这些细胞生长和繁衍.（ 2）动物细胞培育的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培育瓶中进行原代培育贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞连续传代培育.（ 3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁.细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制.3. 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程.融合后形成的具有原先两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞.（ 4. 单克隆抗体（ 1）抗体：一个 B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体.（ 2）单克隆抗体的制备过程：（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量繁衍,又能产生专一的抗体.（ 4）单克隆抗体的优点：特异性强,灵敏度高,并能大量制备.可编辑资料 - - - 欢迎下载